大气颗粒物可引起呼吸系统炎症，低相对分子质量透明质酸（HA）是炎症级联反应的关键作用靶点。本综述从HA的合成与分解、颗粒物与高相对分子质量量透明质酸（HMW-HA）的降低以及相对低分子质量透明质酸（LMW-HA）的增加、LMW-HA与呼吸系统炎症三个方面综述了大气颗粒物通过HMW-HA/LMW-HA失衡引起呼吸系统炎症的可能通路及作用靶点，并进一步列举了针对部分靶点的抑制剂和治疗药物，为大气颗粒物致呼吸系统炎症机制及后续研究需关注的薄弱点提供科研线索。

目的:研究铁死亡是否参与大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)减轻肝硬化的过程。方法:2021年6月至12月，选取10只SD大鼠(军事医学科学院动物实验中心提供)腹腔注射橄榄油12周作为对照组，另30只SD大鼠腹腔注射含40%四氯化碳(CCl 4)的橄榄油混合液8周建立大鼠肝硬化模型，采用随机数表法分为模型组、BMMSCs组及小檗碱组( n＝10)，分别注射磷酸缓冲盐溶液(PBS)、BMMSCs及小檗碱灌胃处理4周，干预结束后检测肝脏功能，苏木精-伊红(HE)及天狼星红染色检测肝脏病理，实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝脏组织Ⅳ型胶原蛋白基因α1(COL4a1)、透明质酸酶1(Hyal1)mRNA，RT-qPCR、蛋白质免疫印迹法(Western blot)及免疫组织化学检测长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA及蛋白表达，检测丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)及Fe 2+含量变化，两组间比较采用 t检验。 结果:采用符合标准的BMMSCs，并成功建立大鼠肝硬化模型。BMMSCs组Ishak评分及分期均低于模型组[评分：(4.00±1.00)比 (11.33±2.08)分、分期：(2.33±0.58)比 (5.67±0.58)， t＝－5.500、－7.071， P<0.05]，肝功能较模型组显著改善[ALT：(44.07±0.60) U/L比 (897.47±14.25) U/L、AST：(65.83±1.39) U/L比 (2 158.73±36.85) U/L、ALB：(39.13±1.29) g/L比 (29.47±1.62) g/L， t＝－103.610、－98.309、8.096， P<0.05]。铁死亡相关结果显示，BMMSCs组较模型组ACSL4、FTH1蛋白表达均升高[ACSL4：(1.17±0.14)比 (0.49±0.12)、FTH1：(0.94±0.07)比 (0.38±0.07)， t＝6.458、9.667， P<0.05]，但GPX4蛋白表达升高[(0.75±0.06)比 (0.41±0.09)， t＝5.253， P<0.05]，mRNA水平与蛋白表达呈现一致；BMMSCs组较模型组MDA及Fe 2+的生成均增加[MDA：(0.41±0.03) μmol/mg比 (0.21±0.03) μmol/mg、Fe 2+：(5.84±0.26) nmol/mg比 (2.64±0.14) nmol/mg， t＝8.464、18.700， P<0.05]，GSH的生成减少[(102.08±1.30) μg/ml比 (220.11±1.68) μg/ml， t＝－96.163， P<0.05]，差异均有统计学意义，铁死亡指标表达上小檗碱组与BMMSCs组相似。 结论:铁死亡参与了BMMSCs改善大鼠肝硬化过程，其机制可能与BMMSCs破坏过氧化与抗过氧化平衡相关。

目的:通过干预体外培养人膝骨关节炎软骨细胞中的骨桥蛋白(OPN)-整合素ɑνβ3配体受体反应，观察其对软骨细胞透明质酸(HA)表达水平的影响。方法:从人膝骨关节炎软骨组织标本中获取并体外培养软骨细胞，实验分为三组：对照组加入1 μg/ml重组人骨桥蛋白(rhOPN)干预；整合素ɑνβ3阻断组先采用整合素ɑνβ3阻断剂GRGDSP peptide(100 μg/ml)干预软骨细胞1 h以阻断OPN-整合素ɑνβ3的结合后再加入1 μg/ml rhOPN进行干预23 h，整合素ɑνβ3同型组先采用整合素ɑνβ3同型剂GRGESP peptide(100 μg/ml)干预软骨细胞1 h后再加入1 μg/ml rhOPN进行干预23 h。采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测各组透明质酸合成酶HAS1、HAS2和HAS3 mRNA表达，采用ELISA法检测HA水平。结果:显微镜下观察膝骨关节炎软骨细胞与正常软骨细胞培养后的形态，正常软骨细胞呈多角形，而膝骨关节炎软骨细胞伪足增多，形态多不规则。另外，与对照组(1.01±0.10)相比，整合素ɑνβ3阻断组HAS1、HAS2、HAS3 mRNA表达水平[(0.70±0.01)、(0.68±0.05)、(0.55±0.03)]显著降低，差异有统计学意义( P<0.05)；而整合素ɑνβ3同型组HAS1、HAS2、HAS3 mRNA表达水平[(1.09±0.14)、(0.95±0.06)、(1.04±0.08)]与对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。与对照组[(884.0±7.6)pg/ml]比较，整合素ɑνβ3阻断组HA水平[(578.4±13.8)pg/ml]显著降低，差异有统计学意义( P<0.05)；而整合素ɑνβ3同型组HA水平[(882.1±10.1)pg/ml]与对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:OPN可以通过与整合素ɑνβ3配体受体反应刺激软骨细胞HAS分泌进而诱导HA表达。

