目的:探讨天香丹胶囊通过ERα调节NLRP3对H9C2细胞缺氧复氧损伤的影响.方法:体外培养心肌细胞,分为空白对照组、模型组、雌激素(E2)阳性对照组及天香丹胶囊含药血清低(5％)、高(15％)浓度组和天香丹胶囊含药血清(15％)+AZD9496(雌激素抑制剂)组、天香丹胶囊含药血清(15％)+MCC950(NLRP3抑制剂)组.CCK-8测定细胞活力;DCFH-DA荧光探针测定心肌细胞活性氧(ROS)水平;ELISA检测细胞上清中LDH、IL-1β、IL-18水平;Hoechst33342/PI双染评价细胞焦亡情况;Western Blot检测雌激素受体ERα和焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、GSDMD的表达.结果:与空白对照组比较,模型组细胞活力显著降低,ROS、LDH、IL-1β、IL-18水平及焦亡相关蛋白表达显著升高(P＜0.05),PI红色荧光明显增强.与模型组比较,天香丹胶囊含药血清低、高浓度组细胞活力显著升高,ROS、LDH、IL-1β、IL-18水平及焦亡相关蛋白表达显著降低(P＜0.05),PI红色荧光明显减弱,天香丹胶囊含药血清高浓度组细胞ERα蛋白表达显著升高(P＜0.05).AZD9496可逆转天香丹胶囊的作用.结论:天香丹胶囊可缓解心肌细胞缺氧复氧后损伤,减轻炎症反应,可能与调节ERα和NLRP3焦亡机制有关.

目的 对畅脉乐胶囊(Ⅰ)质量进行评价.方法 分析采用 Thermo Scientific AccucoreTM XL C18 色谱柱(4.6 mm×250 mm,4 μm);流动相甲醇-乙腈-0.5%磷酸,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温35℃;检测波长230、280 nm,测定天麻素、丹参素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、3′-羟基葛根素、葛根素、3′-甲氧基葛根素、葛根素芹菜糖苷、芍药苷、大豆苷、迷迭香酸、紫草酸、异槲皮苷、芒柄花苷、大豆苷元、丹酚酸B、毛蕊异黄酮的含量,建立HPLC指纹图谱,测定相似度.结果 16 种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 0),平均加样回收率 87.4%～103.9%,RSD 0.54%～3.10%.在 230 nm处,10 批样品指纹图谱相似度为 0.954～0.999,而在280 nm处其差异较明显.3′-羟基葛根素、葛根素、3′-甲氧基葛根素、葛根素芹菜苷、大豆苷、大豆苷元是主要差异成分,芍药苷、异槲皮苷含量在各批样品中稳定.结论 该方法简便、准确、可靠,可用于畅脉乐胶囊(Ⅰ)的质量控制.

目的:观察天香丹(TXD)胶囊通过雌激素受体(ER)α介导的蛋白激酶B(AKT)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)通路对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的改善作用,并探讨其作用机制.方法:将70只SD雌性大鼠随机分为正常对照组(Control组,10只)和去卵巢组(OVX组,60只),OVX组摘除双侧卵巢.将OVX组分为假手术组(Sham组)、模型组(MIRI组)及雌二醇组(OVX+MIRI-E2组,0.8 mg/kg)、OVX+MIRI-TXD高剂量组(0.6 g/kg)、OVX+MIRI-TXD中剂量组(0.4 g/kg)、OVX+MIRI-TXD低剂量组(0.2 g/kg),每组10只,连续灌胃给药60 d.通过结扎心脏冠状动脉左前降支30 min后再灌注60 min方法建立大鼠心肌缺血-再灌注损伤模型.记录各组大鼠心脏血流动力学指标;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织形态学变化,微量法检测大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、一氧化氮(NO)水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清雌二醇水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测心肌组织雌激素受体ERα、AKT蛋白磷酸化水平、eNOS磷酸化水平.结果:与MIRI组比较,OVX+MIRI-E2组及OVX+MIRI-TXD各剂量组大鼠心脏血流动力学指标、心肌组织形态结构改善,血清LDH、CK和MDA含量降低,NO、SOD和ERα蛋白含量升高,抗氧化能力、AKT和eNOS磷酸化水平增强(P<0.05).结论:TXD胶囊预处理可减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤,其机制可能与激活ERα介导的AKT/eNOS信号通路、增加内源性NO释放、舒张血管、减轻心脏负荷和心肌需氧量、对心肌缺血的保护作用有关.

