目的:研究鞘氨醇激酶1（SphK1）过表达在丙烯酰胺（ACR）致神经细胞损伤中的保护作用以及影响。方法:将纯度为99%的ACR用生长液制备成浓度为1.25、2.5 mmol/L溶液；将人神经母细胞瘤（SH-SY5Y）细胞分为对照组（NC组）、实验组和SphK1激活剂组。NC组加入（12-）十四酸佛波酯（-13-）乙酸盐（PMA）溶液[SphK1特异性激活剂，二甲基亚砜（DMSO）配制，终浓度为100 nmol/L]。实验组给予终浓度分别为1.25和2.5 mmol/L的ACR溶液，染毒24 h。SphK1激活剂组在实验组染毒浓度的基础上，每个染毒浓度分别加入PMA溶液，其他处理与实验组一致。各组采用免疫印迹（Western blot）法检测SphK1蛋白的表达含量；CCK-8检测SH-SY5Y细胞的增殖活性；Hoechst33342法观察神经细胞形态学改变；流式细胞术分析细胞的凋亡。结果:与NC组比较，实验组和SphK1激活剂组细胞SphK1蛋白表达均降低，差异有统计学意义（ P<0.05）。与实验组比较，SphK1激活剂组细胞在1.25和2.5 mmol/L浓度的SphK1蛋白表达均增高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。与NC组比较，实验组和2.5 mmol/L浓度SphK1激活剂组的细胞相对生长存活率均更低，差异有统计学意义（ P<0.05）。与实验组比较，SphK1激活剂组细胞相对生长存活率均更高，差异有统计学意义（ P<0.05）。随着染毒剂量的增加，实验组细胞在ACR 1.25 mmol/L浓度时呈现出早期凋亡、在ACR 2.5 mmol/L浓度时呈现出晚期凋亡的形态学特征。与NC组比较，实验组和SphK1激活剂组在ACR 2.5 mmol/L浓度时凋亡率差异均有统计学意义（ P<0.05）；与实验组比较，SphK1激活剂组在ACR 2.5 mmol/L浓度时细胞凋亡率更低，差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:SphK1过表达可以对丙烯酰胺引起的神经细胞损伤起到保护作用。

目的:探讨盐酸氯丙嗪对人弥漫大B淋巴瘤细胞增殖、凋亡和周期阻滞的影响及其可能的机制。方法:于2019年1月，不同浓度盐酸氯丙嗪分别处理OCI-LY3和TMD8细胞72 h，用阿尔玛蓝法检测盐酸氯丙嗪对增殖的影响；经流式细胞术分别应用碘化丙啶双染和PI检测盐酸氯丙嗪对其凋亡和周期阻滞的影响；荧光实时定量PCR检测盐酸氯丙嗪对细胞周期蛋白依赖激酶抑制蛋白P21、P27、细胞周期蛋白D1（CyclinD1）以及鞘氨醇-1-磷酸受体2（S1PR2）的mRNA水平的影响；Western blot检测盐酸氯丙嗪对P21、P27以及S1PR2的蛋白水平的影响。结果:OCI-LY3和TMD8细胞随盐酸氯丙嗪的浓度增加，72 h细胞增殖抑制率增加，24 h细胞凋亡和G1期周期阻滞增加。与对照组比较，10 μmol/L盐酸氯丙嗪处理12 h后，OCI-LY3和TMD8细胞P21、P27和S1PR2 mRNA表达水平增加（ P<0.05），CyclinD1 mRNA表达差异无统计学意义（ P>0.05）；盐酸氯丙嗪处理24 h后，OCI-LY3和TMD8细胞的P21、P27和SIPR2蛋白表达水平增加（ P<0.05）。 结论:盐酸氯丙嗪特定浓度下可能通过促进S1PR2的表达来抑制ABC型弥漫大B淋巴瘤细胞增殖，促进细胞凋亡和G1期的周期阻滞。

急性髓细胞白血病(AML)是起源于造血干细胞(HSC)的常见血液系统恶性肿瘤。传统化疗和造血干细胞移植(HSCT)是治疗AML的主要手段。由于AML患者的总体生存(OS)率低、复发率高，因此提高其疗效及改善预后是目前临床亟待解决的难题。鞘磷脂代谢产物1-磷酸鞘氨醇(S1P)是一种具有生物活性的脂质信号分子，参与调控细胞生长、存活、分化、凋亡、自噬及耐药等。多项研究结果表明，AML患者S1P及其相关限速酶异常表达，与其疾病进展、化疗耐药及不良预后相关。笔者拟就S1P的合成与代谢、S1P在AML细胞中的生物学功能，以及鞘氨醇激酶(SPHK)/S1P相关信号通路调控AML细胞耐药的最新研究进展进行阐述，旨在深入了解S1P介导AML耐药的机制，为探索靶向S1P的治疗方案及改善患者预后提供参考。

