目的:分析抗α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异 唑丙酸受体（AMPAR）抗体脑炎的临床特点。 方法:回顾性总结2020年1月至2021年5月空军军医大学唐都医院诊治的3例抗AMPAR抗体脑炎患者的临床资料，对其临床表现、辅助检查、治疗及预后进行分析。结果:3例抗AMPAR抗体脑炎（年龄12~70岁）均急性起病，首发症状包括认知减退、性格改变及少见的头痛、运动障碍，其中例1肺部占位性病变经病理证实为小细胞肺癌，血清及脑脊液抗AMPAR抗体、抗Y染色体性别决定区相关高迁移率组盒蛋白1抗体阳性，激素联合肿瘤化学治疗后症状仍持续存在，无临床复发；例2责任病灶位于双侧额颞叶、半卵圆中心及侧脑室旁，同时合并低颅压综合征典型影像学特征，血清抗AMPAR抗体阳性，激素治疗后症状部分改善；例3颅内病灶位于脑桥及右侧小脑中脚，伴显著小脑萎缩，脊髓磁共振成像提示颈 2~胸 10水平脊髓病变，血清及脑脊液抗AMPAR抗体阳性，激素联合静脉滴注人免疫球蛋白治疗后症状显著改善。 结论:抗AMPAR抗体脑炎临床表现异质性高，除边缘系统外，尚可波及脑干、脊髓，出现脑萎缩；存在多重抗神经元抗体尤其是抗神经元细胞内抗原抗体时需密切监测肿瘤；免疫治疗有效，肿瘤叠加多重抗体时预后差。

目的:探讨颈 7神经切断后发生的脊髓中枢神经元逆行性退变中过磷酸化Tau蛋白的表达情况，为外周神经损伤后中枢神经元逆行性退变保护提供新思路。 方法:将成年雌性SD大鼠36只随机分为3组（假手术组、切断组、切断+药物干预组），其中切断组和干预组的动物施行双侧颈 7神经切断造模，干预组予每天腹腔注射1 mmol/kg氯化锂。2周、4周后取大鼠颈 7节段脊髓，通过HE染色、流式细胞技术来分析神经细胞的凋亡情况，Western Blot分析Tau蛋白及相关蛋白表达水平。 结果:HE染色及流式细胞学检测显示2周时切断组的细胞凋亡程度小于4周时的凋亡程度；Western Blot结果提示随着周数的增加，总Tau蛋白的量因颈 7神经的切断而下降，磷酸化的Tau蛋白的量的比例上升，差异具有统计学意义。予氯化锂后，凋亡的程度及磷酸化的Tau蛋白的比例均发生下降，差异具有统计学意义。 结论:Tau蛋白的过磷酸化机制存在于颈 7神经切断术后发生的脊髓中枢神经元逆行性退变的过程中；氯化锂能减轻逆行性退变的程度。

目的:通过观察麦粒灸"大椎"穴对神经根型颈椎病大鼠激活素A(ActA)、Act Ⅰ型受体(ActR Ⅰ)及受体后信号传导蛋白Smad4表达的影响,探讨麦粒灸治疗神经根型颈椎病(CSR)的镇痛机制.方法:将30只SPF级雌雄各半SD大鼠随机分为空白组、模型组、麦粒灸组,每组10只.采用椎管插线法制备CSR模型.模型组及麦粒灸组均于造模后待伤口恢复7 d,第8天开始干预.空白组正常喂养且不做任何干预措施,模型组仅予腹腔注射1 ml的0.9％氯化钠溶液,麦粒灸组在模型组基础上予麦粒灸"大椎"穴,6壮/次,1次/d.连续干预7 d后,观察各组大鼠步态评分,测量机械痛阈值,采用蛋白免疫印迹检测脊髓及神经根组织Act A、ActR Ⅰ及Smad4的蛋白.PCR检测脊髓及神经根组织Act A和ActR Ⅰ的mRNA表达水平,苏木素-伊红染色观察脊髓及神经根组织的形态结构,免疫荧光染色观察Smad4阳性表达水平.结果:与空白组比较,模型组、麦粒灸组大鼠步态评分升高、机械痛阈降低(P＜0.05).与模型组比较,麦粒灸组大鼠脊髓及神经根组织Act A、ActR Ⅰ及其mRNA表达水平均升高(P＜0.05).Western blotting和免疫荧光结果均显示Smad4表达增加;HE染色观察麦粒灸组脊髓形态损伤较模型组有所减轻,灰质区神经元固缩,尼氏小体减少,神经胶质细胞和毛细血管数量比模型组减少.结论:麦粒灸"大椎"穴能改善CSR大鼠疼痛阈值和运动功能,促进神经元损伤后修复,这与激活Activin A/ActR Ⅰ/Smad4信号通路有关.

