患者，男，41岁，因左眼视物不清2年伴耳鸣1个月余，于2021年4月19日至南京中医药大学附属南京中医院眼科就诊，眼科检查：左眼视力0.08，矫正视力0.8；双眼眼压均为18 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)；左眼瞳孔正圆，瞳孔直径约5 mm，直接对光反射迟钝；右眼瞳孔正圆，瞳孔直径约3 mm，直接对光反射灵敏，余眼前节及眼底未见明显异常；双眼视野检查示可见生理盲点，全视野范围内各部位光敏感度正常。请神经外科医师会诊，头颅CT检查后诊断为头颈部腺样囊性癌，行肿瘤次全切除术及放射治疗。术后6个月，患者因左眼视物不清伴分泌物增多及左耳胀痛2周，再次就诊。眼科检查：左眼视力指数20 cm；眼压19 mmHg，球结膜中度充血，角膜中央可见4 mm×4 mm溃疡，荧光素钠染色阳性，前房可见积脓，眼后段结构窥不清(图1)。激光扫描角膜共焦显微镜示病灶内大量炎性细胞浸润(图2)。结膜囊分泌物培养未见细菌及真菌生长。角膜知觉检查显示左眼角膜知觉反射迟钝。耳鼻喉科医师会诊诊断为左中耳炎。临床诊断为左眼感染性角膜溃疡，左眼神经营养性角膜炎，左中耳炎。给予氧氟沙星眼膏(日本参天制药株式会社)1次/2 h点眼，头孢曲松钠3.0g 1次/d静脉滴注。治疗5 d后，患者眼部及耳部症状明显减轻，左眼角膜溃疡范围缩小至3 mm×3 mm(图3A、B)，前房积脓消失。停用全身抗感染药物，加用小牛血去蛋白提取物滴眼液(沈阳兴齐眼药股份有限公司)1次/2 h点眼并佩戴角膜绷带镜。持续治疗5 d后检查发现左眼角膜上皮缺损持续不愈，予利多卡因联合罗哌卡因1：1约0.2 ml球结膜下浸润麻醉后行左眼角膜羊膜覆盖术。术中将羊膜覆盖全角膜，于角膜缘进行间断缝合。术后1 d，羊膜贴敷紧密，角膜缘无渗出及分泌物(图4A)。术后1周羊膜贴敷紧密、无溶解，拆除缝线(图4B)。术后2周羊膜仍覆盖角膜，未见溶解迹象(图4C)。术后1个月检查发现溃疡病灶愈合并呈片状云翳，球结膜中度充血，角膜缘上方可见一新发1.5 mm×1.5 mm角膜溃疡灶，前房下方积脓(图4D)；压迫泪囊区可见大量脓性分泌物自下泪小点溢出，泪囊区皮肤无红肿和压痛；结膜囊分泌物培养结果为金黄色葡萄球菌。综合诊断为左眼泪囊炎、左眼感染性角膜溃疡、左眼神经营养性角膜炎、左中耳炎。给予全身头孢曲松钠3.0 g 1次/d静脉滴注，局部氧氟沙星眼膏、小牛血去蛋白提取物滴眼液1次/2 h点眼抗感染治疗，治疗5 d后行左泪囊鼻腔吻合术；术后随访1年角膜溃疡已形成角膜云翳(图5)，泪道冲洗通畅。

目的:评价改性壳聚糖滴眼液在白念珠菌性角膜炎动物模型中的治疗作用及安全性。方法:选取10只健康成年雌性新西兰白兔，以右眼为实验眼，采用角膜接触镜法建立浅层白念珠菌性角膜炎模型。经裂隙灯显微镜及角膜刮片显微镜检查结果初步判定造模成功的新西兰白兔，采用随机数字表法分为模型组和改性壳聚糖点眼组，根据真菌培养结果最终判定造模成功的模型兔，另选5只兔为正常对照组，不做处理。正常对照组和改性壳聚糖点眼组局部给予改性壳聚糖滴眼液点眼，每日6次，1周后改为每日4次，继续用药1周后停药；模型组不给予治疗。用药期间每天裂隙灯显微镜下观察各组角膜病灶及眼表变化，于造模后第1、7、14、21、28天行裂隙灯显微镜照相并进行眼部症状评分，并记录角膜愈合时间。停药后继续观察各组实验眼角膜情况2周。结果:8只模型兔实验眼角膜刮片显微镜检查结果为真菌菌丝和孢子阳性，培养分离的菌株与接种菌株一致，造模成功率为80%(8/10)。造模后第7、14、21天，模型组感染程度评分分别为(14.50±0.58)、(6.25±0.50)和(2.50±0.58)分，明显高于相应时间点改性壳聚糖点眼组的(7.25±1.26)、(2.75±0.50)和(1.25±0.50)分，差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组于造模后7 d内，角膜水肿明显加重，中央白色溃疡范围增大，造模后7～28 d角膜溃疡逐渐愈合，平均愈合时间为(24.5±2.6)d，最终遗留角膜瘢痕及新生血管。改性壳聚糖点眼组造模后7 d内角膜浸润明显减轻，造模后14 d角膜刮片镜检及真菌培养结果均为阴性，平均愈合时间为(13.5±1.3)d，明显短于模型组，差异有统计学意义(t＝7.47，P<0.01)。造模后28 d改性壳聚糖点眼组实验眼未见角膜炎复发，治愈率为100%。正常对照组局部用药期间未见眼睑结膜充血水肿及角膜损伤表现。结论:改性壳聚糖滴眼液治疗兔眼浅层白念珠菌性角膜炎模型安全、有效，眼表刺激性小。

