目的 研究金果榄、矮脚苦蒿和姜黄等十种清热解毒中药抗泛耐药鲍曼不动杆菌(XDR-AB)感染的活性,筛选出具有体内抗感染活性的中药提取物,为发现新型抗XDR-AB感染的抗菌药物提供研究基础.方法 分别采用水、50％乙醇、95％乙醇提取十种清热解毒中药并制成不同浓度的药物浸膏,与课题组前期优化的XDR-AB感染秀丽隐杆线虫模型共孵育,通过线虫的存活率判断中药提取物的体内抗XDR-AB活性.结果 随着姜黄和土荆皮提取物浓度的增大,XDR-AB感染的线虫存活率不断提高.姜黄的水提取物、50％乙醇提取物和95％乙醇提取物在浓度1 000 μg/mL时,可使XDR-AB感染的秀丽隐杆线虫存活率分别提高至54.2％(与阴性对照组比较,P＜0.001)、18.8％、13.3％;土荆皮的水提取物、50％乙醇提取物和95％乙醇提取物在浓度1 000 μg/mL时,可使XDR-AB感染的秀丽隐杆线虫存活率分别提高至47.4％(与阴性对照组比较,P＜0.001)、23.8％、15.8％.结论 姜黄和土荆皮水提取物具有较好的抗XDR-AB感染活性,可对其主要化学成分进行体外抗菌药效验证,以期发现新型抗XDR-AB感染的抗菌药物.

目的:建立同时测定金果榄药材中古伦宾、蜕皮激素和生物碱类成分的含量的方法,并寻找金果榄药材中的质量差异标志物.方法:采用HPLC法同时测定古伦宾、蜕皮激素、非洲防己碱、药根碱和巴马丁的含量,并以检测出的含量为指标,结合聚类分析和偏最小二乘判别分析进一步确定金果榄药材中的质量差异标志物.结果:测定方法精密度、稳定性和重复性良好,聚类分析和偏最小二乘判别分析结果均显示20批样品可分为三大类,变量权重结果证实非洲防己碱、古伦宾、巴马汀为金果榄药材主要质量差异标志物.结论:所建方法利用DAD检测器特性,同时监测多个波长,方便快捷,能显著提高药材质量控制效率;聚类分析和偏最小二乘判别分析结果也可为金果榄药材种植、栽培提供依据.

生物碱是许多中药的重要活性成分,生物碱苷是其存在形式之一.因糖单元的引入改善了生物碱苷类成分的水溶性从而呈现更好的生物活性.鉴于生物碱苷在植物体内的含量较低,其研究相对较少.该研究采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS/MS),对含有重要生物碱的 6 种中药(黄连、黄柏、北豆根、青风藤、金果榄和防己)进行生物碱苷的识别和成分分析,结果表明除金果榄外,其他 5 种药材均含有生物碱苷,基于在线紫外吸收光谱、一级质谱准分子离子峰、二级质谱碎片离子信息以及相关文献报道,对各药材所含生物碱苷类成分进行鉴定,从中鉴定了 42 个生物碱苷,其中黄连和北豆根中鉴定出的生物碱苷较多,而黄连中的 11 个均为潜在的新化合物.进而以黄连为例,采用水煎煮,水提液经大孔吸附树脂粗分,D151 阳离子交换树脂、ODS和MCI等柱色谱纯化,结合半制备高效液相色谱,进行目标生物碱苷的分离,得到2 个新的生物碱苷,通过质谱、核磁等波谱数据鉴定其结构分别为(S)-7-羟基-1-(对羟基苄基)-2,2-N,N-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和(S)-N-甲基四氢巴马汀红碱-9-O-β-D-吡喃葡萄糖苷.该研究对于丰富黄连的化学成分信息、深入开发黄连药用资源具有重要意义,同时可为从其他中药中快速鉴别和分离生物碱苷类成分提供参考.

目的 提取贵州山慈菇及混伪品的总DNA后,并对ITS序列进行PCR扩增,测序,采用序列对比软件对山慈菇及混伪品的ITS进行聚类分析,寻找出山慈菇的变异位点,为山慈菇的基源鉴定和品质评价提供分子依据.方法 运用改良CTAB法提取总DNA,PCR扩增ITS序列后送入公司测序并作序列同源性分析.结果 贵州山慈菇及混伪品的ITS、ITS2序列经比对后,存在变异位点.山慈菇与4个金果榄比较,分别有208个、206个、205个、206个突变位点,与2个青牛胆比较分别有187个、194个突变位点,与白及比较有70个突变位点;从ITS序列构建的NJ系统发育树图显示,山慈菇与其混伪品白及、金果榄之间差异较为显著,系统发育树也显示它们聚到不同的分枝上.结论 ITS区序列为中药真品鉴定及道地药材的质量鉴定奠定了理论基础.

