目的:探讨1-磷酸鞘氨醇(S1P)通过1-磷酸鞘氨醇受体2(S1P2)及RhoA/Rho激酶通路对人胎儿肺成纤维细胞(HFL-1)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的作用。方法:本研究为实验研究。培养14~19代HFL-1。应用蛋白质印迹法分别检测不同浓度(10 -7 mol/L、10 -6 mol/L、10 -5 mol/L)S1P刺激下HFL-1中α-SMA的表达，10 -6 mol/L S1P及10 -6 mol/L S1P2拮抗剂JTE-013刺激下HFL-1中α-SMA、RhoA的表达，10 μg/L RhoA抑制剂C3胞外酶、10 -5 mol/L Rho激酶抑制剂Y27632、10 -6 mol/L S1P刺激下HIF-1中α-SMA的表达。 结果:S1P 10 -6 mol/L组、S1P 10 -5 mol/L组α-SMA的相对表达量0.641(0.591，0.747)、0.662(0.633，0.810)较空白对照组0.116(0.089，0.456)升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。S1P组α-SMA的相对表达量0.907(0.466，1.629)较空白对照组0.540(0.210，0.807)、JTE-013组0.296(0.182，0.598)升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。S1P10 -6 mol/L 5 min组RhoA的相对表达量0.931(0.660，0.977)较S1P 10 -6 mol/L 0 min组0.060(0.023，0.061)升高；S1P 10 -6 mol/L 10 min组RhoA的相对表达量0.086(0.016，0.097)较S1P 10 -6 mol/L 5 min组RhoA的相对表达量0.931(0.660，0.977)降低；S1P 10 -6 mol/L组RhoA的相对表达量2.221(2.063，3.061)较空白对照组0.833(0.092，1.393)、JTE-013 10 -6 mol/L组0.619(0.145，0.967)、JTE-013 10 -6 mol/L+S1P 10 -6 mol/L组0.984(0.354，1.442)升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。S1P组α-SMA的相对表达量0.738(0.389，0.774)较空白对照组0.120(0.057，0.120)、C3胞外酶组0.073(0.027，0.093)高，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。Y27632+S1P组α-SMA的相对表达量0.142(0.014，0.430)较空白对照组0.544(0.489，0.632)低，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:S1P在毫摩尔水平浓度通过S1P2及其下游信号RhoA/Rho激酶通路调控HFL-1中α-SMA的表达。

急性髓细胞白血病(AML)是起源于造血干细胞(HSC)的常见血液系统恶性肿瘤。传统化疗和造血干细胞移植(HSCT)是治疗AML的主要手段。由于AML患者的总体生存(OS)率低、复发率高，因此提高其疗效及改善预后是目前临床亟待解决的难题。鞘磷脂代谢产物1-磷酸鞘氨醇(S1P)是一种具有生物活性的脂质信号分子，参与调控细胞生长、存活、分化、凋亡、自噬及耐药等。多项研究结果表明，AML患者S1P及其相关限速酶异常表达，与其疾病进展、化疗耐药及不良预后相关。笔者拟就S1P的合成与代谢、S1P在AML细胞中的生物学功能，以及鞘氨醇激酶(SPHK)/S1P相关信号通路调控AML细胞耐药的最新研究进展进行阐述，旨在深入了解S1P介导AML耐药的机制，为探索靶向S1P的治疗方案及改善患者预后提供参考。

全球糖尿病及其并发症发病率不断增加，对公共卫生构成重大威胁，开发对糖尿病及其并发症有效的治疗方法十分必要。鞘氨醇激酶（SphK）/1-磷酸鞘氨醇（S1P）信号轴是鞘脂代谢途径中重要的信号通路。越来越多的证据表明，SphK/S1P信号通路在糖尿病和相关并发症中起着关键作用。该文就SphK/S1P信号通路在糖尿病及其并发症中作用的研究进展作一综述，以期为其治疗靶点提供思路。