目的:制备特异性抗镰刀菌鸡卵黄抗体(IgY)并检测其对温度和pH的耐受性及抗真菌作用。方法:取22周龄莱杭母鸡18只，采用随机数表法将其随机分为阴性对照组和实验组，每组9只。制备灭活镰刀菌丝悬液，将菌丝浓度2×10 7菌落形成单位(CFU)/ml的菌悬液与弗氏完全佐剂等体积混合充分乳化后，对实验组莱杭母鸡进行免疫，每只鸡注射1 ml，2周后换为弗氏不完全佐剂加强免疫。在免疫后的第5~16周每周收集卵黄，用硫酸铵盐析法制备IgY，将得到的蛋白溶液放入冻干机中制作成冻干粉，4 ℃保存。以质量分数0.9%氯化钠溶液代替菌悬液按照同样方式进行阴性对照组莱杭母鸡的注射，以制备非特异性抗体作为实验中的阴性对照。采用考马斯亮蓝法测定特异性IgY蛋白浓度，采用间接酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定其效价。将1×10 5 CFU/ml和1×10 3 CFU/ml镰刀菌悬液与不同浓度IgY及磷酸盐缓冲液(PBS)混合培养4 d后测定吸光度( A)值，用PBS及非特异性IgY与镰刀菌悬液共孵育作为空白对照组及阴性IgY组，绘制抗镰刀菌IgY的抑菌曲线。用pH 7.4的PBS将特异性IgY溶液稀释至0.02 mg/ml，分别在30、40、50、60、70、80和90 ℃水浴中孵育30 min后冷却至室温；此外，用pH值为l、2、3、4、5、6、7、8、9、l0、11和12的PBS将特异性IgY溶液稀释至0.02 mg/ml，4 ℃下放置1 h，均采用间接ELISA法测定抗体活性，评估IgY对不同温度和pH的耐受性。取SPF级8周龄雌性C57BL/6小鼠12只，采用随机数表法将其分为PBS对照组和特异性IgY治疗组，每组6只。用镰刀菌感染小鼠右眼角膜，建立小鼠真菌性角膜炎动物模型，建模后1 d，特异性IgY治疗组用200 mg/ml特异性抗镰刀菌IgY点眼，PBS对照组用PBS点眼，于感染后1、3和5 d在裂隙灯显微镜下观察小鼠角膜，根据炎症评分表对真菌性角膜炎的严重程度进行评分。 结果:免疫后第5~16周的IgY蛋白质量浓度分别为1.57、2.89、24.98、25.09、23.89、25.78、21.57、21.37、18.98、15.78、14.67和12.67 mg/ml。特异性抗镰刀菌IgY的效价从第5周开始升高，第7周时达到最高效价，为1∶10 000，可维持至免疫后12周，12周后抗体效价逐渐下降。抑菌曲线显示，与空白对照组和阴性IgY组相比，特异性IgY治疗组镰刀菌生长缓慢。抗体效价高于1∶10 000的特异性IgY在60 ℃以下具有较好的热稳定性；在pH 4~6具有最高活性，在pH 3~9的免疫活性能够保持在70%以上，随着pH值的进一步降低或升高，其活性迅速降低。镰刀菌感染后1、3和5 d，PBS对照组角膜炎症评分分别为3.50±0.55、7.33±0.82和4.00±0.63，特异性IgY治疗组角膜炎症评分分别为3.33±0.82、4.17±0.75和2.50±0.55。2个组不同时间点炎症评分总体比较，差异均有统计学意义( F分组＝247.35， P<0.05； F时间＝23.19， P<0.05)，其中镰刀菌感染后3 d和5 d，与PBS对照组相比，特异性IgY治疗组小鼠真菌性角膜炎炎症评分降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:用硫酸铵盐析法可成功制备高效价特异性抗镰刀菌IgY，其稳定性高，对温度和酸碱度均有一定的耐受性，可以在小鼠的真菌性角膜炎模型中减轻角膜溃疡的严重程度，降低炎症评分。