目的:探究食欲素-A(orexin-A)和α4β2-N型乙酰胆碱受体(α4β2-nAChR)选择性激动剂RJR-2403分别对新生大鼠离体脊髓腹角神经元自发动作电位影响的差异.方法:应用8～12d新生SD大鼠,麻醉后游离出颈端至骶部的脊髓,保留腰骶膨大节段并制备切片.切片孵育30min,采用木瓜蛋白酶消化19～22 min,转常温孵育45～60 min.沿中央管切取脊髓腹角,使用口径从大到小的巴斯德吸管急性机械分离神经元,静置20 min待细胞贴壁,在倒置显微镜下利用膜片钳记录良好的神经元,联合药理学方法进行功能性研究.在电流钳记录模式下,观察orexin-A和RJR-2403分别对离体脊髓腹角神经元自发放电(动作电位)的影响,并比较多种参数的差异.结果:①本研究应用急性分离的脊髓腹角神经元进行膜片钳记录,所记录的神经元胞体完整,形态多样,能发出较多突起且有分支;②给予orexin-A前的腹角神经元自发动作电位的频率[(3.55±0.66)Hz]低于给药后[(8.26±3.31)Hz](P＜0.01),给药前动作电位幅值[(95.28±7.21)mV]高于给药后[(85.15±5.80)mV](P＜0.05),静息电位和动作电位半幅时程无明显变化;③应用RJR-2403前,腹角神经元的静息电位[(-66.67±43.38)mV]高于给药后[(-60.48±3.38)mV](P＜0.01),给药前放电频率[(2.74±1.60)Hz]低于给药后[(8.94±3.14)Hz](P＜0.001),给药前动作电位幅值[(84.96±4.85)mV]高于给药后[(73.77±5.42)mV](P＜0.01),给药前半幅时程[(4.34±1.52)ms]低于给药后[(5.39±1.80)ms](P＜0.01).结论:Orexin-A和RJR-2403对脊髓腹角神经元自发动作电位均具有正性调制作用,但对于静息电位、半幅时程存在不同作用,可能源于促代谢型受体和促离子型受体介导的作用差异.

目的 探索骨形态发生蛋白(BMP)2基因表达介导转化生长因子(TGF)β信号通路对神经根型颈椎病大鼠颈脊髓神经元细胞凋亡的影响.方法 20只健康清洁剂雄性8周龄SD大鼠随机分为模型组和假手术组,每组10只.模型组采用椎管插线法建造神经根型颈椎病大鼠模型.造模后,分离大鼠颈脊髓神经元细胞并进行实验分组转染,分为Sham组(假手术组颈脊髓神经元细胞)、Model组(模型组颈脊髓神经元细胞,不转染慢病毒)、NC组(模型组颈脊髓神经元细胞,转染空载慢病毒)、BMP2-shRNA组(模型组颈脊髓神经元细胞,转染PLL-BMP2-shRNA慢病毒)、BMP2-pcDNA组(模型组颈脊髓神经元细胞,转染PLL-BMP2-pcDNA慢病毒).实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组BMP2 mRNA表达水平、TGFβ信号通路相关基因(TGFβ1、Smad2)和细胞凋亡相关基因[抑凋亡B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、促凋亡Bcl-2相关X基因(Bax)]mRNA表达水平;Western印迹检测各组颈脊髓神经元细胞BMP2、TGFβ1、Smad2、Bcl-2和Bax蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡.结果 模型组BMP2和Bcl-2表达显著低于假手术组,TGFβ1、Smad2和Bax表达显著高于假手术组(均P＜0.05);与Model组相比,BMP2-shRNA组BMP2和Bcl-2表达显著降低,TGFβ1、Smad2和Bax表达显著增强,G1期阻滞作用显著增强,S期显著减少,细胞凋亡率显著增加(均P＜0.05);BMP2-pcDNA组BMP2和Bcl-2表达显著增加,TGFβ1、Smad2和Bax表达显著降低,G1期阻滞作用显著减弱,S期显著增加,细胞凋亡率显著下降(均P＜0.05).结论 过表达BMP2基因可抑制TGFβ信号通路激活,减弱G1期阻滞作用,增加S期细胞比例,进而减少颈脊髓神经元细胞凋亡,从而可能改善或延缓大鼠神经根型颈椎病进展.