目的:探讨鞘氨醇激酶/1-磷酸鞘氨醇(SphK/S1P)信号通路在肝脏缺血再灌注损伤(IRI)中肝窦微循环的保护作用。方法:2015年9月至2019年9月，将40只适龄雄性大鼠(购自常州卡文斯实验动物有限公司)，信封法随机分4组包括，假手术(Sham)组，IRI＋等体积生理盐水组(IRI组)，IRI＋SphK激动剂组(PMA组)和IRI＋SphK阻断剂组(DMS组)。建立大鼠IRI模型，通过对SphK/S1P信号激动和阻滞后，应用苏木精-伊红(HE)和细胞凋亡染色原位缺口末端标记法(TUNEL)技术观察肝窦间隙、肝窦内皮细胞(LSEC)和肝细胞的形态学改变及其细胞凋亡程度，酶联免疫吸附(ELISA)和蛋白质印迹法(Western blot)对细胞间黏附分子(ICAM-1)和髓过氧化物酶(MPO)的表达进行评价。应用SPSS 17.0统计软件行 χ2检验和单因素方差分析。 结果:HE染色显示SphK激动剂(PMA)可改善缺血肝脏损伤，减轻肝窦异常扩张，LSEC损伤程度得到改善，其阻断剂反而加重LSEC的损伤。与Sham组(3.46±0.27)比较，IRI组大鼠血清S1P升高(4.71±0.42， t＝4.336， P<0.05)；与IRI组比较，PMA组血清S1P显著升高(36.01±10.13， t＝5.347， P<0.01)，DMS组血清S1P显著降低(15.83±3.14， t＝6.080， P<0.05)。与Sham组[(10.09±1.05)%]比较，IRI组肝脏细胞凋亡率显著升高(28.83±2.06)%， t＝14.040， P<0.05]；与IRI组比较，PMA组肝脏细胞凋亡率显著降低[(13.59±3.02)%， t＝7.221， P<0.05]，而DMS组肝细胞凋亡率显著升高[(61.92±7.72)%， t＝7.173， P<0.01]。与IRI组比较，PMA组肝脏S1PR的蛋白表达升高(S1PR：1.65±0.12比2.50±0.09， t＝9.930， P<0.05)，MPO、ICAM-1的蛋白表达降低(ICAM-1：3.21±0.39比1.52±0.26， t＝6.245， P<0.05；MPO：2.51±0.20比1.09±0.13， t＝10.310， P<0.05)；而DMS组肝脏S1PR的蛋白表达降低(S1PR：1.65±0.12比1.31±0.09， t＝3.926， P<0.05)，MPO、ICAM-1蛋白表达升高(ICAM-1：3.21±0.39 5.92±0.22， t＝7.855， P<0.05；MPO：2.51±0.20比5.21±0.43， t＝9.861， P<0.05)。 结论:SphK/S1P信号通过减少细胞凋亡，减少MPO和ICAM-1表达，减少白细胞和LSEC的黏附，从而改善肝窦微循环。

目的:探讨肾必宁颗粒通过鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase 1,SphK1)/1-磷酸鞘氨醇受体2(sphingosine 1 phosphate receptor 2,S1PR2)通路改善IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)大鼠肾损伤的作用及机制.方法:将54只健康雄性SD大鼠按照完全随机分组法分为空白组(n=10)、模型组(n=10)、泼尼松组(n=10)、肾必宁低剂量组(n=12)和肾必宁高剂量组(n=12).除空白组外,其余4组建立IgAN模型,第9周起治疗组灌胃给药,7周后生化检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、谷丙转氨酶(ALT)、血清白蛋白(ALB)、尿红细胞计数及24 h尿蛋白定量(24 h-UTP);苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肾组织病理学变化;免疫荧光观察IgA沉积;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测SphK1、S1PR2蛋白表达;实时荧光定量PCR法(RT-PCR)检测SphK1、S1PR2 mRNA表达.结果:与空白组比较,模型组大鼠尿红细胞计数、24 h-UTP、SCr、BUN水平均显著升高(P＜0.01或P＜0.05),ALB水平显著降低(P＜0.01),ALT水平有所升高,但差异无统计学意义(P＞0.05),有明显的肾脏病理损伤,免疫荧光可见大量IgA荧光沉积,肾组织SphK1、S1PR2蛋白及mRNA表达水平显著升高(P＜0.01);与模型组比较,泼尼松组、肾低组、肾高组大鼠尿红细胞数、24 h-UTP、BUN水平均明显降低(P＜0.01),ALB水平显著升高(P＜0.01),各组ALT水平有所下降,但差异无统计学意义(P＞0.05),肾低组SCr水平显著降低(P＜0.05),肾脏病理有不同程度改善,IgA荧光沉积可见不同程度减少,肾组织SphK1、S1PR2蛋白及mRNA表达水平明显下降(P＜0.01).结论:肾必宁颗粒可能通过抑制SphK1/S1PR2通路来降低IgAN大鼠尿蛋白,减轻血尿并改善肾功能,从而起到保护肾脏、防治肾损害的作用.

