目的：:分析真菌性角膜炎继发感染性眼内炎行眼内容物剜除术患者的临床特点及病原学特点。方法：:回顾性系列病例研究。收集2012年1月至2021年12月于山东省眼科医院，因真菌性角膜炎继发感染性眼内炎，而行眼内容物剜除术的所有患者44例（44眼）。分析其病程及发病诱因、眼部及全身病史、临床表现、微生物培养及药物敏感试验结果。结果：:纳入的44例患者占同期山东省眼科医院诊断为真菌性角膜炎患者总例数的2.15%。44例患者病程中位数为18.5 d，入院时44眼视力均为无光感，20眼（45%）合并继发性青光眼。44眼均表现为全角膜溃疡，并累及角膜全层及角膜缘处，27眼（61%）合并前房积脓。微生物培养显示39眼（89%）真菌生长，其中镰刀菌属20眼（51%），曲霉菌属8眼（21%），链格孢霉属2眼（5%）；其他包括无孢霉4眼（10%），谲诈腐霉菌2眼（5%），尖端赛多孢霉1眼（3%），帚枝霉1眼（3%），多毛拟单孢瓶霉1眼（3%）。培养的菌种对两性霉素B、泊沙康唑、伏立康唑、伊曲康唑、5-氟胞嘧啶、氟康唑、阿尼芬净、米卡芬净、卡泊芬净等的最低抑菌浓度的几何均数依次为1.597、1.338、1.926、3.291、64、189.699、1.36、1.16、1.23 μg/ml。结论：:真菌性角膜炎继发感染性眼内炎行眼内容物剜除术的患者临床特征常表现为全角膜溃疡，致病菌除常见镰刀菌属、曲霉菌属、链格孢霉属外，其他如无孢霉、谲诈腐霉菌、尖端赛多孢霉等致病侵袭力较强的菌属也较为常见。

目的:探讨真菌性角膜炎（FK）的临床特征及诊断和治疗方法。方法:回顾性系列病例研究。收集2006年1月至2016年10月于山东省眼科研究所青岛眼科医院就诊的1 414例（1 414只眼）真菌性角膜炎患者的资料，对其人口学特征、致病诱因、发病时间、实验室检查方法和结果、临床特征及治疗方案进行分析。结果:1 414例FK患者中，男性877例（62.0%），女性537例（38.0%）；年龄（53.71±11.72）岁，40~60者874例（61.8%）。1 174例（83.0%）患者来自山东省，其余主要来自长江以北各省。患者职业以农民（1 211例，占85.6%）为主，发病时间以秋冬季为主。从发病到于我院就诊的时间为1~74 d，942例（67.1%）患者在症状出现后8~30 d于我院就诊。角膜损伤为主要危险因素，其中以植物外伤最为多见（367例，26.4%）。1 365只患眼通过氢氧化钾湿片直接镜检法查出菌丝，诊断阳性率为96.5%，1 270只患眼通过共焦显微镜查出菌丝，诊断阳性率为89.8%。973只患眼（68.8%）的角膜溃疡灶刮取物和（或）术后的病变角膜组织培养出真菌，其中以镰刀菌属最多见595例（61.1%），其次为链格孢霉菌属184例（18.9%）、曲霉菌属119例（12.2%）。603例（42.7%）为浅中基质浸润者，614例（43.4%）为深基质浸润者，197例（13.9%）为全层浸润。角膜溃疡灶直径以4~6 mm最为多见725例（51.6%），其次为<4 mm 372例（26.4%）、>6 mm 302例（22.0%）。498例（35.2%）合并前房积脓，34例（2.4%）合并角膜穿孔，58例（4.1%）合并眼内炎。1 198例（84.8%）患者接受手术治疗，其中包括416例（29.4%）行穿透性角膜移植术，408例（98.1%）治愈；199例（14.1%）行板层角膜移植术，193例（97.0%）治愈；532例（37.6%）角膜溃疡清创术，494例（92.8%）治愈。215例（15.2%）患者接受了单纯药物治疗，147例（68.4%）治愈。56例（3.9%）最终失去眼球，包括54例眼内容物摘除术和2例眼球摘除术。结论:FK的发病人群多为在农村居住的中老年群体。镰刀菌仍是山东地区最主要的FK病原体。角膜刮片氢氧化钾涂片直接镜检法可早期、快速诊断FK。对浅中基质浸润的患者，角膜溃疡清创术是一种便捷有效的治疗手段。对深基质浸润的患者，角膜移植术是最有效的治疗手段。 （中华眼科杂志，2020，56：286-293）

