目的:探讨重组胰岛素样生长因子-1（IGF-1）对 MEX3C基因敲除小鼠卵巢发育的影响。 方法:采用聚合酶链式反应（PCR）法鉴定4周龄FVB（SPF级）小鼠基因型，将鉴定出的雌性小鼠随机分为4组（每组6只）：野生型组、 MEX3C基因敲除小鼠纯合子（简称纯合子组）、纯合子+IGF-1处理组、处理对照组。比较IGF-1注射前后各组小鼠体质量及卵巢湿重变化；酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中雌二醇水平；HE染色观察卵巢形态结构；免疫组织化学法和Western blotting法测定MEX3C、重组胰岛素样生长因子-1受体（IGF-1R）和p-AKT （Ser473）蛋白表达。 结果:IGF-1注射前，纯合子组体质量［（6.33±0.31）g］明显轻于野生型组［（15.20±0.35）g］，差异有统计学意义（ P<0.001）。ELISA结果显示，与处理对照组［（8.124 8±0.847 7）ng/L］相比，纯合子+IGF-1处理组［（17.245 3±0.073 1）ng/L］血清雌二醇水平显著较高，差异有统计学意义（ P<0.001）。HE染色结果显示，与处理对照组相比，纯合子+IGF-1处理组中原始卵泡数（19.83±2.94）和初级卵泡数（15.50±2.69）增多，且闭锁卵泡数（7.17±1.42）减少，差异均有统计学意义（ P均<0.05）。Western blotting结果证实，与处理对照组相比，纯合子+IGF-1处理组IGF-1R和p-AKT蛋白表达显著升高，差异有统计学意义（ P=0.014 1， P=0.002 5）。 结论:IGF-1促进 MEX3C基因敲除小鼠卵巢卵泡发育，其机制是通过上调IGF-1R和p-AKT水平，提高血清雌激素水平促进卵泡发育。

目的:探讨胰岛素样生长因子I受体基因(IGF1R)杂合子突变患者的表型及对生长激素治疗的反应。方法:采用Sanger测序和多重连接探针扩增分析，对身材矮小、小头畸形、小于胎龄儿并伴有IGF-I不敏感特征的儿童进行IGF1R突变或缺失分析。结果:在两个家系中，发现了一个新的杂合子非同义错义IGF1R变异体。在家系1的先证者中发现c.3364G>T，p(Gly1122Cys)，并与三代表型完全共分离。在家系2中检测到一个从头变异c.3530G>a，p.(Arg1177His)。这两种变异体都很罕见，在GnomAD数据库中未曾出现。三个携带IGF1R突变的个体接受了重组人生长激素治疗，在治疗1年和2年后，平均高度的标准差比例分别为0.42(范围：0.26～0.60)和0.64(范围：0.32～0.86)。结论:研究显示了两种IGF1R杂合子突变导致出生前后生长受限和小头畸形，且IGF1R杂合子突变个体可对重组人生长激素治疗产生反应。研究结果强调，对于因出生前后生长受限而导致的小头畸形和身材矮小患儿应考虑IGF1R测序。

随着围生医学的进步，早产儿生存率大幅提升，但生长迟缓、早产儿脑损伤、早产儿视网膜病变、支气管肺发育不良以及坏死性小肠结肠炎等早产相关并发症的发生率也随之增高。胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1，IGF-1)与IGF-1受体特异性结合，激活细胞内信号通路，促进细胞生长、增殖和分化，抑制细胞凋亡。IGF-1参与心、脑、肺等重要器官的发育，因此对新生儿的生长发育起重要作用。目前已有一些临床试验发现补充重组IGF-1及其结合蛋白-3对早产儿视网膜病变及支气管肺发育不良可以起到预防及治疗的作用，为这些难治性早产儿并发症的防治带来希望。该文就IGF-1的功能及其在早产儿相关并发症中的研究进展做一综述。