目的 采用RNA测序技术,从基因与分子层面探讨益肾养髓方治疗脊髓型颈椎病的潜在作用机制.方法 30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和中药组,采用脊髓压迫法建立脊髓型颈椎病大鼠模型,中药组于术后1周开始予益肾养髓方灌胃,每日1次,连续8周.采用Basso Beattie Bresnahan(BBB)评分评估大鼠脊髓功能,透射电镜观察脊髓组织病理形态,RNA测序技术筛选各组差异基因并进行生物信息学分析,RT-PCR检测差异基因mRNA表达,Western blot检测差异基因蛋白表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠BBB评分显著降低(P<0.05);与模型组比较,术后4周开始,中药组大鼠BBB评分显著升高(P<0.05).透射电镜观察显示,模型组脊髓组织髓鞘不完整,可见断裂或卷曲,神经元线粒体嵴断裂、缺失;中药组髓鞘结构排列较规则,线粒体形态破坏较轻.RNA测序技术筛选出假手术组与模型组差异基因303个(153个上调、150个下调),模型组与中药组差异基因341个(130个上调、211个下调),对差异表达基因取交集,得到117个共表达基因,显著性排名前3位的基因分别为Gpnmb、cd68、Caspase-1;差异共表达基因GO富集分析显示,生物过程主要涉及免疫、再生、代谢等,细胞组分包括细胞、胞外区、分子复合物等,分子功能包含受体调节活性等;KEGG通路富集分析显示,主要与CREB信号通路、神经活性配体-受体相互作用、PPAR信号通路等显著相关.RT-PCR和Western blot结果显示,与假手术组比较,模型组脊髓组织Gpnmb、cd68、Caspase-1 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,中药组脊髓组织Gpnmb、cd68、Caspase-1 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05).结论 益肾养髓方可能通过Gpnmb、cd68、Caspase-1等靶点治疗脊髓型颈椎病,涉及神经系统调节、免疫、代谢及反馈调节等诸多生物学过程,并通过CREB信号通路、神经活性配体-受体相互作用、PPAR信号通路等相关通路介导细胞凋亡、焦亡、炎症反应、氧化应激等发挥作用.

目的:探讨高压氧治疗在病毒性脑炎患儿中的临床应用价值.方法:将46例病毒性脑膜炎患儿随机分为对照组和观察组,各23例,对照组采用常规治疗,观察组则在常规治疗基础上加用高压氧治疗,收集并比较2组患儿治疗前和治疗后10 d、20 d及30 d的血清神经功能相关指标,包括神经元特异性烯醇化酶、神经生长因子及脑脊液髓鞘碱性蛋白;外周血T淋巴细胞亚群,包括CD3 +、自然杀伤细胞及CD4/CD8;脑氧代谢指标,包括混合静脉血氧饱和度、过氧化钙及动-颈内静脉血氧含量差.结果:治疗前2组患儿的血清神经功能相关指标、外周血T淋巴细胞亚群及脑氧代谢指标差异均无统计学意义(P>0.05);2组患儿治疗后上述9个指标均有不同程度的好转(P<0.05~P<0.01),且观察组治疗后10 d、20 d及30 d上述9个指标的检测结果均优于对照组同时间点的检测结果(P<0.05).结论:高压氧治疗在病毒性脑炎患儿中的临床应用价值较高,对于患儿的神经功能、免疫功能及脑氧代谢状态均有积极的改善作用.

