目的:探讨长效生长激素预处理对高龄不孕患者体外受精/卵胞质内单精子显微注射（ in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection，IVF/ICSI）临床结局和安全性的影响。 方法:采用前瞻性、自身前后对照研究分析2018年5月至2019年11月期间在郑州大学第三附属医院生殖医学科进行IVF/ICSI助孕患者的临床资料。选取女方年龄35~39岁，单侧基础窦卵泡数≥5个，基础卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone，FSH）<10 IU/L，且前次IVF/ICSI周期≥50%的Ⅳ级胚胎为A1组，再次助孕添加生长激素6周以上预处理为A2组。平行对照选取同期行IVF/ICSI助孕患者，入组标准同上，第一周期常规IVF/ICSI助孕，未使用生长激素（B1组）；第二周期采用与第一周期相同的控制性超促排卵方案，未使用生长激素（B2组），主要观察指标为累积活产率（cumulative live birth rate，CLBR）。结果:促性腺激素（gonadotropin，Gn）使用时间、人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin，hCG）注射日子宫内膜厚度、hCG注射日雌激素、hCG注射日孕酮水平及IVF受精比例前后自身对照比较差异均无统计学意义（ P均 >0.05）。A2组的Gn用量高于A1组［（3 880.4±902.0）IU比（3 485.6±1 054.0）IU， P=0.012］，B2组的Gn用量高于B1组［（3 377.7±899.2）IU比（3 117.8±891.3）IU， P=0.025］。A2组的可利用胚胎率［55.17%（160/290）］、优质胚胎率［21.38%（62/290）］、冻融胚胎移植临床妊娠率［60.87%（14/23）］、累积妊娠率［61.11%（22/36）］和CLBR［50.00%（18/36）］均显著高于A1组［45.98%（120/261）， P=0.031；12.64%（33/261）， P=0.007；17.39%（4/23）， P=0.003；17.50%（7/40）， P<0.001；2.50%（1/40）， P<0.001］，差异均有统计学意义。B2组与B1组比较，可利用胚胎率、优质胚胎率、新鲜周期临床妊娠率、冻融胚胎移植临床妊娠率差异均无统计学意义（ P均 >0.05），累积妊娠率［34.21%（13/38）比12.50%（5/40）， P=0.023）］、CLBR［26.32%（10/38）比2.50%（1/40）， P=0.003］增加，差异均有统计学意义。A2组与B2组比较，可利用胚胎率［55.17%（160/290）比45.56%（113/248）， P=0.026］、优质胚胎率［21.38%（62/290）比13.31%（33/248）， P=0.014］、累积妊娠率［61.11%（22/36）比34.21%（13/38）， P=0.021］和CLBR［50.00%（18/36）比26.32%（10/38）， P=0.036］显著增高，差异均有统计学意义。A2组卵巢过度刺激综合征（ovarian hyperstimulation syndrome，OHSS）发生率、多胎妊娠率和异位妊娠率较A1组差异均无统计学意义，但A2组流产率小于A1组，差异有统计学意义［18.18%（4/22）比71.43%（5/7）， P=0.016］。A2组应用生长激素前、后Gn启动日和取卵日空腹血糖组间比较差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:生长激素可能改善高龄患者的助孕结局，临床应用相对安全。

