长非编码RNA(lncRNA)-母系表达基因3(MEG3)和微小RNA-21(miR-21)是抑癌和致癌因子。竞争性内源RNA(ceRNA)假说为研究RNA之间的相互作用提供了新的策略。MEG3可作为miR-21的ceRNA在乳腺癌、宫颈癌、胃癌、肺癌、白血病等恶性肿瘤的发生、发展、增殖、转移以及药物耐药、预后中发挥重要作用。

目的:本研究旨在探讨长链非编码RNA母系表达基因3（LncRNA MEG3）过表达对胰腺癌细胞（PANC1）自噬、凋亡及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路的影响。方法:构建pCMV-N-Flag-MEG3表达质粒并转染入PANC1细胞。实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）法检测HPDE6C7（正常胰腺细胞）组、PANC1（空白对照）组、Vector（PANC1细胞转染空载体）组和MEG3（PANC1细胞转染pCMV-N-Flag-MEG3重组质粒）组中LncRNA MEG3表达量；四甲基偶氮唑蓝比色（MTT）法、流式细胞术和单丹磺酰尸胺（MDC）染色法分别检测LncRNA MEG3过表达对胰腺癌细胞PANC1增殖、凋亡和自噬的影响；蛋白免疫印迹（Western blot）法检测LncRNA MEG3过表达对胰腺癌细胞PANC1中抑凋亡因子（Bcl-2）、促凋亡因子（Bax）和自噬因子（Beclin 1）蛋白表达水平及mTOR通路中mTOR、核糖体p70S6激酶蛋白（SK61）和核起始因子4E结合蛋白1（4E-BP1）磷酸化水平的影响。结果:与PANC1组和Vector组相比，MEG3组LncRNA MEG3表达水平（0.36±0.08 vs 0.35±0.11 vs 0.69±0.09）、胰腺癌细胞PANC1增殖抑制率（3.35%±0.12% vs 3.23%±0.09% vs 36.77%±0.13%）、自噬率（29.32%±1.03% vs 26.73%±1.32% vs 57.76%±1.09%）、凋亡率（9.85%±1.58% vs 9.73%±1.12% vs 35.89%±1.05%）、Bax（0.26±0.08 vs 0.29±0.05 vs 0.83±0.08）和Beclin 1（0.15±0.06 vs 0.17±0.02 vs 0.61±0.03）表达水平显著升高（均 P < 0.05），Bcl-2表达水平（0.79±0.12 vs 0.81±0.09 vs 0.30±0.03）及mTOR通路中mTOR（1.08±0.05 vs 1.06±0.08 vs 0.37±0.10）、SK61（1.12±0.06 vs 1.11±0.09 vs 0.41±0.03）和4E-BP1（0.97±0.07 vs 0.95±0.03 vs 0.39±0.05）磷酸化水平显著降低（均 P<0.05）。 结论:LncRNA MEG3过表达能抑制胰腺癌细胞PANC1增殖促进细胞凋亡，促进细胞自噬囊泡的形成，可能与阻滞mTOR通路有关。

目的:探讨长链非编码RNA母系表达基因3(lncRNA MEG3)对脑缺血再灌注损伤的影响及其调控机制。方法:将30只SD大鼠随机数字表法分为假手术组、模型组和lncRNA组，每组10只。除假手术组外，模型组和lncRNA组大鼠采用改良Longa线栓法建立大鼠大脑局灶性缺血再灌注损伤模型。lncRNA组大鼠经脑室注射lncRNA MEG3腺相关病毒；模型组和假手术组经脑室注射等体积对照腺相关病毒。注射24 h后，评估3组大鼠神经功能缺损评分，采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死体积，原位末端转移酶标记技术(TUNEL)法检测细胞凋亡，酶联免疫吸附测定(ELASA)分析脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-6炎性因子水平；蛋白免疫印迹法(Western blot)分析凋亡相关蛋白表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果:lncRNA组大鼠神经功能评分[(1.70±0.95)分]明显低于模型组大鼠神经功能评分[(3.60±0.52)分]，差异有统计学意义( t＝5.563， P<0.05)。lncRNA组大鼠脑组织梗死百分比[(22.20±2.97)%]明显低于模型组大鼠脑组织梗死百分比[(47.10±10.94)%]，差异有统计学意义( t＝6.946， P<0.05)。lncRNA组大鼠脑组织TNF-α和IL-6炎性因子水平[(146.09±18.87)、(116.98±14.67) pg/ml]明显低于模型组大鼠脑组织TNF-α和IL-6炎性因子水平[(280.26±18.65)、(237.03±16.58) pg/ml]，差异有统计学意义( t＝15.990、17.140， P<0.05)。lncRNA组大鼠脑组织凋亡比例[(28.61±6.65)%]明显低于模型组大鼠脑组织凋亡比例[(52.17±5.21)%]，差异有统计学意义( t＝8.810， P<0.05)。lncRNA组大鼠脑组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达水平[(1.43±0.12)]明显低于模型组大鼠脑组织Caspase-3表达水平(2.27±0.20)，差异有统计学意义( t＝11.140， P<0.05)。lncRNA组大鼠脑组织B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)/bcl-2相关X蛋白(bax)比值(1.48±0.10)明显低于模型组大鼠脑组织bcl-2/bax比值(2.36±0.09)，差异有统计学意义( t＝19.980， P<0.05)。 结论:lncRNA MEG3过表达可显著下调缺血再灌注大鼠的脑组织炎性因子水平，抑制脑组织凋亡水平，进而对缺血再灌注脑组织起保护作用。