目的:探讨树突状表皮T细胞(DETC)调节小鼠表皮干细胞增殖和分化，促进小鼠全层皮肤缺损创面愈合的机制。方法:(1)取10只8周龄野生型雄性C57BL/6(品系和性别下同)小鼠，剪取整块背部皮肤，分离培养DETC。取5只8周龄野生型小鼠设为野生对照组，5只8周龄T细胞受体(TCR)δ -/ -型小鼠设为TCRδ -/ -对照组，于背部脊柱线两侧各制作一个直径为6 mm的全层皮肤缺损创面，伤后不做任何处理。另取15只8周龄TCRδ -/ -型小鼠，按随机数字表法(分组方法下同)分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、DETC组和胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)组，每组5只，同前制作全层皮肤缺损创面，伤后即刻，分别于每个创面周围皮下注射10 μL无菌PBS、DETC(细胞浓度为1×10 6个/mL)、5 mg/mL重组小鼠IGF-Ⅰ。伤后2、4、6、8 d，计算剩余创面面积百分比。(2)取3只8周龄野生型小鼠，设为野生对照组。另取9只8周龄TCRδ -/ -型小鼠，分为TCRδ -/ -对照组、PBS组和DETC组，每组3只，同实验(1)制作全层皮肤缺损创面。伤后3 d，化学发光成像分析仪检测创缘表皮组织IGF-Ⅰ蛋白表达水平。(3)取3只8周龄野生型小鼠，设为野生对照组。另取6只8周龄TCRδ -/ -型小鼠，分为PBS组和DETC组，每组3只，同实验(1)制作全层皮肤缺损创面。伤后3 d，取创缘表皮组织，分离DETC，流式细胞仪检测表达IGF-Ⅰ的DETC百分比。(4)同实验(2)取小鼠并分为野生对照组、PBS组、DETC组、IGF-Ⅰ组，在任意一侧耳朵朝内耳方向做一长3 cm的直线切口，深达皮肤全层。野生对照组小鼠伤后不进行任何处理，DETC组、IGF-Ⅰ组、PBS组小鼠伤后即刻分别于创面周围皮下注射10 μL DETC(细胞浓度为1×10 6个/mL)、5 mg/mL重组小鼠IGF-Ⅰ、无菌PBS。伤后12 d，取创缘表皮组织，免疫荧光染色观察角蛋白15阳性细胞数。(5)同实验(4)取小鼠并进行分组、处理。伤后12 d，取创缘表皮组织，免疫荧光染色观察角蛋白10阳性细胞数。(6)取20只3 d龄野生型小鼠(下同)，每个指标检测取5只，剪取全身皮肤，分离培养表皮干细胞，分为对照组、DETC共培养组。DETC共培养组细胞加入1 mL DETC(细胞浓度为1.25×10 6个/mL)，对照组细胞加入1 mL DETC培养基，培养3 d，流式细胞仪(下同)检测5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)阳性细胞百分比；培养5 d，检测CD49f ＋CD71 -细胞百分比、角蛋白14阳性细胞百分比；培养10 d，检测角蛋白10阳性细胞百分比。(7)取20只小鼠，每个指标检测取5只，分离培养表皮干细胞，分为对照组和IGF-Ⅰ组。IGF-Ⅰ组细胞加入1 mL重组小鼠IGF-Ⅰ(10 ng/mL)，对照组细胞加入1 mL无菌PBS，同实验(6)检测EdU阳性细胞百分比、CD49f ＋CD71 -细胞百分比、角蛋白14阳性细胞百分比、角蛋白10阳性细胞百分比。实验(6)和(7)各组样本数均为3。对数据行重复测量方差分析、单因素方差分析、 t检验。 结果:(1)伤后4、6、8 d，TCRδ -/ -对照组小鼠剩余创面面积百分比显著高于野生对照组( t＝2.78、3.39、3.66， P<0.05或 P<0.01)；DETC组、IGF-Ⅰ组小鼠剩余创面面积百分比显著低于PBS组( t＝2.61、3.21、3.88，2.84、2.91、2.49， P<0.05或 P<0.01)。(2)伤后3 d，TCRδ -/ -对照组小鼠创缘表皮组织中IGF-Ⅰ蛋白表达水平显著低于野生对照组( t＝17.34， P<0.01)。DETC组小鼠创缘表皮组织中IGF-Ⅰ蛋白表达水平显著高于PBS组( t＝11.71， P<0.01)。(3)伤后3 d，PBS组小鼠创缘表皮组织中表达IGF-Ⅰ的DETC百分比显著低于野生对照组和DETC组( t＝24.95、27.23， P<0.01)。(4)伤后12 d，PBS组小鼠创缘表皮组织中角蛋白15阳性细胞数显著少于野生对照组、DETC组和IGF-Ⅰ组( t＝17.97、11.95、7.63， P<0.01)。(5)PBS组小鼠创缘表皮组织中角蛋白10阳性细胞数显著多于野生对照组、DETC组和IGF-Ⅰ组( t＝11.59、9.51、3.48， P<0.05或 P<0.01)。(6)DETC共培养组培养3 d EdU阳性细胞百分比、培养5 d CD49f ＋CD71 -细胞百分比、培养5 d角蛋白14阳性细胞百分比分别为(43.5±0.6)%、(66.5±0.5)%、(69.3±1.7)%，显著高于对照组的(32.3±1.3)%、(56.4±0.3)%、(54.9±1.3)%， t＝7.97、17.10、6.66， P<0.01。DETC共培养组培养10 d角蛋白10阳性细胞百分比为(55.7±0.7)%，显著低于对照组的(67.1±1.2)%， t＝8.34, P<0.01。(7)IGF-Ⅰ组培养3 d EdU阳性细胞百分比、培养5 d CD49f ＋CD71 -细胞百分比、培养5 d角蛋白14阳性细胞百分比分别为(42.1±0.9)%、(81.1±1.3)%、(66.8±1.0)%，显著高于对照组的(32.4±0.7)%、(74.9±0.7)%、(52.0±1.9)%， t＝8.39、4.24、7.25， P<0.05或 P<0.01。IGF-Ⅰ组培养10 d角蛋白10阳性细胞百分比为(53.5±1.1)%，显著低于对照组的(58.2±0.3)%， t＝3.99, P<0.05。 结论:DETC通过分泌IGF-Ⅰ促进表皮干细胞的增殖和抗凋亡潜能并抑制其向终末期细胞分化，从而促进小鼠全层皮肤缺损创面愈合。