目的:探讨第二个线粒体衍生的半胱氨酸蛋白酶激动剂小分子(Smac)类似物LCL161联合天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)抑制剂Z-VAD-FMK诱导细胞发生坏死性凋亡对人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231增殖的影响。方法:体外培养MCF-7、MDA-MB-231细胞株。噻唑蓝(MTT)法检测2种细胞株空白对照组、Z-VAD-FMK组(10 mmol/L)、LCL161(1 μmol/L)组及LCL161+Z-VAD-FMK组存活率，并应用透视电子显微镜观察各组细胞凋亡亚微结构。Nec-1预处理后，MTT法检测2种细胞株空白对照组、Nec-1组(20 mmol/L)，LCL161(1 μmol/L)组及LCL161+Nec-1组细胞存活率。Annexin V-FITC/PI双染法检测空白对照组、LCL161组、Z-VAD组、Nec-1组、LCL161+Z-VAD组、LCL161+Nec-1组、LCL161+Z-VAD+Nec-1组细胞凋亡率。裸鼠成瘤实验观察空白对照组、LCL161组、LCL161+Z-VAD-FMK组裸鼠活体内MCF-7细胞株移植瘤体积和质量。结果:(1)MTT法检测结果显示，LCL161+Z-VAD-FMK组的MDA-MB-231和MCF-7细胞株的存活率均低于其他各组，差异均有统计学意义( P值均<0.01)。透视电子显微镜观察到LCL161+Z-VAD-FMK组细胞具有凋亡和坏死共同存在的特征性形态学改变。(2)Nec-1预处理后，MTT法检测结果显示，与空白对照组及Nec-1组相比较，LCL161组和Nec-1+LCL161组的MDA-MB-231和MCF-7细胞的OD值明显降低，表明其细胞存活率较低，差异均有统计学意义( P值均<0.05)；但LCL-161组与Nec-1+LCL161组比较，MDA-MB-231和MCF-7细胞存活率差异均无统计学意义( P值均>0.05)。(3)Annexin V-FITC/PI双染法结果显示，与其他各组相比，LCL161+Z-VAD-FMK组和LCL161组两种细胞株凋亡率明显增高，LCL161+Z-VAD-FMK组亦高于LCL161组，差异均有统计学意义( P值均<0.01)。(4)15只裸鼠成功建立MCF-7细胞裸鼠成瘤模型，给药后第20天时LCL161组和LCL161+Z-VAD-FMK组肿瘤体积和质量均低于空白对照组，差异均有统计学意义( P值均<0.05)，而LCL161组与LCL161+Z-VAD-FMK组的肿瘤体积和质量差异均无统计学意义( P值均>0.05)。 结论:体外实验验证LCL161+Z-VAD-FMK在乳腺癌细胞中能通过诱发坏死性凋亡抑制肿瘤增殖，但是对雌激素受体阳性乳腺癌体内作用需要进一步验证。

目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)拮抗剂方案促排卵前使用雌激素预处理的必要性及临床效果。方法:回顾性分析2015年1月至2016年12月期间在福建中医药大学福总教学医院生殖医学中心使用拮抗剂方案进行IVF-ET的1042例患者临床资料，根据是否行雌激素预处理分为未预处理组和预处理组，并依据不同卵巢反应（高反应、正常反应、低反应）比较未预处理组与预处理组的临床特征与助孕结局。结果:不论哪种卵巢反应性，经雌激素预处理后血清卵泡刺激素(FSH)、血清促黄体生成素(LH)水平、窦卵泡直径及其变异系数(CV)均显著小于未预处理组( P均<0.001)。未预处理组中卵巢高反应、正常反应和低反应患者的促性腺激素(Gn)使用总量[(1 693.4±569.8) IU，(2 242.5±635.8) IU，(2 686.4±833.8) IU]及Gn使用时间[(9.7±1.1) d，(9.6±1.1) d，(9.5±1.6) d]均显著小于预处理组[(1 897.9±508.0) IU，(2 458.9±759.1) IU，(2 942.1±756.0) IU；(10.8±1.1) d，(10.5±1.4) d，(10.5±1.6) d] ( P<0.001， P=0.019， P=0.029； P<0.001， P<0.001， P<0.001)。