患者，男，49岁，于2020年2月12日因双眼红、右眼视物变暗，夜间急诊就诊于我院眼科，当时诊断为双眼结膜炎，给予左氧氟沙星滴眼液点眼治疗。2月14日自觉双眼视力下降、视物变暗，再次就诊我院眼科。当时眼部查体：裸眼视力（UCVA）右眼0.12，左眼0.1，矫正视力右眼+3.0=0.9，左眼+3.0=0.8。双眼结膜轻度充血，其余前节未见明显异常。眼底彩照见图1，当时就诊医师认为眼底未见明显异常。诊断双眼结膜炎，给予妥布霉素地塞米松滴眼液，每日4次点双眼治疗，4 d后自觉视力好转，继续妥布霉素地塞米松滴眼液点眼治疗。2月22日患者出现头痛，头皮针刺感，自行口服羊角片，布洛芬胶囊对症治疗。2月24日自觉头痛及头皮针刺感加重，不能触摸头皮，当时患者就诊神经内科行头部CT检查未发现明显异常，患者继续间断口服布洛芬胶囊对症治疗。3月2日患者出现视力下降再次就诊我院眼科，UCVA：双眼0.1，矫正视力：右眼+3.0 D=0.2，左眼+3.0 D=0.12。双眼结膜轻度充血，角膜下方灰白色的角膜后沉积物（Keratic precipitate，KP），前房清，瞳孔光反射灵敏，晶状体透明，玻璃体呈颗粒样混浊（见图2），眼底：右眼视盘边界不清，视盘周围线状出血，视网膜动静脉大致正常，后极部视网膜局部水肿，黄斑区反光消失。左眼视盘边界不清，视网膜动静脉大致正常，后极部视网膜局部水肿，黄斑区反光消失。辅助检查：光学相干断层成像（OCT）检查（见图3）提示：双眼黄斑区浆液性视网膜脱离，视网膜色素上皮（Retinal pigment epithelium，RPE）层呈波浪样改变。双眼荧光素眼底血管造影（FFA） （见图4）提示：双眼视盘区毛细血管扩张，晚期视盘周围荧光素渗漏，荧光增强，后极部局部视网膜可见针尖样高荧光。根据患者双眼全葡萄膜炎和头痛的症状和体征，初步诊断为福格特-小柳-原田综合征（Vogt-Koyanagi-Harada syndrome，VKHS）。给予口服醋酸泼尼松片60 mg/次，1次/日，晨起口服。3月4日患者晨起后出现眩晕、耳鸣、恶心、无呕吐、双下肢无力、走路不稳收入眼科住院治疗。既往身体健康，否认家族眼病史，偶有吸烟、饮酒。否认糖尿病史、屈光不正史。全身情况：秃发，未发现白发和皮肤改变。眼部查体：UCVA：右眼0.1，左眼0.1，矫正视力：右眼+1.5 D=0.2，左眼+1.5 D=0.12，右眼眼压16 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），左眼15 mmHg。眼前节及后节同2 d前查体情况。眼球运动检查：第一眼位时双眼水平震颤，向左侧注视时水平震颤较第一眼位时加重，向右侧注视时水平震颤较轻。颅脑磁共振成像（MRI）检查：轻度缺血性脑白质病变，左侧上颌窦、筛窦、蝶窦炎（见图5）。化验：血常规正常，结核分枝杆菌抗体阴性，肝肾功能正常，血糖正常，梅毒特异性抗体阴性，钾离子3.47 mmol/L，超敏C反应蛋白正常，抗"O"正常，血沉正常，抗核抗体谱均阴性，抗单纯疱疹病毒I型IgG阳性，抗巨细胞病毒IgG阳性。

目的 建立同时测定低分子量肝素钠注射液中醋酸根离子、氯离子、亚硫酸根离子、硫酸根离子和草酸根离子含量的离子色谱法.方法 色谱柱为Dionex IonPac AS11(250mm×4 mm),保护柱为Dionex IonPac AG11(50mm×4mm),用淋洗液自动发生器,采用氢氧化钾梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,检测器为配有化学抑制器的电导检测器.结果 醋酸根离子、氯离子、亚硫酸根离子、硫酸根离子和草酸根离子分别在0.12～24μg·mL-1、0.24～48μg·mL-1、0.4～80 μg·mL-1、0.04～8 μg·mL-1、0.3～60 μg·mL-1 与测定值线性关系良好,r分别为 0.9991、0.9999、0.9999、0.9995、0.9995;加样回收率分别为 105.3％、101.0％、102.3％、96.8％和 108.3％(n=6),RSD分别为 2.2％、1.8％、1.6％、2.6％和 1.6％.结论 该方法操作简便,灵敏,高效,可用于同时测定低分子量肝素钠注射液中醋酸根、亚硫酸根、硫酸根、草酸根和氯离子的含量,为其质量提供保证.