患者,男,71岁,因双上肢无力 8 个月,加重 2 个月,于2016 年8 月29 日入院.患者8 个月前无明显诱因出现双上肢无力,表现为双上肢抬起困难,向外伸展受限,并且发现双上肢及肩胛带肌群逐渐萎缩,之后发现双侧大小鱼际肌逐渐萎缩.不伴双下肢肌肉萎缩及无力,无肢体麻木、吞咽困难、饮水呛咳及尿便失禁,无呼吸困难等.2 个月前患者自觉双上肢无力较前加重,完成刷牙洗脸等日常活动较困难,其余症状较前无变化.曾在外院查肌电图提示:双上肢呈广泛性神经源性异常,上肢所查感觉神经未见明显受累征象.颈椎MR I:髓内未见异常信号影,颈3～4 椎间盘突出.腰椎 MR I:腰 4～5 椎间盘突出,腰椎骨质增生.1 个月前患者出现肩关节酸痛,侧卧位时加重,平卧位及坐位时稍缓解,伴有双上肢"肉跳"感.10 天前在外院行腰椎穿刺:脑脊液外观无色透明,总细胞3.00×106/L,白细胞1.00×106/L;细胞学30 个淋巴细胞及 2 个单核细胞.

目的:探讨脊髓背角细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)磷酸化对2,4-二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB)诱导的小鼠慢性痒的调控作用.方法:8~12周ICR雄性小鼠随机分为DNFB诱导组和丙酮对照组.DNFB组小鼠分别于面颊部和背部反复涂抹1.5% DNFB溶液,建立类似特异性皮炎的慢性痒模型.分别观察慢性痒模型建立后小鼠的自发性行为,以及鞘内注射M EK抑制剂U0126后小鼠自发性慢性痒行为的变化.免疫组织化学染色法分析小鼠脊髓组织磷酸化 ERK(phosphrylated ERK,pERK)的表达情况.结果:面颊部诱导模型中,DNFB组小鼠的搔抓次数明显高于丙酮对照组(P<0.05),而擦涂行为无差异,证实DNFB诱发的是痒觉;颈背部诱导模型中,DNFB组小鼠表现出剧烈的搔抓行为,而丙酮对照组的搔抓行为不明显.背部慢性痒模型建立后,分别在第1、3、7和14天鞘内注射 M EK 抑制剂U0126,小鼠的搔抓行为受到明显抑制(P<0.05),且脊髓背角pERK的表达水平也明显降低(P<0.05).pERK活化主要表达于小鼠脊髓背角Ⅰ ~ Ⅱ层,且与神经元标志物NeuN共标,与星形胶质细胞标志物GFAP和小胶质细胞标志物Iba1不共标.结论:脊髓背角浅层神经元 ERK磷酸化可能参与调控DNFB诱导的慢性痒.

目的:考察右美托咪定对颈椎手术患者神经元损伤指标、炎性因子及脊髓功能的影响.方法:选取2015年5月-2017年11月于我院行全麻颈椎手术的患者112例,按随机数字表法分为对照组和右美托咪定组,各56例.两组患者均采用全凭静脉麻醉方式进行麻醉维持;右美托咪定组患者于麻醉维持前静脉泵注盐酸右美托咪定注射液负荷剂量0.8μg/kg,泵注时间>10 min,随后以0.4μg/(kg·h)的速度持续泵注直至手术前30 min.观察两组患者麻醉诱导前(T0)、手术结束后1 h(T1)、手术结束后1 d(T2)、手术结束后7 d(T3)的神经元损伤指标[神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)]和血清炎性因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-10]水平,术前及术后第7天的颈椎日本矫形科学学会(JOA)评分以及术后第1、7天的视觉模拟量表(VAS)评分,并记录不良反应发生情况.结果:两组各有3例患者脱落,各有53例完成本研究.T0时点,两组患者神经元损伤指标和血清炎性因子水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);T1～T3时点,两组患者上述指标均显著高于T0时点,且右美托咪定组患者GFAP、NSE、MMP-9、TNF-α、IL-6水平显著低于对照组,IL-10水平显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).术前或术后第1天,两组患者JOA评分及VAS评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05);术后第7天,两组患者JOA评分显著升高,VAS评分显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05),但组间比较差异均无统计学意义(P>0.05).两组患者均未见明显不良反应发生.结论:在麻醉维持前加用右美托咪定可改善颈椎手术患者的血清炎性因子水平,并一定程度地减轻患者脊髓和神经元损伤,同时不影响用药的安全性.