雌激素预处理后，正常反应和低反应人群中，Gn使用第5~6日、第7~8日和人绒毛膜促性腺激素(hCG)注射日卵泡不同步率较未预处理组显著降低( P均<0.05)；hCG注射日直径≥14 mm的卵泡数、获卵数、成熟卵数、双原核受精率、优质胚胎数，预处理组均显著大于未预处理组( P均<0.05)。雌激素预处理后，高反应人群Gn使用第5~6日卵泡不同步率(17.7%)较未预处理组(26.7%)显著降低( P=0.012)，但其余治疗过程及实验室相关指标与未预处理组相比差异均无统计学意义( P均>0.05)。正常反应和低反应人群中，获卵数、成熟卵数、优质胚胎数在预处理组和未处理组间差异有统计学意义( P<0.001， P<0.001； P<0.001， P<0.001； P<0.001， P=0.018)。正常反应人群累积妊娠率预处理组(81.3%)显著高于未预处理组(70.5%， P=0.044)，而新鲜胚胎移植临床妊娠率、流产率、全部胚胎冷冻后首次冻融移植妊娠率两组在不同卵巢反应人群中差异均无统计学意义( P均>0.05)。 结论:对于卵巢正常反应与低反应人群，拮抗剂方案促排卵前应用雌激素预处理可以改善卵泡发育的同步性，增加成熟卵子数和优质胚胎数，进而改善妊娠结局，而在高反应人群中并未体现出优势，且增加了Gn使用总量和使用时间，临床应用价值不大。

目的:基于网络药理学方法分析五味子防治稽留流产的潜在作用机制,并通过实验进行验证.方法:运用系统药理学方法查找并从中药系统药理学数据库和分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP,https://old.tcmsp-e.com/tcmsp.php)筛选五味子的活性成分及靶点,查找稽留流产相关基因,确定五味子防治稽留流产的靶点.利用Cytoscape构建"药物成分-靶点"网络,筛选关键化合物.利用String建立蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,并通过Cytoscape-CytoNCA拓扑分析筛选核心靶点.通过对靶基因进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析,以预测其可能的信号通路及机制.最后借助人绒毛膜外滋养层细胞系(HTR-8/SVneo)利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测和蛋白质印迹(Western blotting)检测进行机制验证.结果:从TCMSP数据库中鉴定了 7种五味子活性成分.PPI网络表明雄激素受体(androgen receptor,AR)、雌激素受体(estrogen receptor,ER)、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、核受体辅激活因子 2(nuclear receptor coactivator 2,NCOA2)和乙酰胆碱酯酶(acetylcholine esterase,ACHE)可能是五味子防治稽留流产的核心作用靶点.GO富集分析获得44个细胞生物学过程,KEGG途径富集分析获得2个相关信号通路,主要包括甲状腺激素信号通路和雌激素信号通路;在利用细胞模型验证机制过程中发现,二羟环氧苯并芘[benzo(a)pyren-7,8-dihydrodiol-9,10-epoxide,BPDE]染毒后的细胞中AR、ER和COX-2的蛋白质和(或)mRNA水平高于正常细胞,而先使用五味子乙素(Schisandrin B,Sch B)预处理后再染毒BPDE的细胞中AR、ER和COX-2的蛋白质和(或)mRNA水平均较未用Sch B预处理的细胞降低,而NCOA2和ACHE的蛋白质和(或)mRNA水平变化不明显.结论:五味子可通过抗炎和调节AR、ER发挥防治稽留流产的作用,这一保护作用可能是通过雌激素信号通路来实现的.

