目的:探讨褪黑素联合丰富环境对快速老化小鼠(senescence-accelerated mouse prone 8，SAMP8)学习记忆能力的影响及可能机制。方法:48只4月龄雄性SAMP8小鼠按照随机数字表法分为模型组、丰富环境组、褪黑素组和褪黑素联合丰富环境组(联合干预组)，每组12只。褪黑素组和联合干预组小鼠按8 mg·kg -1·d -1剂量皮下注射褪黑素，模型组和丰富环境组小鼠给予等量生理盐水；模型组和褪黑素组小鼠饲养于标准环境，丰富环境组和联合干预组饲养于丰富环境；共干预28 d。小鼠在干预前、干预28 d后进行老化度评分，Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力，尼氏染色、TUNEL染色分别观察小鼠海马CA1区尼氏染色阳性细胞、凋亡细胞情况，ELISA检测小鼠海马组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量，Western blot检测小鼠海马组织β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein，Aβ)1~42、在苏氨酸(Thr)205位点磷酸化的微管相关蛋白tau(tau pT205)、Toll样受体4(toll-like receptor 4，TLR4)、核转录因子κB(nuclear factor-κB，NF-κB) p65蛋白表达水平，qRT-PCR检测小鼠海马组织TLR4、NF-κB p65 mRNA表达水平。采用SPSS 22. 0进行统计分析，分别用单因素方差分析、LSD检验和重复测量方差分析进行数据处理。 结果:(1)老化度评分：干预后，各组小鼠老化度评分差异有统计学意义( F＝120.601， P<0.01)，丰富环境组、褪黑素组和联合干预组小鼠老化度评分均低于模型组(均 P<0.05)，其中联合干预组小鼠老化度评分显著低于丰富环境组和褪黑素组(均 P<0.05)。(2)定位航行实验结果显示：四组小鼠逃避潜伏期的时间-组别交互作用显著( F＝30.524， P<0.001)；第2~4天，丰富环境组、褪黑素组和联合干预组小鼠的逃避潜伏期均低于模型组(均 P<0.05)。空间探索实验结果显示：四组小鼠目标象限停留时间和穿越平台次数均差异有统计学意义( F＝291.328，113.482，均 P<0.01)，丰富环境组、褪黑素组和联合干预组小鼠在目标象限停留时间[(29.45±1.70)s，(32.44±1.55)s，(37.48±0.84)s]和穿越平台次数[(6.44±0.61)次，(7.16±0.70)次，(12.60±1.23)次]均高于模型组[(15.07±1.28)s，(4.10±0.61)次]，其中丰富环境组和褪黑素组小鼠在目标靶象限停留时间、穿越原平台所在位置次数均显著减少于联合干预组(均 P<0.05)。(3)尼氏染色和TUNEL染色结果显示：各组小鼠海马CA1区尼氏染色阳性神经元数量差异有统计学意义( F＝809.264， P<0.01)，海马CA1区凋亡细胞数量差异有统计学意义( F＝1 060.583， P<0.01)。联合干预组小鼠海马CA1区尼氏染色阳性神经元数量多于模型组、丰富环境组和褪黑素组(均 P<0.05)，凋亡细胞数量少于模型组、丰富环境组和褪黑素组(均 P<0.05)。(4)ELISA检测结果显示：各组小鼠海马组织IL-1β、IL-6和TNF-α含量差异有统计学意义( F＝152.887，63.506，432.026，均 P<0.01)。丰富环境组、褪黑素组和联合干预组小鼠海马组织IL-1β、IL-6、TNF-α含量均低于模型组(均 P<0.05)，其中丰富环境组和褪黑素组小鼠海马组织IL-1β、IL-6和TNF-α含量均显著高于联合干预组(均 P<0.05)。