目的 观察天香丹胶囊预处理对去卵巢合并心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌损伤的保护作用.方法 将 60 只SD雌性大鼠摘去卵巢后随机分为假手术组、模型组、对照组和低、中、高剂量实验组,每组 10 只.假手术组和模型组均灌胃给予等量双蒸水;对照组按0.8 mg·kg-1 的剂量灌胃给予雌二醇溶液;低、中、高剂量实验组分别按 200.0、400.0 和 800.0 mg·kg-1 的剂量灌胃给予天香丹溶液.6 组大鼠连续给药60 d.末次给药 12h后,建立缺血再灌注模型;其中假手术组只穿线不结扎.另取 10 只正常SD雌性大鼠为正常组(不做任何处理).用伊文氏蓝-氯化三苯基四氮唑双重染色检测大鼠心肌梗死率,用蛋白质印迹法检测组织中活化胱天蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)、环腺苷酸反应元件结合蛋白(CREB)等相关蛋白的表达情况.结果 高剂量实验组、对照组、模型组、假手术组和正常组的心肌梗死率分别为(21.61±2.74)%、(22.08±4.68)%、(61.84±3.92)%、(1.02±0.02)%和(0.85±0.13)%,cleaved caspase-3 蛋白相对表达水平分别为 0.52±0.03、0.70±0.05、0.98±0.03、0.54±0.07 和0.44±0.03,磷酸化CREB蛋白相对表达水平分别为1.12±0.06、1.16±0.04、0.70±0.05、1.32±0.04和 1.45±0.03.模型组的上述指标与高剂量实验组、对照组、假手术组和正常组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05 或P＜0.01).结论 天香丹胶囊预处理可以改善I/R引起的大鼠心肌损伤,其作用机制可能是上调环腺苷酸/蛋白激酶A/环腺苷酸反应元件结合蛋白(cAMP/PKA/CREB)通路相关蛋白表达,下调cleaved-caspase-3 蛋白表达,进而实现抑制心肌细胞凋亡.

吴某,女,18岁.主诉停经6个月,无腹痛.初潮年龄13岁.末次月经2017年4月16日.曾间断服用黄体酮胶囊治疗,未效.2017年10月31日初诊:形丰,面色少华,倦怠乏力,舌质淡红、苔薄白,脉沉细.诊断为闭经.证属肾气不足,脾胃亏虚.滋肾健脾育经汤加减:肉苁蓉、川芎、玫瑰花各6g ,熟地黄、麸白术、甘松、炒赤芍、炒白芍、醋香附、月季花各10g ,砂仁3g ,当归、厚朴各12g ,桃仁、红花各5g ,益母草、路路通、菟丝子、桑寄生各15g ,小茴香3g.7剂.11月7日二诊:诉头晕乏力,守原方,去桃仁、麸白术,加丹参15g ,党参8g.7剂.11月14日三诊:月经未转,上方去路路通、麸白芍、玫瑰花,加梅花、桃仁各5g ,鸡血藤15g.7剂.11月21日四诊:经水仍未转,上方去桃仁、鸡血藤、玫瑰花,加枸杞子、牛膝各10g ,续断9g.7剂.11月28日五诊:喜诉月经已来潮,量少,6天干净.上方去牛膝、炒赤芍,加郁金10g ,砂仁3g.7剂.随访3个月,月经来潮,周期稳定,量色正常.

目的 探讨糖尿病眼底出血应用和血明目片治疗的预后.方法 将许昌口腔医院2017年4月-2018年12月的100例糖尿病眼底出血患者,按照随机数表法分组,对照组采取常规药物治疗,给予控制血糖治疗,并给予香丹注射液治疗,每天静脉滴注20 mL.同时在治疗前10天给予云南白药胶囊口服,每次0.5g,每天3次,10天之后改为口服益脉康片,每次服用80 mg,每天3次,根据患者情况服用1～3个月.观察组在对照组治疗的基础上给予口服和血明目片,每次5片,每天3次,根据患者情况服用1～3个月.比较两组治疗效果;视网膜出血吸收的时间、视力改善的时间;治疗前后患者视力水平、简明健康量表分值;不安全事件.结果 观察组有效率(100％)高于对照组(78％),差异有统计学意义(P＜0.05).治疗前对照组、观察组视力水平、简明健康量表分值相近,无显著性差异(P＞0.05);治疗后观察组视力水平、简明健康量表分值变化幅度更大,差异有统计学意义(P＜0.05).观察组视网膜出血吸收的时间、视力改善两行的时间[(10.11±1.21)天、(13.13 ±0.24)天]和对照组[(14.50±2.13)天、(16.23±1.51)天]比较有统计学意义(P＜0.05),观察组和对照组不安全事件相似,无显著性差异(P＜0.05).结论 常规药物联合和血明目片治疗糖尿病眼底出血效果确切,可缩短治疗时间和改善视力,改善生活质量.