目的:探讨母系表达基因3(MEG3)对膀胱癌细胞增殖凋亡的影响及其机制。方法:膀胱癌T24细胞分为对照组(转染空质粒pcDNA3.1)、实验组(转染pcDNA3.1-MEG3)和空白组(生理盐水)。细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞增殖；Hoechst33528核染色检测细胞凋亡；实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测转染后细胞中p53、鼠双微体基因(MDM2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、MEG3的mRNA表达；蛋白质印迹法(Western blot)检测p53、MDM2、bcl-2蛋白表达。双荧光素酶报告系统检测MEG3靶基因p53的转录活性。组间比较采用方差分析及 t检验。 结果:培养24、48、72 h时，实验组细胞的吸光度( A)值为0.26±0.02、0.60±0.03、0.88±0.02；空白组的细胞 A值为0.49±0.07、0.81±0.04、1.71±0.07；对照组的细胞 A值为0.35±0.02、0.71±0.05、1.30±0.09；实验组 A值均明显低于空白组及对照组( F＝6.431、6.470、36.340， P<0.05)。Hoechst33528核染色实验显示，实验组出现明显的凋亡细胞，实验组的细胞凋亡率为(26.72±4.07)%，明显高于空白组和对照组( F＝26.100， P<0.05)。转染48 h后，实验组p53、MEG3的mRNA相对表达为7.24±0.90、30.72±2.15，均明显高于空白组和对照组( F＝51.020、188.900， P<0.05)，而实验组MDM2、bcl-2的mRNA相对表达为0.15±0.04、0.45±0.04，均明显低于空白组和对照组( F＝12.660、19.270， P<0.05)。Western blot结果显示，转染48 h后实验组p53的蛋白相对表达为0.80±0.02，明显高于空白组和对照组( F＝555.400， P<0.05)，实验组MDM2及bcl-2的蛋白相对表达为0.05±0.01、0.06±0.01，低于空白组和对照组( F＝41.730、2.098， P<0.05)。双荧光素酶报告系统检测结果显示，共转染p53启动子和MEG3过表达质粒组比p53启动子和空质粒组荧光素酶活性明显增强，前者为后者的139.99%，两者差异有统计学意义( t＝10.880， P<0.05)。 结论:MEG3过表达可显著抑制膀胱癌细胞增殖，诱导其凋亡，其机制可能与激活p53启动子的转录并调节p53、MDM2及bcl-2的表达有关。

目的:探讨胃癌(GC)患者血清中长链非编码RNA(lncRNA)H19、lncRNA母系表达基因3(MEG3)的表达及临床意义。方法:选取宿迁市第一人民医院2017年7月至2018年8月收治的87例GC患者为GC组，51例良性肿瘤患者为良性肿瘤组，40名体检健康者为健康对照组，测定各组血清lncRNA H19、lncRNA MEG3表达水平，分析其与GC患者临床病理特征和预后的关系及对GC的诊断价值。结果:健康对照组、良性肿瘤组、GC组血清lncRNA H19水平依次递增，lncRNA MEG3水平依次降低( P<0.05)；GC组血清lncRNA H19水平与肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移有关，lncRNA MEG3水平与分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关( P<0.05)；随访13～32(23.54±4.18)个月，87例GC患者存活63例，Kaplan-Meier生存曲线显示，高血清lncRNA H19水平组和低血清lncRNA MEG3水平组总生存率明显低于低血清lncRNA H19水平组和高血清lncRNA MEG3水平组( P<0.05)；多因素Cox回归分析显示，lncRNA H19( HR＝3.442，95% CI：0.089～23.421)为GC患者预后独立危险因素，lncRNA MEG3( HR＝4.386，95% CI：0.934～20.596)为保护因素( P<0.05)；受试者工作特征(ROC)曲线显示，血清lncRNA H19＋lncRNA MEG3(AUC＝0.922，95% CI：0.861～0.962)诊断GC的灵敏度、特异度、准确度均高于血清lncRNA H19(AUC＝0.840，95% CI：0.771～0.904)、lncRNA MEG3(AUC＝0.830，95% CI：0.753～0.890)单独诊断。 结论:GC患者血清lncRNA H19水平明显升高，lncRNA MEG3水平明显降低，与肿瘤发生和发展及预后密切相关，联合检测可提升GC的诊断价值。

