目的:比较不同产地车前子盐炙前后6种有效成分含量的变化。方法:采用HPLC法对车前子生品和盐炙车前子中的京尼平苷酸、车前素、槲皮素、山柰酚、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷6种成分进行定量分析。结果:京尼平苷酸、车前素、槲皮素、山柰酚、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷6种成分能够良好分离；线性范围分别为0.259 2~ 3.628 8 μg ( r＝0.999 8)、0.054 3~ 0.760 5 μg ( r＝0.999 6)、0.030 0~ 0.420 6 μg ( r＝0.999 4)、0.055 6~ 0.777 8 μg ( r＝0.999 5)、0.287 0~ 4.018 0 μg ( r＝0.999 8)、0.033 1~ 0.463 1 μg ( r＝0.999 7)；平均加样回收率分别为98.68%、98.46%、98.87%、98.99%、98.34%、98.75%( n＝6)。5个产地的8批车前子生品中6种有效成分含量均有一定差异。车前子经盐炙后，车前素含量变化不大；盐炙车前子的黄酮类成分、京尼平苷酸和异毛蕊花糖苷含量明显增多；毛蕊花糖苷含量显著降低。 结论:基于HPLC法对车前子盐炙前后6种成分进行定量分析，为进一步对车前子盐炙前后的质量变化和药效物质基础提供参考依据。

车前子为我国临床常用的传统中药材,具有清热利尿通淋、渗湿止泻、明目、祛痰的功效.车前子炮制历史悠久,早在汉代就有炒制的记载,其后出现了酒制、盐制、米泔水制等多种炮制方法,车前子炮制加工后可减弱药物寒性,利于临床应用.现代研究表明,车前子的主要化学成分有苯乙醇苷类、环烯醚萜类、多糖类、黄酮类等,具有利尿、抗炎、降血糖、降血脂、抗氧化等药理作用.该文查阅历代本草、医药典籍和相关文献资料,从车前子的炮制历史沿革、化学成分及药理作用等方面进行论述,以期为车前子的相关研究提供参考.

毛蕊花糖苷广泛分布于兔耳草、地黄、车前子等多种植物中.其对中枢神经系统的作用尤其显著,特别在治疗神经退行性疾病有优良的药用价值,其机制主要通过抑制胱天蛋白酶3(Caspase-3)来减少神经元凋亡、促进神经干细胞增殖、减少自由基堆积、抑制氧化应激和炎症反应来保护神经细胞起到缓解帕金森病症状的作用;通过阻止β-淀粉样蛋白(Amyloid β-protein,Aβ)沉积、抑制凋亡和增强胆碱能活动来改善阿尔茨海默病认知功能障碍;通过减少脊髓神经元细胞损伤来治疗多发性硬化;此外,毛蕊花糖苷还通过增加脑内单胺类神经递质(Monoamine oxidase,MAO)含量起到抗抑郁作用;通过抗炎、减轻氧化应激、抑制神经元凋亡来减少神经元损伤来减轻脑缺血再灌注的损伤;通过减轻氧化应激来起到抗惊厥的作用;还能通过增加脑内神经营养因子(Neurotrophin,NT)、海马突触结合蛋白-1(Synaptotagmin-1,Syt1)和原肌球蛋白受体激酶A(Tropomycin receptor kinase A,TrkA)的表达,增加突触 可塑性起到改善记忆的作用.通过查阅近年来相关文献,对毛蕊花糖苷在中枢神经系统方面的作用进行综述,希望能为毛蕊花糖苷的进一步开发研究提供理论依据.

