目的:探讨焦炉工人尿中多环芳烃（polycyclic aromatic hydrocarbons，PAHs）暴露与S-腺苷高半胱氨酸水解酶（S-adenosylhomocysteine hydrolase，SAHH）活力及长链非编码RNA H19基因表达的关系。 方法:于2019年9月，在太原市某焦化厂通过完全随机抽样的方法，选取焦炉作业满1年的男性工人146人，问卷调查法收集其个人基本信息，并采集血样和尿样。采用高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）-荧光检测法检测尿中4种PAHs代谢物2-羟基芴、2-羟基萘、9-羟基菲、1-羟基芘的水平；HPLC-紫外检测法检测血浆中S-腺苷蛋氨酸（S-adenosylmethionine，SAM）和S-腺苷高半胱氨酸（S-adenosylhomocysteine，SAH）的含量，通过计算比值得到SAHH活力值；反转录PCR法测定 H19基因表达水平。将尿中2-羟基芴、2-羟基萘、9-羟基菲、1-羟基芘水平根据四分位数（ P25、 P50、 P75）各分为 Q1、 Q2、 Q3、 Q4组，采用多元logistic回归、趋势检验和限制性立方样条分析PAHs代谢物与SAHH活力、 H19基因表达的关系及其剂量反应。 结果:焦炉工人年龄中位数为39.60岁，工龄中位数为20.38年，尿中2-羟基芴、2-羟基萘、9-羟基菲和1-羟基芘水平分别为0.29、0.74、0.09、0.06 μg/mmol Cr。不同1-羟基芘水平组间，工人尿中2-羟基芴、2-羟基萘、9-羟基菲水平差异均有统计学意义（ P<0.05）。校正了年龄、工龄、吸烟、饮酒及2-羟基芴、2-羟基萘、9-羟基菲水平后，SAHH活力随尿中1-羟基芘水平的升高而降低（ OR=0.63，95% CI：0.41~0.98， P=0.038），表现为非线性关系（ P非线性=0.030）； H19基因表达水平随尿中1-羟基芘浓度的升高而升高（ OR=1.51，95% CI：1.03~2.19， P=0.033），存在线性关系（ P趋势=0.058）。其他3种尿中代谢物与SAHH活力、 H19基因表达的关系均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:尿中1-羟基芘水平可能是焦炉工人SAHH活力降低、 H19基因表达升高的危险因素。

目的 观察清热除湿方治疗急性湿疹(湿热蕴结证)的效果,初步探寻其作用机制.方法 选择急性湿疹患者96例,按照随机数字表法分为观察组与对照组各48例.对照组予以3％硼酸洗液外用联合可氯雷他定胶囊口服,观察组以3％硼酸洗液外用联合清热除湿方口服,两组疗程均为2周.比较两组治疗前后症状评分(湿疹面积、瘙痒程度、湿疹形态、皮疹颜色)、湿疹面积和严重指数(EASI)评分、瘙痒视觉模拟量表(VAS)评分,并比较两组外周血嗜酸粒细胞(EOS)、白细胞介素-4(IL-4)、免疫球蛋白E(IgE)含量和白细胞介素-22(IL-22)mRNA、芳香烃受体(AhR)mRNA相对表达量,并比较两组治疗总有效率.结果 治疗后观察组症状评分、EASI评分、瘙痒VAS评分均低于对照组(P＜0.05),外周血EOS、IL-4、IgE含量及IL-22 mRNA、AhR mRNA相对表达量均低于对照组(P＜0.05);观察组总有效率为93.75％,显著高于对照组的77.08％(P＜0.05).结论 清热除湿方可有效缓解病情,减轻临床治疗症状,降低治疗外周血 EOS、1L-4、IgE含量,治疗急性湿疹(湿热蕴结证)效果显著,其机制可能与降低IL-22 mRNA、AhR mRNA表达有关.

目的:了解类芳烃受体核转位蛋白2(BMAL2)在急性髓系白血病(AML)中的表达及与患者预后的关系,分析其对AML细胞有氧糖酵解和增殖的影响.方法:应用实时定量PCR法检测AML患者和正常对照组的骨髓单个核细胞中BMAL2的表达情况.利用美国国家生物技术信息中心公共数据库分析BMAL2表达与AML患者预后的相关性.通过慢病毒系统敲低AML细胞系HL-60和Kasumi-1中BMAL2的表达,葡萄糖摄取实验、乳酸含量实验、CCK-8法、细胞集落形成实验检测其对细胞糖代谢、细胞增殖的影响.结果:BMAL2 mRNA在AML中的表达水平显著高于正常对照组(P＜0.01).BMAL2表达高的AML患者总生存时间较低表达患者明显缩短(P＜0.05).敲低AML细胞系HL-60和Kasumi-1中的BMAL2后,细胞葡萄糖摄取减少,乳酸生成减少.RT-PCR及Western blot检测结果显示,BMAL2通过增强HIF1A的表达来促进AML细胞有氧糖酵解,进而促进细胞增殖.结论:BMAL2高表达于AML中,通过HIF1A增强AML细胞有氧糖酵解从而促进细胞增殖.

