MLL3又名赖氨酸甲基转移酶2C（KMT2C）。MLL3突变可发生在人体多种癌症中，包括白血病、肝癌、胃癌等。但其在不同癌症中发挥的效应不同，如MLL3在胰腺癌、肝癌中表现为促癌作用，而在急性髓系白血病、食管鳞状细胞癌中表现为抑癌作用。基因在肿瘤中产生的效应依赖一定的环境和条件，MLL3在白血病中发挥抑癌作用的机制还尚未完全清楚。文章就MLL3在白血病中的抑癌机制研究进展进行综述。

目的:检测胃癌组织中赖氨酸组蛋白甲基转移酶2D(KMT2D)的表达水平并探究其临床意义。方法:对100例胃癌患者癌组织及其相应的癌旁组织中的KMT2D进行免疫组织化学染色，分析其蛋白表达水平与患者临床病理特征和预后的关系。结果:100例胃癌组织中的KMT2D高表达率[78%(78/100)]显著高于癌旁组织的高表达率[12%(12/100)]。胃癌组织中的KMT2D高表达与浸润深度( χ2＝36.515， P<0.01)、淋巴结转移状态( χ2＝52.329， P<0.01)、TNM分期( χ2＝78.952， P<0.01)、肿瘤瘤体大小( χ2＝10.905， P<0.010)、淋巴管侵犯状态( χ2＝22.355， P<0.01)、静脉侵犯状态( χ2＝4.100， P<0.05)显著相关，而与患者的性别、年龄、肿瘤远处转移、肿瘤分化程度、肿瘤部位无明显相关( P>0.05)。此外Kaplan-Meier生存分析显示KMT2D高表达组的胃癌患者中位生存时间为15个月，低于KMT2D低及正常表达组的患者，两者差异有统计学意义(Log-rank＝11.146， P<0.05)。Cox单因素回归分析表明年龄[风险比( HR)＝0.544， P<0.05]、肿瘤浸润深度( HR＝2.054， P<0.05)、淋巴结转移( HR＝1.964， P<0.05)、远处转移( HR＝2.663， P<0.05)、TNM分期( HR＝2.344， P<0.05)、KMT2D表达水平( HR＝2.420， P<0.05)都是胃癌患者的不良预后影响因素，但是Cox多因素回归分析发现以上因素都不是胃癌的独立预后因素( P>0.05)。 结论:KMT2D在胃癌组织中高表达，作为癌基因促进胃癌的进展并与胃癌的预后显著相关。

目的:探讨伴赖氨酸甲基转移酶2D（KMT2D）基因突变脾边缘区淋巴瘤（SMZL）的临床表现和诊治过程。方法:回顾性分析2020年2月联勤保障部队第九四○医院收治的1例伴KMT2D基因突变SMZL患者的临床资料，并进行文献复习。结果:患者为25岁男性，给予CHOP方案后临床症状缓解不明显，后改为R-FC方案后缓解迅速，截至2021年8月患者为无症状生存。结论:KMT2D基因突变可能导致SMZL的发生，且伴KMT2D基因突变SMZL对CHOP方案不敏感，对含利妥昔单抗的联合化疗方案较为敏感。