为探讨生活污水与营养液两种不同的水源对六价铬[Cr(Ⅵ)]污染人工湿地残根分解及铬化学形态转化的影响,该研究通过构建微型薏苡人工湿地处理含铬废水[分别以生活污水(DWS)和1/2 Hoagland营养液(HNS)配制含0、20、40 mg·L-1Cr(Ⅵ)的配制液作为模拟含铬废水],采用埋根分解法,研究残根的分解动态,以及铬化学形态转化规律.结果表明:(1)20、40 mg·L-1 Cr(Ⅵ)胁迫下,薏苡的生长均受到抑制,HNS处理株高和茎径均大于DWS处理,但HNS处理的株高和茎径受Cr(Ⅵ)抑制程度大于DWS处理.(2)薏苡残根分解速率随Cr(Ⅵ)处理浓度的提高而降低,HNS处理残根分解速率大于DWS处理.分解60 d后,DWS处理条件下,20、40 mg·L-1 Cr(Ⅵ)处理残根铬含量比埋根初期分别降低了 11.70％、8.09％,HNS处理下分别下降了 15.80％、18.42％.20、40 mg·L-1 Cr(Ⅵ)处理薏苡残根的残渣态铬占比均随埋根时间的延长而降低,而乙醇提取态铬和去离子水提取态铬占比增大,醋酸结合态铬占比则显著增大.(3)残根分解初期,HNS和DWS处理出水中的COD、TN、NH4-N以及总铬含量均有提高,而后降低,变化趋势与残根分解进程一致,HNS处理人工湿地对废水中铬的去除效率更高.该研究结果表明在人工湿地植物收割后,根系分解可短时间内提高出水中铬含量,适当改善污水中营养状况,可以促进残根分解和湿地对铬的去除.

目的 探讨含半水硫酸钙、硫酸钡、醋酸氯己定和聚乙二醇(polyethylene glycol 400,PEG 400)的新型硫酸钙基乳牙根管封闭剂的理化性能和生物学性能.方法 本研究已通过单位伦理委员会审查批准.将不同质量分数半水硫酸钙和硫酸钡的混合粉末按照3∶1粉液比与PEG 400混合,醋酸氯己定依照PEG 400的体积以0.2 mg/mL加入.将上述材料以250 r/min的转速球磨24 h得到硫酸钙基乳牙根管封闭剂.根据各组分质量分数的不同分组,通过固化时间、流动性、阻射性能实验结果优化出合适的组分质量分数,再用最优质量分数组对封闭剂的pH值、体外质量丧失、显微形态进行评价.通过细菌-材料共培法检测封闭剂的抗菌性,通过CCK-8实验和细胞形态染色评价其细胞相容性,通过皮下组织埋置实验评价其生物相容性.结果 优化后的封闭剂,半水硫酸钙质量分数为80 wt％,硫酸钡质量分数为20 wt％.封闭剂的流动性、辐射不透明度均符合国际标准.封闭剂在去离子水组和磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)组的pH值稳定在6～7,第7天和第14天时封闭剂在去离子水组中的pH值显著高于PBS组(P＜0.001),随后二组的pH值逐渐接近(P＞0.05).体外降解实验发现,前期封闭剂的质量丧失率约15.17％,3周后质量丧失率仅约8.33％.X射线衍射和扫描电子显微镜检测发现水化后的封闭剂主要成分是二水硫酸钙.细菌学实验和细胞学检测中,封闭剂抑制粪肠球菌生长的作用明显(P＜0.001);第1天和第4天时,1∶10和1∶20封闭剂浸提液稀释组的骨髓间充质细胞活力明显低于对照组(P＜0.05),至第7天时,1∶20封闭剂浸提稀释液对细胞增殖能力无明显影响(P＞0.05).组织切片观察封闭剂组与对照组(Vitapex糊剂及ZOE糊剂)均为轻度炎症反应.结论 本实验研制了一种新型硫酸钙基乳牙根管封闭剂,其具有良好的理化性能和较强的抗菌性,可以满足生物相容性的要求,为乳牙根管封闭剂的研发提供了新思路.

