目的 建立一种能够快速准确鉴定克罗诺杆菌的实时荧光聚合酶链式反应(PCR)方法,并对食品样品和人工污染样品进行克罗诺杆菌检验.方法 根据克罗诺杆菌DNA旋转酶B亚基(gyrB)基因保守区序列设计引物和探针.通过特异性试验、绝对灵敏度、相对灵敏性试验、抗干扰试验对所建立方法进行方法学验证.采用人工污染样品增菌液进行方法灵敏度试验.结果 本研究建立的方法能够特异性扩增7种克罗诺杆菌,但对与其亲缘关系较近的其他肠杆菌及食品中较为常见的其他致病菌均无扩增,表明本研究建立的方法具有很好的特异性和抗干扰能力.采用阪崎克罗诺杆菌验证绝对灵敏度达1～10pg,相对灵敏度可以达到103CFU/mL.在基因组水平和培养物水平均具有很好的抗干扰能力.人工污染样品在36℃增菌24 h后检测灵敏度可以达到100 CFU/mL.结论 本研究所建立的实时荧光PCR方法对婴幼儿配方食品样品中的克罗诺杆菌的检测具有快速、特异、灵敏和稳定的特点,可以为传统婴幼儿配方食品中的克罗诺杆菌的检验提供技术参考.

目的 了解杭州市富阳区市售食品食源性致病菌污染情况,为加强食品安全监管、防控食源性疾病提供依据.方法 于2019-2022年采集富阳区11类市售食品样品1 176份,依据《2019年国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》和食品微生物学检验国家标准,检测沙门菌、副溶血性弧菌和小肠结肠炎耶尔森菌等9种食源性致病菌,并分析不同类别和来源的食品食源性致病菌检出情况.结果 检出食源性致病菌332份,检出率为28.23％;副溶血性弧菌、阪崎肠杆菌、非O1/非 O139群霍乱弧菌、小肠结肠炎耶尔森菌、创伤弧菌、蜡样芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌和单核细胞增生李斯特菌检出率分别为39.47％、36.92％、35.48％、34.09％、13.85％、12.26％、8.58％、6.65％和2.53％.水产品及其制品、肉与肉制品、地方特色食品、餐饮食品、调味品、特殊膳食用食品、乳与乳制品、蛋与蛋制品、熟制品和其他食品食源性致病菌检出率分别为38.36％、24.90％、15.48％、11.90％、5.68％、5.56％、4.48％、1.67％、1.25％和0.81％;冷冻饮品未检出食源性致病菌.农贸市场、超市、网店、摊贩和餐饮店食源性致病菌检出率分别为24.97％、15.19％、9.88％、7.89％和7.23％.结论2019-2022年富阳区市售食品副溶血性弧菌、阪崎肠杆菌和非O1/非O139群霍乱弧菌检出率较高,水产品及其制品、肉与肉制品和地方特色食品食源性致病菌污染较为严重.

目的 了解阜阳市食品中食源性致病菌污染状况,为食品安全风险评估和控制食源性疾病提供科学依据.方法 按照《2016年国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》中的标准操作程序,对市售7类食品进行金黄色葡萄球菌、沙门菌、蜡样芽胞杆菌、单核细胞增生李斯特菌、阪崎肠杆菌、副溶血性弧菌共6种致病菌检测.结果 共检测样品205份,检出阳性菌株29株,总检出率为14.15％(29/205),其中单核细胞增生李斯特菌10株、蜡样芽胞杆菌9株、副溶血性弧菌6株、沙门菌2株、金黄色葡萄球菌2株.结论 阜阳市售食品存在不同程度的食源性致病菌污染,主要污染菌为副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特菌、蜡样芽胞杆菌.

该研究通过对8种根类饮片共计40份样本需氧菌总数计数(total aerobic microbial count,TAMC)、酵母、真菌总数计数(total yeast and mould count,TYMC),探讨不同作用类型根类中药饮片微生物污染状况;进一步评价样品耐胆盐革兰阴性菌污染载量,并运用革兰阴性杆菌生化鉴定系统对分离到的耐胆盐革兰阴性杆菌进行鉴定.结果显示,85％(34/40)的样品TAMC超过1 000CFU·g-1,30％(12/40)的样品TYMC超过100 CFU·g-1;45％(18/40)的样品检出耐胆盐革兰阴性菌污染,7批样品检测结果N＞1 000 MPN·g-1,从13批样品中分离出阴沟肠杆菌、河生肠杆菌、创伤埃希氏菌、坂崎肠杆菌等16株耐胆盐革兰阴性杆菌,其中阴沟肠杆菌是丹参样品中分离到的优势菌;河生肠杆菌是麦冬样品中分离到的优势菌;假结核耶尔森菌是党参样品中分离到的优势菌.上述研究结果表明,武汉市场中根类饮片存在较严重的微生物污染,微生物种类对药材成分具有一定的选择特异性,依据不同作用类型饮片所含化学成分有针对性地鉴定控制菌类型、制定控制菌检验限度,对提高中药饮片的安全使用具有重要意义.

目的 分析阪崎肠杆菌培养上清蛋白对ICR(2只雄性和7只雌性白化Swiss小鼠,CD-1(R))乳鼠脑上皮细胞的损伤作用.方法 CAYE培养阪崎肠杆菌(IQCC10418),采用硫酸铵逐级沉淀法分离纯化上清蛋白,以不同浓度阪崎肠杆菌培养上清蛋白体外侵袭ICR乳鼠脑上皮细胞,采用MTT法测定脑上皮细胞生长抑制率,采用流式细胞技术检测细胞凋亡率.结果 阪崎肠杆菌培养上清蛋白对ICR乳鼠脑上皮细胞具有明显的生长抑制作用,其侵袭浓度与脑上皮细胞凋亡率呈正相关.结论 阪崎肠杆菌培养上清蛋白可明显抑制ICR乳鼠上皮脑细胞生长,并引起细胞凋亡.