目的 观察蜕皮甾酮对皮肤光老化和黑色素生成的影响.方法 ①实验分为正常对照组、1.0 μmol/L蜕皮甾酮组、1.5 μmol/L蜕皮甾酮组、2.0 μmol/L蜕皮甾酮组,各组分别处理角质形成细胞(HaCaT细胞)、黑素细胞(B16F10 细胞)和人真皮成纤维细胞(HDF细胞)后,MTT法检测细胞活力.②实验分为正常对照组、UVB组、1.0 μmol/L 蜕皮甾酮组、1.5 μmol/L蜕皮甾酮组、2.0 μmol/L 蜕皮甾酮组,Annexin V-FITC/PI 双标法检测 HaCaT 细胞凋亡情况,Hoechst 33258 染色法检测凋亡细胞的形态,Western blot 法检测HaCaT细胞中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、环氧化酶-2(COX-2)、沉默调节蛋白1(Sirt-1)表达情况.③实验分为正常对照组、1.0 μmol/L 蜕皮甾酮组、1.5 μmol/L蜕皮甾酮组、2.0 μmol/L蜕皮甾酮组,Western blot 法检测HaCaT细胞中透明质酸合成酶 2(HAS-2)、转谷氨酰胺酶 1(TGM1)和HDF细胞中Ⅰ型胶原蛋白Iα1 肽链(COL1A1)表达情况.④实验分为正常对照组、黑色细胞刺激素组、1.0 μmol/L蜕皮甾酮组、1.5 μmol/L蜕皮甾酮组、2.0 μmol/L蜕皮甾酮组、熊果苷组,采用分光光度仪检测B16F10 细胞黑色素生成及分泌情况.⑤实验分为正常对照组、左旋多巴组、1.0 μmol/L蜕皮甾酮组、1.5 μmol/L蜕皮甾酮组、2.0 μmol/L蜕皮甾酮组,采用分光光度仪检测各组蘑菇酪氨酸酶活性.结果 不同浓度的蜕皮甾酮对HaCaT细胞、B16F10 细胞、HDF细胞活力均无明显影响.蜕皮甾酮各组HaCaT细胞凋亡率及HaCaT细胞中MMP-1、MMP-9、COX-2 蛋白相对表达量均明显低于UVB组(P均<0.05),HaCaT细胞中Sirt-1 蛋白相对表达量均明显高于UVB组(P均<0.05).蜕皮甾酮各组HaCaT细胞中HAS-2、TGM1 蛋白相对表达量和HDF细胞中COL1A1蛋白相对表达量均明显高于正常对照组(P均<0.05).蜕皮甾酮各组和熊果苷组B16F10 细胞黑色素生成和分泌吸光度值均明显低于黑色细胞刺激素组(P均<0.05).蜕皮甾酮各组蘑菇酪氨酸酶活性均明显低于左旋多巴组(P均<0.05).结论 蜕皮甾酮可能具有延缓皮肤光衰老、抗皱和抗黑色素生成作用.

