目的:探索褪黑素对中波紫外线(UVB)引起人永生化表皮角质形成(HaCaT)细胞黑色素合成的影响及机制，为褪黑素的皮肤保护机制提供理论基础。方法:80 mJ/cm 2 UVB照射10 -5 mol/L褪黑素预处理的HaCaT细胞，照后48和72 h，利用NaOH法检测细胞黑色素水平。照后72 h，利用β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测早衰阳性细胞并分析其比例，蛋白免疫印迹法检测衰老相关蛋白p53和酪氨酸酶(TYR)的表达变化。80 mJ/cm 2 UVB照射分别经毛细血管扩张性共济失调突变激酶/毛细血管扩张性共济失调Rad3相关激酶(ATM/ATR)抑制剂、p53抑制剂和褪黑素预处理的HaCaT细胞，照后72 h检测细胞早衰阳性比例和黑色素水平变化。 结果:褪黑素抑制UVB诱导的黑色素水平增加( t＝56.65、13.39, P<0.05)，同时抑制UVB诱导的TYR表达增加( t＝16.46, P<0.05)；并可缓解UVB诱导的HaCaT细胞早衰( t＝6.37, P<0.05),抑制UVB诱导的p53表达增加( t＝19.08, P<0.05)；ATM/ATR抑制剂、p53抑制剂和褪黑素预处理均可抑制UVB诱导的HaCaT细胞黑色素水平升高( t＝13.88、7.86、8.96, P<0.05)。 结论:褪黑素通过调控p53介导的细胞早衰，抑制UVB诱导的HaCaT细胞黑色素水平增加。

白血病是血液系统常见的恶性肿瘤，许多患者可有眼部表现，部分患者可因视力损害或眼部病变首诊于眼科。白血病可通过直接浸润或由于贫血、血小板减少、血黏度增高、免疫抑制等间接因素累及眼前节、玻璃体、视网膜、视神经、脉络膜、眼眶等眼组织，特征性眼部表现包括Roths斑、绿色瘤等。不同类型白血病对眼部的损害概率和侵犯部位不尽相同，急性较慢性、髓细胞较淋巴细胞白血病出现眼部病变的概率高。近年来，白血病的治疗取得了较大进展，特别是抗白血病靶向药物、造血干细胞移植的广泛应用等，但白血病患者生存周期明显延长的同时，也可能引起或加重眼部病变，如酪氨酸酶抑制剂类药物可导致眶周水肿、阿糖胞苷具有角膜毒性、甲氨蝶呤引起眼外肌麻痹、造血干细胞移植后干眼高发等，在很大程度上影响到患者的生存质量。因此，重视白血病相关眼病的诊治具有重要的临床意义。本文就白血病的眼部表现及其治疗引起的眼部不良反应进行综述。

现有的黄褐斑治疗方案中尚没有一种足够有效、可被用作金标准的方案。局部制剂常被用于治疗黄褐斑，尤其是联合多种作用机制的复合配方较单一成分更为有效。一项小型研究证实，烟酰胺能抑制黑素小体向角质形成细胞的转移，曲酸可以抑制酪氨酸酶的活性，氨甲环酸通过干扰黑素细胞和角质形成细胞的相互作用抑制黑色素的合成。低通量Q开关1 064 nm Nd：YAG（钕：钇铝石榴石）激光被广泛用于黄褐斑的治疗并取得了可靠的疗效。本研究评价一种含有氨甲环酸、烟酰胺和曲酸的外用配方与激光联合应用时对黄褐斑的改善效果。