目的:观察长链非编码RNA母系表达基因3(MEG3)通过Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力的影响。方法:将胶质瘤细胞(购自美国典型菌种保藏中心细胞库)分为3组，空白对照组(NOR)、基因转染组(MEG3)和基因抑制组(siMEG3)。空白组不做处理，正常培养。基因转染组转染MEG3基因，基因抑制组进行基因干扰处理。应用蛋白质印迹法(Western blot)测定蛋白表达量，应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测基因表达量。方差齐性检验后，组间比较应用 t检验，用Pearson Correlation检验相关性，组间比较采用 χ2分析。 结果:在细胞转染MEG3基因以后，随着培养时间的延长，细胞的凋亡率升至61.05±2.77，高于对照组和基因抑制组( F＝23.543， P<0.05)。MEG3基因被敲除以后，胶质瘤细胞的细胞凋亡率高于空白对照组( P<0.05)。在细胞转染MEG3基因48 h以后，细胞的迁移数量为105.36±15.27低于对照组和基因抑制组( F＝33.350， P<0.05)。当MEG3基因被抑制后，细胞的迁移数量为989.41±11.06，高于空白对照组( F＝40.667， P<0.05)。在细胞转染MEG3基因以后，细胞的侵袭数量为251.25±35.85，低于对照组和基因敲除组( F＝31.167， P<0.05)。MEG3基因被敲除后，细胞的侵袭数量为1 500.00±84.76，高于空白对照组( F＝63.762， P<0.05)。与基因抑制组相比，对照组和基因转染组的c-Jun基因降低，其中基因转染组低于空白对照组( F＝15.426， P<0.05)。 结论:长链非编码RNA MEG3可以通过Wnt/β-catenin信号通路来抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭。

目的:探讨长链非编码核糖核酸-母系印迹表达基因3（RNA MEG3）和DNA去甲基化酶TET2在垂体生长激素（GH）腺瘤侵袭性生长中的作用，为后续探索分子生物学机制提供研究方向。方法:收集2016年1月至2019年11月在大连市中心医院诊断为垂体GH腺瘤并接受经鼻-蝶神经内镜手术治疗切除的患者60例，同时收集10例无神经系统或内分泌系统疾病的颅脑外伤患者的正常垂体前叶组织标本作为对照组。利用实时逆转录-聚合酶链反应检测长链非编码RNA MEG3和TET2在正常脑外伤对照垂体前叶组织、侵袭性和非侵袭性垂体GH腺瘤中的表达，并分析组间差异。同时将年龄、性别纳入研究范围，分析年龄、性别对垂体GH腺瘤侵袭性生长的影响。结果:MEG3和TET2的侵袭性生长与患者年龄、性别无关。侵袭性垂体GH腺瘤和非侵袭性垂体GH腺瘤中长链非编码RNA MEG3的表达量较正常对照组脑组织明显降低。分析组间差异发现，长链非编码RNA MEG3表达水平在正常外伤对照垂体组织、非侵袭性GH腺瘤和侵袭性GH腺瘤中依次降低。相对于正常对照组脑组织，长链非编码RNA MEG3在侵袭性垂体GH腺瘤中的相对表达水平为0.097 ± 0.04，而在非侵袭性垂体GH腺瘤的相对表达水平为0.384 ± 0.141。MEG3表达水平与垂体GH腺瘤的侵袭性生长行为有关（ P<0.05）。侵袭性垂体GH腺瘤和非侵袭性垂体GH腺瘤中DNA去甲基化酶TET2的表达水平较正常对照组脑组织明显降低，三组样本中表达水平逐渐降低（ P<0.05）。提示长链非编码RNA MEG3表达量与DNA去甲基化酶TET2表达水平呈正相关。 结论:长链非编码RNA MEG3和DNA去甲基化酶TET2的低表达与垂体生长GH激素腺瘤的侵袭性密切相关。

