目的:探讨中药单体贯叶金丝桃素(HPF)与氨来呫诺(AM)联合给药时，对抗肥胖及改善代谢紊乱的叠加治疗作用。方法:采用ob/ob小鼠为肥胖小鼠模型，在HPF单药(2.5 mg/kg，腹腔注射)或与AM(50 mg/kg，灌胃)联合给药4周后，监测小鼠体重、摄食，检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平，并通过小动物核磁共振、代谢笼、糖耐量和胰岛素耐量检测及HE染色等方法，观察小鼠的体重变化、能量消耗、脂肪含量、糖代谢等的变化。Western印迹和酶联免疫吸附测定(ELISA)用以检测环磷酸腺苷(cAMP)-蛋白激酶A(PKA)信号通路。结果:给药4周后，与对照组相比(平均体重54.07 g)，HPF给药组的小鼠平均体重下降至51.33 g( P＝0.042)；与AM联合给药后，小鼠平均体重进一步降低至47.61 g( P＝0.041)，表现出明显的叠加效应。小鼠核磁共振结果显示，HPF给药后小鼠脂肪含量减少( P＝0.011)，表现为腹股沟白色脂肪和附睾旁白色脂肪的细胞直径都变小( P＝0.014, P＝0.032)，产生棕色化趋势，棕色脂肪组织中白色脂肪浸润减少。然而，与HPF给药组相比，两药联合治疗并没有使白色脂肪细胞进一步变小或减少其在棕色脂肪组织的脂质积累。代谢笼实验显示，HPF处理的小鼠在光照期的氧气消耗率( P<0.001)和二氧化碳释放率( P＝0.002)都显著高于对照组小鼠，HPF与AM的组合可以进一步提高小鼠的能量消耗。此外，HPF与AM联合给药可以进一步激活白色脂肪组织中的儿茶酚胺下游cAMP-PKA信号通路。当联合用药时，肥胖小鼠的胰岛素抵抗改善，肝脏三酰甘油含量减少( P＝0.049)，肝脏损伤指标血清ALT水平下降( P＝0.008)。 结论:HPF和AM联合用药有望成为治疗肥胖、改善代谢紊乱、缓解儿茶酚胺抵抗的有效策略。

目的:研究贯叶连翘Hypericum perforatum L.的化学成分及降糖活性.方法:运用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20 葡聚糖凝胶柱色谱以及制备HPLC等多种方法对贯叶连翘地上部分 95%乙醇提取物进行分离纯化,利用HR-ESI-MS、NMR等波谱技术对分离得到的化合物进行鉴定.通过体外α-葡萄糖苷酶活性抑制试验,测定化合物的降糖活性.结果:从贯叶连翘中分离得到 14 个化合物,分别鉴定为:北美芹素(1)、3′,4′-disenecioyl-cis-khellactone(2)、5,4′-二羟基-6,8-二甲基-7-甲氧基黄酮(3)、5,4′-二羟基-6-甲基-7-甲氧基黄酮(4)、5,7-二羟基-3-甲基色原酮(5)、5,7-二羟基-3-乙基色原酮(6)、2,4,6-三羟基苯甲酸乙酯(7)、香草醛(8)、7-hydroxy-5-methoxy-4,6-dimethylphthalidc(9)、α-生育醌(10)、豆甾醇(11)、乙酰-11-羰基-β-乳香酸(12)、阿魏酸二十六烷酯(13)、cosmo-soic acid(14).结论:其中,化合物 1～4、10、12～14 为首次从金丝桃属植物中分离得到,化合物 5～7 和 9 为首次从贯叶连翘中分离得到.化合物 3 和 4 表现出较好的 α-葡萄糖苷酶抑制活性,其 IC50 值分别为 490.3 和 549.9 μmol/L,与阳性药阿卡波糖效果(IC50=500.1 μmol/L)相当.