目的 通过响应面法优化富含车前子苷的车前草黄酮提取工艺,并探究车前草黄酮对过氧化氢(H2O2)损伤的L02 细胞的保护作用及其作用机制.方法 通过单因素研究乙醇浓度、提取温度、液料比对车前草黄酮得率及其中车前子苷转移率的影响,在此基础上使用Central-Composite中心组合试验设计和响应面分析法筛选出车前草黄酮提取得率最高,车前子苷转移率最大的提取条件.通过测定该车前草黄酮对过氧化氢诱导的人正常肝细胞L02 存活率、细胞凋亡、线粒体膜电位的影响,及其对L02 细胞丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化物歧化酶(SOD)含量,HO-1、Nrf2、SOD蛋白表达量的影响来探究车前草黄酮对过氧化氢损伤的L02细胞的保护作用.结果 研究结果表明,提取温度 80℃、乙醇浓度 65％、液料比为 15:1 时,提取得到的车前草黄酮得率和车前子苷转移率均最大,分别为 1.82％和 35.01％.该条件下提取得到的车前草黄酮在 25～100 μg·mL-1 内可明显降低过氧化氢损伤的L02 细胞的凋亡率(P<0.001),降低其线粒体膜电位损伤程度(P<0.001),增加细胞内SOD和GSH的表达量(P<0.001),降低细胞中MDA含量(P<0.01,P<0.001).此外,该车前草黄酮可以调节过氧化氢损伤的L02 细胞中HO-1、Nrf2、SOD的表达量,降低过氧化氢损伤肝细胞中HO-1、Nrf2 蛋白表达水平,并增加细胞中SOD蛋白的表达量(P<0.05,P<0.01).结论 使用响应面法筛选出的车前草黄酮提取工艺操作简便,关键有效成分车前子苷的含量丰富,可为车前草黄酮的实际生产提供参考.该方法提取得到的车前草黄酮可降低过氧化氢损伤的肝细胞的氧化应激水平,对L02 细胞具有一定的氧化损伤保护作用,研究结果可以为车前草黄酮作为护肝保健品的开发应用奠定基础.

目的 分析车前子Plantaginis Semen及其不同炮制品的指纹图谱、色度值及抗氧化活性的差异,探讨其化学成分与抗氧化作用的谱效关系.方法 采用分光测色仪测定色度值,采用UPLC法建立车前子及其不同炮制品指纹图谱,采用ABTS法测定抗氧化活性,结合相似度评价、方差分析、主成分分析(principal component analysis,PCA)、层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)等多元统计方法分析车前子及其炮制品的差异;运用偏最小二乘回归法(partial least squares regression method,PLSR)和灰色关联度分析法(grey relation analysis,GRA)分析车前子及其不同炮制品化学成分与抗氧化活性的谱效关系.结果 建立的车前子UPLC指纹图谱标定了 19个共有峰,炒车前子和盐车前子标定了 27个共有峰,合计标定了 34个色谱峰,并对其中13个色谱峰进行了指认.多元统计分析表明,车前子与不同炮制品间存在显著差异,PCA与HCA可将车前子生品与炮制品分为2类,OPLS-DA筛选出10个差异性标志成分.车前子炮制前后的粉末色度值ΔE*＞6,可被肉眼识别,但不同炮制品间粉末颜色差异不明显.抗氧化活性结果表明,车前子炮制后抗氧化作用增强,不同炮制品间差异不大.相关性分析表明,共有峰的峰面积值对色度值有一定影响,对b*值的影响较小,对L*值、a*值影响较大;PLSR与GRA分析表明,有11个共有峰表征的化学成分与车前子及其炮制品的抗氧化活性关联较大,其中包括原儿茶酸、木通苯乙醇苷B与野漆树苷.结论 建立的UPLC指纹图谱及色度值、抗氧化活性的测定方法,可用于车前子及其不同炮制品的鉴别及质量分析,指纹图谱-体外抗氧化活性的谱效关系研究,可为车前子炮制机制的研究提供参考.

复方车前片来源于《圣济总录》中车前子散,系由车前子与黄连组方配伍,经现代工艺制作而成的创新中药.为阐明复方车前片治疗糖尿病肾病的物质基础,该研究采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对复方车前片的化学成分进行表征分析,共鉴定出 48 个化学成分;以复方车前片中鉴定出的化学成分为研究对象,进行网络药理学分析并结合活性报道,选取了 6 个药效成分:毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、黄连碱、木兰花碱、巴马汀和小檗碱作为质量评价的指标成分;在此基础上,采用"双外标"一测多评法对复方车前片中 6 个药效成分进行含量测定,分别以毛蕊花糖苷为对照,计算异毛蕊花糖苷的相对校正因子为1.118;以黄连碱为对照,计算木兰花碱、巴马汀和小檗碱的相对校正因子分别为 0.729、1.065 和 1.126,在不同条件下稳定性良好,"双外标"一测多评法所得结果与外标法接近.该研究成功采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术定性表征复方车前片中化学成分,并结合网络药理学筛选其治疗糖尿病肾病的主要药效物质基础,进一步采用"双外标"一测多评法对主要药效物质群进行定量分析,为阐明复方车前片药效物质基础和质量控制提供科学依据.