目的:探究膀胱尿路上皮癌中长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)的表达情况以及MEG3调控膀胱尿路上皮癌细胞增殖活性的分子机制。方法:通过实时荧光定量PCR检测膀胱尿路上皮癌组织及癌旁正常组织中lncRNA MEG3的表达水平；通过Western blot检测过表达lncRNA MEG3后T24细胞内第10号染色体同源丢失性磷酸酶一张力蛋白基因(PTEN)蛋白水平；CCK8试剂盒检测细胞活性。结果:MEG3的RNA水平在膀胱尿路上皮癌组织中表达显著下调( P<0.01)，PTEN的表达水平也明显降低( P<0.01)。T24中过表达MEG3后，PTEN水平上调，细胞活性降低( P<0.01)；而过表达MEG3并给予PTEN抑制剂时细胞活性则上升。 结论:过表达lncRNA MEG3可通过上调PTEN抑制人膀胱尿路上皮癌T24细胞的细胞增殖活性，有可能成为临床治疗的潜在靶点。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因8(MEG8)通过微小RNA-495-3p(miR-495-3p)调控急性髓性白血病细胞(AML)高迁移率族蛋白A1(HMGA1)表达及对细胞增殖、凋亡的机制.方法:选取50例经确诊为AML患者的骨髓活检标本与52例健康骨髓捐赠者骨髓标本,常规培养人AML细胞株HL-60,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法骨髓单个核细胞中lncRNA MEG8 mRNA表达.将HL-60细胞分为六组,即HL-60组(HL-60 细胞)、si-NC 组(转染 si-NC)、si-lncRNA MEG8 组(转染 si-lncRNA MEG8)、mimic-NC 组(转染 mimic-NC)、miR-495-3p mimic 组(转染 miR-495-3p mimic)、si-lncRNA MEG8+miR-495-3p mimic 组(转染 si-lncRNA MEG8+miR-495-3p mimic),CCK-8法检测培养24、48、72 h各组细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,West-ern blot法检测细胞中HMGA1表达,双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA MEG8、miR-495-3p、HMGA1之间的关系.结果:与对照组相比,观察组lncRNA MEG8 mRNA表达升高(P＜0.05).与miR NC+MEG8 WT组比较,miR-495-3p mimic+MEG8 WT 组荧光素酶活性下降(P＜0.05),与 miR NC+HMGA1 WT 组比较,miR-495-3p mimic+HMGA1 WT 组荧光素酶活性下降(P＜0.05).与 HL-60 组、si-NC 组、mimic-NC 组比较,si-lncRNA MEG8组、miR-495-3p mimic 组和 si-lncRNA MEG8+miR-495-3p mimic组 24、48 h 细胞增殖能力均显著下降,si-lncRNA MEG8+miR-495-3p mimic 组细胞增殖率最低(P＜0.05).与 HL-60 组、si-NC 组和 mimic-NC 组比较,si-lncRNA MEG8+miR-495-3p mimic 组 HL-60 细胞凋亡率高于 si-lncRNA MEG8 组和 miR-495-3p mimic 组(均 P＜0.05).与 HL-60 组、si-NC 组和 mimic-NC 组比较,si-lncRNA MEG8+miR-495-3p mimic 组 HMGA1 蛋白表达低于 si-lncRNA MEG8组和miR-495-3p mimic组(均P＜0.05).结论:沉默lncRNA MEG8可能通过上调miR-495-3p来下调HMGB1,来抑制HL-60细胞的恶性生物学行为,可为探索AML潜在治疗靶点提供了新思路.

[目的]探讨参芪扶正汤治疗桥本氏甲状腺炎(HT)合并甲状腺功能减退的临床疗效,初步分析其治疗机制.[方法]选择秦皇岛市中医医院2020年1月—2023年1月收治的HT患者110例,按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组55例,两组均口服左甲状腺素钠片,在此基础上,对照组口服亚硒酸钠片,观察组口服中药参芪扶正汤,疗程12周.比较两组治疗前后中医证候评分、甲状腺体积和峡部厚度、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb),长链非编码RNA人母系表达基因3(lncRNA MEG3)、微小RNA-17(miR-17)、辅助性T淋巴细胞亚群17(Th17)、调节性T细胞(Treg)含量、Th17/Treg值,并比较两组治疗总有效率.[结果]治疗后观察组中医证候评分低于对照组(P＜0.05),甲状腺体积和峡部厚度均低于对照组(P＜0.05);血清FT3、FT4水平高于对照组(P＜0.05),TSH、TGAb、TPOAb水平低于对照组(P＜0.05);观察组 Th17、Th17/Treg、miR-17 低于对照组(P＜0.05),Treg、lncRNA MEG3 高于对照组(P＜0.05);治疗总有效率高于对照组(P＜0.05).[结论]参芪扶正汤可以改善中医证候和甲状腺功能,调节甲状腺自身抗体,减小甲状腺体积,治疗HT合并甲状腺功能减退效果显著,其机制可能与调节血清lncRNA MEG3、miR-17有关.