目的 探讨双硫仑(disulfiram,DSF)联合二价铜离子(Cu2+)对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法 体外培养肝癌Hep3B细胞,分别采用DSF(30 nmol/L)溶液、Cu2+(1 μmol/L)溶液和铜螯合剂四硫代钼酸铵(ammonium tetrathiomolybdate Ⅵ,ATTM)(30 nmol/L)溶液单独或联合干预,以二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)(30 nmol/L)作用的细胞为对照组.分别采用CCK-8实验、划痕实验和Transwell小室实验检测细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力;采用免疫荧光实验检测细胞中铜死亡相关蛋白二氢硫辛酰胺-S-乙酰转移酶(dihydrolipoamide S-acetyltransferase,DLAT)和铁氧还蛋白1(ferredoxin 1,FDX1)的表达.结果 与对照组相比,DSF、Cu2+单独或联合干预后Hep3B细胞的增殖、迁移和侵袭能力均下降(均P＜0.05),其中DSF+Cu2+联合干预的细胞增殖、迁移和侵袭能力下降更加显著(均P＜0.0001).在DSF联合Cu2+的基础上加入ATTM后逆转了 DSF联合Cu2+对Hep3B细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用,其增殖、迁移以及侵袭能力较DSF+Cu2+组增强(均P＜0.05).与对照组相比,DSF、Cu2+单独干预后铜死亡相关蛋白DLAT和FDX1的荧光强度改变并不明显,但Cu2+联合DSF后DLAT蛋白的荧光强度增加而FDX1蛋白的荧光强度减弱,加入ATTM后则逆转了 DLAT和FDX1蛋白的表达趋势.结论 DSF联合Cu2+能抑制肝癌细胞Hep3B增殖、迁移和侵袭能力,其作用机制可能是通过诱导铜死亡的发生实现.

卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤之一,多数患者在发现时已是晚期,治疗效果及预后差,严重影响患者的生存质量.铜是人体内重要的微量元素,参与多种关键生物过程,并与多种恶性肿瘤的进展密切相关.目前,越来越多的研究探索了铜与卵巢癌的关系,发现卵巢癌患者血浆、腹水及肿瘤组织中铜水平较健康人群明显升高,并且多种铜转运蛋白的异常表达与卵巢癌铂类药物化疗耐药密切相关.近年来,针对铜代谢的抗肿瘤治疗方式成为了研究的热点,大量的研究证明了铜螯合剂和铜离子载体在体内外对卵巢癌的显著抑制作用.综述铜与卵巢癌的密切关系,深入了解基于铜代谢的药物及治疗方法在卵巢癌中的应用,以期为卵巢癌的治疗提供新的方向.

铜死亡是一种新发现的细胞程序性死亡方式,细胞内的铜代谢失衡尤其是铜离子过载有可能会导致细胞铜死亡的发生.过量的铜积累会靶向结合硫辛酰化三羧酸循环蛋白,使其异常聚集进而触发细胞死亡,铁氧化还原蛋白1(FDX1)等多个分子能够调控铜死亡活性.肿瘤细胞内铜代谢稳态主要靠四组铜相关蛋白质的相互作用来维持,影响受体酪氨酸激酶(RTK)、自噬、Notch等相关信号通路,与肿瘤的发生发展息息相关.合理利用铜离子载体和铜螯合剂等铜配合物以及铜死亡相关生物标志物将有助于开发肿瘤治疗和预后评估新策略,在未来的肿瘤个性化治疗中有着巨大的潜力.

肿瘤与人体内铜离子稳态失衡密切相关.为了开发高效低毒的新型铜离子螯合剂类抗肿瘤化合物,以2-甲基-8-羟基喹啉为起始物,经过C-2位羟醛缩合、消除反应、迈克尔加成等反应合成5种8-羟基喹啉衍生物.通过紫外滴定法研究目标化合物的铜离子螯合能力和选择性;通过MTT法测定其对人黑色素瘤细胞(A375细胞和Colo829细胞)、人肺癌细胞(A549细胞)、人肝癌细胞(HepG2细胞)、人宫颈癌细胞(HeLa细胞)及人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)的细胞毒性.最终,得到安全性高于阳性对照品氟尿嘧啶(5-FU)的TDMQ51和TDMQ53这2个化合物,对铜和锌的络合常数相差达13个数量级,且对多种肿瘤细胞具有良好抑制活性,在提高抗肿瘤活性上具有改造潜力,可作为先导化合物进行深入研究.