目的:观察益康唑固体脂质纳米粒(E-SLNs)滴眼液在兔眼单次点眼后的眼部药代动力学。方法:采用微乳法制备质量分数0.2%的E-SLNs，采用微量稀释法评估其在体外抑制镰刀菌的最小抑菌浓度(MIC)并与那他霉素滴眼液进行比较。取健康无眼疾新西兰大白兔25只，任取4只作为空白对照组，未给予药物干预；采用随机数字表法将另21只实验免依据处理时间点不同随机分为7个组，每组3只。双眼均用E-SLNs滴眼液点眼，分别于点眼后不同时间点采用滤纸收集泪液，处死动物后剖取角膜，采用高效液相色谱分析法测定泪液和角膜样品中的药物含量，并对样品药物的精密度、回收率、稳定性及药物抑菌能力进行评估。结果:泪液及角膜样品药物精密度的相对标准偏差(RSD)为2.34%～4.04%；稳定性分析结果显示，各样品中药物RSD均小于10%。E-SLNs的半数抑菌浓度(MIC 50)和90%抑菌浓度(MIC 90)分别为0.37 μg/ml和0.89 μg/ml，那他霉素滴眼液的MIC 50和MIC 90分别为1.15 μg/ml和1.70 μg/ml。E-SLNs滴眼液兔眼单次点眼后，泪液、角膜中的药物质量分数达峰时间均为5 min，峰值质量分数分别为597.64 μg/g和33.15 μg/g。 结论:E-SLNs滴眼液兔眼单次点眼后在泪液及角膜中可获得远高于对致病镰刀菌MIC的药物质量浓度。

目的:制备特异性抗镰刀菌鸡卵黄抗体(IgY)并检测其对温度和pH的耐受性及抗真菌作用。方法:取22周龄莱杭母鸡18只，采用随机数表法将其随机分为阴性对照组和实验组，每组9只。制备灭活镰刀菌丝悬液，将菌丝浓度2×10 7菌落形成单位(CFU)/ml的菌悬液与弗氏完全佐剂等体积混合充分乳化后，对实验组莱杭母鸡进行免疫，每只鸡注射1 ml，2周后换为弗氏不完全佐剂加强免疫。在免疫后的第5~16周每周收集卵黄，用硫酸铵盐析法制备IgY，将得到的蛋白溶液放入冻干机中制作成冻干粉，4 ℃保存。以质量分数0.9%氯化钠溶液代替菌悬液按照同样方式进行阴性对照组莱杭母鸡的注射，以制备非特异性抗体作为实验中的阴性对照。采用考马斯亮蓝法测定特异性IgY蛋白浓度，采用间接酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定其效价。将1×10 5 CFU/ml和1×10 3 CFU/ml镰刀菌悬液与不同浓度IgY及磷酸盐缓冲液(PBS)混合培养4 d后测定吸光度( A)值，用PBS及非特异性IgY与镰刀菌悬液共孵育作为空白对照组及阴性IgY组，绘制抗镰刀菌IgY的抑菌曲线。用pH 7.4的PBS将特异性IgY溶液稀释至0.02 mg/ml，分别在30、40、50、60、70、80和90 ℃水浴中孵育30 min后冷却至室温；此外，用pH值为l、2、3、4、5、6、7、8、9、l0、11和12的PBS将特异性IgY溶液稀释至0.02 mg/ml，4 ℃下放置1 h，均采用间接ELISA法测定抗体活性，评估IgY对不同温度和pH的耐受性。取SPF级8周龄雌性C57BL/6小鼠12只，采用随机数表法将其分为PBS对照组和特异性IgY治疗组，每组6只。用镰刀菌感染小鼠右眼角膜，建立小鼠真菌性角膜炎动物模型，建模后1 d，特异性IgY治疗组用200 mg/ml特异性抗镰刀菌IgY点眼，PBS对照组用PBS点眼，于感染后1、3和5 d在裂隙灯显微镜下观察小鼠角膜，根据炎症评分表对真菌性角膜炎的严重程度进行评分。 结果:免疫后第5~16周的IgY蛋白质量浓度分别为1.57、2.89、24.98、25.09、23.89、25.78、21.57、21.37、18.98、15.78、14.67和12.67 mg/ml。特异性抗镰刀菌IgY的效价从第5周开始升高，第7周时达到最高效价，为1∶10 000，可维持至免疫后12周，12周后抗体效价逐渐下降。抑菌曲线显示，与空白对照组和阴性IgY组相比，特异性IgY治疗组镰刀菌生长缓慢。抗体效价高于1∶10 000的特异性IgY在60 ℃以下具有较好的热稳定性；在pH 4~6具有最高活性，在pH 3~9的免疫活性能够保持在70%以上，随着pH值的进一步降低或升高，其活性迅速降低。镰刀菌感染后1、3和5 d，PBS对照组角膜炎症评分分别为3.50±0.55、7.33±0.82和4.00±0.63，特异性IgY治疗组角膜炎症评分分别为3.33±0.82、4.17±0.75和2.50±0.55。2个组不同时间点炎症评分总体比较，差异均有统计学意义( F分组＝247.35， P<0.05； F时间＝23.19， P<0.05)，其中镰刀菌感染后3 d和5 d，与PBS对照组相比，特异性IgY治疗组小鼠真菌性角膜炎炎症评分降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:用硫酸铵盐析法可成功制备高效价特异性抗镰刀菌IgY，其稳定性高，对温度和酸碱度均有一定的耐受性，可以在小鼠的真菌性角膜炎模型中减轻角膜溃疡的严重程度，降低炎症评分。