目的:探讨1-磷酸鞘氨醇(S1P)通过1-磷酸鞘氨醇受体2(S1P2)及RhoA/Rho激酶通路对人胎儿肺成纤维细胞(HFL-1)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的作用。方法:本研究为实验研究。培养14~19代HFL-1。应用蛋白质印迹法分别检测不同浓度(10 -7 mol/L、10 -6 mol/L、10 -5 mol/L)S1P刺激下HFL-1中α-SMA的表达，10 -6 mol/L S1P及10 -6 mol/L S1P2拮抗剂JTE-013刺激下HFL-1中α-SMA、RhoA的表达，10 μg/L RhoA抑制剂C3胞外酶、10 -5 mol/L Rho激酶抑制剂Y27632、10 -6 mol/L S1P刺激下HIF-1中α-SMA的表达。 结果:S1P 10 -6 mol/L组、S1P 10 -5 mol/L组α-SMA的相对表达量0.641(0.591，0.747)、0.662(0.633，0.810)较空白对照组0.116(0.089，0.456)升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。S1P组α-SMA的相对表达量0.907(0.466，1.629)较空白对照组0.540(0.210，0.807)、JTE-013组0.296(0.182，0.598)升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。S1P10 -6 mol/L 5 min组RhoA的相对表达量0.931(0.660，0.977)较S1P 10 -6 mol/L 0 min组0.060(0.023，0.061)升高；S1P 10 -6 mol/L 10 min组RhoA的相对表达量0.086(0.016，0.097)较S1P 10 -6 mol/L 5 min组RhoA的相对表达量0.931(0.660，0.977)降低；S1P 10 -6 mol/L组RhoA的相对表达量2.221(2.063，3.061)较空白对照组0.833(0.092，1.393)、JTE-013 10 -6 mol/L组0.619(0.145，0.967)、JTE-013 10 -6 mol/L+S1P 10 -6 mol/L组0.984(0.354，1.442)升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。S1P组α-SMA的相对表达量0.738(0.389，0.774)较空白对照组0.120(0.057，0.120)、C3胞外酶组0.073(0.027，0.093)高，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。Y27632+S1P组α-SMA的相对表达量0.142(0.014，0.430)较空白对照组0.544(0.489，0.632)低，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:S1P在毫摩尔水平浓度通过S1P2及其下游信号RhoA/Rho激酶通路调控HFL-1中α-SMA的表达。

回顾性分析105例行手术切除且经病理确诊的胰腺癌患者的临床资料，探讨胰腺癌组织CAMK1、SPHK1的表达与临床病理特征及预后的关系。结果显示，胰腺癌组织CAMK1、SPHK1均呈高表达，其高表达组的临床分期，远处转移及脉管浸润与低表达组比较，差异均有统计学意义，且高表达与患者的总生存期短有关，是影响胰腺癌患者预后的生物学指标。

目的:探讨鞘氨醇激酶/1-磷酸鞘氨醇(SphK/S1P)信号通路在肝脏缺血再灌注损伤(IRI)中肝窦微循环的保护作用。方法:2015年9月至2019年9月，将40只适龄雄性大鼠(购自常州卡文斯实验动物有限公司)，信封法随机分4组包括，假手术(Sham)组，IRI＋等体积生理盐水组(IRI组)，IRI＋SphK激动剂组(PMA组)和IRI＋SphK阻断剂组(DMS组)。建立大鼠IRI模型，通过对SphK/S1P信号激动和阻滞后，应用苏木精-伊红(HE)和细胞凋亡染色原位缺口末端标记法(TUNEL)技术观察肝窦间隙、肝窦内皮细胞(LSEC)和肝细胞的形态学改变及其细胞凋亡程度，酶联免疫吸附(ELISA)和蛋白质印迹法(Western blot)对细胞间黏附分子(ICAM-1)和髓过氧化物酶(MPO)的表达进行评价。应用SPSS 17.0统计软件行 χ2检验和单因素方差分析。 结果:HE染色显示SphK激动剂(PMA)可改善缺血肝脏损伤，减轻肝窦异常扩张，LSEC损伤程度得到改善，其阻断剂反而加重LSEC的损伤。与Sham组(3.46±0.27)比较，IRI组大鼠血清S1P升高(4.71±0.42， t＝4.336， P<0.05)；与IRI组比较，PMA组血清S1P显著升高(36.01±10.13， t＝5.347， P<0.01)，DMS组血清S1P显著降低(15.83±3.14， t＝6.080， P<0.05)。与Sham组[(10.09±1.05)%]比较，IRI组肝脏细胞凋亡率显著升高(28.83±2.06)%， t＝14.040， P<0.05]；与IRI组比较，PMA组肝脏细胞凋亡率显著降低[(13.59±3.02)%， t＝7.221， P<0.05]，而DMS组肝细胞凋亡率显著升高[(61.92±7.72)%， t＝7.173， P<0.01]。与IRI组比较，PMA组肝脏S1PR的蛋白表达升高(S1PR：1.65±0.12比2.50±0.09， t＝9.930， P<0.05)，MPO、ICAM-1的蛋白表达降低(ICAM-1：3.21±0.39比1.52±0.26， t＝6.245， P<0.05；MPO：2.51±0.20比1.09±0.13， t＝10.310， P<0.05)；而DMS组肝脏S1PR的蛋白表达降低(S1PR：1.65±0.12比1.31±0.09， t＝3.926， P<0.05)，MPO、ICAM-1蛋白表达升高(ICAM-1：3.21±0.39 5.92±0.22， t＝7.855， P<0.05；MPO：2.51±0.20比5.21±0.43， t＝9.861， P<0.05)。 结论:SphK/S1P信号通过减少细胞凋亡，减少MPO和ICAM-1表达，减少白细胞和LSEC的黏附，从而改善肝窦微循环。

