目的:分析乙型肝炎疫苗（HepB）初次免疫正常及高应答婴儿初次免疫后10年的抗体持久性及其影响因素。方法:于2009年8—9月，以山东省济南、潍坊、烟台和威海市为研究现场，按照随机整群抽样方法，抽取1 838名按照“0-1-6”程序完成5 μg重组酵母HepB初次免疫的正常应答及高应答［乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）≥100 mIU/ml］的7~12月龄婴儿为研究对象。基线调查时（T 0），采集研究对象静脉血3 ml，采用化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）检测乙肝表面抗体（抗-HBs）、乙肝表面抗原（HBsAg）和乙肝核心抗体（抗-HBc），同时采用自行设计的调查问卷收集婴儿的月龄、性别、出生体重、是否早产、出生胎次、分娩地点以及母亲HBV感染状况等信息。分别于2014年6—7月（随访5年）、2019年6—7月（随访10年）（T 1），采集对象静脉血2 ml，采用CMIA方法检测抗-HBs、抗HBc，对抗-HBs<10 mIU/ml者采用CMIA法检测HBsAg。采用多因素非条件logistic和线性回归模型分析T 1时抗-HBs阳性率和几何平均浓度（GMC）的影响因素。 结果:1 838名研究对象进行10年随访，共随访到1 359名对象，随访率为73.94%（1 359/1 838）；其中，男童占51.15%（625名）。研究对象抗-HBs阳性率由T 0时的100.00%降为T 1时的53.44%（95% CI：50.59%~56.26%），降幅为46.56%，年均递减率为6.07%；研究对象抗-HBs GMC由T 0时的607.89（95% CI：579.01~642.62）mIU/ml降为T 1时的16.44（95% CI：15.06~18.00）mIU/ml，降幅达97.29%，年均递减率为30.30%。多因素logistic回归模型分析结果显示，与及时接种首针HepB者相比，未及时接种首针HepB者的T 1时抗-HBs 阳性率较低， OR（95% CI）值为0.25（0.07~0.71）；与T 0时GMC<1 000 mIU/ml者相比，GMC≥1 000 mIU/ml者的T 1时抗-HBs 阳性率较高， OR（95% CI）值为2.29（1.76~2.97）。多因素线性回归模型分析结果显示，与及时接种首针HepB者相比，未及时接种首针HepB者的T 1时抗-HBs GMC较低，β（95% CI）值为-0.50（-1.24~0.24）；与T 0时GMC<1 000 mIU/ml者相比，GMC≥1 000 mIU/ml者的T 1时抗-HBs GMC较高，β（95% CI）值为0.81（0.62~1.05）。 结论:5 μg重组酵母HepB初次免疫正常及高应答婴儿免疫后10年抗体水平有所下降；抗体持久性主要与是否及时接种首针疫苗、初次免疫结束时抗-HBs水平有关联。

目的:评价昌平区146名新生儿全程接种10 μg重组乙肝疫苗（hepatitis B vaccine，HepB）5年后的免疫效果及其影响因素。方法:应用队列研究的方法，选用10 μg重组汉逊酵母HepB，按照"0-1-6"月龄免疫程序完成3剂次初免的新生儿，并在接种第3剂次后和5年后分别采集静脉血，用同样方法检测，计算抗体阳性率和几何平均滴度（geometric mean titer，GMT）。通过logistic回归分析抗体阳性率的影响因素。结果:随访儿童感染率为0，5年抗-HBs（hepatitis B surface antibody，抗-HBs）阳性率为79.45%，GMT为37.41 mIU/mL，5年抗-HBs水平与初免抗-HBs水平呈正相关（ r=0.406， P<0.01）。多因素logistic回归分析显示，调查对象5年抗-HBs抗体阳性率呈初免高应答儿童高于中低应答儿童（ OR=2.24，95% CI：1.07~4.65）、出生6个月时能坐稳儿童高于不能坐稳者（ OR=3.10，95% CI：1.19~8.09）。 结论:新生儿接种10 μg重组HepB 5年后抗-HBs依然有较高水平。

目的 建立鼻腔喷雾型重组乙型肝炎疫苗中乙肝病毒表面抗原(HBsAg)含量检测方法,并进行验证.方法 通过对壳聚糖酶的处理条件(反应温度、酶浓度和酶解时间)进行优化,建立鼻腔喷雾型重组乙肝疫苗中HBsAg含量检测方法,并对该方法进行特异性、线性范围、准确度、精密度(重复性、中间精密度)及耐用性验证.结果 确定壳聚糖酶处理条件为:2 U/ml的壳聚糖酶于37℃水浴中孵育60 min,然后采用基于化学发光法的试剂盒定量检测HBsAg含量.壳聚糖酶的加入不会对疫苗中HBsAg含量检测产生干扰;HBsAg浓度在1.25～ 160ng/ml之间与发光值具有良好的线性(r2≥0.95);高、中、低浓度疫苗的平均回收率分别为100.18％、103.54％和113.88％;重复性及中间精密度验证结果的变异系数(CV)均≤20％;壳聚糖酶浓度在1.5～2.5 U/ml之间以及酶解时间为60 min,测定值CV均符合≤20％的验证审定标准.结论 建立了鼻腔喷雾型重组乙型肝炎疫苗中HBsAg含量检测方法,该方法具有良好的特异性、准确度、精密度及耐用性,可用于该疫苗的质量控制.