(5)Western blot检测结果显示：各组小鼠海马组织Aβ1~42、tau pT205、TLR4、NF-κB p65蛋白表达水平差异有统计学意义( F＝122.349，98.934，201.635，116.553，均 P<0.01)，丰富环境组、褪黑素组和联合干预组小鼠海马组织Aβ1~42、tau pT205、TLR4、NF-κB p65蛋白表达水平均低于模型组，其中丰富环境组和褪黑素组小鼠海马组织Aβ1~42、tau pT205、TLR4、NF-κB p65蛋白表达水平均显著高于联合干预组(均 P<0.05)。(6)qRT-PCR检测结果显示：各组小鼠海马组织TLR4、NF-κB p65 mRNA表达水平差异有统计学意义( F＝42.913，102.446，均 P<0.01)，丰富环境组、褪黑素组和联合干预组小鼠海马组织TLR4[(0.63±0.05)，(0.55±0.04)，(0.42±0.03)]、NF-κB p65[(0.98±0.06)，(0.82±0.04)，(0.72±0.04)] mRNA表达水平均低于模型组[(0.74±0.07)，(1.20±0.05)，均 P<0.05]，其中丰富环境组和褪黑素组小鼠海马组织TLR4、NF-κB p65 mRNA表达水平均显著高于联合干预组(均 P<0.05)。 结论:褪黑素联合丰富环境可改善SAMP8小鼠学习记忆能力及神经炎性反应，其机制可能与下调TLR4/NF-κB p65信号通路有关。

目的:评价褪黑素对大鼠前额叶皮层缺血诱发认知功能障碍的影响并探讨其受体机制。方法:选择清洁级成年雄性SD大鼠，体重约300 g，进行前额叶皮层置管。实验Ⅰ　取置管成功的大鼠24只，采用随机数字表法分为3组( n＝8)：对照组(C组)前额叶皮层注射生理盐水0.5 μl；模型组(M组)前额叶皮层微注射1 μmol/L内皮素0.5 μl；褪黑素组(ME组)前额叶皮层注射1 μmol/L内皮素+1 μmol/L褪黑素，共0.5 μl。实验Ⅱ　取置管成功的大鼠44只，采用随机数字表法分为4组( n＝11)：模型组(M组)前额叶皮层微注射1 μmol/L内皮素0.5 μl；褪黑素组(ME组)前额叶皮层注射1 μmol/L内皮素+1 μmol/L褪黑素，共0.5 μl；褪黑素1/2型受体(MT 1/2R)拮抗剂+褪黑素组(L+ME组)前额叶皮层注射1 μmol/L内皮素+1 μmol/L MT 1/2R拮抗剂和1 μmol/L褪黑素，共0.5 μl；褪黑素2型受体(MT 2R)拮抗剂+褪黑素组(P+ME组)前额叶皮层注射1 μmol/L内皮素+1 μmol/L MT 2R拮抗剂和1 μmol/L褪黑素，共0.5 μl。前额叶皮层给药后1周进行T-迷宫实验和旷场实验。 结果:实验Ⅰ　3组旷场实验运动速度比较差异无统计学意义( P>0.05)。与C组比较，M组和ME组T-迷宫实验选择正确率下降( P<0.05)；与M组比较，ME组T-迷宫实验选择正确率升高( P<0.05)。实验Ⅱ　4组旷场实验运动速度比较差异无统计学意义( P>0.05)。与M组比较，ME组和P+ME组T-迷宫实验选择正确率升高( P<0.05)，L+ME组差异无统计学意义( P>0.05)；与ME组比较，L+ME组T-迷宫实验选择正确率下降( P<0.05)，P+ME组差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:褪黑素可减轻大鼠前额叶皮层缺血引起认知功能障碍，机制与激活MT 1R有关。

目的:观察持续光照致昼夜节律紊乱小鼠糖脂代谢及多组织器官形态学的变化并探讨其内在联系。方法:将60只非特定病原体级健康雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为正常光照（LD）组和24 h持续光照（LL）组。行腹腔内注射葡萄糖耐量实验，检测小鼠空腹血糖（FPG），测量小鼠体重，ELISA法测定游离脂肪酸（FFA）、甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、空腹胰岛素（FINS）及尿6-羟基硫酸褪黑素（6-SML）水平，计算葡萄糖曲线下面积（AUCG）和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR），磁共振成像评价体脂分布。