目的:探讨氨甲环酸对中波紫外线(UVB)照射后小鼠耳郭表皮黑素细胞活性的影响。方法:2016年10月至2018年3月，24只体重20～24 g的C57雌性小鼠，分为生理盐水(NS)组、氨甲环酸(TA)组、UVB/生理盐水(UVB/NS)组、UVB/氨甲环酸(UVB/TA)组4组，每组6只。UVB/NS组、UVB/TA组小鼠分别予UVB照射耳郭皮肤；每次照射前30 min，TA组、UVB/TA组分别予以TA[750 mg/(kg·d)]溶液灌胃；同时NS组、UVB/NS组分别予以等量NS灌胃。光镜结合多巴染色观察黑素细胞数量和形态变化。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测耳郭皮肤中黑素合成相关基因酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白-1(TYRP1)、酪氨酸酶相关蛋白-2(TYRP2)、小眼畸形相关转录因子(MITF)mRNA表达。结果:多巴染色结果显示，NS组与TA组比较，差异无统计学意义( P>0.05)；与NS组相比，UVB /NS组小鼠耳郭表皮的黑素细胞数量显著增多( t＝6.653， P<0.05)，且细胞树突明显增多并延长( t＝6.364，3.844，均 P<0.05)；UVB/TA组则较UVB/NS组黑素细胞的表达减少( t＝3.649， P<0.05)，同时细胞树突减少及变短，差异有统计学意义( t＝4.146，2.197，均 P<0.05)。采用2－△△CT法计算耳郭皮肤组织中TYR、TYRP1、TYRP2、MITF的mRNA表达量，UVB/NS组表达较NS组均明显升高( t＝14.030，5.427，9.800，5.891，均 P<0.05)，UVB/TA组与UVB/NS组相比TYR、TYRP1、TYRP2、MITF的mRNA表达水平降低，差异有统计学意义( t＝2.078，1.905，3.138，1.732，均 P<0.05)。 结论:氨甲环酸可能通过抑制黑素合成相关基因(TYR、TYRP1、TYRP2、MITF)的表达水平而抑制UVB照射后小鼠耳郭表皮黑素细胞的活性。

目的:初步探讨蓝光对人皮肤角质形成细胞、成纤维细胞与黑素细胞生物活性的影响。方法:收集2021年6月至2021年12月昆明医科大学第一附属医院10例3 ~ 12岁健康儿童包皮环切术后的废弃包皮，分离表真皮后采用选择培养基分离角质形成细胞、成纤维细胞、黑素细胞。根据预实验结果采用0、5、10、20、30、40 J/cm 2剂量440 ~ 450 nm蓝光分别照射上述3种细胞，继续培养0、6、24、48 h，在各时间点采用CCK8法检测细胞增殖活力；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测角质形成细胞分泌白细胞介素18（IL-18）、IL-33、神经生长因子（NGF）、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和成纤维细胞分泌IL-33、角质形成细胞生长因子（KGF）的浓度；NaOH裂解法检测黑素细胞黑素合成率；Western印迹检测黑素细胞酪氨酸酶（TYR）、酪氨酸相关蛋白酶1（TRP-1）及多巴色素异构酶（DCT）的相对表达。采用双因素方差分析进行组效应、时间效应和交互效应的分析。 结果:各剂量蓝光照射后不同时间，角质形成细胞组间（ F时间 = 516.20、 F剂量 = 421.20、 F交互 = 25.05，均 P < 0.003）、成纤维细胞组间（ F时间 = 129.30、 F剂量 = 477.80、 F交互 = 10.91，均 P < 0.003）、黑素细胞组间（ F时间 = 77.61、 F剂量 = 138.70、 F交互 = 3.50，均 P < 0.003）增殖活力差异均有统计学意义；照射后即刻，20 ~ 40 J/cm 2组角质形成细胞活力、成纤维细胞活力均低于0 J/cm 2剂量组（均 P < 0.003），5 J/cm 2组黑素细胞活力高于0 J/cm 2剂量组（ P < 0.003）；细胞活力随蓝光照射剂量及继续培养时间的增加有降低趋势。ELISA检测显示，角质形成细胞分泌的IL-18、IL-33、NGF、GM-CSF及成纤维细胞分泌的IL-33、KGF浓度随蓝光照射剂量及培养时间的增加有增高趋势。各剂量蓝光照射后不同时间黑素细胞黑素合成率组间差异有统计学意义（ F时间 = 833.50、 F剂量 = 249.40、 F交互 = 81.38，均 P < 0.003），照射后0 ~ 24 h黑素合成率随蓝光照射剂量及时间的增加有增高趋势，照射后24 ~ 48 h黑素合成率随蓝光照射剂量及时间的增加较24 h有降低趋势；照射后24 h，5、10、20、30、40 J/cm 2组黑素合成率（159.50% ± 10.88%、218.76% ± 8.49%、333.72% ± 7.72%、393.29% ± 6.00%、427.21% ± 8.39%）均高于0 J/cm 2组（102.29% ± 6.57%，均 P < 0.003）。各剂量蓝光照射后不同时间黑素细胞TYR（ F时间 = 67.94、 F剂量 = 28.99、 F交互 = 3.71，均 P < 0.003）、TRP-1（ F时间 = 21.73、 F剂量 = 8.38，均 P < 0.003）、DCT（ F时间 = 34.51、 F剂量 = 11.79，均 P < 0.003）组间相对表达差异有统计学意义，TYR、TRP-1、DCT相对表达随蓝光照射剂量及继续培养时间的增加有增高趋势。 结论:除5 J/cm 2蓝光照射后即刻可增强黑素细胞活力外，5 ~ 40 J/cm 2蓝光照射对人皮肤角质形成细胞、成纤维细胞、黑素细胞增殖活力均具有抑制作用，且这种抑制作用随照射剂量的上升而增强；同时，5 ~ 40 J/cm 2蓝光可增强黑素细胞黑素合成相关酶的表达，短时间内提高黑素细胞黑素合成率。

