目的:研究地黄叶总苷胶囊对核苷类药物所致肾损伤的疗效及线粒体自噬的作用。方法:使用阿德福韦酯（ADV）建立乙型肝炎病毒（HBV）转基因乙型肝炎小鼠肾损伤模型，造模1周及2周检测各组肾功能，造模2周时检测肾脏组织线粒体自噬指标，透射电镜检测肾脏组织线粒体自噬现象。后分别予地黄叶总苷胶囊或等渗盐水对肾损伤小鼠灌胃治疗8周，检测肾功能，观察肾脏组织形态并检测肾脏组织线粒体自噬指标。观察不同浓度毛蕊花糖苷（地黄叶总苷胶囊主要有效成分）对ADV引起HK-2细胞损伤后的保护作用。将HK-2细胞分为对照组、ADV以及ADV加毛蕊花糖苷组。观察不同时间及不同浓度毛蕊花糖苷对HK-2细胞线粒体自噬指标的影响。收集50例使用核苷（酸）类似物治疗后出现肾损伤的慢性乙型肝炎患者。随机数法分为对照组29例按常规治疗，治疗组21例在对照组的基础上给予地黄叶总苷胶囊治疗，8周检测血清肌酐（Scr）、尿蛋白。统计学方法用 χ2 ?或 t检验。 结果:ADV组造模2周引起HBV小鼠肾功能损伤，ADV组肾组织自噬指标表达高于对照组；透射电镜观察到ADV组肾脏组织线粒体自噬现象。与对照组相比，地黄叶总苷胶囊治疗2个月HBV小鼠肾功能好转，自噬指标表达下调。毛蕊花糖苷促进ADV损害的HK-2细胞的增殖，且较单独ADV组自噬指标表达下调。50例有肾功能损伤的患者中，治疗组的尿蛋白改善显著优于对照组，治疗组有效18例、无效3例，对照组有效12例、无效17例，差异有统计学意义（ χ2 ?=?9.975?0， P ?=?0.001?6）。治疗组血肌酐减低，治疗组有效11例、无效10例，对照组有效12例、无效17例，2组差异无统计学意义（ χ2 ?=?0.593?5， P ?=?0.441?1）。 结论:地黄叶总苷胶囊可改善核苷（酸）类似物所致慢性乙型肝炎的肾功能损伤，可能通过抑制PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬发挥作用。

目的:建立密蒙花标准汤剂超高效液相色谱（UPLC）指纹图谱及有效成分毛蕊花糖苷和蒙花苷的含量测定方法。方法:采用UPLC法建立17批密蒙花标准汤剂指纹图谱；利用相似度和聚类分析法对17批密蒙花标准汤剂进行评价分析；通过对照品对比对标准汤剂色谱峰进行归属；采用HPLC法测定密蒙花标准汤剂中有效成分毛蕊花糖苷和蒙花苷含量。结果:密蒙花标准汤剂共呈现11个指纹峰，归属其中6个指纹峰；17批样品相似度为0.972~0.999，17批次标准汤剂聚类分为2类；采用指纹图谱方法对伪品结香花标准汤剂进行有效鉴别；含量测定结果显示，四川和湖北产地密蒙花饮片制备的标准汤剂中，毛蕊花糖苷和蒙花苷含量较高，且稳定。结论:该方法可全面评价密蒙花标准汤剂质量，为其配方颗粒质量标准建立提供参考。

该研究探讨毛蕊花糖苷对单侧输尿管梗阻模型大鼠肾纤维化的作用。采用随机数字表法将24只成年健康雄性SD大鼠随机分为假手术（CON）组、单侧输尿管梗阻（UUO）组、UUO+毛蕊花糖苷（ACT）组和UUO+贝那普利（BZ）组，采用单侧输尿管结扎术建立肾纤维化动物模型。HE染色和Masson染色观察各组大鼠肾组织病理改变。免疫组化法检测肾组织Ⅲ型胶原蛋白（CollagenⅢ）、热休克蛋白（HSP）-47、结缔组织生长因子（CTGF）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、β联蛋白（β-catenin）、B细胞淋巴瘤因子2（Bcl-2）和半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）蛋白的表达。Western印迹法检测肾组织葡萄糖调节蛋白（GRP）78蛋白表达。结果显示，与CON组比较，UUO组大鼠肾小管扩张，肾间质胶原纤维沉积显著增加；UUO+ACT组和UUO+BZ组大鼠肾小管扩张和间质胶原纤维沉积程度较UUO组显著减轻，但仍明显重于CON组。与CON组比较，UUO组大鼠肾组织CTGF、α-SMA、CollagenⅢ、HSP-47、β-catenin及GRP78蛋白表达量均显著较高，Bcl-2蛋白表达量显著较低（均 P<0.05）；与UUO组比较，UUO+ACT组和UUO+BZ组大鼠肾组织Bcl-2蛋白表达量均显著较高，而其他蛋白表达量均显著较低（均 P<0.05）。该研究表明，毛蕊花糖苷可通过下调CTGF、α-SMA、CollagenⅢ、HSP-47、β-catenin及GRP78表达，上调Bcl-2表达，从而发挥改善肾纤维化的作用。