利用热裂解-气相色谱质谱联用(pyrolysis gas chromatography mass spectrometry,Py-GC/MS)分析技术测定黑木耳新品种'农黑 2 号'黑色素裂解产物组分的种类及含量,为解析黑色素的结构奠定理论基础.本研究通过碱溶酸沉法提取黑色素,并用紫外可见吸收光谱、傅立叶红外光谱、有机元素分析鉴定黑色素,采用 Py-GC/MS 技术分析其热裂解产物.结果表明,'农黑 2 号'黑色素的最大吸收峰值在波长 220 nm处,傅立叶红外光谱符合典型的黑色素特征;经有机元素分析,C、H、N、O元素的含量分别为 43.47%、5.24%、11.71%和 39.58%,不含硫元素,为真黑色素;检出的热裂解产物主要有苯类、苯酚类、吲哚类、苯基腈类、烃类、酸类等物质,其中苯、苯酚、吲哚等化合物为真黑色素的裂解产物.综上所述,'农黑 2 号'黑色素为真黑色素,其基本骨架为苯环和吲哚,本研究为精准解析黑木耳黑色素结构提供科学依据.

目的 建立可同时测定尿中 11 种羟基多环芳烃(hydroxy-polycyclic aromatic hydrocarbons,OH-PAHs)的超高效液相色谱串联质谱分析(ultra-high performance liquid chromatography tandem with mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法.方法 尿液样品在 pH=5.5 条件下,在 37℃水浴中经 β-葡萄糖苷酸酶—芳基硫酸酯酶避光水解 16 h,3.0 mL正己烷萃取、涡旋、离心,取上层有机相,重复萃取两次,合并萃取液,氮吹至近干,再复溶于 20%乙腈水溶液中.流动相为水和 10%异丙醇甲醇溶液,梯度洗脱模式洗脱,CORTECS C18 色谱柱分离,ESI-模式测定尿液中 11 种羟基多环芳烃浓度,内标法定量分析.结果 11 种羟基多环芳烃线性关系良好,相关系数(r)均大于 0.997.方法 的检出限为 0.01～0.10 ng/mL;日间回收率为 79.8%～97.3%,精密度为 1.9%～4.7%(n=3);日内回收率为 78.6%～92.3%,精密度为 3.7%～7.1%(n=3).结论 该方灵敏度高,准确可靠,适用于人群中多种羟基多环芳烃的监测.

目的:通过环芳香烃受体(cyclic aromatic hydrocarbon receptor,AhR)/白细胞介素22(in-terleukin-22,IL-22)/信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路探讨董氏奇穴联合丁沉扶正汤对胃癌患者术后肠道菌群紊乱的影响,并探讨其具体作用机制.方法:选择接受腹腔镜下胃癌根治术的患者120例,随机分为对照组和针药联合组,每组60例.对照组接受董氏奇穴针灸治疗,针药联合组在对照组的基础上给予丁沉扶正汤治疗.比较两组术中指标、T淋巴细胞亚群、D-乳酸(D-Lactic acid,D-LA)、炎性因子、肠道细菌以及肠黏膜组织AhR/IL-22/STAT3通路转录和翻译水平.结果:两组干预前指标比较,差异无统计学意义(P>0.05).干预后两组乳酸杆菌、双歧杆菌含量、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值均升高(P<0.05),且上述指标针药联合组均高于对照组(P<0.05).干预后两组肠道中大肠杆菌、梭菌、拟杆菌、柔嫩梭菌水平及血清中D-乳酸、降钙素原、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平均降低(P<0.05),且以上指标针药联合组均显著低于对照组(P<0.05).针药联合组住院时间显著短于对照组(P<0.05).与干预前比较,两组AhR、IL-22和STAT3 mRNA及蛋白水平均升高(P<0.05),针药联合组高于对照组(P<0.05).结论:董氏奇穴联合丁沉扶正汤可能通过促进AhR/IL-22/STAT3通路保护肠黏膜屏障,进而改善胃癌患者术后的细胞免疫功能、缓解肠道菌群失衡,促进患者恢复.