目的:初步探讨miRNA（miR）-193b-5p对黑素合成的影响及可能机制。方法:从健康男性包皮环切术后废弃的正常包皮组织中分离培养人原代黑素细胞。分别转染miR-NC模拟物（miR-NC mimics组）和miR-193b-5p模拟物（miR-193b-5p mimics组）至人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1细胞，转染48 h时实时定量PCR（RT-qPCR）检测miR-193b-5p的过表达效率，转染72 h时Western印迹检测黑素合成相关蛋白酪氨酸酶和小眼畸形相关转录因子的表达，转染1周时采用氢氧化钠法测定细胞中黑素含量。通过TargetScan网站预测miR-193b-5p的靶基因并采用双荧光素酶报告实验验证，RT-qPCR及Western印迹检测miR-193b-5p过表达后该靶基因mRNA和蛋白表达水平的变化。两组间比较采用两独立样本 t检验。 结果:人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1细胞中，miR-193b-5p mimics组miR-193b-5p的表达水平均显著高于miR-NC mimics组， t值分别为65.57、22.49，均 P < 0.001，且miR-193b-5p mimics组黑素含量（0.091 ± 0.007、0.130 ± 0.004）显著低于miR-NC mimics组（0.117 ± 0.002、0.188 ± 0.032）， t值分别为5.98、3.24， P值分别< 0.01、< 0.05。Western印迹检测显示，人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1细胞中，miR-193b-5p mimics组黑素合成相关蛋白酪氨酸酶及小眼畸形相关转录因子的表达均显著低于miR-NC mimics组（均 P < 0.05）。通过TargetScan预测及双荧光素酶报告实验验证，转录调节因子CITED2的3′非翻译区存在miR-193b-5p的结合位点。人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1中上调miR-193b-5p表达后，CITED2 mRNA及蛋白的表达水平均显著低于miR-NC mimics组（均 P<0.05）。 结论:miR-193b-5p过表达可下调黑素合成相关蛋白酪氨酸酶及小眼畸形相关转录因子的表达，抑制黑素合成，该过程与靶向抑制CITED2的表达有关。