目的 探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)预处理对行激素替代方案(HRT)冻胚移植的子宫内膜异位症患者妊娠结局的影响.方法 回顾性分析 2016 年 1 月至 2019 年 12 月在山东大学附属生殖医院接收冷冻胚胎移植(FET)的子宫内膜异位症患者 643 例,按照子宫内膜准备方案分为:实验组(GnRH-a+HRT组,261 个冻胚移植周期)与对照组(HRT组,382 个冻胚移植周期).比较 2 种内膜准备方案的FET妊娠结局.主要结局指标包括活产率、流产率.采用二元 Logistic回归分析矫正影响妊娠结局的混杂因素.结果 两组患者基础黄体生成素(LH)、基础雌激素(E2)、基础泌乳素(PRL)、基础促甲状腺激素(TSH)、促性腺激素(Gn)天数、不孕类型等一般临床资料均无统计学差异(P>0.05).而GnRH-a+HRT组的年龄、基础卵泡刺激素(FSH)、Gn总量及人绒毛膜促性腺激素(HCG)日内膜厚度高于HRT组,抗苗勒管激素(AMH)、窦卵泡数(AFC)、体质量指数(BMI)、基础雄激素(T0)低于HRT组,差异有统计学意义(P<0.05).调整各种混杂因素后显示,GnRH-a+HRT组患者流产率下降(OR=0.607,95%CI=0.378～0.973,P=0.038),但活产率差异无统计学意义.高龄(OR=0.931,95%CI=0.891～0.973,P=0.002)、高FSH水平(OR=0.924,95%CI=0.855～0.998,P=0.043)与较低的活产率相关.结论 对行FET的子宫内膜异位症患者行替代方案前进行GnRH-a预处理,能够降低流产率,但尚未能显著提高活产率,仍需大样本研究进一步证实.

目的 观察超声影像组学预测雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)双阴性乳腺癌的价值.方法 回顾性分析经病理确诊的342例乳腺癌359个病灶,326例可见单发、16例见多发病灶;其中119例见127个ER(-)PR(-)病灶、223例见232个其他病灶[36例共36个ER(+)PR(-)、2例共2个ER(-)PR(+)、185例共194个ER(+)PR(+)病灶];按照7∶3比例将病灶分为训练集(n=251)和测试集(n=108).基于术前超声资料提取1314个病灶影像组学特征,经预处理后获得1205个特征;采用最小绝对收缩和选择算子(LASSO)算法筛选最佳影像组学特征,并利用支持向量机以训练集数据进行训练,构建预测ER及PR双阴性乳腺癌的影像组学模型;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估模型的诊断效能.结果 共筛选出37个最佳影像组学特征,以之构建的影像组学模型预测训练集和测试集ER及PR双阴性乳腺癌的AUC分别为0.872[95％CI(0.820,0.924)]和0.867[95％CI(0.798,0.936)].结论 超声影像组学可有效预测ER及PR双阴性乳腺癌.

目的 探讨缺氧环境下外源性雌激素对子宫内膜癌细胞上皮间充质转化(EMT)的影响及其机制.方法 选择雌激素受体阳性的子宫内膜癌细胞Ishikawa,体外传代培养.取传3代、对数生长期、生长状态良好的Ishikawa细胞进行后续实验.取部分Ishikawa细胞,于0.5%O2、5%CO2、94.5%N2环境中缺氧预处理2 h,随机分为siRNA-缺氧诱导因子1α(HIF-1α)组与siRNA-NC组、HIF-1α过表达组与Control组,siRNA-HIF-1α组、siRNA-NC组、HIF-1α过表达组分别转染siRNA-HIF-1α、siRNA-NC、HA-HIF-1α-pcDNA3,Control组不予转染;另取部分Ishikawa细胞,于0.5%O2、5%CO2、94.5%N2环境中缺氧预处理2 h后加入0.01 μmol/L β-雌二醇,随机分为Estrogen组、Estrogen + siRNA-NC组、Estrogen + siRNA-HIF-1α组以及Control组、Estrogen + HIF-1α过表达组,Estrogen + siRNA-NC组、Estrogen + siRNA-HIF-1α组、Estrogen + HIF-1α过表达组分别转染siRNA-NC、siRNA-HIF-1α、HA-HIF-1α-pcDNA3.转染 24 h,收集各组细胞,分别采用实时荧光定量PCR法、Western blotting法检测HIF-1α及EMT相关基因(E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、TGF-β1)mRNA和蛋白表达.结果 与siRNA-NC组比较,siRNA-HIF-1α组HIF-1α、N-cadherin、β-catenin、TGF-β1 mRNA和蛋白相对表达量均降低,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均<0.05);与Control组比较,HIF-1α过表达组HIF-1α、N-cadherin、β-catenin、TGF-β1 mRNA和蛋白相对表达量均升高,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均<0.05).Estrogen + siRNA-HIF-1α组HIF-1α、N-cadherin、β-catenin、TGF-β1 mRNA和蛋白相对表达量均低于Estrogen + siRNA-NC组和Estrogen组,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均高于Estrogen + siRNA-NC组和Estrogen组(P均<0.05);Estrogen + HIF-1α过表达组HIF-1α、N-cadherin、β-catenin、TGF-β1 mRNA和蛋白相对表达量均高于Estrogen组和Control组,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均低于Estrogen组和Control组(P均<0.05).结论 缺氧环境下外源性雌激素可能通过激活HIF-1α来促进子宫内膜癌细胞EMT.

