目的:探讨前列腺癌细胞中转化生长因子-β受体Ⅱ环状RNA(circTGFBR2)调节核糖核酸结合蛋白2(PTBP2)/胚胎致死性异常视觉样蛋白1(ELAVL1)激活SMAD2信号途径促进前列腺癌发生发展。方法:利用生物信息学方法，寻找与circTGFBR2结合microRNA以及其他相关蛋白结合位点，以及与PTBP2存在相互作用的RNA结合蛋白。PC3转染pcDNA3.1-circTGFBR2后，实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circTGFBR2的表达。PC3细胞过表达circTGFBR2同时敲低微小RNA(microRNA，miR)-29b，蛋白质印迹法(Western blot)检测ALK5、SMAD2及p-SMAD2表达。PC3分别转染pcDNA3.1-circTGFBR2及对照质粒后，利用circTGFBR2特异性探针进行pulldown，检测PTBP2与circTGFBR2的相互作用。过表达circTGFBR2与ELAVL1，检测细胞上皮-间充质转化(EMT)的标志基因E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及ZMYM1表达，以及Transwell检测细胞迁移。组间比较应用单因素方差分析。结果:分析结果显示circTGFBR2存在多个miR-29b结合的位点，ALK5(又名TGFBR1)mRNA 3’端非编码区(3’UTR)同样存在miR-29b的结合位点，并证实PTBP2与另一个RNA结合蛋白ELAVL1存在相互作用。用转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激PC3细胞发现，circTGFBR2的表达高于对照组(1.83±0.02比1.03±0.02， F＝2 832.200， P<0.01)。PC3分别转染pcDNA3.1-circTGFBR2及对照质粒后，RT-qPCR检测circTGFBR2的表达，可见circTGFBR2组高于对照组(176.41±1.21比1.04±0.02， F＝63 426.15， P<0.01)。应用miR-29b抑制剂或circTGFBR2处理细胞后ALK5的蛋白水平明显高于对照组，应用miR-29b抑制剂同时过表达circTGFBR2后进一步增加ALK5的表达(分别为0.15±0.01、0.48±0.02、0.55±0.01、0.74±0.01， F＝1268.314， P<0.01)，并且SMAD2(分别为1.14±0.02、1.28±0.02、1.42±0.01、1.5±0.25， F＝4.852， P<0.01)和p-SMAD2(分别为0.18±0.02、0.36±0.01、0.65±0.01、0.94±0.02， F＝1663.667， P<0.01)的磷酸化水平也呈相同趋势。Pulldown-MS实验，多个蛋白质能与circTGFBR2结合，并证实PTBP2与circTGFBR2相互作用。与对照组比较，敲低前列腺癌细胞PTBP2或过表达circTGFBR2时，间质标志基因Vimentin表达高于对照组，而上皮样标志基因E-cadherin表达低于对照组，当同时过表达circTGFBR2并敲低PTBP2会逆转上述结果(Vimentin分别为0.22±0.02、0.87±0.02、0.85±0.02、0.6±0.01， F＝1319.52， P<0.01；E-cadherin分别为0.80±0.01、0.45±0.03、0.36±0.02、0.9±0.02， F＝614.919， P<0.01)。当过表达circTGFBR2或高表达ELAVL1时，PTBP2与ELAVL1的相互作用减弱，细胞EMT的标志基因E-cadherin表达低于对照组，Vimentin及ZMYM1表达高于对照组，Transwell检测细胞迁移高于对照组，而当同时高表达ELAVL1及circTGFBR2时，上述趋势会进一步增强(Vimentin分别为0.22±0.02、0.87±0.02、0.85±0.02、0.6±0.01， F＝1 319.52， P<0.01；E-cadherin分别为0.93±0.02、0.76±0.02、0.43±0.02、0.27±0.01， F＝1 108.46， P<0.01；ZMYM1分别为0.24±0.01、0.53±0.02、0.32±0.01、1.04±0.02， F＝2 023.794， P<0.01)。 结论:circTGFBR2通过调节PTBP2/ELAVL1激活SMAD2信号途径促进前列腺癌发生发展。