研究鳖甲煎丸对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)小鼠肝脂质代谢的影响,探讨鳖甲煎丸调控NASH小鼠脂质代谢和炎症反应的作用机制.通过高脂高胆固醇饲料喂养C57BL/6 小鼠建立NASH模型,给予鳖甲煎丸干预,通过血清和肝脏生化指标及肝脏组织病理学检测评价鳖甲煎丸对NASH小鼠的治疗效果,应用UPLC-Q-TOF-MS技术检测肝脏的脂质代谢物,结合偏最小二乘法判别分析、t检验和受试者工作特征曲线分析筛选差异脂质和主要生物标志物;结合生物标志物结果,利用Western blot和qPCR检测脂质代谢及炎性相关分子.结果表明,鳖甲煎丸能显著降低NASH小鼠血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)水平和肝组织中甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)含量,抑制肝脏脂滴堆积、肝细胞气球样变和纤维化病变;脂质代谢组学结果显示,鳖甲煎丸可调控磷脂酰胆碱(phosphatidyl choline,PC)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidyl etha-nolamine,PE)、鞘磷脂(sphingomyelin,SM)、神经酰胺(ceramide,Cer)等NASH相关 11 种脂质标志物;Western blot和qPCR结果显示,鳖甲煎丸可调控固醇调节元件结合蛋白1(sterol regulatory element-binding protein 1,SREBP1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phospho-AMP-activated pro-tein kinase,p-AMPK)等脂质代谢相关蛋白的表达,及脂肪酸转位酶36(fatty acid translocase 36,Cd36)、Pparγ、心磷脂合酶 1(car-diolipin synthase 1,Crls1)和磷脂酶Cβ2(phospholipase Cβ2,Plcβ2)mRNA水平;抑制磷酸化p38 丝裂原活化蛋白激酶(phospho-p38 mitogen-activated protein kinase,p-p38 MAPK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶 1/2(phospho-extracellular signal regulated kinase 1/2,p-ERK1/2)和促炎因子 Il-6、Il-1β、Tnf-α mRNA 表达.综上所述,鳖甲煎丸可调节 PC、PE、SM、Cer 等脂类代谢,调控p-AMPK、SREBP1、PPARγ和Cd36、Crls1、Plcβ2 等脂质调控因子表达,改善脂质代谢紊乱,同时还能抑制MAPK信号通路和促炎因子mRNA水平,缓解炎症反应,发挥治疗NASH的作用.

目的 基于鞘氨醇激酶1(Sphk1)/1-磷酸鞘氨醇受体2(S1PR2)信号通路研究雷公藤多苷片(GTW)改善免疫球蛋白A肾病(IgAN)大鼠肾损伤的作用机制.方法 通过牛血清白蛋白灌胃+蓖麻油和四氯化碳皮下注射+脂多糖尾静脉注射等手段建立IgAN大鼠模型.将造模成功大鼠随机分为模型组、对照组和实验组,每组9只;另取10只正常大鼠作为空白组.对照组灌胃给予6.25 mg·kg-1·d-1泼尼松;实验组灌胃给予9.375 mg·kg-1·d-1 GTW;空白组和模型组均灌胃给予0.5 mL·100 g-1·d-1 0.9％NaCl.各组大鼠每天给药1次.于15周末留尿取材,测定各组大鼠血白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白定量(24 h-UTP)、尿红细胞数,用蛋白质印迹法检测各组大鼠Sphk1/S1PR2蛋白的表达水平.结果 苏木精-伊红染色及免疫荧光见对照组与实验组肾病理损伤均较模型组明显减轻.空白组、模型组、对照组和实验组的ALB分别为(32.49±2.23)、(22.98±0.51)、(26.01±1.33)和(26.53±1.92)g·L1,BUN 分别为(6.11±1.71)、(13.75±2.96)、(6.71±1.35)和(4.77±0.99)mmol·L-1,24 h-UTP 分别为(5.72±1.96)、(9.12±2.15)、(5.78±2.05)和(4.75±1.50)mg·24 h-1,尿红细胞数分别为(9.73±2.40)、(14.62±2.60)、(9.90±1.59)和(9.46±2.94)cell·μL-1,Sphk1 蛋白相对表达水平分别为 0.85±0.02、1.47±0.02、1.06±0.02 和 1.09±0.02,S1PR2 蛋白相对表达水平分别为 0.27±0.02、0.88±0.01、0.43±0.02 和 0.42±0.02.模型组的上述指标与对照组和实验组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 GTW可能通过抑制Sphk1/S1PR2信号通路,减少肾小球系膜细胞增殖,从而减轻IgAN大鼠的肾损伤.