目的:研究孕期尼古丁暴露对子代小鼠牙釉质形成的影响及其可能的表观遗传学机制。方法:通过随机数字表法将10只C57BL/6孕鼠分为对照组（皮下注射生理盐水）及孕期尼古丁暴露（prenatal nicotine exposure，PNE）组（皮下注射尼古丁溶液），每组5只，孕鼠生产后分别收集出生后0 d（postnatal day 0，P0；P14、P25含义依此类推）、P14、P25新生小鼠，根据母代分组分为子代对照组及子代PNE组，并记录P0、P25子代小鼠体质量。采用显微CT（micro-CT）扫描分析、扫描电镜和维氏显微硬度检测对子代小鼠牙槽骨和下颌切牙进行硬组织相关参数分析。提取P25子代小鼠下颌骨组织及第3代牙上皮干细胞（dental epithelial stem cell，DESC）中的总RNA，通过实时荧光定量PCR检测成骨向及成釉向分化相关基因、增殖相关标志物和干细胞标志物的表达水平。采用石蜡切片免疫组织化学染色观察增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，Pcna）、釉原蛋白（amelogenin，Amelx）、甲基转移酶ZESTE增强子同源物2（enhancer of zeste homolog 2，Ezh2）、组蛋白H3第27位赖氨酸的三甲基化修饰（histone H3 trimethylated at lysine 27，H3K27me3）阳性染色分布及水平。使用细胞增殖（cell counting kit-8，CCK-8）试剂盒对外源性添加不同浓度（0.01、0.1、1 mmol/L）尼古丁以及Ezh2抑制剂GSK126的DESC进行细胞活力检测。结果:PNE组孕鼠较对照组更容易出现不良妊娠结局，P0时子代PNE组小鼠体质量［（0.99±0.02）g］显著低于子代对照组［（1.20±0.04）g］（ P<0.001）；P25时，子代PNE组小鼠体质量［（9.65±1.32）g］显著低于子代对照组［（15.26±1.70）g］（ P<0.001），死产率［（46.40±9.30）%］显著高于对照组（0）（ P<0.001）。P14和P25时，子代PNE组小鼠下颌切牙釉质矿化沉积点与第一磨牙近中面的距离数值［分别为（-1 349±45）、（-506±380）μm］均较子代对照组［分别为（-1 192±147）、（504±198）μm］显著减小（ P<0.05， P<0.001），提示矿化沉积点延迟。子代PNE组小鼠切牙釉柱及釉柱间质较对照组排列松散无序，显微硬度［（245.7±18.4）MPa］较子代对照组［（371.9±28.7）MPa］显著降低（ P<0.001）。HE染色显示子代PNE组小鼠前成釉细胞（pre-ameloblast，Pre-Am）区域排列较对照组紊乱，矿化沉积点推迟，暂时性扩增细胞（transit-amplifying cell，TA）及Pre-Am区域延长。免疫组织化学染色显示，子代PNE组小鼠唇侧颈环（labial cervical loop，LaCL）整体Pcna表达较子代对照组显著增多（ P<0.05），H3K27me3较对照组显著富集（ P<0.01），对应区域可见Ezh2表达显著增加（ P<0.01），同时成釉细胞胞质中Amelx阳性信号减弱。体外实验添加1 mmol/L 尼古丁能显著上调子代PNE组DESC的Pcna基因表达水平（ P<0.01），同时显著下调DESC标志物B淋巴瘤Mo-MLV插入蛋白1、富亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域1和成釉细胞向分化的相关基因Amelx等的基因表达水平（ P<0.05， P<0.05， P<0.01）。此外，与0 h时相比，干预24 h后1 mmol/L尼古丁可显著增强DESC的增殖活性（ P<0.001），添加10 μmol/L Ezh2抑制剂GSK126可挽救1 mmol/L尼古丁对DESC带来的增殖促进作用。 结论:孕期尼古丁暴露可能导致成釉向谱系定向分化过程延迟，致子代小鼠DESC增殖及分化异常，并且影响H3K27me3表观遗传修饰水平，造成子代牙釉质发育障碍，提示孕期尼古丁暴露是牙发育的危险环境因素。

目的 检测组蛋白甲基转移酶MLL1在单侧输尿管梗阻(UUO)所导致的肾间质纤维化过程中的表达,探讨其在肾小管上皮细胞间质转分化(EMT)中的作用.方法 将42只雄性SD大鼠随机分为正常组,假手术组,UUO术后1d、1周、2周、3周和4周组,利用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测大鼠肾组织MLL1、Ⅲ型胶原纤维(Col3α1)的表达及EMT的情况.利用siRNA-MLL1质粒抑制HK-2细胞中MLL1基因的表达后,以TGF-β1进行诱导处理,Western印迹法检测细胞中MLL1、EMT相关指标、Col3α1及组蛋白H3第4位赖氨酸三甲基化(H3K4me3)的蛋白水平;同时利用染色质免疫共沉淀(CHIP)对EMT相关基因启动子区域H3K4me3水平进行检测.结果 (1)与正常和假手术组相比,UUO术后大鼠的肾功能随着梗阻时间的增加不断丧失(P＜0.05).(2)与正常和假手术组相比,UUO术后1周和2周时大鼠肾组织肾间质纤维化最为显著(均P＜ 0.05),MLL1及EMT相关指标的表达量也最高(均P＜ 0.05).(3)与对照组相比,3 ng/ml的TGF-β1作用细胞后MLL1的表达量最高(P＜0.05),而在此浓度下HK-2细胞发生EMT也最为显著(P＜0.05).(4)将MLL1敲除后,3 ng/mlTGF-β1所诱导的HK-2细胞EMT被显著抑制(P＜0.05),α-SMA和Vimentin启动子区域的H3K4me3水平也显著下降(P＜0.05).结论 MLL1能够促进TGF-β1所诱导的HK-2细胞EMT的发生,其机制可能是使α-SMA和Vimentin启动子区的组蛋白H3第4位赖氨酸发生三甲基化(H3K4me3).

阿尔兹海默病是一种神经退化性疾病,石杉碱甲作为一种强效可逆性胆碱酯酶抑制剂,成为国内外治疗的首选药物之一.但因石杉碱甲植物提取原料短缺产量低,无法满足市场需求.近年研究可采用酸浸取,酶辅超声,双水相萃取或氯仿萃取,柱层析及阳离子交换树脂纯化等方法使石杉碱甲提取率由原来的0.02281％提高到5％,生产周期从一个月缩短至2d左右.通过优化提取工艺可使提取率大大提高,但要解决石杉碱甲产量过低的根本问题,还需从分子生物学层面入手,寻找编码石杉碱甲生物合成过程中的关键酶基因,进而利用基因工程方法改造菌种,从而达到工业化生产要求.目前报道的赖氨酸脱羧酶、酮胺氧化酶、N-甲基转移酶、细胞色素P450推测均不是限速酶,而加双氧酶极有可能为限速酶.