目的:通过生物信息学分析转录因子E2F1/2/7/8在前列腺癌(PCa)中的生物学作用。方法:在GEPIA数据库中，以50%为界值将E2F1/2/7/8基因表达水平分为低表达组和高表达组，分析E2F1/2/7/8表达差异与PCa患者无病生存率(DFS)的关系。TCGA数据库包含497例PCa和52例正常前列腺组织，UALCAN网站分析TCGA数据库中基因转录水平及其与Gleason评分的关系。分别获取E2F1/2/7/8的相关基因，将4组相关基因取交集绘制韦恩图获得最终相关基因，进一步行GO功能分析和KEGG通路富集分析。结果:E2F1/2/7/8表达水平越低，PCa患者DFS越高(均 P<0.05)。与正常前列腺组织比较，PCa组织中E2F1/2/7表达升高(均 P<0.05)。E2F1/2/7/8表达水平越高，PCa患者的Gleason评分越高(均 P<0.05)。126个最终相关基因的GO功能分析显示，相关基因在生物学过程(BP)方面主要富集于细胞分裂、有丝分裂、姐妹染色体结合、细胞增殖以及DNA复制等，在细胞成分(CC)方面主要富集于细胞核、细胞核质、细胞质以及细胞溶质等，在分子功能(MF)方面主要富集于蛋白结合、ATP及DNA结合等；KEGG富集于细胞周期、卵母细胞减数分裂、孕酮介导的卵母细胞成熟等信号通路。 结论:转录因子家族中E2F1/2/7/8可通过调节细胞周期，发挥致癌基因作用。

目的:筛选与新生儿支气管肺发育不良(BPD)发病相关的关键转录因子(TF)、微小核糖核酸(miRNA)和信使核糖核酸(mRNA)，并构建了调控网络。方法:从高通量基因表达数据库GEO获取mRNA芯片数据集GSE108756，筛选出的差异表达基因(DEGs)进行京都基因和基因百科全书(KEGG)、基因本体注释(GO)功能富集分析；参照HumanTFDB数据库获取与DEGs对应的TF后利用cytoHubba插件筛选出degree值前10的Hub TF；通过hTFtarget数据库找出Hub TF中7个TF所对应的靶基因；在GSE108756中获取7个TF及其靶基因所对应的探针表达量后做相关性分析，筛选出最终纳入研究的6个Hub TF及所对应的正相关TF-mRNA关系队；利用Targetscan Human数据库获取靶向调控6个Hub TF的miRNAs，并与miRNA芯片数据集GSE166762差异miRNAs取交集后匹配出负向调节的miRNA-TF关系队，最后构建BPD患儿潜在miRNA-TF-mRNA调控网络，进一步筛选出关键miRNA、mRNA。结果:共筛选出201个差异表达基因，KEGG富集结果主要涉及B细胞受体信号通路、造血系统、原发免疫缺陷等作用，GO功能富集分析主要富集在B细胞增殖活化及免疫应答调节细胞表面受体等生物学过程中。与Hub TF(EBF1、TCF4、JUN、BCL11A、SPIB、E2F1)表达谱强关联的正相关下游靶基因有159个，负相关的上游miRNA有120个。BPD患儿发病潜在的关键miRNA-TF-mRNA网络包括has-miR-217-TCF4-Pou2AF1、has-miR-150-5p-E2F1-ADM。结论:本研究构建了新生儿BPD的miRNA-TF-mRNA共调控网络，从转录调控的崭新视角为揭示BPD发病机制奠定理论基础。