目的 通过对脑出血信号通路相关研究进行文献计量学统计及可视化分析,探讨近10年该领域的研究热点和发展趋势.方法 基于Web of Science核心合集Science Citation Index Expanded数据库,利用CiteSpace分析软件对近10年发表的文章进行文献计量学统计及可视化分析.结果 通过对796篇脑出血信号通路领域文献进行可视化分析显示,该领域发文量呈逐年上涨趋势,中国是发文量最多的国家,发文量最多的机构为洛马林达大学,资助该领域最多的基金资助机构是中国国家自然科学基金委员会,关键词分析结果显示研究热点方向集中在炎症反应、氧化应激反应、miRNA基因表达、核因子-κB(NF-κB)信号通路、细胞外调节蛋白激酶1/2信号通路、脂质信号分子鞘氨醇-1-磷酸及头针治疗等.结论 应用CiteSpace可视化分析方法可直观的展示出脑出血相关信号通路的研究热点和趋势,为脑出血的治疗和预防打开新的窗口.

鞘氨醇-1-磷酸(S1P)是由鞘氨醇激酶磷酸化鞘氨脂产生的多效鞘磷脂,可通过与G蛋白偶联S1P受体(S1PR)结合发挥作用,在细胞的生存、增殖、迁移、免疫细胞的募集、炎症介质合成和淋巴管及血管的生成等多种生理及病理生理过程中起着不可或缺的作用,S1P/S1PR信号通路参与了免疫介导的疾病发病机制,在免疫系统中发挥着重要作用.然而该信号轴在自身免疫性疾病发病机制中的参与程度有待进一步发掘.因此,文章针对近年来S1P-S1PR轴在自身免疫方面相关疾病的研究进行综述.

目的 通过体外实验探讨清疕饮和鞘氨醇-1-磷酸受体 5(sphingosine-1-phosphate receptor 5,S1PR5)信号对鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)诱导的人永生化角质形成细胞(human immortalized keratinocytes,HaCaT)生物学功能的影响,研究清疕饮在角质细胞(keratinocytes,KC)上对银屑病的治疗机制.方法 脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)(1 μg/mL,24 小时)刺激HaCaT细胞,酶联免疫吸附测定实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞上清中 S1P 含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real time-polymerase chain reaction,q-PCR)法检测S1PRs mRNA转录水平,筛选出高特异性的S1P/S1PR5 通路.细胞增殖和细胞毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)法测定细胞存活率,q-PCR法检测白介素(interleukin,IL)-17、IL-23 mRNA表达,筛选适宜的 S1P处理浓度和时间,蛋白质免疫印迹法(Western blot,WB)检测清疕饮对S1PR5 蛋白表达的抑制,WB检测S1PR5 蛋白表达筛选高效siRNA构建S1PR5基因缺陷模型.将细胞分为阴性对照组(PBS+NC siRNA)、S1P 炎症模型组(S1P+PBS+NC siRNA)、清疕饮处理组(S1P+清疕饮+NC siRNA)、S1PR5 基因缺陷组(S1P+PBS+S1PR5 siRNA)、清疕饮处理S1PR5 基因缺陷组(S1P+清疕饮+S1PR5 siRNA)予对应处理,划痕试验检测细胞迁移率,EILSA法检测细胞上清中 IL-36γ 分泌,WB 法检测细胞核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路相关蛋白核因子抑制蛋白(inhibitor kappa B alpha,IκBα)、kappa B 抑制因子激酶(inhibitor of kappa B kinase,IKK)、磷酸化(p)-IKK、p65、p-p65 的表达.结果 相比于正常细胞,LPS刺激HaCaT银屑病炎症模型细胞上清S1P含量显著上升(P＜0.01),S1PR5 mRNA表达增加最明显(P＜0.01).筛选出浓度0.5 μmol/L的S1P处理 48 小时为炎症造模方案,清疕饮冻干粉溶液能显著抑制S1P造成的S1PR5 蛋白高表达(P＜0.01).与阴性对照组比较,S1P炎症模型组HaCaT细胞迁移能力显著增强,上清液IL-36γ显著增加,细胞中p-IKK、p-p65 蛋白的表达水平显著增加(P＜0.01),IκBα、IKK、p65 蛋白未发现显著变化.与S1P炎症模型组比较,清疕饮处理组、S1PR5 基因缺陷组、清疕饮处理S1PR5 基因缺陷组HaCaT细胞迁移能力显著降低,IL-36γ分泌量显著减少,细胞中p-IKK、p-p65 表达水平显著降低(P＜0.01),IκBα、IKK、p65 蛋白未发现显著变化,但清疕饮处理 S1PR5 基因缺陷组 IL-36γ、p-IKK、p-p65 的变化相较于另外两组更明显(P＜0.01).结论 清疕饮可以部分通过阻碍S1P与S1PR5 结合抑制HaCaT细胞迁移和IL-36γ分泌,截断NF-κB通路信号,从而干预炎症反应.