目的:通过构建胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠模型，利用非靶向代谢组学的研究方法，探讨甲氨蝶呤治疗类风湿关节炎的作用机制。方法:采用ELISA测定血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10的含量，苏木精-伊红（HE）染色及Masson染色观察各组大鼠关节组织学改变，非靶向气相色谱-质谱代谢组学技术筛查血清差异代谢物表达谱并进行聚类分析和KEGG富集分析，筛查出差异性代谢途径，并采用实时定量聚合酶链反应对差异性代谢途径中的关键酶进行检测。将所有符合正态分布的实验数据，采用单因素方差分析比较组间差异，以 P<0.05表示差异具有统计学意义。 结果:甲氨蝶呤（MTX）可明显改善CIA大鼠的关节炎症反应和关节炎评分（ P<0.05），增加CIA大鼠的体质量（ P<0.05）。HE和Masson染色结果显示MTX可改善CIA大鼠滑膜组织对关节软骨的侵蚀。ELISA结果显示MTX可显著降低CIA大鼠血清中TNF-α[（191.2±17.4）pg/ml， F=40.31， P<0.001]、IL-1β[（28.4±1.2）pg/ml， F=10.11， P=0.012]和IL-6[（118.7±1.4）pg/ml， F=829.40， P<0.001]的含量，提高血清中IL-4[（49.3±3.3）pg/ml， F=33.44， P<0.001]和IL-10[（30.2±0.7）pg/ml， F=33.44， P<0.001]的含量。非靶向代谢组学结果显示MTX对CIA大鼠血清中的磷酸胆碱、棕榈酸、油酸、胆碱等代谢产物有影响。KEGG通路富集分析结果显示MTX对CIA大鼠的甘油磷脂代谢（ P<0.01）和鞘脂代谢（ P<0.05）有影响。实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）结果显示MTX可下调CIA大鼠关节滑膜甘油磷脂代谢途径中关键酶磷脂酶B1（Plb1）[（1.00±0.49）， F=8.23， P=0.019]、甘油磷胆碱磷酸二酯酶（Gpcpd1）[（1.10±0.09）， F=8.19， P=0.019]、胆碱激酶α（Chka）[（1.33±0.19）， F=33.00， P<0.001]，胆碱激酶β（Chkb）[（2.07±1.21）， F=8.20， P=0.019]和磷酸乙醇胺/磷酸胆碱磷酸酶1（Phospho1）[（1.07±0.14）， F=13.58， P=0.006）的表达水平，也可下调鞘脂代谢途径中关键酶3-酮二氢鞘氨醇还原酶（Kdsr）[（1.24±0.32）， F=13.85， P=0.006]、磷脂磷酸酶（Plpp1）[（1.61±0.32）， F=11.95， P=0.003]和鞘脂去饱和酶1（Degs1）[（1.21±0.15）， F=46.55， P<0.001]的表达水平。 结论:MTX治疗RA的生物学机制可能与下调机体的甘油磷脂代谢和鞘脂代谢通路的代谢水平有关。