目的 探究天香丹胶囊含药血浆对氧化损伤心肌细胞的影响.方法 制备含药血浆和原代培养心肌细胞,用H2O2诱导心肌细胞建立氧化损伤模型,将细胞分为对照组、模型组(100μmol/L H2O2)、空白血浆组预处理24 h、天香丹胶囊含药血浆低、中、高浓度组预处理24 h,用MTT法检测天香丹胶囊含药血浆对100μmol/L H2O2氧化损伤心肌细胞2 h的细胞活力;Hoechst 33342染色法观察心肌细胞凋亡形态变化;生化试剂法测定心肌细胞中总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量;West-ern blot法检测心肌细胞中核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)和三磷酸肌醇受体(Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor,IP3R)的蛋白表达水平.结果 与对照组比较,模型组心肌细胞的存活率、T-AOC和SOD水平显著降低并有明显凋亡形态变化,心肌细胞中MDA含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,天香丹胶囊含药血浆组预处理心肌细胞后,可明显增强心肌细胞活力,提高T-AOC和SOD水平,减轻细胞凋亡变化和降低MDA含量,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot结果显示,与对照组比较,模型组心肌细胞的Nrf2蛋白表达水平明显降低,而IP3R蛋白表达水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,天香丹胶囊含药血浆组预处理心肌细胞后,可明显提高Nrf2的表达水平,降低IP3R的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05).结论 天香丹胶囊含药血浆对氧化损伤的心肌细胞有保护作用.

经前烦躁障碍症(PMDD)是育龄期女性在黄体期发生并在月经开始后几天内消失的一种常见精神类疾病.PMDD病因病机复杂,虽至今尚未明确,但大量研究显示,PMDD发病机制主要定位于脑中枢,与导致兴奋性神经毒性发生的谷氨酸、γ-氨基丁酸、5-羟色胺、钙稳态等密切相关;同时发现,治疗PMDD的药物经前平颗粒、白香丹胶囊、氟西汀等药理作用均涉及抗兴奋性神经毒性作用.

目的 研究天香丹胶囊调控雌激素核效应抗心肌缺血作用的机制.方法 建立去卵巢心肌缺血再灌注大鼠双模型,取SD雌性大鼠70只(200±50)g,随机分为空白组、去卵巢组、去卵巢缺血再灌注组、雌二醇干预组(E2,0.8×10-3 g·kg-1·d-1),天香丹干预高、中、低剂量组(天香丹胶囊,0.8×10-3、0.6×10-3、0.2×10-3 g·kg-1·d-1),建立去卵巢大鼠模型,每组每天给药1次,灌胃60 d,可逆性结扎大鼠心脏左前降支使心肌缺血30 min,再灌注180 min.实验过程中心电图实时监测,记录各组大鼠的Ⅱ导联心电图;检测血清中雌激素和心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平;伊文氏蓝-2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)双染色法测定心脏梗死面积;HE染色观察心肌组织形态;Western blot分析心肌组织细胞核中雌激素受体α(ERα)、热休克蛋白70(HSP70)、BCL2-Associated X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)蛋白的表达.结果 天香丹干预60 d后,与去卵巢缺血再灌注组比较,雌二醇干预组和天香丹高、中、低干预组雌激素水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与去卵巢缺血再灌注组比较,雌二醇干预组和天香丹干预组雌激素水平显著升高(P<0.05),而cTnI水平降低(P<0.05),心肌梗死面积减小,HE染色心脏组织呈现出不同程度的改善,此外,雌二醇干预组和天香丹干预组心肌组织细胞核蛋白中ERα、HSP70、Bcl-2、Bcl-2/Bax蛋白的表达显著高于缺血再灌注模型组,差异有统计学意义(P<0.05),Bax蛋白的表达显著低于缺血再灌注模型组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 天香丹胶囊调控雌激素核效应可通过激活雌激素核受体α和增加HSP70的表达,从而抑制细胞凋亡发挥抗心肌缺血作用.

基于一测多评法建立高效液相色谱法同时测定冠心舒通胶囊(广枣、丹参、丁香、冰片、天竺黄)中没食子酸、丹参素钠、原儿茶酸、原儿茶醛、香草醛、迷迭香酸、丹酚酸B、丁香酚、隐丹参酮、丹参酮ⅡA的含量.采用Agilent C18(ZORBAX Extend-RPC18,250 mm×4.6 mm,5 pm)色谱柱,以甲醇-0.4％甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,检测波长280 nm,柱温35℃,进样量5 μL.以原儿茶酸为内参物,计算相对校正因子并进行耐用性考察,通过一测多评法和外标法计算10个成分的含量.结果表明,10种成分专属性、线性关系、精密度、重复性、稳定性均良好,平均加样回收率98.20％～103.47％,RSD 1.26％～2.84％.计算其他9个成分的相对校正因子、含量(mg·g-1)分别为没食子酸(0.759,227.381)、丹参素钠(3.630,3.283)、原儿茶醛(0.185,0.150)、香草醛(0.532,65.213)、迷迭香酸(4.240,1.035)、丹酚酸B(3.245,18.204)、丁香酚(1.729,9.265)、隐丹参酮(0.691,1.449)、丹参酮ⅡA(0.702,1.939).一测多评法所得结果与外标法接近,相对误差在-3％～3％之间.表明该方法稳定可靠,可用于冠心舒通胶囊中10个成分的含量测定.