董荣芬主任将消化道神经-体液调节反射系统称为“胃神”，临证常基于胃神理论，从斡旋中焦气机角度辨治不寐病。董师常将不寐病分为阳明燥热证、肝经郁热证、血虚火动证、清降失和证。阳明燥热证治以清热养阴、健脾安神为法，首选竹叶石膏汤加减治疗；肝经郁热证治以疏肝清热、养心安神为法，首选温胆汤加减治疗；血虚火动证治以滋阴降火、养血安神为法，首选黄连阿胶汤和酸枣仁汤加减治疗；清降失和证治以调畅气机、养心安神为法，首选人参清肺汤合归脾汤加减治疗。附验案进行分析。

该研究建立了一种简便、快速、灵敏的超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),能够同时测定给药炒酸枣仁提取物后比格犬血浆中木兰花碱、乌药碱、维采宁Ⅱ、异斯皮诺素、斯皮诺素、当药黄素、N-去甲基荷叶碱、6?-阿魏酰斯皮诺素和酸枣仁皂苷B的含量.采用Waters HSS-T3 C18 色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm),流动相为甲醇-水(含0.01%甲酸),梯度洗脱,9 种成分和 2 种内标于 8 min内完全分离;质谱检测在电喷雾离子源正、负离子切换模式下,采用多反应监测模式进行检测.分析方法经特异性、选择性、线性范围、准确度、精密度、回收率、基质效应和稳定性验证,可满足犬灌胃炒酸枣仁提取物后的药代动力学的研究要求.结果显示,比格犬单次灌胃给药后,木兰花碱、乌药碱、维采宁Ⅱ、异斯皮诺素、斯皮诺素、6?-阿魏酰斯皮诺素和酸枣仁皂苷B的Tmax 为2.40～3.20 h,t1/2 为2.08～6.79 h,其中木兰花碱和斯皮诺素的暴露量相对较高,Cmax 分别为 76.7、31.5 ng·mL-1,AUC0-∞分别为 581、315 ng·h·mL-1;其余 5 种暴露较弱的化合物的 Cmax 为 0.81～13.0 ng·mL-1,AUC0-∞为 6.00～106 ng·h·mL-1.该研究为炒酸枣仁后续相关药理研究提供了参考依据.

2型糖尿病(type2diabetesmellitus,T2DM)是一种由多因素导致的系统代谢紊乱疾病,可能由胰岛β细胞的胰岛素分泌缺陷、肌肉组织对葡萄糖的摄取减少、肝糖原输出量增加、脂代谢紊乱、肠促胰岛素效应减弱、肾脏对葡萄糖的处理失调和神经递质紊乱等造成.目前,T2DM的治疗机制主要是通过增加胰岛素的分泌,减少肝糖原的输出,抑制肠道葡萄糖的摄取和吸收,改善C肽的分泌来实现.当药黄素是酸枣仁、菥蓂和淡竹叶等的主要活性成分之一,可诱导干细胞分化成胰岛素产生细胞,调节胰岛素分泌、干预肌肉组织和肝糖原的代谢过程,抑制糖脂和神经递质代谢紊乱,抑制炎症和氧化应激反应的发生,此外还有抗炎、抗氧化、增强记忆力等作用.通过查阅近年来国内外当药黄素治疗T2DM的作用机制,对其分析归纳整理,为T2DM的治疗和研究提供科学的理论依据.

目的:采用正交设计结合层次分析法-客观赋权法(AHP-CRITIC)优化酸枣叶拌蒸酸枣仁的炮制工艺.方法:采用单因素试验优化辅料酸枣叶的加入倍量和蒸制时间,以酸枣叶的加入倍量和蒸制时间为因素,以斯皮诺素、6?-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、白桦脂酸含量为评价指标进行综合加权评分,结合AHP-CRITIC优化酸枣仁的拌蒸工艺.结果:最佳拌蒸工艺为酸枣叶加入量是酸枣仁的4倍,1层酸枣叶1层酸枣仁交替平铺,上锅蒸制3 h.结论:多指标结合AHP-CRITIC优选酸枣仁拌蒸工艺合理可行,可为酸枣叶拌蒸酸枣仁炮制工艺的生产实践提供参考.