实时荧光定量PCR检测骨骼肌及肝脏核心生物钟基因Nr1D1核受体亚家族1，组D，成员1（ Rev-erbα）mRNA，光学显微镜及透射电镜观察小鼠脂肪、骨骼肌、心肌、肾脏的病理细微结构。组间昼夜节律性差异分析采用双因素方差分析，其余数据比较采用 t检验。 结果:与LD组相比，LL组小鼠夜间尿6-SML水平降低（ P<0.05）；小鼠骨骼肌及肝脏中 Rev-erbα mRNA表达节律发生改变；LL组小鼠体重、血清FFA、TG、TC、IL-6、TNF-α、FPG、FINS、内脏脂肪体积、AUCG、HOMA-IR均增加（ P<0.05）。进一步光学显微镜及透射电镜显示，持续光照可使小鼠脂肪、骨骼肌、心肌、肾脏均发生不同程度的病理损伤。 结论:持续光照导致小鼠糖脂代谢及多器官形态学改变，昼夜节律紊乱可从多层面对机体造成不良影响。

目的:探讨虚拟现实（VR）技术治疗对慢性失眠患者睡眠质量、睡眠结构及神经心理特征的影响。方法:选择自2021年10月至2022年4月就诊于天津医科大学总医院神经内科门诊的51例慢性失眠患者为研究对象，依据患者意愿分为VR联合药物治疗组（ n=26）与单纯药物治疗组（ n=25）。单纯药物治疗组患者采用非苯二氮卓类药物联合褪黑素受体激动剂、五羟色胺再摄取抑制剂治疗。VR联合药物治疗组患者在上述药物治疗的基础上添加每周5 d、每天30 min的VR技术治疗。治疗前、治疗6周后应用Epworth嗜睡量表（ESS）、匹茨堡睡眠质量指数（PSQI）、失眠严重程度指数（ISI）评估患者的主观睡眠质量，应用汉密尔顿焦虑量表（HAMA）、汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评估焦虑抑郁情绪，应用简易精神状态检查量表（MMSE）、听觉词语学习测试（AVLT）、数字广度测试（DST）、连线测试（TMT）、Stroop色词测试A/B/C、线方向判断（JLO）、数字符号转换测试（SDMT）评估总体及单项认知功能，采用基于心肺耦合技术的便携式睡眠监测仪（PSM）-100A评估睡眠结构。比较2组患者治疗前、后及VR联合药物治疗组患者自身治疗前后主观睡眠质量、神经心理特征和睡眠结构的差异。 结果:（1）治疗6周后，与单纯药物治疗组相比，VR联合药物治疗组患者的PSQI、ISI及HAMD、HAMA评分明显降低，AVLT-即刻回忆总分及AVLT-短时延迟回忆评分、长时延迟回忆评分、再认评分明显升高，TMT-A、TMT-B用时明显缩短，DST-倒背评分、SDMT评分明显升高，高频耦合带（HF）睡眠比例明显升高，低频耦合带（LF）睡眠比例、LF/HF值明显降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。（2）与治疗前相比，治疗6周后VR联合药物治疗组患者的PSQI、ISI及HAMD、HAMA评分明显降低，AVLT-即刻回忆总分及AVLT-短时延迟回忆评分、长时延迟回忆评分、再认评分明显升高，TMT-A、TMT-B用时明显缩短，DST-顺背、倒背评分明显升高，JLO、Stroop色词测试A/B/C和SDMT评分明显升高，HF睡眠比例明显升高，LF睡眠比例、LF/HF值明显降低，觉醒次数减少，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:VR技术联合药物治疗较单纯药物治疗可更有效地改善慢性失眠患者的主观睡眠质量和睡眠结构、减轻抑郁焦虑情绪、改善记忆力和注意力。

