骨骼肌衰老是机体衰老的相关生物学事件,以质量丢失和功能衰退为显著特征,金属组学尤其是铜金属组学在其中的功能角色正日益得到关注.铜金属组学在衰老状态下表现为铜过载,其触发的毒理效应具有激活骨骼肌细胞中发生凋亡、焦亡、铁死亡、铜死亡及并促进α突触核蛋白聚集的特异性分子潜力,相关的信号级联最终可诱导衰老肌纤维中蛋白质、线粒体和卫星细胞等内容物代谢失衡及裂解丢失,同时可触发神经肌肉接头(neuromuscular junction,NMJ)退化和异常,是骨骼肌衰老萎缩的新型病理生理机制.本综述首次系统地解码骨骼肌衰老萎缩调控网络中铜的分子生物学功能、衰老骨骼肌中铜过载的潜在机制,以及铜过载诱导的多种细胞死亡形式例如凋亡、焦亡、铁死亡及铜死亡的信号转导途径在骨骼肌衰老萎缩中的新角色,为临床上应用铜螯合改善和治疗骨骼肌衰老萎缩提供潜在分子靶点和方案选择.

目的:探索成肌细胞外泌体诱导骨髓间充质干细胞成肌分化的可行性。方法:大鼠骨骼肌卫星细胞经体外培养成肌分化，提取成肌细胞外泌体与骨髓间充质干细胞共孵育，诱导其向骨骼肌分化，检测成肌分化以及各生长因子分泌变化。结果:通过酶消化分离、差速贴壁提取的肌卫星细胞，Pax7表达阳性，增殖、分化后Myogenin、Desmin及Myosin表达阳性，Desmin流式细胞鉴定阳性率为94. 5%。超速离心法提取到圆形或椭圆形的成肌细胞外泌体，外形呈杯状，磷钨酸负染；WB检测CD9、CD63、CD81及TSG101表达阳性。GFP标记的外泌体可被骨髓间充质干细胞摄取。外泌体与骨髓间充质干细胞共同孵育，3 d后Myogenin表达阳性，6 d后Desmin与Myosin表达阳性。ELASA检测细胞上清胰岛素样生长因子Ⅰ（insulin like growth factor，IGFⅠ）、肝细胞生长因子（heptocyte growth factor，HGF）及成纤维生长因子（fibroblast growth factor2，FGF2）水平明显升高。结论:成肌细胞外泌体在体外能诱导骨髓间充质干细胞向成肌分化，刺激各种生长因子分泌可能是外泌体促进细胞增殖、分化的机制之一。

目的:探讨儿童进行性限制性斜视的临床特征、影像学表现、组织病理学特点及手术效果。方法:回顾性病例系列研究。收集2017年6月至2022年10月在天津市眼科医院就诊的进行性限制性斜视9例（9只眼）患儿的资料，比较患儿双眼眼球突出度及受累眼在第一眼位及水平内外转时睑裂高度的改变，总结患儿的临床特征并对行斜视矫正手术患儿术中情况、手术效果及术后组织病理学结果进行分析。采用Wilcoxon符号秩检验和Friedman双向秩方差分析进行统计学处理。结果:9例患儿均为单眼发病，其中男性4例，女性5例；右眼3例，左眼6例；发病年龄为2~40个月。患儿双眼眼球突出度右眼为13.00（12.00，13.00）mm，左眼为12.00（12.00，13.50）mm，差异无统计学意义（ Z=-1.00， P=0.317）；受累眼睑裂高度内转为8.00（7.25，8.00）mm，第一眼位为7.50（7.00，8.00）mm，外转为8.00（7.75，8.00）mm，差异无统计学意义（ χ2=1.00， P=0.607）。所有患儿头颅CT或MRI检查均未见明显异常，血清学及免疫学检查亦未见明显异常，而眼眶CT或MRI检查均提示不同眼外肌肌腹增粗。9例患儿中6例行斜视矫正手术，手术患儿术前均行被动牵拉试验，受累眼向各个方向运动均受到不同程度限制。术后第一眼位正位，但眼球运动仍受限。对3例患儿术中眼外肌取材行组织病理学检查，1例提示主要为增生的胶原纤维；1例在弥漫型增生的胶原纤维之间散在束状排列的平滑肌纤维，1例表现为异常增生的横纹肌纤维，部分横纹肌纤维直径大小不一，配对盒（PAX）基因阳性的卫星细胞增多，以表达慢肌球蛋白的肌纤维为主。 结论:儿童进行性限制性斜视呈限制性改变，受累眼眼球突出度及睑裂高度无明显改变，影像学检查显示受累眼外肌肌腹增粗；被动牵拉试验发现受累眼向各个方向运动均受到不同程度限制，虽然斜视矫正手术可以改善眼位，但术后眼球运动仍存在受限因素；部分患儿组织病理学表现为骨骼肌纤维或胶原纤维异常增生。