目的:比较荧光染色和过碘酸希夫染色对真菌性角膜炎(FK)的诊断效果。方法:收集2017年1月至2019年5月于山东第一医科大学附属眼科医院就诊且角膜刮片或真菌培养阳性的FK患者147例角膜标本147份，其中行穿透角膜移植术(PKP)患者84例，板层角膜移植术(LKP)患者42例，病灶切除患者21例；选取11例单纯疱疹病毒性角膜炎活检组织作为阴性对照。对角膜组织标本分别行真菌荧光染色和过碘酸希夫染色。将染色完成的切片分别置于荧光显微镜和光学显微镜下查找真菌菌丝或孢子。比较2种染色方法的阳性率、不同手术方式获得的FK角膜组织以及不同真菌菌株标本间2种染色方法的阳性例数。结果:过碘酸希夫染色的阳性率为60.5%(89/147)，真菌荧光染色的阳性率为79.6%(117/147)，荧光染色法诊断FK的阳性率明显高于过碘酸希夫染色法，差异有统计学意义( χ2＝28.00， P<0.01)，2种染色方法的特异性均为100%。PKP手术切除标本荧光染色的阳性率为85.7%(72/84)，明显高于过碘酸希夫染色的阳性率65.5%(55/84)，差异有统计学意义( χ2＝17.00， P<0.01)；LKP手术切除标本荧光染色的阳性率为71.4%(30/42)，明显高于过碘酸希夫染色的52.4%(22/42)，差异有统计学意义( χ2＝8.00， P<0.01)；病灶切除标本分别采用荧光染色和过碘酸希夫染色法进行检查，阳性率分别为71.4%(15/21)和57.1%(12/21)，差异无统计学意义( χ2＝1.30， P＝0.25)。不同真菌菌株标本间2种染色的阳性例数不同，其中茄病镰刀菌复合群、谲诈腐霉菌、烟曲霉复合群、季也蒙假丝酵母、木霉和铺叶沼兰褐莺真菌行荧光染色的阳性例数分别为19、5、5、1、1和1例，行过碘酸希夫染色的阳性例数分别为11、0、3、0、0和0例。11例阴性对照均为阴性结果。 结论:荧光染色技术应用于石蜡包埋角膜组织检查真菌成分较过碘酸希夫染色法敏感性高，可显著提高真菌检测的阳性率。