目的 了解部队新兵乙肝疫苗免疫效果,为修订部队乙肝疫苗接种方案提供科学依据.方法 采用ELISA法初筛和CLIA法复检相结合的方式,分别检测新兵乙肝疫苗接种前和接种不同针次疫苗后的血清Anti-HBs,观察抗体滴度变化.结果 入伍新兵在乙肝疫苗免疫前,Anti-HBs阳性率为52.01％,弱阳性率为8.61％;对Anti-HBs阴性新兵,接种乙肝疫苗第二针次和第三针次后,Anti-HBs阳转率分别为78.16％和90.49％,无应答率分别为21.84％和9.51％.对乙肝疫苗免疫前Anti-HBs为弱阳性新兵,接种一针次20μg/ml乙肝疫苗后,阳转率为95.75％.结论 20 μg/ml基因重组HepB具有较好的免疫性,新兵入伍后可依据Anti-HBs检测结果,确定接种对象和免疫方案.

目的 观察成人接种60μg重组乙肝疫苗(酿酒酵母)的免疫效果.方法 选择绍兴市立医院门诊18～55岁重组乙肝疫苗(酿酒酵母)接种者240人,分为4组,每组60人.初A组60μg重组乙肝疫苗(酿洒酵母)接种1次,初B组60μg按0、1月程序接种2次,初C组20μg按0、1、6月程序接种3次,复种组60μg、 按0、1月程序接种2次.所有对象均在接种完成后1个月采血检测乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)并随访观察不良反应发生情况.结果初A、 初B、 初C和复种组抗-HBs阳性率分别为68.33％、90.00％、70.00％和80.00％,有效应答率分别为55.00％、81.67％、58.33％和66.67％,4组间总体差异均有统计学意义(P<0.05).初B组抗-HBs阳性率和有效应答率均高于初A组和初C组(P<0.008),与复种组比较差异均无统计学意义(P>0.008).各组注射部位均未见局部肿胀、 疼痛、 发热以及过敏性休克等接种后不良反应.结论 按 0、 1 月程序接种 2 次 60 μg 重组乙肝疫苗的免疫成功率较高, 安全性良好, 可应用于初免和复种人群.

目的 探讨免疫接种乙肝疫苗对老年维持性血液透析(MHD)患者体内乙肝表面抗体(抗-HBs)产生的影响.方法 75例老年MHD患者(≥65岁)随机分为两组:试验组39例,分别在第0、1、6、9个月肌肉注射重组乙肝疫苗20 μg;对照组36例,不注射乙肝疫苗及乙肝免疫球蛋白.1年后采集血样,测定乙肝两对半及抗-HBs滴度(＞10 mIU/ml为阳性).结果 1年后,试验组抗-HBs阳转率和滴度均高于对照组[38.46％ vs.8.33％和(298.90±190.87) mIU/ml vs.(170.56±118.98) mIU/ml](P＜0.05).试验组无HBsAg转阳患者,对照组1例患者HBsAg转阳.结论 接种乙肝疫苗能促使老年MHD患者体内产生抗-HBs,降低HBV感染的风险.

目的 通过原核系统表达纯化嵌合肠道病毒71型(EV71)中和表位SP70的病毒样颗粒(VLPs),作为备选的EV71基因重组亚单位疫苗.方法 将SP70插入乙肝病毒核心抗原(HBcAg)截短序列的主要免疫显性区域,合成融合蛋白基因后连接表达质粒转化入大肠埃希菌诱导表达,经DEAE离子交换层析、CsCl垫层离心以及密度梯度离心后得到纯化的重组VLPs,并通过Western Blot和ELISA实验鉴定其抗原性.结果 成功构建重组质粒pHBc-SP70,在大肠埃希菌中经IPTG低温诱导后高效表达,可溶性目的蛋白经离子交换层析、CsCl垫层离心和密度梯度离心三步纯化后纯度可达90％以上;纯化的融合蛋白可自发折叠组装为病毒样空心颗粒,与抗SP70单克隆抗体和抗HBc单克隆抗体均可特异性结合.结论 在原核系统中成功高效表达和纯化了表面展示EV71中和表位的嵌合HBc-SP70 VLPs,并证实其具有良好的抗原性,为该EV71基因重组疫苗的免疫效果评价奠定了基础.