目的 为了解漳州市市售部分食品中微生物及其致病因子的污染水平和趋势,评估漳州市食品安全状况,发现食品安全隐患,及时采取相应的风险管控和监管措施.方法 对2014年-2016年漳州市监测的10类707份样品的食源性致病菌监测数据进行整理分析.结果 707份样品食源性致病菌的总检出率为13.72％,各种致病菌的检出率分别为铜绿假单胞菌(27.42％)、副溶血性弧菌(10.12％)、蜡样芽胞杆菌(7.17％)、阪崎肠杆菌(7.14％)、金黄色葡萄球菌(4.96％)、单核细胞增生李斯特菌(1.80％)、沙门菌(0.47％).结论 漳州市市售部分食品中存在食源性致病菌污染,食品安全监管部门应加强日常监管,确保人民群众的食品安全.

研究谢氏丙酸杆菌(Propionibacterium shermanii,CICC10019)发酵过程中产生丙酸杆菌素对食源性致病菌及芽菜内生菌的抑菌效果.将丙酸杆菌素溶液发酵液用于绿豆芽保鲜,评价了其对绿豆芽菌落总数、pH和挥发性盐基氮的影响.结果表明:谢氏丙酸杆菌发酵时间为120 h时,产酸最多,pH为4.52,还原糖总量消耗大,发酵液抗菌活性最高;丙酸杆菌素溶液对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,ATCC6538)、大肠杆菌(Escherichia coli,ATCC35401)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,ATCC9372)、志贺氏菌(Shigella,ATCC12022)、沙门氏菌(Salmonella,ATCC14028)和副溶血性弧菌(Vibrio Parahemolyticus,ATCC17802)均产生显著的抑菌效应,对阪崎肠杆菌(E.sakazakii)没有抑制作用.用丙酸杆菌素溶液清洗绿豆芽,可将豆芽菌落总数降低1.20 lg CFU/g;4 ℃保存第10d时处理过的豆芽pH为6.20,比对照组降低了1.60;挥发性盐基氮含量为28.70 mg/100 9,为对照组的50％.冷藏条件下芽菜保质期延长了2d.

目的 掌握防城港市食品中食源性致病菌的污染现状和污染水平,为提高食源性疾病的预警和控制能力提供有力的技术依据.方法 2014-2016年在防城港市辖区内抽取12大类食品样品共1 562份样品开展12种食源性致病菌的分离与鉴定.结果 1 562份食品样本中,共检出食源性致病菌224份,总检出率14.34％,检出的菌株种类包括蜡样芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、铜绿假单胞菌、阪崎肠杆菌、沙门氏菌、致泻性大肠埃希菌等7种;12大类样品中的8大类样品检出致病菌,检出率最高的是水产品、餐饮食品、肉及肉制品等3大类食品.结论 防城港市仍然存在不同程度的食源性致病菌污染的情况,同时,反映我市致病菌的污染情况有所增加,特别是散装食品污染较重,针对存在致病菌污染风险较大的食品,有关部门应加大监管力度,防范于未然.

目的 评价山西省晋城地区市售婴幼儿谷类辅助食品微生物污染状况,为监管部门制定措施提供参考.方法 依据有关国家标准和风险监测手册对晋城地区2013—2016年市售婴幼儿谷类辅助食品进行菌落总数﹑大肠菌群﹑阪崎肠杆菌和蜡样芽孢杆菌的检测.结果 112份婴幼儿谷类辅助食品中,菌落总数超标率16.96％,大肠菌群超标率8.03％,致病菌检出率为:阪崎肠杆菌16.07％,蜡样芽孢杆菌21.43％.婴幼儿生制类谷物辅助食品菌落总数超标率53.33％高于婴幼儿谷物辅助食品11.11％和婴幼儿饼干12.50％(χ2=12.785,P=0.001),阪崎肠杆菌检出率46.67％高于婴幼儿谷物辅助食品13.58％和婴幼儿饼干0.00％(χ2=11.571,P=0.002).网购环节菌落总数超标率43.75％高于其他流通环节(χ2=16.299,P<0.001).采自超市样品的蜡样芽孢杆菌检出率44.44％高于其他流通环节,差异有统计学意义(χ2=12.055,P=0.006).以麦粉为原料的谷物辅助食品菌落总数超标率33.33％高于以大米5.45％和小米14.29％为原料类型(χ2=7.012,P=0.016).结论 晋城地区市售婴幼儿谷类辅助食品存在一定的食品安全隐患.

目的 通过连续5年对陕西省婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的监测,调查陕西省婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的污染情况.方法 随机采集省内超市、零售店、农贸市场、网购场所的婴幼儿食品,依照食品微生物检验国家标准GB 4789.40-2010对所采集的婴幼儿食品进行阪崎肠杆菌的检测.结果 2012-2016年共采集婴幼儿食品897份,总检出率为3.01％(27/897).婴幼儿辅助食品的检出率(6.54％)高于婴儿配方食品(1.90％),第二季度的检出率(3.82％)较高,0～6个月婴幼儿配方食品中也检出了阪崎肠杆菌,检出率为1.67％,羊奶粉的检出率(5.51％)高于牛奶粉的检出率(1.08％).结论 陕西省婴幼儿食品存在阪崎肠杆菌污染,婴幼儿辅助食品、0～6个月婴幼儿食品以及羊奶粉中阪崎肠杆菌污染更为严重,需引起监管部门重视,加强监督和管理.