目的 基于表面等离子共振(SPR)技术建立抗CD80 生物技术药物结合活性方法,并进行方法学验证和样品测定.方法 通过优化试验条件建立合适的结合活性方法,并选择合适的数据分析模型后对建立的方法进行方法学验证.结果 通过对各种条件进行筛选及耐用性考察,确定了方法的试验参数:配体固定条件为pH 5.0 的醋酸盐缓冲液,固定量为 400～5000 RU,结合和解离速率为 10～50μL·min-1,芯片的再生条件为pH 4.0 的枸橼酸缓冲液(10 mmol·L-1 枸橼酸钠,100 mmol·L-1 NaCl),响应参数为稳态相对响应值(在进样结束后 10 s范围内窗口的平均响应值),数据模型为四参数模型.根据以上参数建立了基于SPR技术抗CD80 生物技术药物结合活性方法.验证结果如下:线性回归方程的决定系数为0.9994;每个效价水平相对效价测定值的相对偏倚平均值为-0.66%～0.64%,线性回归方程的斜率为 0.9867;每个效价水平 6 次独立测试结果的几何变异系数为 0.7%～1.5%,范围为 64%～156%.各项验证指标均满足相关验证要求,专属性结果也较好.将建立的结合活性方法应用于抗CD80 生物技术药物,测得结合活性相对效价为 100%.结论 本研究通过优化试验条件建立了基于SPR技术的抗CD80 生物技术药物结合活性方法,该方法专属性强、重复性好、准确度高.

目的 比较枸橼酸碳酸氢盐透析液与醋酸碳酸氢盐透析液应用于无肝素血液透析的效果,为临床选用合适的透析液提供依据.方法 采用自身对照设计,纳入 2021年 1月至 8月在东南大学附属中大医院血液净化中心的维持性血液透析患者 42例,每例患者连续进行 2次无肝素血液透析,分别使用枸橼酸盐透析液和醋酸盐透析液各 1次.比较患者分别使用两种透析液治疗前后血小板、pH、碳酸氢根离子(HCO3?)、钙离子(Ca2+)、凝血指标、体外循环管路及滤器的凝血情况、透析治疗完成情况、不良反应等.结果 使用枸橼酸盐和醋酸盐透析液时患者均能较好的耐受治疗,未出现恶心呕吐、低血压、肌肉痉挛、低血钙、出血等不良反应和并发症.患者在两种透析液治疗前血小板、pH、HCO3?、Ca2+、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、国际标准化比值(in-ternational normalized ratio,INR)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB-C)差异无统计学意义(P＞0.05),治疗后的血小板、pH、APTT差异无统计学意义(P＞0.05),HCO3?、Ca2+、PT、INR、TT、FIB-C差异有统计学意义(P＜0.05).枸橼酸盐组体外循环管路及滤器凝血分级程度较醋酸盐组轻,治疗完成率高(85.7%比 64.3%,P＜0.05).结论 枸橼酸盐透析液在无肝素血液透析临床应用中的安全性与醋酸盐透析液相当,体外循环管路及滤器的凝血情况、透析治疗完成情况均优于醋酸盐透析液.

建立感染性休克患者替加环素检测方法,采用Ultimate AQ-C1s色谱柱(3.0 mm×100 mm,3μm),流动相为含0.2％甲酸,5 mmol/L醋酸铵水溶液-乙腈,梯度洗脱方式,电喷雾离子化正离子扫描模式下,用于定量分析的离子对分别为m/z 586.4→513.3(替加环素)、m/z 338.2→296.0(利奈唑胺).替加环素血药浓度在50.15～2 006 ng/mL范围内线性关系良好,批内、批间RSD均小于15％,稳定性良好.11名感染性休克患者高剂量给药替加环素后,药物在体内药峰浓度(cmax)和药时曲线下面积(AUCo-12 b)分别为(1.97±0.87)μg/mL和(9.10±3.58) mg· h/L.研究结果表明,多重耐药菌所致感染性休克患者给予高剂量替加环素后,虽给药剂量翻倍,较之于常规剂量给药的院内获得性肺炎重症患者其AUC数值并未明显增加,且略低于同等高剂量给药脓毒血症患者,未达到预期杀菌效果,这可能由于感染性休克患者高血流动力学加快药物清除速率,以及感染综合症导致毛细血管通透性增加联合间隙水肿,药物的分布容积增加有关.综上所述,推荐在多药耐药所致感染性休克患者中使用替加环素的推荐剂量区间应为150～200 mg,须对重症患者进行替加环素治疗药物浓度监测,并根据患者病程的不同阶段及时调整给药剂量.