目的:研究贯叶金丝桃Hypericum perforatum L.的化学成分及其抗肿瘤活性.方法:采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20 葡聚糖凝胶、MCI和半制备HPLC等方法对贯叶金丝桃石油醚部位进行化学成分分离,通过NMR、HR-ESI-MS等波谱技术对分离得到的化合物进行结构鉴定;通过MTT法测试分离得到的化合物对肝癌细胞HepG2和肺癌细胞A549 的细胞毒活性.结果:从贯叶金丝桃石油醚部位中分离并鉴定了 8 个化合物,分别为:贯叶连翘素A(1)、1-[2-[[(2E)-3,7-dimethyl-2,6-octadien-1-yl]oxy]-4,6-dihydroxyphenyl]-2-methyl-1-propanone(2)、olympi-cin A(3)、1-[3-(3,7-dimethyl-2,6-octadien-1-yl)-2,4,6-trihydroxyphenyl]-3-methyl-1-butanone(4)、3-geranyl-1-(2′-methylbutyryl)-phloroglucinol(5)、elegaphenone(6)、2,6-dihydroxy-3,4-dimethylbenzoic acid methyl ester(7)、2,3-meth-ylenedioxyxanthone(8).结论:化合物 1 为新的间苯三酚类化合物,以上化合物均为首次从贯叶金丝桃中分离得到.化合物 1～6 具有一定程度的细胞毒活性.

目的 研究并建立贯叶金丝桃UPLC指纹图谱和多指标成分的含量测定方法.方法 采用Eclipse Plus C18色谱柱(100mm×2.1 mm,1.8 μm);以乙腈-0.1％磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为300nm;流速为0.25mL·min-1;柱温为25℃.建立了同时测定金丝桃苷、芦丁、槲皮苷、槲皮素含量及指纹图谱的方法,并结合相似度评价、聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对22批贯叶金丝桃样品进行质量分析.结果 建立了贯叶金丝桃药材UPLC指纹图谱共有模式,标定了 11个共有峰,并指认了其中9个,主成分分析基本可将22批贯叶金丝桃按照不同产地分为5类;采用OPLS-DA分析,得到5个质量差异标志物,差异排序依次为峰10(槲皮苷)＞峰5＞峰6(芦丁)＞峰8(异槲皮苷)＞峰1(绿原酸).含量测定结果表明,野生品与栽培品4个指标成分总含量差异不甚明显,不同产地4个指标成分总量略有差异,其中以陕西、新疆产地的含量较高.结论 建立的UPLC指纹图谱和4个指标成分同时测定的方法可用于贯叶金丝桃药材的质量控制及质量标准提升.

目的 超高效液相色谱(UPLC)法结合模式识别方法分析贯叶连翘不同生长部位成分和抗炎活性的差异,建立同时定量测定贯叶连翘5个不同生长部位中6种黄酮类活性成分的方法.方法 采用ACQUITY UPLC(R) BEH C18(50 mm×2.1mm,1.7 μm)色谱柱,0.2％甲酸-水-乙腈作为梯度洗脱系统.采集贯叶连翘花、果、叶、茎、根5个不同部位样品的色谱信息,对积分数据进行中心化、归一化等预处理,采用偏最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)及PLS-tree聚类分析方法,以NO活性的半数抑制浓度(IC50)作为抗炎活性的监督因子,评价贯叶连翘不同部位在黄酮成分、抗炎活性方面的相似性和差异性.结果 方法学验证结果显示,5种化合物线性关系良好,r＞0.999,精密度、重复性和稳定性良好,平均加样回收率为97.28％～102.84％.根据不同部位的黄酮类成分含量和抗炎活性PLS分析情况,显示贯叶连翘不同部位的质量为叶＞花＞茎＞果＞根.结论 说明贯叶连翘采收部位应以地面上茎干部分开始采收为宜.

目的 研究舒肝解郁胶囊(贯叶金丝桃、刺五加)对抑郁大鼠血清5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、下丘脑-垂体-肾上腺轴(hypothalamic-pituitary-adrenal axis,HPA axis)分泌因子皮质酮(corticosterone,CORT)、促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)和海马区脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响,探讨该药的抗抑郁作用机制.方法 采用慢性不可预见性轻度应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)结合孤养法制作抑郁大鼠模型,对各组动物的体质量和行为学表现进行评测,以确认模型有效以及各药物组的抑郁症状得到改善;采用酶联免疫法分析5-HT、CRH和CORT的水平;采用荧光定量PCR测量BDNF的表达.结果 与空白组比较,模型组大鼠体质量增长明显减少(P＜0.01),直立次数和穿格数明显减少(P＜0.01),强迫游泳静止时间显著延长(P＜0.01),糖水消耗减少(P＜0.01),说明抑郁模型有效;与模型组比较,氟西汀和舒肝解郁胶囊组的上述检测指标均显著改变(P＜0.05或P＜0.01);ELISA和qRT-PCR检测结果显示,CUMS大鼠血清5-HT水平降低(P＜0.01),CRH和CORT水平升高(P＜0.01),BDNF mRNA表达减少(P＜0.01),使用氟西汀或舒肝解郁胶囊后,5-HT和BDNF的表达明显升高(P＜0.01),CRH和CORT的水平均显著降低(P＜0.01).结论 舒肝解郁胶囊具有抗抑郁作用,其作用机制可能是通过提高突触间隙单胺递质5-HT浓度进一步调节HPA轴功能,同时提升神经营养因子BDNF的水平,保护神经元功能.