目的 探讨动机行为转化下的多轨道专科护理模式在脑出血患者术后康复中的应用效果.方法 选取 2020 年 1 月—2021 年 12 月医院收治的 80 例脑出血患者作为研究对象,按照组间基线资料具有可比性的原则将其分对照组和观察组,各 40 例.对照组接受常规护理,观察组接受动机行为转化下的多轨道专科护理模式,比较两组患者心理弹性、神经功能恢复状况[降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)、血清脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)]、炎性反应[血清重组人精氨酸酶 1(serum recombinant human arginase 1,ARG1)、核因子E2相关因子2(NF-E2-related factor,Nrf2)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)]、颅内感染预测指标[核转录因子(nuclear transcription factor,NF)-kB、可溶性白细胞介素 2 受体(soluble interleukin-2 receptor,sIL-2R)]和护理满意程度.结果 干预后,观察组患者CD-RISC评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者CGRP值低于对照组,IGF-1、BDNF值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者Arg1、TNF-α、Nrf2 值低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者NF-kB、sIL-2R值低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者护理满意程度高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 脑出血患者术后接受动机行为转化下多轨道专科护理模式干预,能调动患者术后康复积极心理,进而利于调控机体炎性因子,促进神经功能恢复,防控颅内感染等发生,提高护理满意度.