糖尿病膀胱功能障碍(DBD)是糖尿病(DM)在泌尿系统常见的并发症之一,能引起排尿功能障碍等诸多下尿路症状,严重影响患者的生活质量.抗胆碱能药物、β3受体激动剂、α1受体拮抗剂、磷酸二酯酶抑制剂、咖啡因、肌苷等西药是DBD的首选治疗方法,对此类药物的研究和探索也是最早最多的,已在临床上进行了一定程度的推广;以缩泉丸、木樨草素、葡萄籽提取物、车前子提取物、萝卜硫素、薄荷醇等为代表的中药方面的探索也在逐渐加快步伐,这类药物把控好使用的安全剂量后,未来有望在DBD的临床治疗上得到极大的应用;低能量冲击波、神经刺激法、电针等物理疗法是近些年来研究的热点,正在一步步地被证实是除药物疗法外很重要的一类DBD治疗方法;包含人脐带间充质干细胞、骨髓间充质干细胞、人羊水间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、新生儿膀胱间充质干细胞等在内的干细胞移植疗法的相关研究才刚刚起步,其在DBD的基础实验中表现出了不错的治疗效果,是有相当大的应用前景的;还有几种比较特殊的治疗,包括肉毒梭菌毒素A、人干细胞白血病基因、七甲川吲哚类花菁染料等,还需要更多的实验验证来说明其对DBD的疗效.各类治疗方法都在不断开展的实验研究中逐渐进步和完善,但是目前这些治疗中有很多都还只是在DM动物模型身上进行研究,未来则需要在临床上有更多更深入的验证.

目的:对车前子盐炙工艺进行优化.方法:利用正交实验设计L9(34)优化炮制工艺.评价指标选用京尼平苷酸、毛蕊花糖苷.结果:车前子最佳盐炙工艺是取净车前子,炮制温度160～ 180℃,有爆鸣声,香气溢出时喷洒浓度5％盐水,加其重量40％(mL/100 g)的盐水,炮制7 min,取出,自然放干,放凉.结论:本实验方法更具体、完善、为车前子盐炙工艺的优化奠定了基础.

该文研究车前子降糖活性部位的化学成分.前期研究表明车前子60％乙醇提取物对高脂饲料诱导糖尿病模型小鼠的血糖及糖耐量具有一定改善作用.该文进一步应用硅胶、ODS、Sephadex LH-20柱色谱,中压制备液相、薄层制备等色谱技术对车前子的60％乙醇提取物进行化学成分研究,共分离了8个化合物,并根据化合物的理化性质结合应用波谱技术鉴定了化合物结构,分别为车前子萜A(1)、iridolactone (2)、pedicularislacton(3)、rehmaglutin C(4)、京尼平苷酸(5)、p-hydroxylphenylglycerol(6)、4-(2-羟乙基)-1,2-苯二酚(7)、3-buten-2-one-4-[3-(β-D-glucopyranosyloxy)-4-hydroxyphenyl](8).其中,化合物1～5为环烯醚萜类,6～8为酚酸类.其中化合物1为新的天然产物,化合物2～4,6,8为首次从车前科植物中分离得到.

目的 建立车前子配方颗粒中京尼平苷酸、咖啡酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的含量测定方法,为其质量标准的研究提供依据.方法 采用Kinetex C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.6 μm),以乙腈-0.5％乙酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min-1,检测波长分别为:京尼平苷酸239 nm,咖啡酸325 nm,毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷330 nm;柱温30℃.结果 京尼平苷酸、咖啡酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的进样量分别在0.292 1 ～2.921μg(r =0.999 9),0.003 4 ～0.033 6μg(r =0.999 8),0.047 6 ～0.476 μg(r =0.999 8),0.102 7 ～1.027 μg(r =0.999 9)内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.32％,98.62％,98.23％和98.51％,RSD分别为1.47％,1.36％,1.62％和1.53％.结论 该方法简便、准确,分离效果好,可为车前子配方颗粒的质量控制提供方法参考.