基质相互作用分子1（STIM1）是钙池操纵性钙内流（SOCE）的关键成分，通过感知内质网腔内存储Ca 2+含量以控制质膜Ca 2+通道的开放与关闭，进而影响细胞粘附、迁移、基因表达和增殖等过程。研究表明，在缺血性脑卒中（IS）的发生发展过程中，STIM1在神经元、内皮细胞和血小板等多种细胞中表达异常，在高血压调控以及促进血栓形成、激活细胞自噬、介导细胞凋亡和促进神经炎症的病理过程中发挥重要作用。本文对STIM1在IS发生发展和预后评估中的研究进展进行总结，力求为寻找IS的潜在治疗靶点提供理论参考。

目的:探讨Orai1介导钙池操纵的钙内流（SOCE）在脓毒症小鼠CD4 + T细胞免疫功能损害中的作用。 方法:采用清洁级雄性Balb/c小鼠建立盲肠结扎穿孔（CLP）脓毒症模型，分别于术后1、3、5 d 处死小鼠，无菌留取脾脏，免疫磁珠法分选CD4 + T细胞，Western印迹法检测各组脾脏CD4 + T细胞Orai1蛋白表达，流式细胞术检测SOCE，流式细胞术检测CD4 + T细胞凋亡，CCK-8细胞计数试剂盒检测CD4 + T细胞增殖，酶联免疫吸附法（ELISA）检测干扰素（IFN）-γ和白细胞介素（IL）-4水平。然后调节Orai1蛋白的表达，实验分为4组，sham组、CLP3组、Orai1下调组（Orai1-down组）、Orai1上调组（Orai1-up组），进一步检测小鼠脾脏CD4 + T细胞SOCE和免疫功能。 结果:sham组脾脏CD4 + T细胞Orai1蛋白的相对表达量为1.03±0.16，与sham组相比，CLP组的Orai1蛋白水平明显降低（ F=19.64， P=0.000 5）。与sham组相比，CLP组SOCE水平明显降低（ F=30.01， P=0.001）。sham组的CD4 + T细胞早期和晚期凋亡比率为8.7%±1.5%，与sham组相比，CLP组明显升高（ F=32.29， P=0.000 1）。与sham组相比，CLP组小鼠脾脏CD4 + T细胞增殖能力明显降低，差异有统计学意义（ F=7.26， P=0.001 8）。与sham组相比，CLP组小鼠脾脏CD4 + T细胞分泌IFN-γ和IL-4的能力均明显降低，差异均有统计学意义（ F=19.690、6.183，均 P<0.05）。与sham组相比，CLP组IFN-γ/IL-4比值变小（ F=11.23， P=0.003 1）。与CLP3组相比，Orai1-down组CD4 + T细胞SOCE的水平明显下降，早期和晚期凋亡比率明显升高，脾脏CD4 + T细胞增殖能力显著下降，分泌IFN-γ和IL-4下降，IFN-γ/IL-4值下降，差异均有统计学意义（ t=4.819、7.952、2.988、28.760、3.140、7.670，均 P<0.05）；而Orai1-up组则均获得相反的结果，差异亦均有统计学意义（ t=2.983、6.796、9.390、19.670、3.692、15.870，均 P<0.05）。 结论:Orai1介导SOCE减轻脓毒症小鼠CD4 + T细胞免疫功能障碍。