目的:评价拮抗剂方案中不同卵巢反应患者雌激素预处理的效果.方法:检索数据库(PubMed、Web of Science、中国知网、万方数据库)中关于雌激素预处理在拮抗剂方案中作用的研究进行meta分析.结果:纳入7篇随机临床对照研究、2篇回顾性研究.为了进一步探索异质性的来源,采用亚组分析,主要根据研究实际纳入人群的卵巢反应性进行亚组分析,分为低反应、非低反应、混合反应组;在促性腺激素(gonadotropin hormone,Gn)天数研究时根据用药方式分为洗脱组(停用雌激素预处理5～6 d后开始促排卵)及非洗脱组(雌激素预处理用至促排卵启动前一日)进行分析.在非洗脱组中[WMD=1.07,95%CI(0.83,1.31),I2= 66%]预处理后Gn天数显著增加.在洗脱组中[WMD=-0.12,95%CI(-0.45,0.21),I2=0%]Gn天数无明显变化.预处理在低反应亚组中均不影响获卵数[WMD=0.46,95%CI(-0.23,1.16),I2= 81%]、临床妊娠率[RR=0.77,95%CI(0.55,1.06),I2=73%]及周期取消率[RR=0.80,95%CI(0.40,1.61),I2=83%];在非低反应组中均不影响获卵数[WMD=0.21,95%CI(-0.69,1.11),I2=22%]、临床妊娠率[RR=0.94,95%CI(0.77,1.14),I2=41%]、活产率[RR=0.82,95%CI(0.62,1.08),I2=0%]及周期取消率[RR=0.89,95%CI(0.54,1.47),I2=2%].结论:拮抗剂方案中雌激素预处理(非洗脱)会增加Gn天数,不改善非低反应及低反应者体外受精结局.雌激素预处理的应用还需谨慎对待.

目的:观察天香丹(TXD)胶囊通过雌激素受体(ER)α介导的蛋白激酶B(AKT)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)通路对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的改善作用,并探讨其作用机制.方法:将70只SD雌性大鼠随机分为正常对照组(Control组,10只)和去卵巢组(OVX组,60只),OVX组摘除双侧卵巢.将OVX组分为假手术组(Sham组)、模型组(MIRI组)及雌二醇组(OVX+MIRI-E2组,0.8 mg/kg)、OVX+MIRI-TXD高剂量组(0.6 g/kg)、OVX+MIRI-TXD中剂量组(0.4 g/kg)、OVX+MIRI-TXD低剂量组(0.2 g/kg),每组10只,连续灌胃给药60 d.通过结扎心脏冠状动脉左前降支30 min后再灌注60 min方法建立大鼠心肌缺血-再灌注损伤模型.记录各组大鼠心脏血流动力学指标;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织形态学变化,微量法检测大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、一氧化氮(NO)水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清雌二醇水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测心肌组织雌激素受体ERα、AKT蛋白磷酸化水平、eNOS磷酸化水平.结果:与MIRI组比较,OVX+MIRI-E2组及OVX+MIRI-TXD各剂量组大鼠心脏血流动力学指标、心肌组织形态结构改善,血清LDH、CK和MDA含量降低,NO、SOD和ERα蛋白含量升高,抗氧化能力、AKT和eNOS磷酸化水平增强(P<0.05).结论:TXD胶囊预处理可减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤,其机制可能与激活ERα介导的AKT/eNOS信号通路、增加内源性NO释放、舒张血管、减轻心脏负荷和心肌需氧量、对心肌缺血的保护作用有关.