目的 了解赤壁市乙肝病毒母婴感染状况,探讨乙肝病毒母婴阻断效果,分析HBsAg阴性母亲所生儿童接种乙肝疫苗免疫效果及影响因素.方法 采取知情自愿的原则,对研究对象进行统一问卷调查,开展血清学乙肝病毒两对半检测后进行统计分析.结果 617例母亲HBsAg携带者率为8.27％,总感染率为59.48％,617例儿童HBsAg携带率为0.00％.51例HBsAg阳性母亲所生儿童均未感染乙肝病毒.566例HBsAg阴性母亲所生儿童的HBsAb阳性455例,阳性率为80.39％.母亲HBsAb阴性组所生儿童HBsAb阳性率高于母亲HBsAb阳性组.母亲HBsAb高滴度组、低滴度组对儿童免疫应答无影响,52例HBsAb阴性儿童再次接种重组酵母乙肝疫苗10μg阳转49.00人,阳转率为94.23％.结论 接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染最经济、有效、简便的办法,同时也是新生儿阻断乙肝病毒母婴传播的手段之一.对新生儿全程接种乙肝疫苗后未产生抗体者,只需加倍剂量接种乙肝疫苗.

目的 分析11例婴儿发生HBV母婴传播的原因和时间,为采取措施进一步降低HBV母婴传播提供临床依据.方法 对2010年12月至2012年6月首都医科大学附属北京地坛医院收治的409慢性HBV感染母亲分娩的409例婴儿随访观察,所有婴儿均在出生后2 h内、15～30 d各注射乙肝免疫球蛋白(HBIG)200 IU,并按0-1-6方案接种重组酵母乙肝疫苗10μg.采用微粒子化学发光法(CMIA)、荧光定量聚合酶链反应技术检测婴儿出生时外周静脉血的血清学标志物(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、HBeAb、HBcAb)和HBV DNA,并于婴儿1个月、7个月～3岁随访.409例慢性HBV感染母亲按照血清HBV DNA水平高低分为3组,分别为HBV DNA阴性组147例患者(<5×102拷贝/ml)、低病毒含量组124例患者(≥5×102～<1.00×106拷贝/ml)、高病毒含量组138例患者(≥1.00×106拷贝/ml).多因素Logistic回归分析喂养方式、分娩方式、母亲血清HBV DNA和HBVeAg水平对母婴传播的影响.结果 发生母婴传播的11例婴儿中,45.45％(5/11)婴儿从出生至1月龄HBsAg、HBV DNA持续阳性,1月龄时HBsAg均>250 IU/ml、HBV DNA均>1.00×106拷贝/ml,免疫失败,全部进展为慢性感染,分析为宫内感染;54.55％(6/11)婴儿出生时至1个月龄无明确感染,抗-HBs均阳转,但在7月龄时5例婴儿、12月龄时1例婴儿发生HBsAg、HBV DNA阳转,分析为产后感染.HBV DNA阴性组、低病毒载量组和高病毒载量组婴儿感染率分别为0、0.81％(1/124)和7.25％(10/138),高病毒载量组较低病毒载量组婴儿感染风险高8.98倍(P=0.01).多因素Logistic回归分析显示母亲血清HBV DNA水平是影响母婴传播的的独立危险因素(95％CI:1.28～6.39、P=0.01).结论 婴儿出生后经严格主-被动联合免疫,血清高病毒载量母亲分娩婴儿仍有HBV母婴传播风险,母婴传播的原因除宫内感染外,产后感染亦是母婴传播的重要因素,特别在被动免疫消失,主动免疫尚未产生时,婴儿存在较大母婴传播风险.

乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染已成为全球性的健康问题,其每年可导致70余万人死于肝癌和肝硬化[1].我国之前一直是HBV高流行区,20世纪90年代,我国人群乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)携带率曾高达9.07％[纠.1992年,我国将乙型肝炎疫苗(简称乙肝疫苗)纳入计划免疫管理,2002年纳入免疫规划推动阻断母婴传播的免疫策略实施,2009年纳入国家基本药物目录.经过十余年的乙肝疫苗应用后,2006年全国人群乙肝血清流行病学调查显示,我国人群HBsAg携带率已下降至7.18％,其中儿童携带率下降至1％以下;而2014年全国1 ～ 29岁人群乙肝流行病学调查中,1～4岁儿童携带率进一步下降至0.32％[3-4],我国通过接种乙肝疫苗减少了2 000万HBsAg携带者[5],乙肝疫苗在控制乙肝流行中发挥了至关重要的作用.