目的 探索miR-3133 通过靶向透明质酸合成酶 2(HAS2)促进细胞自噬,抑制血管生成,从而影响布加综合征中隔膜形成的作用,为布加综合征的病因研究提供新的线索,寻求潜在的治疗方法.方法 利用透射电镜观察人脐静脉内皮细胞(HUVECs)内自噬小体的数量,使用细胞自噬染色检测试剂盒,通过 MDC 法对细胞进行荧光染色,在荧光显微镜下观察自噬性死亡的细胞数量.通过 Western blot 实验检测自噬标志蛋白 p62 和 LC3 的表达改变,从而验证miR-3133 促进自噬的作用.通过CCK-8 实验检测细胞的增殖能力变化,管状形成实验检测细胞形成管道能力的变化,从而验证miR-3133 通过促进自噬抑制血管生成.利用生物信息学软件 miRanda 进行预测,找到有可能成为 miR-3133靶向调控对象的下游基因.转染miR-3133 后使用 Western blot检测 HAS2 的蛋白表达改变,从而验证 miR-3133 能够靶向负调控 HAS2.在使用小干扰 RNA后,检测 HUVECs的增殖能力和血管形成能力变化以及自噬标志蛋白表达的改变,从而验证miR-3133 是通过靶向 HAS2 促进自噬抑制血管形成.结果 透射电镜结果显示转染 miR-3133 mimic的细胞比其阴性对照具有更多的自噬体.在荧光显微镜下 mimic 组中出现更多的 MDC染色;与对照组相比,在 inhibi-tor组中观察到相对较少的 MDC染色.CCK-8 实验表明,miR-3133 mimic减弱了 HUVECs的增殖,而miR-3133 inhibi-tor促进了 HUVECs的增殖.与各对照组相比,miR-3133 mimic 组 p62 蛋白表达显著下调,而 miR-3133 inhibitor 组表达增加,mimic 组 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加,而 inhibitor 组降低.Western blot 结果显示,与各自的对照组相比,miR-3133 mimic组中的 HAS2 表达受到抑制,而miR-3133 inhibitor组中的表达上调.然而,miR-3133 未能在mRNA水平上显著调节 HAS2 的表达.HUVECs敲除 HAS2 后,p62 蛋白表达明显降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高.与阴性对照组相比,HAS2 敲除组的 HUVECs细胞增殖率和血管形成率显著降低.结论 miR-3133 可以通过靶向 HAS2 的表达,促进细胞自噬抑制血管生成,进而参与影响布加综合征.

目的 探讨乳腺癌患者血清透明质酸合成酶2(HAS2)和分化抗原簇44(CD44)水平的变化及其临床意义.方法 选取2020年1月—2021年6月上海交通大学医学院附属第六人民医院乳腺癌患者52例(乳腺癌组)、乳腺良性疾病患者40例(乳腺良性疾病组)、健康体检者34名(正常对照组).收集所有研究对象的临床资料,并检测血清HAS2和CD44水平.采用Pearson相关分析评估HAS2与CD44的相关性.采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清HAS2、CD44、癌胚抗原(CEA)和糖类抗原(CA)15-3单项检测和联合检测诊断乳腺癌的效能.结果 正常对照组、乳腺良性疾病组和乳腺癌组血清HAS2和CD44水平依次升高(P<0.000 1).Pearson相关分析结果显示,正常对照组、乳腺良性疾病组和乳腺癌组血清HAS2与CD44均呈正相关(r值分别为0.364 4、0.415 2、0.290 5,P<0.05).ROC曲线分析结果显示,血清HAS2、CD44、CEA、CA15-3单项检测和4项指标联合检测诊断乳腺癌的曲线下面积(AUC)分别为0.800、0.805、0.560、0.621、0.883;4项指标联合检测模型诊断早期(TNM分期 Ⅰ～Ⅱ)和晚期(TNM分期 Ⅲ～Ⅳ)乳腺癌的AUC分别为0.860、0.919.不同肿瘤大小、组织学分级、人表皮生长因子受体2(HER2)表达和有无淋巴转移的乳腺癌患者之间血清HAS2水平差异均有统计学意义(P<0.05),不同年龄、雌激素受体(ER)表达、孕激素受体(PR)表达、Ki67表达和有无脉管侵犯的乳腺癌患者之间血清HAS2水平差异均无统计学意义(P>0.05).不同临床病理特征的乳腺癌患者之间血清CD44水平差异均无统计学意义(P>0.05).血清HAS2诊断乳腺癌淋巴转移的AUC为0.739.结论 HAS2和CD44可作为乳腺癌的辅助诊断指标.血清HAS2水平与乳腺癌恶性进展密切相关,或可作为预后判断的指标之一.

紫笋茶作为较为独特的一类小茶种,至今为止在护肤领域未有相应研究报道,前期研究发现其提取液在体外能够抑制酪氨酸酶活性及促进成纤维细胞增殖.为进一步研究紫笋茶提取液是否对黑色素生物合成及转移途径具有相应作用以及其对透明质酸合成的影响,以体外培养的人角质形成细胞(HaCaT细胞),人成纤维细胞(HSF细胞),人黑色素瘤细胞(A375细胞)为研究对象,通过Cell-based ELISA、Western blot、细胞免疫组化等实验方法研究及验证相应机制.紫笋茶提取液在适当浓度范围内(0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 g/L)具有抑制黑色素生物合成和转运途径中一系列关键受体表达的作用,尤其浓度为0.6～1.0 g/L时,包括酪氨酸相关蛋白2(TRP-2),黑素细胞黑素皮质素受体1(MC1R),蛋白酶激活受体2(PAR-2),同时发现在适当浓度下(0.8 ～1.0 g/L)能够促进透明质酸合成酶1(HAS1)的表达.结果表明,紫笋茶提取液在体外水平能够显著地抑制促黑激素与黑素细胞结合、黑色素的生物合成以及转移至角质细胞途径中关键受体,并且能够显著促进天然保湿因子透明质酸的合成,即在体外水平具有一定美白和抗衰作用.