目的 观察肌醇、二甲双胍预处理配合促排卵方案治疗肥胖型多囊卵巢综合征(PCOS)的效果,并分析其对性激素水平、妊娠结局的影响.方法 选取2020年2月至2022年2月河南省生殖健康科学技术研究院收治的129例肥胖型PCOS患者为研究对象,采用随机数表法分为对照组64例和研究组65例.对照组患者予以二甲双胍+促排卵治疗,研究组患者予以肌醇+促排卵治疗,连续用药3个治疗周期.比较两组患者的治疗效果,以及预处理前后的体格指标[体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)]、糖脂代谢指标[空腹血糖(FPG)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)]、胰岛素功能[空腹胰岛素(FINS)、稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]、性激素[雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、卵泡雌激素(FSH)、睾酮(T)]和病情相关指标[胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)、白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-10(IL-10)、晚期氧化蛋白产物(AOPP)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)]水平;同时比较两组患者的排卵情况、妊娠结局和不良反应情况.结果 研究组患者的治疗总有效率为95.38%,明显高于对照组的82.81%,差异有统计学意义(P<0.05);预处理后,研究组患者的BMI、WHR、FPG、TG、TC、FINS、HOMA-IR分别为(22.32±0.58)kg/m2、0.78±0.08、(4.35±0.68)mmol/L、(0.95±0.28)mmol/L、(3.95±0.66)mmol/L、(11.38±2.79)μIU/mL、2.25±0.45,明显低于对照组的(23.63±0.71)kg/m2、0.82±0.09、(4.62±0.71)mmol/L、(1.06±0.32)mmol/L、(4.22±0.83)mmol/L、(13.49±3.04)μIU/mL、2.77±0.62,差异均有统计学意义(P<0.05);预处理后,研究组患者的E2、LH、FSH、T、IL-18、AOPP水平分别为(26.74±6.91)pg/mL、(4.65±1.25)mIU/mL、(4.06±0.81)U/L、(23.68±6.89)ng/mL、(160.32±43.44)ng/L、(35.62±8.87)μmol/L,明显低于对照组的(33.18±7.06)pg/mL、(5.16±1.32)mIU/mL、(4.41±1.16)U/L、(29.71±7.91)ng/mL、(230.69±66.86)ng/L、(60.75±15.25)μmol/L;IGFBP-1、IL-10、GSH-PX水平分别为(42.21±8.07)ng/mL、(10.52±2.17)pg/mL、(174.06±48.02)μg/mL,明显高于对照组的(26.19±6.06)ng/mL、(8.23±2.04)pg/mL、(148.21±39.40)μg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);预处理后,研究组患者的优势卵泡、排卵率、妊娠率、宫颈黏液评分分别为(1.80±0.24)个、71.67%、38.33%、(11.78±1.02)分,明显高于对照组的(1.69±0.20)个、53.33%、56.67%、(7.16±0.93)分,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗期间,研究组患者的不良反应发生率为4.62%,明显低于对照组的15.63%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 与二甲双胍比较,采用肌醇预处理配合促排卵治疗肥胖型PCOS可改善患者的糖脂代谢、胰岛素功能,纠正性激素紊乱状态,提高妊娠率,临床疗效显著,且不良反应少.