目的:初步探讨Fam114A1对黑素细胞生物学功能的影响。方法:以黑素瘤细胞A375为工具细胞株，通过慢病毒转染的方式构建稳定过表达和抑制Fam114A1蛋白的细胞株，即过表达组和表达抑制组，以转染空载慢病毒的A375细胞作为对照组。实时荧光定量PCR检测Fam114A1对黑素合成相关基因酪氨酸酶（TYR）、酪氨酸酶相关蛋白1（TYRP1）、前黑素小体蛋白（PMEL）、小眼畸形相关转录因子（MITF）和多巴色素异构酶（DCT）mRNA表达的影响，Western印迹法检测TYR、MITF蛋白的表达，MTT法、Transwell迁移和黏附实验分别检测Fam114A1对A375细胞增殖活性、迁移细胞数及黏附能力的影响。统计分析采用单因素方差分析和Dunnett- t检验。 结果:荧光显微镜观察慢病毒转染效率均在90%左右。与对照组A375细胞Fam114A1相对表达水平（0.850 ± 0.120）相比，过表达组显著升高（1.507 ± 0.170， t = 5.888， P = 0.001），而表达抑制组显著降低（0.397 ± 0.120， t = 4.065， P = 0.007），成功构建稳定过表达和抑制Fam114A1的A375细胞株。实时荧光定量PCR及Western印迹结果显示，表达抑制组TYR和MITF mRNA及蛋白表达均显著低于对照组（均 P < 0.01），而过表达组TYR和MITF mRNA及蛋白表达与对照组差异无统计学意义（均 P > 0.05）。与对照组相比，表达抑制组细胞增殖活性和黏附能力显著增强（ P = 0.009、0.001），细胞迁移能力显著减弱（ P = 0.005），而过表达组仅细胞迁移能力显著增强（ P = 0.021）。 结论:Fam114A1可影响A375的增殖活性、迁移和黏附能力，且影响黑素合成相关蛋白TYR和MITF的表达，可能是一种参与调控黑素细胞生物学活性的功能蛋白。

Broussonin C是从构树(Broussonetia papyrifera)中分离得到的一种1,3-二芳基丙烷类化合物,具有较好的酪氨酸酶抑制活性.本文以2,4-二羟基苯甲醛为起始原料,经6步反应得到broussonin C,实现其首次全合成.该法操作简单、收率高.同时,在类似物研究中发现,broussonin C无异戊烯基片段的结构类似物酪氨酸酶抑制活性更好,实现了对其结构的有效简化.

为了解斯里兰卡来源瓦拉(Aquilaria walla)沉香中的化学成分,采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱法从其乙醇提取物中分离得到2个2-(2-苯乙基)色酮类化合物,通过质谱、核磁共振等现代波谱学方法分别鉴定为(5R,6S,7S)-5,6,7-三羟基-2-(2-苯乙基)-5,6,7,8-四氢色酮(1)和(5R,6S,7S)-5,6,7-三羟基-2-[2-(4-甲氧基)苯乙基]-5,6,7,8-四氢色酮(2),均为新化合物.化合物1 和2 对脂多糖诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7 产生NO无抑制作用,MTT法表明对5株人肿瘤细胞不具有体外生长抑制作用,200 μg/mL的化合物2 对酪氨酸酶具有弱抑制作用,抑制率为(21.67±1.67)%.

本文研究西番莲(Passflora edulis Sims)果皮化学成分及其抑制酪氨酸酶活性.采用半制备液相色谱法对西番莲果皮乙醇提取物进行了分离纯化,结合波谱数据和文献报道鉴定其化合物结构.利用酪氨酸酶试剂盒检测酪氨酸酶抑制活性,采用Autodock Vina及Gromacs软件实现化合物与酪氨酸酶蛋白的分子对接.最终从西番莲果皮中分离鉴定3个化合物,分别为肌醇木脂素(1)、松柏苷(2)和紫丁香苷(3),其中化合物1为新的新木脂素类化合物.3个化合物对酪氨酸酶抑制率分别为(27.27±0.79)％、(1.35±0.44)％和(17.04±0.86)％,与酪氨酸酶蛋白的结合能分别为-8.3、-6.9、和-6.7kcal/mol,表明肌醇木脂素具有良好酪氨酸酶抑制活性,与酪氨酸酶蛋白结合作用强,且分子动力学模拟结果表明肌醇木脂素配体-酪氨酸酶复合物结合作用稳定,且具有潜在的酪氨酸酶抑制活性.