目的 对"远志-酸枣仁"中潜在作用于钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ,CaMK Ⅱ)靶点的活性物质进行筛选,阐明其药效物质基础.方法 采用以药效团为基础的虚拟筛选手段,通过收集已出版文献中报道的具有调控CaMK Ⅱ作用的化合物信息,建立基于CaMK Ⅱ配体的HipHop药效团模型,收集文献中报道的"远志-酸枣仁"中的成分并建立化合物库,对"远志-酸枣仁"中的成分与药效团进行匹配,随后使用分子模拟对接手段对匹配到的小分子化合物与CaMK Ⅱ靶点(PDB ID:2V7O)进行对接,研究潜在活性单体与CaMK Ⅱ的作用.用戊四唑(pentylenetetrazol,PTZ)点燃模型对活性单体细叶远志苷A(39)的抗癫痫作用进行测定,并对CaMK Ⅱ水平的调控作用进行评价.结论 通过文献检索建立包含"远志-酸枣仁"中109种化学成分的化合物库,通过测试集验证确定将药效团03用于对"远志-酸枣仁"化合物库的虚拟筛选,对匹配度排前6位的单体通过分子模拟对接分析其与CaMK Ⅱ的作用情况,并用抗癫痫动物模型对单体的活性进行评价,化合物39能够在中高剂量下延长PTZ致癫痫发作的潜伏时间,改善PTZ所致的焦虑抑郁样行为,改善PTZ诱导的癫痫发作后脑内尼氏体丢失,提升PTZ所致的CaMK Ⅱ表达水平降低,提升海马CA1、CA3区及颞叶皮层内CaMK Ⅱ免疫阳性细胞数量并进一步对nAChR4受体水平进行调控.表明基于虚拟筛选与活性评价手段探讨"远志-酸枣仁"中CaMK Ⅱ调控作用的成分具有一定的准确性.

红花作为传统的活血化瘀中药,具有抗肿瘤、抗炎、免疫调节等药理活性.黄酮糖苷是红花植物的主要生物活性组分,糖基转移酶作为活性糖苷化合物生物合成的下游后修饰酶,具有重要的研究意义.该研究基于红花转录组数据分析,挖掘到一条糖基转移酶基因CtUGT49,对其进行了系统的生物信息学分析和酶学性质考察.该基因开放阅读框(ORF)长度为1 416 bp,编码 471 个氨基酸残基,相对分子质量约为 52 kDa.系统进化分析表明,该糖基转移酶属于UGT73 家族.体外酶促结果显示,CtUGT49 可催化柚皮素查尔酮生成樱桃苷和南酸枣苷;催化根皮素生成的主产物为根皮苷和三叶苷,并且具有良好的底物宽泛性.通过蛋白异源表达与纯化得到较为纯净的重组蛋白CtUGT49 后,进行CtUGT49 催化柚皮素查尔酮的酶学性质考察.结果显示,CtUGT49 催化反应的最适pH为7.0,最适温度为37℃,反应8 h后,底物转化率达到最高.采用米氏方程计算CtUGT49 的酶活常数Km=209.90 μmol·L-1,kcat =48.36 s-1.该研究发现的新颖糖基转移酶CtUGT49 对于丰富糖基化工具酶库具有重要意义,且能为进一步解析红花黄酮糖苷的糖基化过程奠定基础.

目的 对不同采收时间的野生与野生抚育酸枣各部位(叶、果肉、种仁)化学成分含量积累差异进行研究,为野生抚育酸枣的质量控制提供参考.方法 利用HPLC-DAD/ELSD串联检测法测定不同采收时间野生和野生抚育的酸枣叶、酸枣果肉及酸枣仁中斯皮诺素、(6′′′)-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B及酸枣仁皂苷D的含量,分析其含量变化趋势.结果 不同采收时间的野生与野生抚育酸枣各部位化学成分含量变化趋势相近,野生抚育酸枣果肉中斯皮诺素含量高于野生酸枣果肉,野生抚育酸枣仁中酸枣仁皂苷B含量高于野生酸枣仁,酸枣仁中斯皮诺素和酸枣仁皂苷A含量均符合《中华人民共和国药典》标准.结论 野生抚育酸枣与野生酸枣中5种成分含量变化相近,野生抚育技术可有效解决野生酸枣资源不足问题.