目的:观察桑叶提取物对妊娠糖尿病模型大鼠血糖及胰岛β细胞增殖的影响。方法:制备妊娠糖尿病大鼠模型。32只模型大鼠按随机数字表法分为模型组、二甲双胍组、桑叶提取物低剂量组和桑叶提取物高剂量组，每组8只。选取8只正常孕鼠作对照，为正常组。低、高剂量组分别灌胃桑叶提取物0.5、1.5 g/kg，二甲双胍组大鼠灌胃200 mg/kg盐酸二甲双胍混悬液，模型组和正常组灌胃等体积无菌生理盐水。连续干预4周。采用HE染色观察各组大鼠胰腺组织病理学改变。采用血糖仪检测大鼠空腹血糖水平。采用全自动生化检测仪检测大鼠TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。采用酶联免疫吸附试验检测大鼠空腹胰岛素水平，并计算大鼠胰岛抵抗指数、胰岛素敏感指数。采用放射免疫计数器检测血清SOD、CAT、GSH-Px活性和MDA水平。采用MTT法检测胰岛β细胞增殖情况。Western blot法检测周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4, CDK4)、磷酸化视网膜母细胞瘤基因(phosphorylated retinoblastoma, pRB)、E2F1基因编码蛋白(E2F1)表达。结果:与模型组比较，桑叶提取物低、高剂量组空腹血糖、TC、TG、LDL-C水平降低( P<0.05)，HDL-C水平升高( P<0.05)；空腹胰岛素、胰岛抵抗指数降低( P<0.05)，胰岛素敏感指数升高( P<0.05)；血清SOD[(360.62±27.96)U/ml、(401.62±25.66)U/ml比(293.45±31.36)U/ml]、CAT[(10.26±2.07)U/ml、(12.26±0.96)U/ml比(8.26±2.44)U/ml]、GSH-Px[(790.23±47.87)U/ml、(880.63±40.62)U/ml比(716.62±45.62)U/ml]活性升高( P<0.05)，MDA[(30.89±3.28)mmol/ml、(40.42±2.06)mmol/ml比(44.85±5.33)mmol/ml]水平降低( P<0.05)；造模后48、72 h，与模型组比较，桑叶提取物低、高剂量组胰岛β细胞增殖率升高( P<0.01)；桑叶提取物低、高剂量组CDK4[(1.15±0.42)、(1.35±0.59)比(0.75±0.22)]、pRB[(1.11±0.58)、(1.54±0.64)比(0.67±0.20)]、E2F1[(1.06±0.39)、(1.27±0.18)比(0.48±0.12)]蛋白表达升高( P<0.05)。 结论:桑叶提取物可改善妊娠糖尿病模型大鼠血糖、血脂、胰岛素水平，通过调控CDK4-pRB-E2F1通路相关蛋白，促进胰岛β细胞增殖。

目的:探讨MRI诊断乳腺癌转录因子E2F2高表达的价值，以及进一步评估乳腺癌的生物侵袭性。方法:该研究为横断面研究。回顾性分析2014年10月至2020年12月在南通大学第二附属医院病理诊断为乳腺癌的92例患者的临床及影像资料。患者均为女性，年龄32~82（56±11）岁，均接受MRI，包括T 1WI、T 2WI、扩散加权成像（DWI）和动态增强MRI。根据免疫组化结果将患者分为转录因子E2F2高表达组和E2F2低表达组。采用独立样本 t检验、Mann-Whitney U检验或 χ2检验比较2组患者的临床资料、MRI特征及病理学特征。将单因素分析中 P≤0.1的特征纳入多因素logistic回归筛选预测乳腺癌转录因子E2F2高表达的独立危险因素。 结果:92例患者中E2F2高表达组68例、E2F2低表达组24例。2组在瘤周水肿、时间-信号强度曲线类型构成比、雌激素受体表达、人表皮生长因子受体2表达、脉管内癌栓及分子分型构成比方面差异均有统计学意义（ P均<0.05）。多因素logistic回归分析显示仅瘤周水肿（ OR=7.061，95% CI 1.837~27.144， P=0.004）是预测乳腺癌转录因子E2F2高表达的独立危险因素。 结论:MRI上显示瘤周水肿是预测乳腺癌转录因子E2F2高表达的独立危险因素，其与乳腺癌的侵袭性有关。