目的:研究钙池操纵的钙内流(SOCE)在哮喘小鼠气道上皮屏障破坏中的作用及可能机制.方法:建立屋尘螨(HDM)致敏的C57BL/6急性过敏性哮喘小鼠模型,分为正常对照组、哮喘模型组和SOCE阻断剂BTP-2干预的哮喘模型组,剔除造模过程中死亡鼠和肺泡灌洗失败小鼠,每组10只.肺组织HE染色评估肺组织炎症,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-13和血清中IgE水平.右旋糖酐通透性实验评估屏障通透性,肺免疫荧光及肺组织化学染色评估连接蛋白(ZO-1和occludin)的分布和表达,RT-PCR和Western Blot评估肺组织中连接蛋白的表达.结果:与正常对照组相比,HDM致敏的小鼠气道炎症加重,肺组织ZO-1、occludin的mRNA和蛋白表达水平显著降低,同时右旋糖酐通透性增高(P＜0.000 1);与哮喘模型组相比,BTP-2干预组小鼠气道炎症减轻,ZO-1、occludin的mRNA和蛋白表达水平较哮喘组增高,右旋糖酐通透性亦明显下降(P＜0.000 1).结论:SOCE及其介导的钙信号可能参与了 HDM诱导的小鼠气道上皮屏障的破坏.

目的 研究瞬时受体电位通道1(TRPC1)及钙释放激活钙通道调节分子1(Orai1)在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)经钙池操纵性钙通道(SOC)和受体操纵性钙通道(ROC)介导的Ca2+内流和一氧化氮(N0)生成中的作用.方法 取2～3代HUVEC进行随机分组,将构建的TRPC1、Orai1干扰质粒(shTRPC1、shOrai1)分别转染入HUVEC,采用real-time PCR和Western blot检测TRPC1、Orai1 mRNA和蛋白的表达及转染抑制效率.将各组细胞分别与钙敏感受体(CAR)激动剂精胺、ROC模拟剂(TPA) +CaR负性变构调节剂Calhex231、蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro31-8220与经典型PKCs和PKCμ抑制剂Go6967孵育后,荧光探针Fura-2/AM及DAF-FM负载方法同步检测[Ca2+]i和NO生成的变化.结果 与对照组比较,shTRPC1组和shOrai1组mRNA表达(抑制率分剐为84.50％、76.10％)和蛋白的表达(抑制率分别为83.98％、71.73％)明显降低(P＜0.05).在4种不同药物作用下,shTRPC1组和shOrai1组[Ca2+]i△ratio值和NO净荧光强度值均明显降低(P＜0.05).结论 TRPC1、Orai1参与了人脐静脉内皮细胞SOC和ROC介导的钙内流和NO生成.

目的:探讨5-羟色胺(5-HT)诱导冠状动脉收缩的机制.方法:取雄性Wistar成年大鼠,制备离体冠状动脉环,经血管张力测定仪测定动脉环的张力变化,并探讨给予不同信号通路抑制剂对5-HT诱导的冠状动脉收缩的影响.结果:首先发现给予5-HT2A受体阻断剂沙格雷酯(sarpogrelate,1 μmol/L)可完全消除5-HT引起的冠状动脉浓度依赖性收缩;磷脂酶Cβ(PLCβ)抑制剂U73122(10 μmol/L和50 μmol/L)、Rho相关蛋白激酶抑制剂Y-27632(3 μmol/L和10 μmol/L)和蛋白激酶C δ亚基(PKCδ)抑制剂rottlerin(3 μmol/L和10 μmol/L)孵育后,均可明显抑制5-HT引起的冠状动脉环收缩(P<0.05);此外,L-型钙通道(Cav1.2)阻断剂硝苯地平(1 μmol/L)及细胞内钙池操纵性钙内流(SOCE)抑制剂SKF96365(10 μmol/L和30 μmol/L)和2-氨基乙氧基苯硼酸(2-APB, 50 μmol/L和100 μmol/L)孵育后,5-HT诱导的血管收缩张力较未处理组明显下降(P<0.05);另外,在含硝苯地平(1 μmol/L)的无钙Kerbs-Henseleit(K-H)液中,发现5-HT仍可诱导血管收缩.结论:5-HT通过激活5-HT2A受体诱导冠状动脉收缩,其机制可能与PKC和Rho激酶信号通路,以及钙调控有关.

基质相互作用蛋白分子1(STIM1)与肿瘤的发生发展密切相关,其参与多种癌症细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭的调节过程.阻断或敲除STIM1可以显著抑制癌细胞的增殖和迁移.阐明STIM1在癌症细胞中的调节机制,将有助于新的治疗靶点的确定.本文对STIM1分子在不同肿瘤中的作用机制及临床应用前景作一综述.