目的 探讨铜离子在铅(Pb)加重Aβ1-42处理的小胶质细胞活化及神经元损伤中的作用,以揭示铅加重阿尔兹海默症(AD)样变的调控机制.方法 将BV2细胞分为Control组(不予任何处理)、Aβ1-42组(5、10、15、20 μmol/LAβ1-42处理12 h)、Pb组(5、10、15、20 μmol/L Pb处理12h)和Aβ1-42+Pb组(10μmol/LAβ1-42+10 μmol/LPb处理12 h).CCK8检测细胞活力,相差显微镜观察细胞形态学改变,细胞免疫荧光检测iNOS释放及氧化应激情况,ELISA检测小胶质细胞的炎性因子释放情况,Western blot检测CTR1和ATP7A蛋白表达量,ICP-MS检测细胞铜含量.结果 15 μmol/L和20 μmol/L的Aβ1-42处理BV2细胞12h可降低其生长活力(P<0.05和P<0.01);与对照组相比,10 μmol/L Aβ1-42处理BV2细胞12h可引起iNOS、炎性因子TNF-α和IL-6释放增加(P<0.05);10 μmol/L Aβ1-42联合15 μmol/L和20 μmol/L的铅处理BV2细胞可影响其生长活力(P<0.05);与10 μmol/L Aβ1-42单独处理组相比,10 μmol/L铅与10 μmol/LAβ1-42联合处理BV2细胞12h可使激活的小胶质细胞增多,具体表现为BV2细胞形态呈现胞体增大、突起增多且细长,iNOS、炎性因子TNF-α和IL-6、IL-1β释放增加(P<0.05),细胞ROS释放增多,细胞内铜离子蓄积(P<0.001),铜转运蛋白CTR1表达水平上升(P<0.05);BV2细胞的激活明显降低了海马神经元HT22细胞生长活力(P<0.001);与Aβ1-42+Pb组相比,在使用抗氧化剂NAC和铜螯合剂TM后,激活的小胶质细胞減少,且对神经元细胞的生长活力损伤有所减轻(P<0.05).结论 铅暴露加重了Aβ1-42处理的小胶质细胞造成的神经元损伤,与铅加重Aβ1-42处理的小胶质细胞铜离子蓄积,氧化应激,炎性因子释放增加,引发小胶质细胞活化有关.

多发性硬化(Multiple sclerosis,MS)是以人类中枢神经系统炎性脱髓鞘为主要特点的神经退行性疾病,并伴随着轴突损伤、胶质细胞增生、炎性细胞浸润等病理特征.双环己酮草酰二腙(Cuprizone,CPZ)是一种铜离子螯合剂,给小鼠饲喂CPZ可诱导小鼠中枢神经系统产生脱髓鞘病变,引起少突胶质细胞凋亡、少突胶质细胞祖细胞增殖、星形胶质细胞和小胶质细胞激活等病理变化,停止饲喂CPZ后,小鼠的中枢神经系统会逐步发生髓鞘再生现象,因此是研究MS脱髓鞘和髓鞘再生的常用模型.本文从CPZ小鼠模型构建、少突胶质细胞、星形胶质细胞、小胶质细胞以及髓鞘再生等不同方面进行了总结,并对采用CPZ模型的特色疗法进行了概括,从而为CPZ模型在科研与医学实践中的广泛应用提供了详细的理论依据.

目的 建立11种湘产中药材中3种重金属的快速检测方法.方法 铅、镉、铜在一定条件下分别与螯合剂二甲酚橙、镉试剂、铜试剂发生显色反应,对其含有量进行检测.结果 铅、镉、铜离子显色反应色阶范围分别为0.2～10.0、0.1 ～5.0、0.5～ 10 mg/L.结论 该方法简单、快速、选择性强、检测成本低,可为中药材中重金属现场快速检测提供参考.

阿尔茨海默病是一种与年龄相关的神经退行性疾病,其发病机制尚未完全阐明,近年来,金属离子在阿尔茨海默病发生和发展中起到的作用受到了广泛关注,该文综述了人体必需的铁、铜、锌、镁等金属离子和非必需金属铝和汞在AD发病机制中可能发挥的作用,为靶向金属离子转运和分布的抗AD药物研究提供思路和线索.

心力衰竭(HF)是一种复杂的疾病,任何导致心室充盈和射血受损的结构及功能性改变都能导致HF,并且患病率逐渐增加,是导致患者生活质量下降及社会经济高负担的疾病之一.目前,尽管临床上治疗方法不断增加,患者再入院率、病死率及致残率依旧较高.铜离子代谢异常被发现与HF的发生发展密切相关,本文总结铜离子代谢异常及铜死亡与HF发病机制之间的关系,认为铜离子可能通过参与心肌重构、氧化应激、心肌能量缺乏、基因异常表达等过程促进HF的发生发展,同时还探讨补充铜及应用铜螯合剂对HF患者的影响,以期为治疗HF提供新思路.