目的:分析板栗刺所致眼部损伤的临床特征和治疗方法。方法:回顾性系列病例研究。选取2013年1月至2019年3月于青岛眼科医院住院治疗的因板栗刺造成眼部损伤的48例（48只眼）患者的病历资料。入选患者随访至少3个月，分析患者的一般资料、就诊时间、病变部位、病变特征和治疗方式。结果:48例（48只眼）患者中，男性33例，女性15例；年龄（56±10）岁（19~74岁）。受伤时间集中在9月下旬（25例）和10月中上旬（23例）。至青岛眼科医院就诊时间最短为伤后3 h，最长为伤后8个月。临床表现为角膜和（或）巩膜异物者共13例（27.1%），入院后均急症给予角膜和（或）巩膜异物取出术治疗。临床表现为真菌性角膜炎者共24例（50.0%），其中18例患者的患眼存在角膜溃疡，感染累及角膜浅层或全层；6例患者的患眼角膜表面无溃疡，为深基质及角膜内皮面的感染；共聚焦显微镜检查真菌阳性率为87.5%（21/24）；根据真菌感染的深度给予单纯药物（2例）、角膜清创术（5例）、结膜瓣遮盖术（2例）、角膜基质内注药（1例）或穿透角膜移植术（14例）治疗；链格孢霉菌为主要病原菌。临床表现为坏死性巩膜炎者共11例（22.9%），均给予巩膜切开探查术治疗，其中3例至青岛眼科医院后经超声生物显微镜检查仍发现有巩膜异物残留，给予手术取出；4例在巩膜坏死部位涂片查到真菌。结论:板栗刺造成的眼部损伤主要为角膜和（或）巩膜异物、真菌性角膜炎、坏死性巩膜炎3大类。板栗刺异物应尽早取出，一旦发生真菌性角膜炎应尽早药物或手术干预。坏死性巩膜炎常由长期异物存留诱发，巩膜切开探查术是治疗的有效方法。（中华眼科杂志， 2020， 56： 370- 375）

目的:探讨腐霉菌性角膜炎的临床特征，并评估其治疗预后。方法:回顾性系列病例研究。收集2017年6月至2019年6月于山东省眼科医院明确诊断为腐霉菌性角膜炎的患者6例（6只眼），其中男性4例，女性2例，年龄（58.7±11.3）岁。记录患者的临床特点、角膜激光共聚焦显微镜图像特点、治疗方法、药物治疗有效率和术后感染复发情况。结果:6例患者裂隙灯显微镜下角膜病变表现为：溃疡表面干燥，溃疡周围可见毛刺征、卫星灶、伪足表现，2例患者（2/6）可见苔被形成，所有患者均未见明显免疫环结构。共聚焦显微镜未发现腐霉菌感染的特定特征。6例患者均对抗真菌药物反应不佳，均接受了角膜移植手术治疗。3例患者（3/6）术后复发，初次手术后复发时间为4~6 d，再次手术后复发时间为2~3 d；其中2例患者复发后分别经过2次、3次角膜移植，但因复发未保住眼球，行眼内容物摘除术。结论:腐霉菌性角膜炎较为罕见，在临床表现、辅助检查结果方面与常见真菌性角膜炎难以区分，DNA测序是明确病原的关键；该病病情进展快，角膜移植术后复发率及眼内容物摘除率均较高。 （中华眼科杂志，2021，57：589-594）

目的:分析浙南地区外伤性真菌性角膜炎患者的人口学及临床特征。方法:收集2016年1月至2020年12月温州医科大学附属眼视光医院外伤后真菌性角膜炎562例(562眼)的临床资料，回顾性分析其人口学特征、致病因素、致病菌属、用药史、临床体征及治疗方式。结果:农民为主要患病人群，共332例(59.1%)。41~80岁年龄段为主，共484例(86.2%)。男女比例为2.7∶1。主要分布地区为温州市鹿城区共65例(11.6%)。植物外伤为主要致病因素，共225例(40.0%)。主要致病菌属为镰刀菌属163例(41.6%)。413例(73.5%)可见明显溃疡灶。130例(23.1%)接受手术治疗。联合角膜共焦显微镜、刮片镜检、培养鉴定，阳性检出率为95.7%(201/210)。结论:中老年男性农民为主要患病人群，镰刀菌属是主要的致病菌属，植物伤是主要致病因素。联合角膜共聚焦显微镜，刮片镜检，培养鉴定这三者检查能提高外伤性真菌性角膜炎阳性检出率。