经典型瞬时受体电位(transient receptor potential canonical,TRPC)通道在病理条件下参与心脏功能调控,与心肌肥大、心律失常以及心肌梗死等发病机制有重要关联.了解与TRPC通道相关的心脏疾病的分子机制及其调控路径/位点,对设计以TRPC通道为靶向的新药具有借鉴意义.本文就有关TRPC通道的功能及调控,以及在多种心脏疾病中所扮演的角色作以简要综述.

目的 探究模拟微重力效应下骨细胞钙池操纵Ca2+通道(store-operated calcium channels,SOC)的活性变化以及其可能机制,阐明失重性骨丢失的发生机制.方法 以小鼠骨细胞(MLO-Y4)为对象,分为回转模拟微重力效应组(simulated microgravity,SM)和正常重力组(control,CON).分别旋转培养24、48 h后,激光共聚焦显微镜检测毒胡萝卜素引发细胞内质网钙库耗竭后胞内Ca2+浓度水平,以反映SOC通道的活性;免疫荧光染色法观察膜骨架spectrin和内质网膜蛋白IP3R的分布情况,研究SOC通道功能变化的可能机制.结果 在内质网钙库释放Ca2+时期,24、48 h SM组的胞内Ca2+浓度水平与CON组相比均无显著差异,而在胞外Ca2+经SOC通道内流时期,24hSM组只在前4 min比CON组有显著性下降,48 h SM组在整个时期均比CON组有显著性下降.与CON组相比,SM组膜骨架spectrin向细胞边缘聚集,而ER膜蛋白IP3R则向ER核被膜区域聚集,且48 h组更为显著.结论 模拟微重力效应可抑制骨细胞SOC通道活性.骨细胞膜骨架spectrin以及内质网膜上蛋白IP3R位置分布变化,可能影响SOC通道激活过程中蛋白间的构象耦合,进而降低骨细胞SOC通道的活性.

基质相互作用分子1(STIM1)为细胞内钙库的钙离子浓度感受器,主要以二聚体形式散在分布于内质网膜上,表达于神经细胞、骨骼肌细胞、心肌细胞、上皮细胞、内皮细胞和免疫细胞等各类细胞中.其功能主要是调控钙池操纵钙内流通道的开放与关闭,影响第二信使钙离子的浓度变化,进而调控细胞的分泌、增殖、基因转录、分化、凋亡、迁移和黏附等一系列的细胞生理功能.现在越来越多的研究表明,STIM1不仅与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭及转移等恶性行为存在着关联,还是启动机体免疫细胞的开关,同时在心脑血管疾病、重要器官损伤中扮演着重要角色.本文结合STIM1结构特点、作用机制和功能研究,阐述其与肿瘤、免疫系统疾病和心脑血管疾病等多种疾病的关系,以期为相关疾病的防治提供参考.

本研旨在探讨Janus激酶3(JAK3)对乳腺癌细胞迁移能力的影响以及其作用机制.利用siRNA (siJAK3)沉默乳腺癌MCF-7细胞JAK3的表达,用划痕实验检测细胞迁移能力,用荧光钙成像技术检测钙池操纵性钙通道(store-operated calcium channel,SOCC)活性,用Western blot和RT-PCR检测钙池操纵性钙内流(store-operated calcium entry,SOCE)过程中的重要分子Orai1和STIM1表达水平.结果 显示,SOCC抑制剂2-APB对MCF-7细胞的迁移能力有抑制作用.siJAK3转染可显著抑制MCF-7细胞的迁移能力,降低SOCC活性,下调Orai1和STIM1的mRNA和蛋白表达水平.在JAK3沉默细胞中过表达Orai1或STIM1,可使MCF-7细胞迁移力恢复.上述结果提示,JAK3通过影响SOCC促进乳腺癌细胞的迁移.