目的:评价褪黑素受体与线粒体分裂蛋白的关系，明确褪黑素减轻LPS致大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤的机制。方法:将大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞以密度2×10 5个/ml接种于6孔板，采用随机数字表法分为5组( n＝10)：对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS＋褪黑素组(LM组)、LPS＋褪黑素受体阻断剂组(LL组)和LPS＋褪黑素＋褪黑素受体阻断剂组(LML组)。采用10 μg/ml LPS孵育24 h的方法制备LPS致细胞损伤模型；于LPS孵育前12 h时，分别向LM组、LL组和LML组加入褪黑素0.1 mmol/L和/或褪黑素受体阻断剂luzindole 0.2 μmol/L。细胞孵育结束后，采用ELISA法测定培养液TNF-α和IL-6浓度。采用GENMED纯化线粒体呼吸控制率(RCR)定量检测试剂盒测定各组RCR。采用Western blot法测定细胞线粒体动力相关蛋白1(Drp1)和线粒体分裂相关蛋白1(Fis1)的表达。 结果:与C组比较，L组、LM组、LL组和LML组细胞培养液TNF-α和IL-6浓度升高，RCR降低，线粒体Drp1和Fis1表达上调( P<0.05)；与L组比较，LM组细胞培养液TNF-α和IL-6浓度降低，RCR升高，线粒体Drp1和Fis1表达下调( P<0.05)，LL组上述各指标差异无统计学意义( P>0.05)；与LM组比较，LML组细胞培养液TNF-α和IL-6浓度升高，RCR降低，线粒体Drp1和Fis1表达上调( P<0.05)。 结论:褪黑素减轻LPS致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的机制与激活褪黑素受体，抑制线粒体分裂蛋白表达有关。

目的:探讨褪黑素在小鼠放射性肠损伤作用中的全基因体表达图谱变化。方法:对C57BL/6J雄性小鼠按10 mg/kg体重进行腹腔注射褪黑素，1次/d，连续5 d，然后，对小鼠腹部进行14 Gy γ射线照射。照射后3 d收集小鼠小肠组织，进行DNA微阵列检测，对小肠组织差异基因进行基因本体论(GO)注释及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。结果:与对照组相比，照射前给药组小鼠差异基因中上调基因584个，下调基因538个。照射组和照射前给药组小鼠取交集的差异基因中，照射前给药组特有的上调基因324个，下调基因246个。这些差异基因的GO注释分析显示，照射前给药组排名前15的显著富集的生物过程主要包括自噬体组装(GO：0000045)、自噬体组织(GO：1905037)和急性炎症反应调节(GO：0002673)。其中，ATG12、ATG16L2和AMBRA1基因参与自噬体组装和自噬体组织，C3、CPN1、CD55、CFP、CNR1、C1QA、C2和CREB3L3基因参与急性炎症反应调节。这些差异基因参与的KEGG通路分析显示，照射前给药组排名前15的显著富集的通路主要包括O-聚糖生物合成(hsa00512)、鞘糖脂生物合成(hsa00603)、细胞外基质-受体互作(hsa04512)和不饱和脂肪酸生物合成(hsa01040)。qRT-PCR验证显示，照射前给药组参与自噬生物过程中的ATG12和ATG16L2基因的表达量较照射组显著增加( t＝2.40、4.35, P<0.05)。 结论:与自噬和急性炎症反应相关生物过程中的差异基因，以及参与不饱和脂肪酸生物合成的通路，可能参与褪黑素在辐射诱导的放射性肠损伤中的作用。

褪黑素具有调节昼夜节律和内分泌节律、抗炎、抗氧化等生物学功能。衰老和受损线粒体是氧化应激的主要源头，线粒体质量控制对维持正常线粒体功能至关重要。心肌缺血再灌注损伤是冠心病再灌注治疗的重要并发症，目前缺乏有效干预策略。线粒体功能障碍和氧化应激被认为是心肌再灌注损伤的核心机制之一，靶向线粒体干预是再灌注损伤潜在治疗方向。近年来的研究发现，褪黑素从多种途径改善线粒体结构和功能。该文从线粒体质量控制出发，综述褪黑素改善心肌缺血再灌注损伤的机制，并探讨其在心肌缺血再灌注损伤预防与治疗中的应用前景。