目的:探究微小染色体维持蛋白5(MCM5)对胶质母细胞瘤的恶性进展促进作用及机制。方法:(1)收集中山大学孙逸仙纪念医院神经外科自2020年9月至2021年9月术中切除的3例非肿瘤患者脑组织与3例Ⅳ级胶质母细胞瘤组织进行质谱检测及蛋白质组学定量分析，筛选差异表达的蛋白并进行功能富集分析。(2)在蛋白质组学的基础上筛选出在胶质母细胞瘤中高表达的目标蛋白MCM5，利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库验证其在胶质母细胞瘤中表达情况，并在收集到的临床标本中进行mRNA水平的进一步验证。(3)通过siRNA转染将U251细胞分为阴性对照组、敲低组-1(si-1组)、敲低组-2(si-2组)，采用CCK-8实验、平板克隆形成实验、EdU染色、Transwell实验及流式细胞术检测MCM5对胶质母细胞瘤恶性表型的调控作用。(4)利用TCGA数据库中胶质瘤患者的转录组数据，通过GSEA算法探究MCM5调控胶质母细胞瘤恶性进程可能的分子机制。结果:(1)在胶质母细胞瘤临床样本中筛选出表达上调的蛋白322种，表达下调的蛋白94种，其中MCM5在3份胶质母细胞瘤样本中均呈现为高表达。(2)基于TCGA数据库163例胶质母细胞瘤和207例非肿瘤脑组织的分析显示MCM5在胶质母细胞瘤中表达上调，差异有统计学意义( t=3.340， P=0.001)；针对临床收集的3份胶质母细胞瘤组织和3份非肿瘤脑组织的实时定量PCR(RT-qPCR)实验结果同样显示MCM5在胶质母细胞瘤中表达增高，差异有统计学意义( t=3.876， P<0.001)。(3)与阴性对照组比较，si-1组、si-2组细胞MCM5 mRNA及蛋白表达均显著下降，接种后第5天的增殖率显著降低，细胞克隆数量显著减少，EdU阳性细胞比例显著降低，G1期细胞比例显著上升，迁移能力明显受损，差异均有统计学意义( P<0.05)。(4)GSEA分析结果显示，MCM5高表达组mRNA在DNA损伤修复、E2F靶基因、MYC靶基因、上皮-间质转化(EMT)、白细胞介素6-Janus激酶-信号转导与转录活化因子3(IL6-JAK-STAT3)、干扰素、KRAS、NOTCH、转化生长因子-β(TGF-β)、Wnt/β-Catenin等特征基因集中富集。 结论:MCM5在胶质母细胞瘤中高表达，并通过包括E2F、MYC、EMT、Wnt/β-Catenin在内的多种机制调控其恶性进展。

目的:探讨流行性感冒（流感）病毒激活Toll样受体7（TLR7）/核转录因子（NF）-κB调控慢性阻塞性肺疾病（COPD）急性加重气道炎症反应的分子机制。方法:从手术标本中获取正常和COPD患者气管组织，分离、鉴定、培养出人原代气道上皮细胞，实验分6组，正常气道上皮细胞组（A组）、正常气道上皮细胞+A型流感病毒（IAV）组（B组）、COPD气道上皮细胞组（C组）、COPD气道上皮细胞+IAV组（D组）、正常气道上皮细胞+TLR7小干扰RNA组（E组）、COPD气道上皮细胞+TLR7小干扰RNA组（F组），分别与IAV、TLR7小干扰RNA共培养24 h后，免疫印迹（Western blot）法检测气道上皮细胞TLR7、NF-κB蛋白表达，酶联免疫吸附（ELISA）法检测细胞上清液中白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子α（TNFα）水平。结果:与A组比，B组、C组和D组TLR7蛋白表达（A组0.350±0.075，B组0.950±0.075，C组0.780±0.056，D组1.280±0.031）、NF-κB蛋白表达（A组0.470±0.034，B组1.090±0.078，C组0.910±0.045，D组1.540±0.051）、IL-6水平[A组（53.000±6.532）pg/ml，B组（185.000±7.874）pg/ml，C组（138.000±5.100）pg/ml，D组（432.000±5.734）pg/ml]、TNFα水平[A组（17.000±1.625）pg/ml，B组（32.000±0.838）pg/ml，C组（29.000±1.323）pg/ml，D组（52.000±3.453）pg/ml]显著升高（ P值均<0.01）；与C组比，D组TLR7、NF-κB蛋白表达及IL-6、TNFα水平显著升高（ P<0.01）。