目的 重组慢病毒介导转化生长因子(TGF)-β3/胰岛素样生长因子-1(HIGF-1)联合基因转染兔骨髓间充质干细胞,诱导其软骨细胞分化,比较与TGF-β3单基因转染诱导其软骨细胞分化的效率.方法 全骨髓贴壁法分离、培养骨髓间充质干细胞,流式细胞术检测细胞表面抗原,培养后通过重组慢病毒分别转染阴性对照(N组)、TGF-β3单基因(T组)、TGF-β3/HIGF-1联合基因(TB组),培养14 d后,荧光显微镜下观察各组细胞形态,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot分别检测性别决定区Y框蛋白9(SOX9)、蛋白多糖、Ⅱ型胶原在基因水平与蛋白水平的表达量.结果 流式细胞术检测造血干细胞标志物(CD34,2.07％)、白细胞表面抗原[人类白细胞抗原DR基因(HLA-DR),1.73％]均为阴性,透明质酸受体(CD44,82.79％)为阳性,荧光显微镜观察诱导后细胞形态多为多角形、方形或者类圆盘状;RT-PCR结果显示:T组SOX9、蛋白多糖、Ⅱ型胶原基因表达量为0.645±0.024、0.587±0.018、0.616±0.019,显著高于C组(0.192 ±0.012、0.241±0.021、0.273 ±0.015),N组(0.211±0.014、0.224±0.016、0.232±0.022) (P =0.000);TB组基因表达量为0.832±0.013、0.746±0.024、0.951 ±0.026,显著高于T组(P=0.000).T组SOX9、蛋白多糖、Ⅱ型胶原蛋白表达量为1.36±0.20、0.39±0.05、0.68±0.09,显著高于C组(0.58±0.11、0.12±0.08、0.23 ±0.15),N组(0.62±0.14、0.13 ±0.06、0.25±0.02,P=0.000);TB组蛋白表达量为1.83±0.13、1.35±0.24、1.51 ±0.26,显著高于T组(P=0.000).结论 TGF-β3/HIGF-1联合基因转染骨髓间充质于细胞能诱导其成软骨细胞分化,且联合基因转染效率高于TGF-β3单基因转染.

目的 观察大鼠尿道壁局部注射不同浓度人重组胰岛素样生长因子-1蛋白(rhIGF-1)后,原位肌卫星细胞的激活和增殖.方法 雄性成年SD大鼠20只,建立尿道壁局部注射rhIGF-1模型,根据rhIGF-1浓度不同,随机分为生理盐水组、20μg/μl组、50μg/μl组、100 μg/μl组,每组5只,生理盐水组作为对照.术后4周,取尿道组织行苏木素-伊红(HE)染色计数新生肌纤维数量,行免疫荧光测定肌卫星细胞分子标记配对核蛋白-7(pax7)及肝细胞生长因子受体(c-Met)蛋白的表达.结果 HE染色提示对照组、20μg/μl组、50 μg/μl组及100 μg/μl组新生肌纤维数分别为(0.82±0.75)、(1.33±0.62)、(2.00±0.74)、(2.67±0.98)个;免疫荧光染色pax7阳性细胞数分别为(27.00±2.65)、(37.87 ±9.46)、(61.83±11.66)、(64.27 ±9.28)个;c-Met平均荧光强度分别为(7.41 ±2.00)、(15.39 ±4.96)、(21.60 ±4.26)、(24.04±3.13);与对照组比较,50μg/μl组及100 μg/μl组新生肌纤维数量显著增多(P=0.004、0.000),且pax7阳性细胞数显著增多(P=0.000、0.000),而20 μg/μl组两者增加均不明显(P=0.487、0.425);3个处理组c-Met平均荧光强度均显著高于对照组(P =0.000、0.000、0.000).结论 大鼠尿道壁局部注射人重组胰岛素样生长因子-1能激活原位肌卫星细胞,促进其增殖分化为新生肌纤维,使尿道括约肌增生肥大.