目的:探讨褪黑素对坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis，NEC）新生大鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（nucleotide-binding oligomerization domain like receptor protein 3，NLRP3）及相关炎性因子的影响。方法:36只新生SD大鼠随机分为对照组、NEC组及褪黑素组，每组12只。对照组与母鼠同笼，自由摄食，每日腹腔注射含磷酸缓冲盐溶液（phosphate buffer saline，PBS）（360 μl/kg）及1%无水乙醇的生理盐水10 ml/kg。NEC组采用配方奶喂养+缺氧+冷刺激的方法诱导NEC，每日腹腔注射PBS（360 μl/kg）及脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）（30 mg/kg）；褪黑素组采用同样方法诱导NEC发生，每日腹腔注射褪黑素15 mg/kg及LPS 30 mg/kg。所有大鼠生后第7天处死，取回盲部肠组织进行病理学评分、TUNEL染色观察细胞凋亡、电镜观察细胞内超微结构，并用酶联免疫吸附法检测白细胞介素（interleukin，IL）18、IL-1β、IL-6 水平，Western-blot法检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1（cysteine aspartic acid specific protease-1，caspase-1）蛋白表达水平。结果:（1）HE染色显示NEC组大鼠肠壁绒毛损伤程度较重，大部分绒毛中部、根部断裂，部分隐窝无法识别、可见透壁坏死。褪黑素组肠壁绒毛损伤情况较NEC组轻。（2）对照组、NEC组及褪黑素组大鼠肠组织细胞凋亡数目分别为（13.6±1.1）、（95.0±9.2）、（37.2±6.5）个，NEC组高于对照组和褪黑素组（ P<0.05），褪黑素组与对照组差异无统计学意义（ P>0.05）。（3）电镜下显示NEC组线粒体肿胀，脊结构排列紊乱，并出现部分脆性裂解现象；褪黑素组线粒体损伤情况较NEC组轻。（4）NEC组IL-18、IL-1β、IL-6表达水平最高，分别为（2.13±0.22）、（0.89±0.06）、（0.45±0.02） pg/ml；其次为褪黑素组，分别为（0.76±0.05）、（0.32±0.03）、（0.23±0.02） pg/ml；最低为对照组，分别为（0.55±0.08）、（0.27±0.04）、（0.17±0.03） pg/ml，NEC组高于对照组和褪黑素组（ P<0.05），褪黑素组与对照组差异无统计学意义（ P>0.05）。（5）NEC组NLRP3及caspase-1蛋白表达水平最高，分别为0.92±0.14、1.13±0.12，其次为褪黑素组，分别为0.46±0.09、0.63±0.08，最低为对照组，分别为0.31±0.06、0.59±0.05，NEC组高于对照组和褪黑素组（ P<0.05），褪黑素组与对照组差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:褪黑素可抑制NLRP3及IL-18、IL-1β、IL-6、caspase-1等相关炎性因子的表达，减轻新生大鼠NEC病变的严重程度。