与A组比，E组TLR7蛋白表达（0.530±0.023，0.350±0.047）、NF-κB蛋白表达（0.800±0.046，0.510±0.067）及IL-6水平[（51.000±0.327）pg/ml比（26.000±1.081）pg/ml]、TNFα水平[（14.000±0.314）pg/ml比（8.000±0.526）pg/ml]显著下降（ P<0.05）；与C组比，F组TLR7蛋白表达（1.080±0.078比0.880±0.056）、NF-κB蛋白表达（1.280±0.034比1.040±0.029）及IL-6水平[（125.000±2.249）pg/ml比（83.000±1.125）pg/ml]、TNFα水平[（28.000±1.010）pg/ml比（21.000±0.429）pg/ml]下降（ P<0.05）。 结论:流感病毒激活TLR7/NF-κB信号通路，调控COPD急性加重患者的气道炎症风暴，为临床寻求流感病毒诱导COPD急性加重新的药物治疗靶点提供理论依据。

目的:探讨E2F转录因子1(E2F1)对神经母细胞瘤(NB)细胞衰老的调控作用及机制。方法:人神经母细胞瘤细胞株SK-N-BE (2) (CRL-2271)购自美国典型培养物保藏中心，并将NB细胞株分为空载体(Mock)对照组、E2F1过表达组、随机干扰(sh-Scb)组、E2F1短发卡RNA (sh-E2F1)干扰组，筛选稳定亚克隆细胞株；采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测NB细胞中E2F1表达变化；通过Kaplan-Meier Plot、ChEA3等数据库分析，寻找NB细胞衰老相关靶基因；衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色12 h后，检测β-半乳糖苷酶活性，计算衰老细胞阳性率；5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)掺入细胞2 h后，观测细胞增殖活性；软琼脂三维培养3周，观测细胞克隆形成能力；基质胶侵袭24 h，测细胞侵袭活性；组间比较采用 t检验。 结果:过表达E2F1组的E2F1转录水平高于Mock组(3.24±0.12比1.00±0.04， t＝32.06， P<0.05)，且E2F1蛋白水平也高于Mock组；而E2F1敲低组中E2F1转录本水平低于sh-Scb组(0.67±0.04比1.00±0.03， t＝14.24， P<0.05；0.67±0.08比1.00±0.03， t＝13.80， P<0.05)，蛋白水平也低于sh-Scb组。E2F1过表达组胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)的转录本和蛋白水平高于Mock组(2.17±0.15比1.02±0.00， t＝13.00， P<0.05)且E2F1过表达组聚合酶γ基因(POLG)转录本和蛋白水平高于Mock组(2.38±0.11比1.02±0.01， t＝15.20， P<0.05)。衰老细胞阳性率下降(6.66±1.52比23.33±2.51， t＝9.80， P<0.05)，细胞增殖速率增高(51.66±1.52比23.00±4.00， t＝11.60， P<0.05)，克隆形成数增加(334.66±6.11比157.66±4.16， t＝41.46， P<0.05)且侵袭细胞数增加(318.33±8.02比126.33±5.50， t＝34.18， P<0.05)。相反，E2F1干扰组中IGFBP2转录水平低于随机干扰组(0.38±0.06比1.02±0.01， t＝17.05， P<0.05；0.33±0.05比1.02±0.01， t＝19.76， P<0.05)，IGFBP2蛋白水平也低于随机干扰组。POLG转录水平降低于随机干扰组(0.50±0.02比1.02±0.01， t＝30.35， P<0.05；0.35±0.05比1.02±0.01， t＝20.72， P<0.05)，蛋白水平也低于随机干扰组。衰老细胞阳性率增加(49.66±3.05比18.66±1.52， t＝15.72， P<0.05；40.33±3.05比18.66±1.52， t＝10.99， P<0.05)，肿瘤细胞增殖速率减慢(3.33±2.31比19.33±1.52， t＝10.01， P<0.05；3.33±1.52比19.33±1.52， t＝12.83， P<0.05)，克隆形成数减少(52.00±6.08比127.00±3.60， t＝18.37， P<0.05；51.33±5.03比127.00±3.60， t＝51.33， P<0.05)且侵袭细胞数减少(44.33±2.08比109.66±7.37， t＝14.77， P<0.05；52.00±5.56比109.66±7.37， t＝10.81， P<0.05)。 结论:转录因子E2F1能调控细胞衰老相关基因IGFBP2和POLG表达，抑制NB细胞衰老。