目的:分析浙南地区外伤性真菌性角膜炎患者的人口学及临床特征。方法:收集2016年1月至2020年12月温州医科大学附属眼视光医院外伤后真菌性角膜炎562例(562眼)的临床资料，回顾性分析其人口学特征、致病因素、致病菌属、用药史、临床体征及治疗方式。结果:农民为主要患病人群，共332例(59.1%)。41~80岁年龄段为主，共484例(86.2%)。男女比例为2.7∶1。主要分布地区为温州市鹿城区共65例(11.6%)。植物外伤为主要致病因素，共225例(40.0%)。主要致病菌属为镰刀菌属163例(41.6%)。413例(73.5%)可见明显溃疡灶。130例(23.1%)接受手术治疗。联合角膜共焦显微镜、刮片镜检、培养鉴定，阳性检出率为95.7%(201/210)。结论:中老年男性农民为主要患病人群，镰刀菌属是主要的致病菌属，植物伤是主要致病因素。联合角膜共聚焦显微镜，刮片镜检，培养鉴定这三者检查能提高外伤性真菌性角膜炎阳性检出率。

目的：:通过分析温州地区真菌性角膜炎患者的病原学、药敏、实验室检查及治疗方式等，进一步为真菌性角膜炎的诊疗及预后评估提供依据。方法：:回顾性研究。收集2017年1月至2019年12月在温州医科大学附属眼视光医院拟诊为真菌性角膜炎患者共258例（258眼），将患者分别按性别、年龄、职业、致病因素、致病菌属分为男性组和女性组，老年组（≥65岁）和非老年组（<65岁），农民组和非农民组，植物伤组和非植物伤组，镰刀菌属组和非镰刀菌属组，分别统计各组的手术率。采用 χ2检验对各因素与手术率之间的关系进行分析比较，同时对病原学检查的阳性检出率做比较，并统计主要致病菌的药敏情况。 结果：:9─11月份是真菌性角膜炎的高发期，占全年的48.1%，其中农民（60.5%）为主要的患病人群。植物伤（34.5%）为首要致病因素。镰刀菌属（45.3%）是主要的致病菌。真菌培养的阳性率为68.6%，高于涂片检查的43.0%（ χ2=4.522， P=0.033）。镰刀菌属对两性霉素B、伊曲康唑、伏立康唑的最小抑菌浓度值的几何均数分别为4.283、17.290、1.105 μg/ml；曲霉菌属分别为3.389、2.661、0.125 μg/ml；链格孢属分别为0.604、0.531、0.258 μg/ml；假丝酵母菌属分别为0.317、0.552、0.047 μg/ml。258例真菌性角膜炎患者中，44例（17.0%）接受了手术治疗，进一步分析发现老年患者（ χ2=5.293， P=0.036），植物伤患者（ χ2=11.386， P=0.001），镰刀菌属感染患者（ χ2=3.939， P=0.044）的手术概率较高。 结论:：镰刀菌属是温州地区真菌性角膜炎的主要致病菌，而植物伤为首要致病因素。老年患者、植物伤以及镰刀菌属感染导致的真菌性角膜炎较严重，需要手术治疗的概率更高。