为了探究短期氮沉降对凋落物和土壤有机质化学组成的影响,以亚热带毛竹林为对象,于2020年7月—2022年1月设置氮沉降增加(施氮量50 kgN·hm-2·a-1)处理,利用热裂解气相色谱质谱联用(Py-GC/MS)技术,对毛竹林毛竹叶/根凋落物和土壤的有机质化学组分进行了分析.结果表明:与对照相比,短期氮沉降处理土壤有机质中酚类的相对含量显著增加了 50.9％,而脂肪酸的相对含量显著减少了 26.3％;叶凋落物中烷烯烃和木质素的相对含量显著增加了 51.9％和33.5％,酚类和多糖的相对含量显著减少了52.2％和56.3％;根凋落物中多杂环芳香烃的相对含量显著减少了 16.6％.土壤有机质中脂肪酸的相对含量与叶凋落物中多糖的相对含量呈显著正相关;土壤有机质中酚类的相对含量与叶凋落物中木质素的相对含量呈显著正相关,与多糖的相对含量呈显著负相关.短期氮沉降对毛竹林毛竹叶/根凋落物和土壤的总有机碳、总氮和碳氮比均无显著影响,但是会显著改变三者的有机质化学组成;另外,短期氮沉降下土壤有机质化学组成的变化受叶凋落物有机质化学组成的影响.

目的 探索黄芪建中汤含药血清对异丙肾上腺素(ISO)诱导的3T3-L1脂肪细胞脂解及棕色化模型的抑制作用及与脑和肌肉芳烃受体核转录因子样蛋白-1(BMAL1)调控环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/环磷酸腺苷反应成分结合蛋白(CREB)信号通路的关系.方法 制备空白及黄芪建中汤含药血清.体外培养3T3-L1脂肪细胞,诱导其分化成熟后分为对照组、空白组、2.5％含药血清组、5％含药血清组、10％含药血清组.除对照组外,其余各组加入10 mmol/L ISO以构建脂肪细胞过度脂解及棕色化模型.采用油红O染色法和酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法检测各组脂肪细胞内脂滴阳性面积比及其水解后产物的含量,采用实时荧光PCR法和蛋白质印迹法检测各组脂肪细胞脂解及棕色化相关基因及蛋白的表达,以筛选出最优体积分数的含药血清进行下一步慢病毒转染实验.取分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,分别加入BMAL1小干扰RNA、空载体小干扰RNA,构建沉默BMAL1的3T3-L1脂肪细胞.将细胞分为空载体组、含药血清空载体组、BMAL1沉默组和含药血清BMAL1沉默组.各组加入ISO孵育后,油红O染色法检测各组脂肪细胞内脂滴阳性面积比;ELISA法检测各组脂肪细胞内甘油三酯(TG)、cAMP及培养基中游离脂肪酸(FFA)的含量;蛋白质印迹法检测PKA、CREB的蛋白表达;实时荧光PCR法检测激素敏感性脂肪酶(HSL)、甘油三酯脂肪酶(ATGL)、线粒体解偶联蛋白1(UCP1)和T-box转录因子1(TBX1)的mRNA表达.结果 与2.5％及5％含药血清组比较,10％含药血清组细胞内cAMP含量及培养基中FFA含量降低(均P<0.05)、TG含量升高(P<0.05)、P KA蛋白表达降低(P<0.05)、HSL及ATGL mRNA表达降低(均P<0.05).慢病毒转染3T3-L1脂肪细胞后,与空载体组比较,BMAL1沉默组中BMAL1蛋白表达降低(P<0.05),表明BMAL1沉默的脂肪细胞成功构建.与空载体组比较,BMAL1沉默组细胞内脂滴阳性面积比及TG含量降低(均P<0.05),培养基中FFA含量、细胞内cAMP含量和PKA、CREB蛋白表达升高(均P<0.05),HSL、ATGL、UCP1和TBX1 mRNA表达量升高(均P<0.05).与BMAL1沉默组比较,含药血清BMAL1沉默组细胞内脂滴阳性面积比及TG含量升高(均P<0.05),培养基中FFA含量、细胞内cAMP含量、PKA和CREB蛋白表达降低(均P<0.05),HSL、ATGL、UCP1及TBX1的mRNA表达降低(均P<0.05).结论 黄芪建中汤含药血清可以抑制ISO诱导的3T3-L1脂肪细胞脂解及棕色化,其机制可能通过介导BMAL1调控cAMP/PKA/CREB信号通路有关.