目的:探讨香芍颗粒对脑卒中后抑郁（PSD）小鼠行为和内侧前额叶皮质（mPFC）少突胶质细胞前体细胞（OPCs）、少突胶质细胞（OLs）的影响。方法:80只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组、大脑中动脉闭塞（MCAO）组、PSD+PBS组和PSD+香芍组，每组20只。采用MCAO后轻度慢性不可预见性应激（CUMS）和孤独饲养的方法构建PSD模型。采用激光散斑成像、改良神经严重程度评分（mNSS）和TTC染色评估MCAO模型，采用体质量、糖水偏好实验和悬尾实验评估PSD模型。PSD建模后4组小鼠均灌胃28 d，假手术组、MCAO组、PSD+PBS组给予溶剂（PBS）0.2 mL灌胃，1次/d；PSD+香芍组按照60 mg/kg剂量将香芍颗粒溶于0.2 mL PBS中灌胃，1次/d。采用免疫荧光染色法检测mPFC中OPCs和OLs的数量，采用Western blotting实验检测mPFC中髓鞘碱性蛋白（MBP）和磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶/雷帕霉素靶蛋白（PI3K/AKT/mTOR）通路蛋白的表达。结果:（1）模型验证结果：激光散斑成像实验观察到小鼠在MCAO术前、术中及再灌注后手术侧大脑中动脉供血区脑血流的明显改变；MCAO组、PSD+PBS组、PSD+香芍组小鼠中TTC染色后均观察到典型的红色非梗死区和白色梗死区；MCAO组、PSD+PBS组、PSD+香芍组小鼠mNSS评分均>4分且差异无统计学意义（ P>0.05）；提示MCAO模型构建成功。PSD建模后治疗前，4组小鼠行为学评估结果显示，与假手术组和MCAO组相比，PSD+PBS组和PSD+香芍组小鼠体质量明显下降，糖水偏好度明显降低，悬尾不动时间明显延长，差异均有统计学意义（ P<0.05），提示PSD模型构建成功。（2）治疗后小鼠行为学实验结果：治疗28 d后，4组小鼠体质量、糖水偏好度和悬尾不动时间差异均有统计学意义（ P<0.05）。与PSD+PBS组相比，PSD+香芍组小鼠体质量和糖水偏好度明显上升，悬尾不动时间明显缩短，差异均有统计学意义（ P<0.05）。（3）免疫荧光染色及Western blotting实验结果：4组小鼠mPFC中OPCs（Olig2 +PDGFRa +）数量、增殖性OPCs（Ki-67 +PDGFRa +、EdU +PDGFRa +）数量、OLs（Olig2 +CC1 +）数量，以及MBP蛋白相对表达量、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白相对表达量差异均有统计学意义（ P<0.05）。与PSD+PBS组比较，PSD+香芍组小鼠上述细胞数量以及蛋白相对表达量均明显升高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:香芍颗粒可通过激活mPFC区的PI3K/AKT/mTOR信号通路促进OPCs增殖和OLs成熟，进而发挥治疗PSD的作用。

全球糖尿病及其并发症发病率不断增加，对公共卫生构成重大威胁，开发对糖尿病及其并发症有效的治疗方法十分必要。鞘氨醇激酶（SphK）/1-磷酸鞘氨醇（S1P）信号轴是鞘脂代谢途径中重要的信号通路。越来越多的证据表明，SphK/S1P信号通路在糖尿病和相关并发症中起着关键作用。该文就SphK/S1P信号通路在糖尿病及其并发症中作用的研究进展作一综述，以期为其治疗靶点提供思路。

目的:探讨鞘氨醇激酶-2(sphingosine kinases 2, SphK2)对活化的星形胶质细胞功能的调控及对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)小鼠疾病进程的影响。方法:白细胞介素-17(interleukin 17, IL-17)体外诱导C57BL/6野生型(wild type，WT)小鼠及 sphk2基因敲除( sphk2 -/-)小鼠原代星形胶质细胞活化，real-time PCR测定炎性因子及趋化因子的mRNA转录水平变化，Western blot和免疫荧光检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达及信号转导与转录激活因子3的磷酸化(p-STAT3)水平。髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG 35-55)多肽体内诱导小鼠EAE模型，Western blot检测脊髓组织中GFAP和p-STAT3的蛋白质表达水平；real-time PCR检测脊髓组织中炎性因子的mRNA转录水平；苏木素-伊红(HE)和劳克坚牢蓝染色(Luxol fast blue, LFB)观察脊髓组织内炎症细胞浸润及髓鞘脱失变化。 结果:与WT组相比较， sphk2 -/-组IL-17体外刺激小鼠原代星形胶质细胞后，p-STAT3水平显著下降；单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1, MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α，TNF-α)及IL-6等趋化因子及炎性因子的mRNA转录水平明显降低。 sphk2 -/-EAE小鼠与WT EAE小鼠相比较，上述指标体内变化与体外结果相似，且 sphk2 -/-EAE小鼠脊髓组织炎性细胞浸润与髓鞘脱失显著减轻，但体内外GFAP的表达差异无统计学意义。 结论:SphK2可能通过STAT3分子信号调控反应性星形胶质细胞的功能，从而调节炎性因子及趋化因子的产生，参与EAE的病变进程。