目的 研究复合酶提取金果榄多糖的最佳条件,并探讨其体外抗氧化活性.方法 复合酶种类及配比为纤维素酶:果胶酶:木瓜蛋白酶=1:1:1,液料比固定为20 mL/g,以金果榄多糖得率为响应值,在单因素试验基础上,以酶解pH值、酶解时间、复合酶添加量、酶解温度为自变量,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺;采用DPPH自由基、羟自由基(?OH)、超氧阴离子自由基(O2-?)清除能力体系评价金果榄多糖体外抗氧化活性.结果 金果榄多糖最佳提取条件为:酶解pH值5.1,酶解时间56 min,复合酶添加量2.0％,酶解温度52℃.在此条件下多糖得率为14.03％,与理论值14.12％的相对误差<5％.酶解温度对多糖得率影响最显著,酶解时间、酶解pH值次之,酶添加量影响最小.金果榄多糖对DPPH、?OH、O2-?清除的半数抑制浓度分别为1.358、0.927、1.096 mg/mL,与维生素C比较,抗氧化活性较弱.结论 本研究优选的金果榄多糖复合酶法提取工艺方便可行,酶解得到的多糖具有较强的体外抗氧化活性.

癫痫为儿科常见的神经系统疾病之一,70％的患儿经过正规的中医或中西医结合抗痫治疗后,癫痫发作可得到良好的控制,约30％的患儿经长期治疗,仍得不到有效地控制,成为难治性癫痫.近年来,马融教授突破了传统的“豁痰熄风”抗痫疗法,在临床中运用银翘散治疗癫痫的过程中,通过其疏风解表、开通经络的功效,使得邪有出路,助药直达病所,后将方中加入金果榄、全蝎,首创疏风止痉方治疗难活性癫痫患儿,取得了一定的疗效,并附验案讨论.

目的:利用青牛胆种子和藤蔓进行种苗繁育研究,旨在建立一种可行的种苗繁育技术,为青牛胆人工栽培奠定基础.方法:以野外采集的青牛胆果实及地上部藤蔓为试验材料,研究了不同基质、不同处理对种子萌发及扦插繁殖的影响.结果:种子试验表明,青牛胆在播种基质腐殖土-园土(1∶1)上萌发率最高(88.00％);50 mg/L浓度GA3处理能显著提高种子萌发率(89.33％).扦插试验表明,扦插基质珍珠岩-腐殖土-蛭石(1∶1∶1)扦插成活率最高(93.33％),综合效果最优;不同植物生长调节剂、不同浓度对青牛胆扦插效果影响不同,以100 mg/L生根粉(ABT)处理1 h的综合效果最好.结论:在自然条件下,以青牛胆种子、藤蔓为繁殖材料建立种苗繁育体系切实可行,本研究对青牛胆人工繁育缓解金果榄药材资源匮乏具有重要意义.

目的:探索不同生根剂处理对金果榄插穗扦插生根的影响.方法:以金果榄半木质化枝条作为扦插材料,通过设置IBA、吲哚生根粉、赤霉素及吲丁诱抗素等4种不同生长调节剂及其浓度梯度,测定其插穗的生根类型、生根率、生根数量、根长、芽高、叶片数等指标.结果:(1)金果榄插穗生根类型有3种:皮部生根、愈伤组织生根和中间类型(即皮部和愈伤组织都有生根),其中以皮部生根为主;(2)使用500 mg/L吲丁诱抗素浸泡60 min对金果榄插穗的生根效果最佳,生根率可达(47.62±1.53)％,生根数平均值为(9.10±1.00)条,新芽高度为(3.00±1.15)cm,叶片数为(1.67±0.58)片,叶片宽为(2.57±0.76)cm.结论:金果榄最佳生根剂为吲丁诱抗素,最佳生根剂浓度为500 mg/L.

目的:应用灰色关联分析(GRA)与主成分分析(PCA)评价不同产地金果榄药材质量.方法:收集来自15个不同产区金果榄药材,测定各批药材的灰分、酸不溶性灰分、浸出物,以及盐酸巴马汀和盐酸药根碱含量,采用GRA法、构建金果榄质量评价模型并与PCA法进行比较.结果:对不同批次金果榄药材中的各成分进行GRA,得出湖北武当山八仙观产金果榄药材与最优参考序列的相对关联度最高(0.64)质量最优,湖北荆州产金果榄药材与最优参考序列的相对关联度最低(0.32)质量最差,PCA法与GRA法的分析结果基本一致,说明结果可重复性较好,较为可靠.结论:GRA所建立的金果榄质量评价模型可作为金果榄药材质量评价的参考依据.

目的 明确青牛胆的产地生态适宜性,为合理选择种植区提供依据.方法 以青牛胆道地产区及主要分布区的410个分布数据为基点,选取海拔、气候、土壤等9个指标作为主要生态因子,应用《药用植物全球产地生态适宜性信息系统》提取青牛胆全球分布的生态因子值,分析在中国及全球的青牛胆产地生态适宜性.结果 青牛胆主要分布在海拔1400 m以下,受年均日照和年均相对湿度的影响较大.在中国,青牛胆的主要适宜区为云南、四川、广西等省区;在全球,青牛胆的生态适宜区域分布于中国、美国、法国等66个国家和地区,其中,越南、缅甸等17个"一带一路"沿线国家亦有分布.结论 对青牛胆的生态适宜分析可为青牛胆合理选择种植区提供依据.