随着促生长激素释放激素-生长激素-胰岛素样生长因子(GHRH-GH-IGF-1)轴和基因学研究的深入,生长激素受体基因(GHR基因)的突变及其核苷酸多态性与特发性矮小(ISS)的关系逐渐明了.GHR基因异常多发生在生长激素受体(GHR)蛋白的胞外区,可引起细胞内信号转导障碍,导致GHR蛋白功能及表达部分缺失,生长激素不能完全发挥作用或部分不敏感,从而可能发生ISS; GHR基因单核苷酸多态性(SNP),尤其是外显子Ex3多态性与ISS易感性有关.此外,GHR基因异常及SNP与ISS中IGF-1、生长激素结合蛋白血清水平及重组人生长激素治疗效果密切相关.深入研究ISS中GHR候选基因的筛查、蛋白功能表达及SNP分析,有利于提高ISS的遗传诊断水平,对明确ISS的病因及指导临床治疗具有重要意义.

目的:探讨重组人血管内皮抑制素对非小细胞肺癌患者治疗效果 、血管新生 、肿瘤细胞增殖及迁移的影响.方法:选择我院收治的100例非小细胞肺癌患者作为研究对象,随机分为观察组与对照组,每组各50例.对照组采用吉西他滨联合顺铂治疗;观察组在对照组基础上联合恩度治疗.观察比较两组癌症治疗效果[包括细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA50)]、血管新生[包括血管内皮生长因子(VEGF)及低氧诱导因子(HIF-1α)]、肿瘤细胞增殖[包括胰岛素样生长因子(IGF-1)、胰岛素样生长因子受体-7(IGFBP-7)]及迁移[包括高迁移率族蛋白AT-hook2(HMGA2)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)]相关指标的表达水平.结果:两组研究对象在治疗效果 、血管新生 、肿瘤细胞增殖及迁移方面变化明显.治疗前,两组各项水平比较,无显著差异(P>0.05);治疗后,两组CY-FRA21-1、CEA、CA50、VEGF、HIF-1α 、IGF-1、HMGA2及HMGB1水平均较治疗前显著降低(P<0.05),IGFBP-7水平则较治疗前显著升高(P<0.05);且治疗后观察组CYFRA21-1、CEA、CA50、VEGF、HIF-1α 、IGF-1、HMGA2及HMGB1水平较对照组下降明显(P<0.05),IGFBP-7水平则较对照组升高明显(P<0.05).结论:重组人血管内皮抑制素可增强对非小细胞肺癌患者的治疗效果,减少血管新生,抑制肿瘤细胞增殖及迁移.

目的 仙茅苷(curculigoside,CCG)能有效防治去卵巢大鼠的骨量丢失,但是其分子机制尚不清楚,因此,研究CCG在地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导下对成骨细胞增殖分化和炎症因子释放的影响,并探讨其相关机制.方法 将大鼠颅骨成骨细胞与DEX共同孵育24～72 h,同时采用不同浓度的CCG对其干预,采用细胞计数试剂盒检测成骨细胞增殖情况,流式细胞术检测成骨细胞线粒体膜电位(mitochondria membrane potential,MMP)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、重组人胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)和巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)等细胞因子的表达.采用蛋白质印迹法检测骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、β-连环蛋白(β-catenin)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子 κB受体活化因子配体(receptor activators of NF-κB ligand,RANKL)和核因子κB受体活化因子(receptor activator of NF-κB,RANK)的蛋白表达.结果地塞米松1μmol/L处理成骨细胞后,成骨细胞增殖明显低于未处理组,25～100μg/mL CCG预处理可明显逆转DEX对成骨细胞的杀伤作用.25～100μg/mL的CCG预处理可提高DEX诱导下成骨细胞的MMP水平,降低ROS的生成.此外,CCG明显逆转DEX对碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、OPG、BMP-2、β-catenin、IGF-1和M-CSF水平的抑制作用以及对RANKL和RANK等分化指标的促进作用.CCG还能抑制DEX诱导的TNF-α、IL-1β、IL-6、COX-2等炎症细胞因子的释放.结论 这些结果为进一步研究CCG的成骨细胞保护机制提供了新的思路,通过诱导细胞增殖和分化,减少炎症反应,提示CCG可用于防治骨质疏松症.