目的 探讨徐振晔教授治疗肺癌脾肾两虚证的临床用药规律和学术思想.方法 建立Access数据库,收集徐振晔教授肺癌临床病案,运用SPSS 21.0统计软件对处方药物进行聚类分析和因子分析.结果 共收集徐教授治疗肺癌脾肾两虚证临床病案310份,共使用中药140种,常用中药39种,平均处方用药18.8味,药物集中,处方精炼.处方中核心药物为石见穿、生黄芪、炒白术、重楼、黄精、鸡内金、灵芝、淫羊藿、蜂房、山慈菇、党参等.并随症选用太子参、茯苓、白扁豆等健脾补肺;徐教授始终不忘顾护胃气,常用鸡内金、炒谷芽、炒麦芽等药物健胃助运;肺肾阴亏者还加用麦冬、北沙参等;失眠焦虑患者常用炙甘草、淮小麦、大枣、知母、灯心草、酸枣仁;咳嗽痰多气喘患者多使用杏仁、芦根、枇杷叶;脘腹胀满、纳呆呕恶者加用黄连、木香.瘀血证兼有肢体麻木者加川芎、桂枝.结论 徐振晔教授治疗脾肾两虚证主肺癌以健脾补肺、滋肾养精,兼以攻毒散结,佐以顾护胃气.攻补兼施,扶正祛邪相结合.聚类分析和因子分析为名老中医学术经验传承提供客观的研究依据,有助于中医药发展.

目的 采用数据挖掘方法分析以脉络学说营卫理论为指导治疗的冠心病心绞痛络气虚滞证患者的辨治规律.方法 围绕冠心病心绞痛病、证、症、法、方、药等多种要素,应用贝叶斯网络、频数分析、聚类分析、描述性分析、Pearson相关分析等综合性数据分析方法,客观揭示脉络学说指导治疗的冠心病心绞痛络气虚滞证患者的临床辨治规律. 结果 贝叶斯网络提取的与络气虚滞证因果关系较强的症状为心胸隐痛、神疲乏力、脉沉细、心悸懒言、舌有齿痕等;利用频数分析方法分析络气虚滞证的症状及药物,结果显示,心胸隐痛、胸闷气短症状出现的频率较高,分别为7.41％、6.79％,药物频率较高的为西洋参、赤芍等,分别为5.83％、5.59％;药物聚类分析得到炒酸枣仁-合欢花、麦冬-五味子、茯苓-泽泻等有意义的聚类组合;运用描述性分析总结常用药对的药物剂量,其中西洋参-生黄芪常用剂量为12g:30g;采用Pearson相关分析得出了高频药对与症候群之间的关联强度,并且所有组合的关联度均在0.4以上. 结论 通过数据挖掘治疗冠心病心绞痛病案,进一步阐明以脉络学说指导的冠心痛心绞痛络气虚滞证患者的组方用药规律及“络以通为用”的治疗原则.

为探究鲁中地区自然条件下野生酸枣光合生理参数对土壤逐渐干旱的响应机制,明确其与土壤水分的定量关系.该研究以2年生野生酸枣盆栽苗为实验材料,采用人工给水和自然耗水相结合法模拟自然条件下土壤干旱过程,分析野生酸枣叶片光合作用和荧光参数对土壤水分含量(RWC)的响应过程及其机制.结果表明:(1)野生酸枣叶片气体交换参数净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、水分利用效率(WUE)均随着土壤含水量的增加表现出先升高后降低的趋势.当RWC＜38.5％0时,Pn下降,而胞间二氧化碳浓度(Ci)上升,气孔限制值(Ls)下降,叶片光合速率下降主要是非气孔限制因素所致;当RWC在38.5％～65.1％范围内,野生酸枣Pn下降,伴随Ci、气孔导度(Gs)均降低,野生酸枣叶片光合速率下降处于气孔限制阶段.(2)通过Pn和WUE对土壤水分的阈值模拟,发现维持野生酸枣叶片具有较高光合生产力的土壤水分范围为46.O％～0.5％,维持其较高水分利用效率的水分范围为56.3％～73.9％.(3)在土壤逐渐干旱过程中(RWC范围为29.9％～86.5％),野生酸枣最大荧光(Fm)、PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)、PSⅡ实际光化学效率(ΦPSⅡ)逐渐降低,初始荧光(Fo)显著升高,光化学猝灭(qP)先升高再降低,非光化学猝灭(NPQ)在过高(RWC＞83.7％o)或过低(RWC＜38.5％)的土壤水分下呈现较高值,表现出热耗散增加.研究认为,野生酸枣叶片气体交换参数及叶绿素荧光参数对土壤水分均具有明显的阈值响应,阈值点的土壤相对含水量大约为38.5％,低于阈值时叶片光合速率由气孔限制转向非气孔限制,PSⅡ受到损伤,电子传递受阻,光合机构受到破坏.