目的：:通过分析温州地区真菌性角膜炎患者的病原学、药敏、实验室检查及治疗方式等，进一步为真菌性角膜炎的诊疗及预后评估提供依据。方法：:回顾性研究。收集2017年1月至2019年12月在温州医科大学附属眼视光医院拟诊为真菌性角膜炎患者共258例（258眼），将患者分别按性别、年龄、职业、致病因素、致病菌属分为男性组和女性组，老年组（≥65岁）和非老年组（<65岁），农民组和非农民组，植物伤组和非植物伤组，镰刀菌属组和非镰刀菌属组，分别统计各组的手术率。采用 χ2检验对各因素与手术率之间的关系进行分析比较，同时对病原学检查的阳性检出率做比较，并统计主要致病菌的药敏情况。 结果：:9─11月份是真菌性角膜炎的高发期，占全年的48.1%，其中农民（60.5%）为主要的患病人群。植物伤（34.5%）为首要致病因素。镰刀菌属（45.3%）是主要的致病菌。真菌培养的阳性率为68.6%，高于涂片检查的43.0%（ χ2=4.522， P=0.033）。镰刀菌属对两性霉素B、伊曲康唑、伏立康唑的最小抑菌浓度值的几何均数分别为4.283、17.290、1.105 μg/ml；曲霉菌属分别为3.389、2.661、0.125 μg/ml；链格孢属分别为0.604、0.531、0.258 μg/ml；假丝酵母菌属分别为0.317、0.552、0.047 μg/ml。258例真菌性角膜炎患者中，44例（17.0%）接受了手术治疗，进一步分析发现老年患者（ χ2=5.293， P=0.036），植物伤患者（ χ2=11.386， P=0.001），镰刀菌属感染患者（ χ2=3.939， P=0.044）的手术概率较高。 结论:：镰刀菌属是温州地区真菌性角膜炎的主要致病菌，而植物伤为首要致病因素。老年患者、植物伤以及镰刀菌属感染导致的真菌性角膜炎较严重，需要手术治疗的概率更高。

患儿男性，11岁，配戴角膜塑形镜矫正近视1年，戴镜后出现右眼疼、睁眼困难，当地医院诊断为右眼角膜炎，给予妥布霉素滴眼液及小牛血去蛋白提取物眼用凝胶4次/d点眼治疗，2 d后症状持续加重，遂于河南省立眼科医院就诊。患儿既往体健；视力右眼为指数/20 cm，左眼为0.8；右眼睑水肿，睑裂区有黄绿色黏液状分泌物，结膜水肿，混合充血(+++)，角膜水肿，中央鼻上方见4 mm×4 mm白色溃疡病灶(图1A)；右眼角膜刮片Giemsa染色镜检发现少量杆菌；角膜活体共聚焦显微镜检查发现右眼角膜病灶及周围大量炎性细胞浸润及大量树突状细胞，可见高反光物沉积，角膜内皮隐见较多炎性细胞附着，未发现典型真菌菌丝、孢子及阿米巴包囊(图1B)。初步诊断：右眼细菌性角膜溃疡。给予莫西沙星滴眼液和妥布霉素滴眼液交替点眼，点眼间隔为10 min，加替沙星眼用凝胶睡前点眼，全身静脉滴注头孢他啶2 g/d，治疗3 d后病灶未见明显好转，遂行角膜病灶刮除，丁胺卡那霉素冲洗液冲洗病灶，继续上述药物治疗3 d，病灶缩小、局限(图2)，角膜刮片细菌培养结果为阳性(图3)，经鉴定为铜绿假单胞菌，对喹诺酮类、氨基糖苷类药物敏感。继续上述药物治疗1周，结膜充血减轻，角膜水肿好转，病灶缩小。将莫西沙星滴眼液和妥布霉素滴眼液点眼次数减少为6次/d，加用0.1%氟米龙滴眼液，3次/d，每周递减1次且监测眼压1次。1个月后复诊，右眼视力恢复至0.6，病灶处遗留角膜云翳(图4)。