目的 探讨青黛及其主要成分对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的治疗作用及机制.方法 将42只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、青黛组、靛蓝组、靛玉红组和色胺酮组,每组7只.除空白组外,其余组采用葡聚糖硫酸钠自由饮用10 d建立UC小鼠模型,各给药组从造模第4日开始予相应药液灌胃,连续7 d.记录小鼠一般状况,测量小鼠结肠长度,HE染色观察结肠组织病理形态,Western blot检测结肠组织芳香烃受体(AHR)、细胞色素P4501A1(CYP1A1)、白细胞介素(IL)-10、IL-22蛋白表达量,RT-PCR检测结肠组织AHR、CYP1A1、IL-10、IL-22 mRNA表达.结果 与空白组比较,模型组小鼠体质量明显减轻,结肠长度明显缩短;结肠组织结构破坏,隐窝结构变形,上皮细胞坏死水肿,中性粒细胞和淋巴细胞弥漫性浸润,结肠组织CYP1A1、IL-10、IL-22蛋白表达明显降低,AHR、IL-10、IL-22 mRNA表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01).与模型组比较,各给药组小鼠体质量明显增加(P<0.01),青黛组、靛玉红组和色胺酮组小鼠结肠长度明显增加(P<0.05,P<0.01);各给药组小鼠结肠组织黏膜损伤及溃疡情况明显好转,水肿及炎性细胞浸润不同程度改善,结肠组织AHR、CYP1A1、IL-10、IL-22蛋白表达明显升高(P<0.01),靛玉红组和色胺酮组小鼠结肠组织AHR、CYP1A1、IL-10、IL-22 mRNA表达明显升高(P<0.01).结论 青黛可能通过激活AHR/CYP1A1信号途径调节炎症因子IL-10、IL-22表达,从而改善UC小鼠炎症损伤.

目的 采用生物信息学方法探讨肾透明细胞癌(KIRC)组织中烷烃羟化酶同源5基因(ALKBH5)mRNA和蛋白的表达及临床意义.方法 下载UCSC Xena数据库和癌症基因组图谱(TCGA)数据库中KIRC、乳头状肾细胞癌(KIRP)、嫌色细胞癌(KICH)的转录组测序(RNAseq)数据、临床病理参数和总生存期数据,并下载基因型和基因表达量关联数据库(GTEx)中对应的正常组织数据.比较KIRC组织及癌旁组织中ALKBH5 mRNA表达水平,分析ALKBH5 mRNA表达水平与不同临床病理学指标的关系;绘制ROC曲线分析ALKBH5 mRNA表达水平对KIRC的诊断价值;利用阿拉巴马大学伯明翰分校癌症数据分析数据库(UALCAN)分析ALKBH5蛋白表达水平与不同临床病理学指标的关系,比较ALKBH5 mRNA表达水平对患者预后的影响;利用LinkedOmics数据库行基因富集分析ALKBH5在KIRC中可能参与的信号通路.结果 与癌旁组织相比,KIRC组织中ALKBH5 mRNA和蛋白均显著高表达(均P＜0.05).不同年龄、种族、病理分期、组织学分级、肿瘤发生部位KIRC患者组织中ALKBH5 mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05).女性KIRC患者组织中ALKBH5 mRNA和蛋白表达水平均显著高于男性患者(均P＜0.05),A亚型KIRC患者组织中ALKBH5 mRNA表达水平显著高于B亚型患者(P＜0.01).酵母交换型转换/蔗糖不发酵(SWI/SNF)染色质重塑复合物突变组患者ALKBH5蛋白表达水平显著高于SWI/SNF复合物未突变组患者(P＜0.01).ROC曲线分析显示,ALKBH5 mRNA表达水平诊断KIRC的AUC为0.813,显著高于 KIRP(AUC=0.605)和 KICH(AUC=0.707)(均 P＜0.05).相较 ALKBH5 mRNA 低表达组,ALKBH5 mRNA 高表达组总生存率显著升高(P＜0.01);男性KIRC患者ALKBH5 mRNA表达水平与预后无关(P＞0.05),而女性KIRC患者ALKBH5 mRNA高表达组总生存率显著高于低表达组(P＜0.05).富集分析显示,ALKBH5 mRNA表达相关的基因可能参与糖酵解、果糖和甘露糖代谢、氨基酸生物合成等信号通路.结论 ALKBH5 mRNA和蛋白表达水平在KIRC中具有较高的诊断、预后评估价值,可能通过糖酵解信号通路发挥作用.ALKBH5 mRNA可能成为判定KIRC患者预后的分子标志物和新的治疗靶点.