组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶2D(KMT2D),属于哺乳动物H3K4甲基转移酶家族成员,在成人组织中广泛表达,对于早期胚胎发育有重要作用.C-末端的SET区域负责组蛋白H3K4甲基化,维持KMT2D蛋白的稳定性.KMT2D与WRAD、NCOA6、PTIP、PA1和H3K27去甲基化酶UTX组成复合物,在其中起到支架蛋白的作用,维持UTX的稳定性.KMT2D主要催化哺乳动物H3K4单甲基化,与转录因子共同作用于增强子区域,从而调控基因表达.KMT2D在调节细胞发育、分化、新陈代谢和肿瘤抑制方面具有重要作用,其突变导致多种疾病发生.进一步研究KMT2D有助于揭示其异常所引发多种疾病的病因,并且对开发临床药物提供有力的帮助.

本文报告了2例Kabuki综合征(Kabuki syndrome,KS)新生儿的诊疗经过.2例患儿新生儿期均无典型KS特殊面容,但均存在反应差、异常外观、多脏器发育异常等表现.病例1出院后失访.病例2随访至生后3个月,逐渐出现典型KS特殊面容(下外侧眼睑外翻、弓形眉、眉弓稀疏、鼻尖扁平、耳朵突出).采用新生儿遗传病基因Panel二代测序技术,进行相关基因测序及数据分析,2例患儿均考虑为赖氨酸甲基转移酶2D(lysine methyltransferase 2D,KMT2D)基因突变致KS.其中病例1为KMT2D基因发生杂合缺失突变c.13895delC(p.P4632HfSTer8),病例2为KMT2D基因发生杂合重复突变c.12809dupA(p.T4271 Dfs*63).2例患儿均为新发突变,其中病例2为新发现的致病性突变.

目的 探讨组蛋白赖氨酸甲基转移酶SET8在高磷诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化中的作用及机制.方法 选取80～100 g的清洁雄性SD大鼠6只,取其胸主动脉,分离VSMCs后进行原代培养.VSMCs传至第3～4代,铺6孔板,并给予相应刺激.将VSMCs随机分为正常组和高磷组(10 mmol/Lβ-甘油磷酸),培养4 d后茜素红染色观察钙结节形成情况,甲基麝香草酚蓝比色法钙含量,流式细胞数检测细胞凋亡,RT-PCR和Western blot检测SET8、p53、Bcl-2、Bax、Caspase3的mRNA和蛋白的表达水平.之后用脂质体将SET8-shRNA质粒与NS-shRNA转染VSMCs作为SET8-shRNA组和空质粒组,未转染组作为正常对照组,RT-PCR和Western blot检测p53、Bcl-2、Bax、Caspase3的mRNA和蛋白的表达水平.结果 (1)高磷组钙盐沉积较正常组明显增加(P<0.05).(2)流式细胞仪检测结果显示,与正常组相比,高磷组VSMCs的细胞凋亡率明显增加(P<0.05).(3)与正常组相比,高磷组Bcl-2、SET8的mRNA和蛋白表达水平下降;p53、Bax、Caspase3的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05).(4)干扰SET8基因表达后钙盐沉积增加(P<0.05),Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平下降;p53、Bax、Caspase3的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05).结论 高磷通过SET8调控p53/Bcl-2/Caspase信号通路,下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,上调促凋亡蛋白Bax和Caspase3的表达,进而参与调控VSMCs的钙化.

组蛋白赖氨酸甲基转移酶2D(histone-lysine N-methyltransferase 2D,KMT2D)作为主要的组蛋白3第4位赖氨酸(H3K4)甲基转移酶,在调控胚胎发育、组织分化、代谢和肿瘤抑制方面发挥重要作用.在小鼠体内,敲除Kmt2d会导致严重的心脏发育缺陷最终造成胚胎期死亡.低氧诱导因子-1α (hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)作为调节细胞应对低氧的关键转录因子,能够调控多种下游基因转录.有相关研究揭示,表观遗传调控者能够调节HIF-1α的稳定性和活性.同样,作为表观遗传调控者的组蛋白甲基转移酶KMT2D是否参与低氧条件下HIF-1α对下游基因的调控,目前仍未知.在本研究中,观察在Kmt2d正常或缺乏的情况下,心肌细胞H9c2对低氧环境的应答反应.结果 显示,与常氧条件相比,低氧状态下HIF-1α、组蛋白乙酰化酶P300、KMT2D及其介导的H3K4一甲基化(H3K4 mono-methylation,H3K4me1)的蛋白质水平增加(P＜0.05);HIF-1α下游基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,Vegf)的mRNA表达水平明显上调(P＜0.01).染色质免疫共沉淀实验(chromatin immunoprecipitation assay,ChIP-qPCR)检测结果显示,H3K4me1和组蛋白3第27位赖氨酸乙酰化(histone 3 lysine 27 acetylation,H3K27ac)在Vegf基因启动子区域的结合丰度明显增加(P＜0.05).低氧条件下沉默Kmt2d之后,H3K4me1蛋白水平和Vegf的mRNA表达下降(P＜0.05).本研究表明,低氧条件下KMT2D参与调控HIF-1α和下游基因Vegf的表达.