目的:探讨3D打印硅酸锌(ZS)/β-磷酸三钙(β-TCP)支架的制备及其体外成骨诱导性能的效果。方法:运用3D打印技术构建不同比例ZS的β-TCP支架组(β-TCP、5%ZS/β-TCP、10%ZS/β-TCP、15%ZS/β-TCP)，扫描电镜观察其形态和表征，测定各组支架的压缩模量。细胞计数试剂盒(CCK-8)进行支架细胞毒性检测，茜素红染色检测体外支架对MC3T3-E1的成骨诱导能力，反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MC3T3-E1的相关成骨基因[Runt相关转录因子2(Runx2)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、成骨相关转录因子(Osterix)]的表达。组内比较采用One-way ANOVA分析。结果:合成支架随ZS含量的增加，其表面粗糙度由(0.61±0.08) μm增加至(7.83±0.46) μm，及其压缩模量由(11.18±2.21) MPa增加至(29.20±1.28) MPa。10%ZS/β-TCP组比较β-TCP、5%ZS/β-TCP、15%ZS/β-TCP组，在培养细胞后第1、3、5天时间点显著促进细胞增殖；成骨矿化结节茜素红染色深度较深；成骨诱导14 d后，RT-PCR结果提示10%ZS/β-TCP组上调Runx2(3.29±0.31比1.00±0.09、2.03±0.47、2.59±0.20， F＝16.63， P<0.05)、Col-Ⅰ(4.91±0.25比1.00±0.03、1.63±0.09、3.16±0.19， F＝144.50， P<0.001)、Osterix(3.07±0.27比1.00±0.09、1.32±0.25， F＝26.49， P<0.05)的表达。 结论:本研究成功地制备了ZS/β-TCP支架，并具有良好的体外成骨诱导性能。

患者男，29岁，因“体检发现肺部阴影7个月”，于浙江省东阳市人民医院住院治疗。患者7个月前体检行胸部CT扫描提示左肺下叶囊腔样结节，界清，局部壁较厚伴实性成分，长径0.9 cm。患者无咳嗽咳痰、胸闷气促、发热畏寒、低热盗汗等不适症状，未行治疗。2022年11月8日住院复查胸部CT提示：左肺下叶囊腔样结节，界清，局部壁较厚，长径0.9 cm；左肺下叶囊腔样结节，早期肺癌难除外，建议手术治疗。查体：颈软，全身浅表淋巴结未及肿大，双肺呼吸音清，未闻及干湿啰音。既往史：患者2年前在我院行右侧甲状腺癌根治术，术后病理提示右侧甲状腺微小乳头状癌伴1/2枚中央区淋巴结转移。术前诊断：肺部结节，于2022年11月9日行电视胸腔镜左下肺部分切除术。术中快速冰冻病理检查提示左下肺透明细胞肿瘤，倾向良性。手术过程顺利，术中出血10 mL。术后病理：左下肺血管母细胞瘤样透明细胞间质肿瘤（hemangioblastoma-like clear cell stromal tumor of the lung，CCST-L），瘤体1.0 cm×0.8 cm×0.8 cm；切缘阴性。免疫组织化学检查：转录因子（transcription factor，TF）E3、波形蛋白（Vimentin）阳性，Ki-67 2%阳性，广谱细胞角蛋白、细胞角蛋白5/6、细胞角蛋白7、HMB45、S-100、天冬氨酸蛋白酶A、甲状腺转录因子1、黑色素A、上皮膜抗原、平滑肌肌动蛋白、抑制素、F8、CD34、CD31、突触素、嗜铬粒蛋白A、神经细胞粘附分子、CD99 、B-细胞淋巴瘤因子2均阴性（图1）。术后随访3个月，未见复发与远处转移。