目的:探讨透明质酸合成酶2(HAS2)基因在多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠表达及RNA干扰其表达对卵巢颗粒细胞活力、凋亡及免疫抑制因子TGF-β1和VEGF表达的影响.方法:建立DHEA致雌性SD大鼠PCOS模型,Western blot检测PCOS大鼠卵巢组织中HAS2的蛋白表达;培养原代PCOS大鼠卵巢颗粒细胞,将合成的靶向抑制HAS2表达的siRNA转染到细胞中,Western blot检测转染效果及转染后48 h各组细胞中免疫抑制因子TGF-β1、VEGF和NF-κB信号通路相关蛋白的表达.CCK8及流式细胞仪分别检测细胞活力和凋亡率.结果:HAS2在PCOS大鼠卵巢组织中高表达,转染si-HAS2的大鼠卵巢颗粒细胞中HAS2的表达显著低于NC组和对照组(P<0.05);与NC组比较,si-HAS2组细胞活力显著降低,凋亡率增加,TGF-β1、VEGF及NF-κB信号通路p-NF-κB、p-IκBα和下游cyclin D1、survivin的蛋白表达均显著降低(P<0.05).结论:HAS2在PCOS大鼠卵巢组织中高表达,抑制大鼠卵巢颗粒细胞中HAS2表达可降低细胞活力,诱导细胞凋亡,下调免疫抑制因子TGF-β1、VEGF及NF-κB信号通路表达.

目的:探索子宫腺肌病(ADS)在位子宫内膜细胞中透明质酸合成酶(HAS)基因优势亚型和透明质酸受体CD44的表达及雌激素调节作用.方法:选择2017年10月 2018年9月在本院手术治疗的ADS患者21例为ADS组,1 9例无子宫内膜病变患者为对照组,qRT-PCR技术检测体外培养的子宫内膜细胞HAS各亚型(HAS1、HAS2、HAS3)和标准CD44 mRNA的表达及其对不同浓度雌激素作用的反应性.结果:ADS组子宫内膜细胞HAS2和CD44 mRNA的表达量(0.302±0.063、0.254±0.067)高于对照组(0.168±0.025、0.128±0.018)(P＜0.0001),且两者在ADS组中表达呈正相关(r=0.797,P＜0.0001);两组子宫内膜细胞HAS1和HAS3表达均无差异(P＞0.05).0.1、1.0、10.0 nmol/L 17β-雌二醇均能上调ADS组HAS2 mRNA表达量,与未用药0 nmol/L比较均有差异(P＜0.05);对照组仅1.0 nmol/L 17β-雌二醇能显著上调HAS2 mRNA表达量,与未用药组比较有差异(P＜0.05);1.0、10.0 nmol/L 17β-雌二醇使ADS组CD44 mRNA表达量显著上调,与未用药组比较有差异(P＜0.05);对照组仅10nmol/L 17β-雌二醇可显著上调CD44 mRNA的表达量,与未用药组比较有差异(P＜0.05).结论:ADS子宫内膜细胞HAS2和CD44的表达异常增高且两者呈正相关,并受高浓度雌激素的正向调控.

目的 观察氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对人主动脉血管平滑肌细胞透明质酸(HA)合成的影响,并初步探究其分子机制.方法 体外培养人主动脉血管平滑肌细胞T/G HAVSMC,使用不同浓度(10、25、50、75、100mg/L) ox-LDL对T/G HAVSMC细胞进行干预,使用CCK-8法检测细胞存活率,并进行分组分析.采用浓度为25和50 mg/L的ox-LDL干预T/G HAVSMC细胞48 h,并设置天然LDL(native-LDL,N-LDL)组(50 mg/L的N-LDL)和对照组,使用HPLC法测定HA含量,使用实时定量PCR检测透明质酸合成酶2(HAS2)和透明质酸合成酶3(HAS3)的mRNA表达,使用Western blot法检测凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)、氧化脂蛋白的清道夫受体(SR-PSOX)以及脂肪酸转位酶(CD36)的表达.结果 低于100mg/L的ox-LDL对T/G HAVSMC细胞无明显细胞毒性.25 mg/L和50 mg/L ox-LDL组HA含量、HAS2和HAS3的mRNA表达量明显高于N-LDL组和对照组(P＜0.05),N-LDL组与对照组组间差异无显著性(P＞0.05).25 mg/L和50 mg/L ox-LDL组LOX-1表达明显高于N-LDL组和对照组(P＜0.05),而LRP-1、SR-PSOX和CD36表达无明显变化(P＞0.05).结论 ox-LDL能够诱导人主动脉平滑肌细胞中HA的合成,其机制可能与结合LOX-1有关.