目的:探讨毛蕊花糖苷对糖尿病肾病小鼠肾组织中高迁移率族蛋白1（high mobility group box 1，HMGB1）及核因子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）表达的影响。方法:采用20只8周龄健康C57BL/6雄性小鼠，选取其中5只作为正常对照组，余15只单次腹腔注射链脲菌素（150 mg/kg）诱导建立1型糖尿病模型后随机平均分为模型组、毛蕊花糖苷组和厄贝沙坦组。持续给药8周后处死小鼠，收集血清、尿液和肾组织，分别进行生化、病理和相关mRNA与蛋白的检测。体外实验采用肾小管上皮细胞（NRK-52E细胞），将其分为对照组（1 g/L葡萄糖）、高糖组（4.5 g/L葡萄糖）和高糖+毛蕊花糖苷组（4.5 g/L葡萄糖+32 μmol/L毛蕊花糖苷），分别于48 h、72 h时间点收获细胞。用实时定量PCR和Western印迹法检测HMGB1和NF-κB mRNA及蛋白的表达。结果:与正常对照组比较，模型组血糖、24 h尿蛋白量、血尿素氮、血肌酐均升高（均 P<0.05），血清、尿液HMGB1均升高（均 P<0.05）；病理染色可见肾小管间质炎性细胞浸润，系膜扩增改变；HMGB1和NF-κB的mRNA、蛋白表达均增加（均 P<0.05）。与模型组比较，毛蕊花糖苷组24 h尿蛋白量、血尿素氮、血肌酐均下降（均 P<0.05），血糖无明显变化（ P>0.05），血清、尿液HMGB1均下降（均 P<0.05），肾脏组织病变减轻，HMGB1和NF-κB的mRNA、蛋白表达下调（均 P<0.05）。NRK-52E细胞中，与对照组比较，高糖组HMGB1、NF-κB mRNA及蛋白水平表达均升高（均 P<0.05）；毛蕊花糖苷干预后，HMGB1、NF-κB mRNA及蛋白水平表达均下调（均 P<0.05）。 结论:毛蕊花糖苷可改善糖尿病肾病小鼠的肾脏病变，其机制可能与降低HMGB1和NF-κB的表达有关。

目的:建立密蒙花超高效液相色谱（UPLC）指纹图谱和2个有效成分含量测定方法，为全面评价不同产地密蒙花药材的质量提供参考。方法:采用UPLC法建立密蒙花药材的指纹图谱；对其进行相似度评价、聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA），并测定密蒙花药材中毛蕊花糖苷和蒙花苷含量。结果:17批密蒙花药材指纹图谱有12个共有指纹峰，经对照品比对，指认其中6个指纹峰，分别为松果菊苷、蒙花苷、木犀草苷、毛蕊花糖苷、异类叶升麻苷、芹菜素；17批密蒙花药材指纹图谱相似度均大于0.9；不同产地的药材分为2类，采用OPLS-DA发现5个差异性标志物，显著性差异排序分别为毛蕊花糖苷>峰3>松果菊苷>异类叶升麻苷>蒙花苷；采用指纹图谱方法对伪品结香花药材进行有效鉴别；湖北和四川产区的密蒙花药材含量较高且稳定。结论:该方法可有效分析不同产地密蒙花药材的质量差异，为其质量控制提供依据。

目的:探究去除玄参芦头对净制玄参药材是否具有必要性.方法:通过对比不同批次玄参药材根和芦头净制后得率、含水量以及浸出物,采用高效液相色谱法比较哈巴苷、哈巴俄苷、安格洛苷C、麦角甾苷、肉桂酸5个主要活性成分含量,并采用苯酚-硫酸法测定玄参多糖,且对上述成分进行主成分分析(PCA),采用脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞(BV-2细胞)建立炎症模型,通过测定细胞上清液中一氧化氮(NO)的释放量,考察玄参根和芦头的抗炎活性,综合评价去除芦头的必要性.结果:玄参中芦头占药材重量的10％～20％,玄参根中浸出物高于芦头;PCA结果显示将玄参根和芦头区分为2大类,哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸以及多糖类活性成分以玄参根中含量高,但芦头中也有较大的贡献,而玄参芦头以安格洛苷C、麦角甾苷含量较多;玄参根和芦头的抗炎活性比较,差异无统计学意义.结论:按照传统习惯,玄参净制去芦具有一定的科学道理,但玄参芦头具有一定的药用价值,在提取物制备等方面进一步挖掘利用.