患者，女，57岁，因无明显诱因出现右眼异物感、视力下降1个月余，于2020年1月至成都东区爱尔眼科医院就诊后收治入院。否认糖尿病病史。患者曾于外院诊断为角膜炎，于10 d前在外院行角膜激光扫描共聚焦显微镜检查，报告发现菌丝，给予常规抗细菌治疗无效转至本院就诊。眼科检查：视力右眼0.02(－2.00 DS/－0.50 DC×90°＝0.15)，左眼0.08(－3.50 DS/－2.00 DC×90°＝1.0)；右眼眼压12.4 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)，左眼眼压15.9 mmHg；右眼结膜混合充血(＋)，角膜中央瞳孔区可见一直径约2 mm灰白色圆形浸润灶，溃疡达浅基质层，溃疡底部较清洁，可见2个灰白色隆起针尖状病变(图1A)，角膜中央直径2 mm荧光素钠染色阳性(图1B)，右眼KP(－)，Tyndall征(－)，晶状体透明，玻璃体和视网膜未见明显异常。左眼前后节均未见明显异常。患者空腹血糖12.38 mmol/L。入院后立即行角膜刮片细胞学检查和细菌、真菌微生物培养，结果均为阴性。激光扫描共聚焦显微镜(HRT3，德国海德堡公司)检查在角膜浅基质层可见纤细分支、略微弯曲的高反光丝状结构，初次报告为"菌丝"(图2)。初步诊断为右眼真菌性角膜溃疡，给予局部抗真菌药物治疗，以及口服降糖药、注射胰岛素4 d后，空腹血糖降为9.6 mmol/L，但眼部症状及体征无明显变化。复查角膜刮片细胞学检查和细菌、真菌微生物培养，结果均为阴性；复查激光扫描共聚焦显微镜，仍可见纤细丝状结构。经远程会诊，考虑诺卡菌感染，入院5 d后修正诊断为右眼诺卡菌性角膜炎，给予0.25%阿米卡星滴眼液(8 ml：20 mg，成都倍特药业有限公司)点右眼，每小时1次，每次1滴；0.3%加替沙星眼用凝胶(5 g，沈阳兴齐眼药股份有限公司)点右眼，每天3次，每次1滴；1%夫西地酸滴眼液(5 g∶50 mg，爱尔兰利奥制药有限公司)点右眼，每晚1次，每次1滴，联合复方托吡卡胺滴眼液(10 ml，日本参天制药株式会社)扩瞳，重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶(5 g，珠海亿胜生物制药有限公司)促进角膜修复；治疗后3 d，角膜溃疡基本愈合，复查激光扫描共聚焦显微镜显示丝状结构影像减少，呈断裂状态(图3)。治疗后9 d，角膜溃疡愈合，炎症消退(图4)，患者痊愈出院。出院时患者右眼裸眼视力0.06(小孔视力0.25)，激光扫描共聚焦显微镜检查未见丝状结构(图5)。

目的：:探讨基于角膜基质内注射伏立康唑的综合治疗方案对感染灶浸润深度达1/2角膜基质以上的深基质真菌性角膜炎的有效性和安全性。方法：:回顾性临床研究。选择2013年3月至2017年7月于温州医科大学附属眼视光医院行角膜基质内注射伏立康唑治疗的深基质真菌性角膜炎患者62例（62眼）的资料进行分析。观察指标包括年龄、溃疡直径、治愈率、复发率以及并发症情况等，注射术后至少随访6个月；并根据角膜基质内注药效果将患者分为单纯角膜基质内注药有效组和单纯角膜基质内注药无效组。采用独立样本 t检验及卡方检验对数据进行统计分析。 结果：:62例患者的溃疡直径为2.8～11.0（5.5±2.1）mm，患者发病到就诊时间为2 d～2年（44.2±98.6）d，其中6例患者主诉病史超半年，56例患者发病到就诊时间为（21.2±13.6）d；术后随访6～36（10.5±7.5）个月。单纯角膜基质内注射伏立康唑治愈42例（42眼）；1例（1眼）患者角膜基质注药有效后为提高视力行角膜移植；单纯角膜基质内注射伏立康唑无效19例（19眼），联合行结膜瓣覆盖治疗后，治愈11眼，需再行角膜移植8眼，其中2眼术后复发。该综合治疗方案治愈率为85.5%，复发率为3.2%。单纯角膜基质内注药有效组溃疡直径小于单纯角膜基质内注药无效组，差异有统计学意义（ t=-2.199， P=0.032）。术中及术后随访均未见并发症。 结论：:角膜基质内注射伏立康唑对常规药物治疗无效的深基质真菌性角膜炎有良好的疗效并且安全性较高。而对于病灶范围广泛的患眼，单纯角膜基质内注药疗效欠佳，联合结膜瓣覆盖治疗可提高治愈率。