目的 建立金桑芪抗毒滴丸 HPLC 特征指纹图谱,对该制剂进行质量控制.方法 采用 Waters XSELECT CSH-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30 ℃,检测波长为260 nm.以毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芦丁、甘草苷、金丝桃苷、槲皮素和甘草酸铵为参照物,对10批金桑芪抗毒滴丸进行相似度分析.结果 金桑芪滴丸特征图谱共有24个共有峰,比对出了贯叶连翘、桑白皮、黄芪和甘草的特征峰,各批样品的相似度均在0.9以上.结论 采用HPLC特征图谱可对金桑芪抗毒滴丸实现全面和整体的评价,为有效提高该制剂的质量控制提供参考.

目的:探讨贯叶金丝桃提取物对其他药物药动学及药效学的影响,为临床安全用药提供参考.方法:对文献资料进行分析,就贯叶金丝桃对治疗药物的药动学和药效学影响进行综述.结果与结论:贯叶金丝桃能够引起多种药物(环孢素A、他克莫司、地高辛、阿米替林、伊马替尼、伊立替康、华法令、口服避孕药等)体内动力学和药效学的改变,临床在合并使用时应引起足够的重视.

为研究金丝桃素对硫化氢合成酶活性的影响,探索金丝桃素作为胱硫醚-β-合成酶(CBS)抑制剂的体内外抗结肠癌作用.本研究通过亚甲蓝法测定金丝桃素和氨基氧乙酸(AOAA)对CBS产H2S活性的抑制作用,以HT29人结肠癌细胞和移植HT29细胞的裸鼠肿瘤模型为抗肿瘤研究对象,测定金丝桃素体内外抗肿瘤作用.结果 表明,来源于贯叶连翘(Hypericum perforaum L.)的化合物金丝桃素是CBS的高效选择性抑制剂,其IC50为7.9±1.42 μmol/L.金丝桃素能显著抑制HT29人结肠癌细胞的增殖,其IC50为22.2±2.25 μmol/L.基因沉默实验表明CBS蛋白可能是金丝桃素在细胞内的潜在靶标之一.意外的是,目前普遍使用的CBS抑制剂AOAA抑制HT29细胞增殖作用非常弱,其IC50为152.5±35.68 μmol/L.此外,不同剂量的金丝桃素(5～S0 mg/kg·d)均能显著减少裸鼠肿瘤体积和重量,30 mg/kg·d剂量皮下给药2周后,和对照组相比肿瘤重量减少了68％.以上结果表明金丝桃素作为CBS的选择性抑制剂具有显著的抗结肠癌作用.

目的 建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定贯叶金丝桃及相关药品中金丝桃苷、金丝桃素含量的方法.方法 采用Hypersil GOLDTM C18 LC色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.05％磷酸水溶液(pH 2.30～2.32)-乙酸铵缓冲液(0.15 mol·L-1,pH 4.10～4.14),梯度洗脱(0～11 min,乙腈25％-0.05％磷酸水溶液75％;11～18 min,乙腈90％-乙酸铵缓冲液10％;18～22 min,乙腈25％-0.05％磷酸水溶液75％);流速1.0 mL·min-1;检测波长360 nm和590 nm;柱温25℃;进样量10μL.按外标法定量分析.结果 金丝桃苷和金丝桃素分别在0.8600～4.3000、0.0188～0.1500μg范围内与峰面积呈良好线性关系(r≥0.9996);其精密性、重复性、稳定性的相对标准偏差(RSD)均小于2％;平均加标回收率分别为98.33％(n=6)和99.20％(n=6).结论 该法快速、准确、分离度高,可用于贯叶金丝桃及相关药品中金丝桃苷和金丝桃素的含量测定.