目的:探讨外侧下丘脑与褪黑素降低大鼠觉醒水平的关系及受体机制。方法:清洁级成年雄性SD大鼠40只，体重250～300 g，采用随机数字表法将大鼠分为4组( n＝10)：对照组(C组)外侧下丘脑区微注射0.9% NaCl溶液0.5 μl；褪黑素组(M组)外侧下丘脑区微注射1 μmol/L褪黑素0.5 μl；1/2型褪黑素受体(MT 1/2R)拮抗剂+褪黑素组(L+M组)外侧下丘脑区微注射1 μmol/L MT 1/2R拮抗剂和1 μmol/L褪黑素，共0.5 μl；2型褪黑素受体(MT 2R)拮抗剂+褪黑素组(P+M组)外侧下丘脑区微注射1 μmol/L MT 2R拮抗剂和1 μmol/L褪黑素，共0.5 μl。微注射给药时间为19：30至20：00，微注射给药后通过脑电/肌电记录技术，检测小鼠睡眠-觉醒时长与脑电不同频段振荡能量。 结果:与C组比较，M组和P+M组觉醒时间百分比减少，非快速眼动睡眠以及快速眼动睡眠时间百分比增加，delta振荡能量增加，theta振荡能量减少( P<0.01)，alpha振荡能量差异无统学意义，L+M组上述指标比较差异无统计学意义( P>0.05)。与M组比较，L+M组觉醒时间百分比增加，非快速眼动睡眠以及快速眼动睡眠时间百分比减少，delta振荡能量减少，theta振荡能量增加( P<0.01)，P+M组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:外侧下丘脑可能参与了褪黑素诱发的大鼠觉醒水平降低，机制可能与褪黑素激活外侧下丘脑MT 1R有关。

目的:评价褪黑素在电针减轻肢体缺血再灌注诱发兔肺损伤中的作用。方法:清洁级健康雄性新西兰大白兔50只，体重2.0～2.5 kg，3月龄，采用随机数字表法分为5组( n＝10)：假手术组(Sham组)、肢体缺血再灌注组(IR组)、电针刺激穴位组(EA组)、电针刺激非穴位组(SEA组)和电针刺激穴位＋褪黑素受体拮抗剂Luzindole组(EA＋L组)。采用夹闭股动脉3 h后再灌注4 h的方法制备兔肢体缺血再灌注损伤模型。EA组和EA＋L组选取双侧足三里和肺俞穴(进针深度4～6 mm)，SEA组选取双侧足三里和肺俞穴旁开0.5 cm处(进针深度3 mm)，于模型制备前1～7 d及模型制备过程中给予电针刺激，刺激参数设置：频率2/15 Hz，刺激电流l～2 mA，疏密波，以兔出现轻微肌颤为宜，每次持续30 min，1次/d。EA＋L组于模型制备前30 min时腹腔注射Luzindole 30 mg/kg。分别于缺血前即刻(T 0)、缺血3 h(T 1)和再灌注4 h(T 2)时，收集右侧颈内静脉血样，采用ELISA法检测血清褪黑素浓度。再灌注4 h时，收集支气管肺泡灌洗液(BALF)，采用ELISA法检测BALF中TNF-α、IL-1β和IL-6浓度，采用黄嘌呤氧化酶法测定BALF中SOD活性，采用硫代巴比妥酸法测定BALF中MDA浓度。随后处死兔，取肺组织，测定湿重/干重(W/D)比值，光镜下观察病理学结果并进行肺损伤评分，透射电镜下观察超微结构，计算线粒体数量和线粒体相对横截面积。 结果:与Sham组比较，其余4组肺损伤评分和肺组织W/D比值升高，线粒体数量减少，线粒体相对横截面积增大，BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6和MDA水平升高，SOD活性降低，IR组T 1和T 2时血清褪黑素浓度降低，EA组和EA＋L组T 0时血清褪黑素浓度升高( P<0.05)。与IR组比较，EA组肺损伤评分和肺组织W/D比值降低，线粒体数量增加，线粒体相对横截面积减小，BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6和MDA水平降低，SOD活性升高，EA组和EA＋L组各时点血清褪黑素浓度升高( P<0.05)，SEA组上述各指标差异无统计学意义( P>0.05)。与EA组比较，SEA组和EA＋L组肺损伤评分和肺组织W/D比值升高，线粒体数量减少，线粒体相对横截面积增大，BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6和MDA水平升高，SOD活性降低，SEA组各时点血清褪黑素浓度降低( P<0.05)。 结论:电针可通过提高血清褪黑素水平减轻肢体缺血再灌注诱发兔肺损伤。