目的:建立可同时测定八角莲根中6种主要毒性成分(鬼臼毒素、4’-去甲鬼臼毒素、鬼臼苦素、鬼臼毒素-4-O-葡萄糖苷、鬼臼毒酮、去氧鬼臼毒素)含量的UPLC-MS/MS法,并应用于大鼠体内药动学研究.方法:采用Waters Acquity UPLC CORTECS C18(1.6 μm,50 mm×2.1 mm)色谱柱,乙腈-5 mmol/L醋酸铵水作为色谱分离流动相,以0.4 mL/min的流速进行梯度洗脱.采用电喷雾离子源(ESI)串联Waters Xevo TQ质谱仪检测,多反应离子监测(MRM)模式进行定量分析.大鼠按0.3 g/kg给药剂量灌胃八角莲提取物后,于0、0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、4、6、8、12、24、36、48 h后取尾尖血,运用DAS 2.2.1软件和非房室模型分析法分析大鼠体内6种分析物的药代动力学参数.结果:每克八角莲根茎干粉中含有鬼臼毒素-4-O-葡萄糖苷17.62 mg、4’-去甲鬼臼毒素14.53 mg、鬼臼苦素6.15 mg、鬼臼毒素91.39 mg、鬼臼毒酮12.30 mg、去氧鬼臼毒素0.03 mg.上述6种物质在0.1～9.7 ng/mL内线性关系良好(r＞0.99).日内和日间精密度和准确度均小于15％,提取回收率高于70.0％,均符合药代动力方法学分析要求.样品在短期、长期和3个冻融循环条件下非常稳定.大鼠灌胃八角莲提取物后,6种待测物在血液中的浓度水平迅速升高,约在0.5 h达到峰值,说明药物可直接在胃部迅速吸收,但药物的分布和代谢过程非常缓慢.结论:本研究建立的UPLC-MS/MS方法操作简便、灵敏、快速、专属性强,可成功甩于生物样品中八角莲根中的6种高毒性化合物的定量分析.

目的 建立重组Ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒(oncolytic herpes simple virus typeⅡ,oHSV2)OH2纯化工艺,制备高纯度的病毒.方法 采用不同粗滤材质[PDH4囊式过滤器、Bio20囊式过滤器、Ultipor GF U6-40、PP材质滤膜(聚丙烯膜)和CA材质滤膜(醋酸纤维膜)]澄清过滤后,使用不同的层析柱(Mustang Q、Sartobind Q囊式离子交换柱和CaptoTM Core 700)进行纯化,并根据确定的纯化工艺,迸一步放大层析柱体积.依据病毒滴度的变化,选择合适的纯化工艺条件.结果 PP及CA材质滤膜过滤病毒液后滴度变化较小,二者对病毒吸附较低;Mustang Q、Sartobind Q囊式离子交换柱纯化OH2病毒时收率最高为13％,而CaptoTM Core 700在AKTA仪上纯化高滴度的病毒液时几乎不损失病毒;使用CaptoTM Core 700进行柱体积放大后,柱床直径为26 mm时,纯化后病毒的滴度及收率较理想.结论 使用CA膜过滤细胞裂解液后,采用CaptoTM Core 700进行柱层析,可制备高纯度的OH2.

目的 观察饮水铅暴露对大鼠大脑皮质、小脑、海马组织中腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)1基因mRNA表达的影响及其与氧化应激的关系.方法 40只SD大鼠根据体重按随机区组法分为5组(对照组和4个暴露组),每组分别自由饮用去离子水、100、200、400、800 mg/L的醋酸铅溶液,连续染毒60 d后取大脑皮质、小脑和海马,RT-PCR技术检测脑组织PARP1基因mRNA的表达量,并测定脑组织铅、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的含量.结果 与对照组比较,4个铅暴露组大脑皮质、小脑和海马中PARP1 mRNA表达量显著下降,铅含量显著上升(均P<0.05);最低剂量组大脑皮质及小脑SOD、GSH-PX含量,低剂量组大脑皮质及小脑SOD、GSH-PX含量、海马SOD含量,中、高剂量组大脑皮质、小脑、海马中SOD、GSH-PX含量均显著低于对照组(均P<0.05);最低剂量组海马MDA,低剂量组小脑及海马MDA,中、高剂量组大脑皮质、小脑、海马MDA含量均显著高于对照组(均P<0.05).随着染铅剂量的升高,各脑组织SOD、GSH-PX含量基本呈逐渐下降趋势,MDA水平基本呈逐渐升高趋势.大脑皮质、小脑、海马PARP1 mRNA表达量均与其组织铅含量及MDA含量呈显著负相关(P<0.05,P<0.01),与SOD含量呈显著正相关(P<0.05);大脑皮质及小脑PARP1 mRNA表达量与GSH-PX含量显著正相关(P<0.05,P<0.01).结论 铅可通过诱导细胞氧化应激影响PARP1基因mRNA表达.