目的:分析儿童感染性角膜炎的病原学特征。方法:回顾性研究。纳入2007至2016年在首都医科大学附属北京同仁医院眼科拟诊为细菌性、真菌性、棘阿米巴性角膜炎的14岁及以下639例（649只眼）患者的资料，其中男性361例，女性278例，年龄（5.6±4.4）岁。按年龄≤3岁、4~7岁、>7岁分别进行分析。收集患眼角膜病灶组织标本649份进行病原学检查及药物敏感试验。定性资料的比较采用 χ2检验。 结果:在649份标本中140份培养结果为阳性，阳性率21.6%。细菌培养标本共368份，其中培养阳性114份（占培养阳性标本总数的81.4%），阳性率31.0 %；细菌菌群分布主要为革兰阳性球菌，其次是革兰阴性杆菌。链球菌属（34.2%）居首位，其次是葡萄球菌属（27.2%）和假单胞菌属（7.9%），≤7岁患儿的标本中肺炎链球菌最常见，8~14岁者表皮葡萄球菌最常见。革兰阳性球菌均对万古霉素敏感；大多数细菌对氟喹诺酮类药物敏感性较高，对头孢类和氨基甙类抗菌药敏感性较低，耐甲氧西林葡萄球菌检出率为68%（17/25）。细菌对各种喹诺酮类抗菌药的敏感率为59.0%~84.4%，其中加替沙星最高，但与莫西沙星、左旋氧氟沙星、氧氟沙星相比差异无统计学意义（ χ2=0.836，0.358，1.490； P=0.361，0.550，0.222）。真菌培养标本共254份，其中培养阳性22份（占培养阳性标本总数的15.7%），阳性率8.7%。2007至2011年真菌培养阳性率为9.2%（11/119），2012至2016年为8.1%（11/135），差异无统计学意义（ χ2=0.096， P=0.757）。真菌感染的菌群分布主要为镰刀菌属（34.8%，8/22）、曲霉菌属（26.1%，6/22）和念珠菌属（13.0%，3/22）。镰刀菌属对特比萘芬敏感率较高，对氟康唑和伊曲康唑不敏感；曲霉属对特比萘芬和伏立康唑敏感率高，两性霉素次之；念珠菌属对两性霉素、氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑敏感率高。棘阿米巴送检标本27份，培养阳性4份（占培养阳性标本总数的2.9%），阳性率14.8%，危险因素包括佩戴角膜塑形镜和外伤。 结论:细菌是儿童感染性角膜炎主要致病病原，其中7岁及以下的患儿肺炎链球菌最常见，8~14岁者表皮葡萄球菌最常见；真菌感染明显低于细菌，以镰刀菌属、曲霉属和念珠菌属为主。

目的:测定临床分离的镰刀菌对抗真菌药物的敏感性，并研究免疫抑制剂他克莫司联合抗真菌药物使用的抗菌效果。方法:以美国临床实验室标准化委员会(CLSI)M27-Ed4及M38-A3方法测定氟康唑、伏立康唑、那他霉素和两性霉素B对24株临床分离致病镰刀菌的最低抑菌浓度(MIC)，并采用棋盘法测定他克莫司分别联合4种抗真菌药物对镰刀菌的抗真菌作用。结果:氟康唑、伏立康唑、那他霉素和两性霉素B对镰刀菌(24株)MIC范围分别是64～256 μg/ml、1～8 μg/ml、2～8 μg/ml和1～8 μg/ml。氟康唑与他莫克司对12.5%菌株(3/24)有协同效应，对所有菌株无拮抗效应；伏立康唑与他莫克司对4.2%菌株(1/24)有协同效应，对所有菌株无拮抗效应；那他霉素与他莫克司对16.7%菌株(4/24)有协同效应，对所有菌株无拮抗效应；两性霉素B与他莫克司对29.2%菌株(7/24)有协同效应，对所有菌株无拮抗效应。结论:镰刀菌在体外对那他霉素敏感，对两性霉素B及伏立康唑部分敏感，与他克莫司联合应用时，均对少部分镰刀菌有联合效应，无拮抗效应。

目的:制备水溶性石墨烯基伊曲康唑滴眼液并评估其抗腐皮镰刀菌活性。方法:通过对石墨烯进行氧化改性和高分子材料的修饰策略，制备出水溶性的聚乙二醇修饰石墨烯(GO-PEG)复合材料。通过扫描电子显微镜、表面电位和拉曼光谱等手段对复合材料进行表征。采用溶剂挥发法实现水溶性GO-PEG载体材料对伊曲康唑的负载，获得伊曲康唑滴眼液。采用紫外－可见分光光度计测量伊曲康唑滴眼液的药物负载量；采用微量稀释法和光学显微镜评估伊曲康唑滴眼液的体外抗腐皮镰刀菌效果。结果:扫描电子显微镜显示GO-PEG呈二维纳米薄片结构，拥有较多褶皱；表面电位分析显示GO-PEG的表面电位为－42.40 mV；拉曼光谱显示GO-PEG的 ID/ IG为1.003。水溶性GO-PEG载体负载最大的伊曲康唑药物质量浓度为10 mg/ml，相比于伊曲康唑的水溶解度(0.001 mg/ml)，表观溶解度提高了10 000倍。伊曲康唑滴眼液对腐皮镰刀菌的最低抑菌质量浓度约为1.88 μg/ml，载体材料GO-PEG对腐皮镰刀菌无明显抗菌活性。 结论:GO-PEG实现了对伊曲康唑的有效负载和增溶，表现出对体外腐皮镰刀菌的抑制作用。