毛蕊花糖苷广泛分布于兔耳草、地黄、车前子等多种植物中.其对中枢神经系统的作用尤其显著,特别在治疗神经退行性疾病有优良的药用价值,其机制主要通过抑制胱天蛋白酶3(Caspase-3)来减少神经元凋亡、促进神经干细胞增殖、减少自由基堆积、抑制氧化应激和炎症反应来保护神经细胞起到缓解帕金森病症状的作用;通过阻止β-淀粉样蛋白(Amyloid β-protein,Aβ)沉积、抑制凋亡和增强胆碱能活动来改善阿尔茨海默病认知功能障碍;通过减少脊髓神经元细胞损伤来治疗多发性硬化;此外,毛蕊花糖苷还通过增加脑内单胺类神经递质(Monoamine oxidase,MAO)含量起到抗抑郁作用;通过抗炎、减轻氧化应激、抑制神经元凋亡来减少神经元损伤来减轻脑缺血再灌注的损伤;通过减轻氧化应激来起到抗惊厥的作用;还能通过增加脑内神经营养因子(Neurotrophin,NT)、海马突触结合蛋白-1(Synaptotagmin-1,Syt1)和原肌球蛋白受体激酶A(Tropomycin receptor kinase A,TrkA)的表达,增加突触 可塑性起到改善记忆的作用.通过查阅近年来相关文献,对毛蕊花糖苷在中枢神经系统方面的作用进行综述,希望能为毛蕊花糖苷的进一步开发研究提供理论依据.

目的 探究熟地黄中促进体外培养的神经干细胞(NSCs)增殖的活性成分.方法 采用系统溶剂萃取法及柱色谱法分离熟地黄各部位,CCK-8法测定熟地黄不同化学分离部位及活性部位所获化合物对NSCs增殖活性的影响.结果 熟地黄水提醇沉后水部位经大孔树脂、硅胶、聚酰胺分离后所得FrC5部分具有显著的促进NSCs增殖的活性(P＜0.05).FrC5部分按照溶解性不同分为FrC5-1和FrC5-2,FrC5-1部位相较于其他组别作用较强且与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05),与对照组相比对NSCs的增殖率为75.85％.进一步分离得到2个化合物,根据MS、NMR数据及参考文献鉴定得出活性化合物为毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷.毛蕊花糖苷对NSCs的增殖率为65.04％,异毛蕊花糖苷对NSCs的增殖率为35.86％.结论 毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷可能是熟地黄中促进NSCs增殖的主要活性成分.

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)检测毛蕊花糖苷干预不育症模型大鼠血浆睾酮的含量,测定不育症模型大鼠血浆24 h睾酮含量,并借助药动学理论定量评价干预效果.方法 大鼠含药血浆以睾酮-C3为内标,用液液萃取法,以12 000 r·min-1离心10 min,取上清液,5 μL进样分析.以Acquity UPLCⅢ BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7 μm)为色谱柱;以甲醇为流动相A、5 mL·L-1甲酸溶液为流动相B进行梯度洗脱,洗脱程序:流速为0.2 mL?min-1;柱温为35℃;样品室温度为4℃;运行时间为10 min;质量检测器使用ESI离子源,正模式检测,睾酮及内标睾酮-C3用于定量的母→子离子对分别为m/z 289.2→97.0、m/z 291.4→101.1.借助药动学软件分析,获取空白组和毛蕊花糖苷干预组大鼠体内24 h睾酮曲线下面积(area under the curve,AUC)数据.结果 睾酮质量浓度在1～1 000 ng·mL-1范围内呈良好的线性关系.该方法日内、日间精密度RSD值均<10.84%,日内、日间准确度RE均<10.03%,样品提取回收率为95.82%～99.17%,置于进样器于4℃冰箱及长期冷冻稳定性RSD值均<10.63%.测定结果显示,毛蕊花糖苷干预组药峰浓度(peak concentration,Cmax)为7.92 ng·mL-1,空白组Cmax为10.26 ng·mL-1.与空白组比较,毛蕊花糖苷干预组大鼠体内睾酮24 h总AUC相对平稳.结论 建立了UPLC-MS/MS测定不育症模型大鼠血浆睾酮含量的方法.从PK/PD角度比较分析推测出,给予毛蕊花糖苷干预后,不育症模型大鼠的24 h总体睾酮可基本恢复正常水平,从而发挥改善大鼠雄性生殖功能的作用.

目的:研究短筒兔耳草Lagotis brevituba Maxim.的化学成分.方法:短筒兔耳草70%乙醇提取物,采用大孔树脂、MCI、ODS、硅胶、Sephadex LH-20 葡聚糖凝胶、半制备高效液相色谱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.结果:从短筒兔耳草中分离鉴定得到 14 个化合物,分别为:大车前苷(1)、松果菊苷(2)、毛蕊花糖苷(3)、车前草苷D(4)、chionoside J(5)、maxoside(6)、turrilliside A(7)、juniperoside(8)、lagotisoside A(9)、土荆皮苷C(10)、4-羟基苯甲酸-β-D-葡萄糖酯(11)、木犀草素-7-O-槐糖苷(12)、6-羟基木犀草素-7-O-葡萄糖苷(13)、对羟基苯甲酸(14).结论:其中,化合物 5～8、10～13 为首次从兔耳草属植物中分离得到,化合物 4、9 为首次从该植物中分离得到.