目的:探讨在脓毒症模型中几丁质酶-3样蛋白1（CHI3L1）介导骨骼肌干细胞损伤的潜在机制。方法:用6种浓度的脂多糖（LPS）刺激体外培养的小鼠骨骼肌卫星细胞，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和细胞增殖与毒性试剂盒（CCK-8）筛选出细胞处理最佳浓度。构建CHI3L1过表达和干扰载体转染骨骼肌卫星细胞，采用聚合酶链反应（PCR）、蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）验证转染效率。将细胞按随机数字表法分为空白对照组（不加任何干预的细胞）、模型组（LPS刺激未转染的细胞）、过表达CHI3L1组（LPS刺激转染了CHI3L1过表达质粒的细胞）、过表达CHI3L1对照组（LPS刺激转染了空载质粒的细胞）、干扰CHI3L1组（LPS刺激转染了CHI3L1干扰序列的细胞）、干扰CHI3L1对照组（LPS刺激转染了CHI3L1干扰序列阴性对照的细胞）。采用ELISA检测细胞外天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1（caspase-1）和白细胞介素-1β（IL-1β）的含量；采用Western blotting检测细胞中IL-1β、信号转导和转录激活因子3（STAT3）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）的蛋白表达水平。结果:根据CCK-8和ELISA检测结果筛选出最佳浓度为5 mg/L的LPS进行后续实验，且PCR、Western blotting证实转染有效。与空白对照组比较，模型组细胞外IL-1β、caspase-1含量和细胞中Akt、p-Akt、IL-1β的蛋白表达水平均明显升高〔IL-1β（ng/L）：11.22±0.55比8.63±0.63，caspase-1（pmol/L）：9.47±0.22比8.65±0.15，Akt/GAPDH：1.36±0.12比1.06±0.15，p-Akt/GAPDH：0.78±0.07比0.09±0.01，IL-1β/GAPDH：1.38±0.12比0.18±0.03，均 P<0.05〕。与模型组、过表达CHI3L1对照组比较，过表达CHI3L1组细胞外IL-1β、caspase-1含量和细胞中p-Akt、IL-1β的蛋白表达均明显升高〔IL-1β（ng/L）：14.93±0.97比11.22±0.55、9.38±0.40，caspase-1（pmol/L）：10.35±0.03比9.47±0.22、8.46±0.24，p-Akt/GAPDH：1.21±0.04比0.78±0.07、0.63±0.04，IL-1β/GAPDH：1.87±0.08比1.38±0.12、1.51±0.17，均 P<0.05〕。与模型组、干扰CHI3L1对照组比较，干扰CHI3L1组细胞外IL-1β和caspase-1含量及细胞中p-Akt、IL-1β的蛋白表达均明显降低〔IL-1β（ng/L）：8.98±0.73比11.22±0.55、10.44±0.65，caspase-1（pmol/L）：7.61±0.63比9.47±0.22、8.37±0.38，p-Akt/GAPDH：0.50±0.04比0.78±0.07、0.94±0.06，IL-1β/GAPDH：0.77±0.02比1.38±0.12、1.13±0.07，均 P<0.05〕。 结论:CHI3L1可能通过caspase-1和IL-1β介导脓毒症模型中小鼠骨骼肌干细胞的损伤；CHI3L1可能参与了调控骨骼肌干细胞中Akt的信号通路，而对STAT3信号通路无明显影响。

目的:研究 LAMA2基因在泛癌中，与生存时间、肿瘤微环境、免疫细胞浸润、免疫治疗反应性的相关性。 方法:从TCGA、IMvigor210数据库中下载 LAMA2在泛癌中的表达矩阵及临床数据，利用R语言分析 LAMA2表达水平与生存时间、肿瘤微环境、免疫细胞浸润、免疫治疗反应性的相关性，并对 LAMA2进行基因富集分析，以探究相关通路。采用Wilcoxon检验比较 LAMA2在肿瘤组织与正常组织中的表达差异，采用Kaplaner-Meier方法进行生存分析，采用单因素COX回归分析评价 LAMA2在各个肿瘤中的风险比关系，采用Spearman相关性分析评价 LAMA2的表达水平与肿瘤微环境免疫评分以及免疫细胞浸润的相关性，采用Preason相关性分析评价免疫治疗反应性与 LAMA2表达水平的相关性。 结果:与正常组织相比， LAMA2在大多数癌种中的表达水平显著降低，此外， LAMA2的表达水平上调或下调对患者预后有提示作用。单因素COX回归分析结果表明， LAMA2在膀胱癌、肾乳头状细胞癌、肾上腺皮质癌等肿瘤中与预后显著相关。 LAMA2的表达水平与肿瘤微环境评分、免疫评分与基质评分同样具有显著相关性。 LAMA2表达水平高低与肿瘤组织免疫细胞(包括B细胞、CD8 ＋T细胞、调节性T细胞、肥大细胞等)浸润有相关性。基因富集分析表明， LAMA2在泛癌中大多参与离子通道、基因表达、骨骼肌运动的各个机制等生物学过程。 LAMA2的表达还与肿瘤突变负荷、微卫星不稳定性及细胞程序死亡-配体1治疗反应性有关。 结论:LAMA2在肿瘤中对患者生存预后有预测价值，并与肿瘤微环境、免疫细胞浸润、免疫治疗反应性等有显著相关性，为潜在肿瘤标志物，为肿瘤的预后判断及治疗选择提供新的方向。

生肌调节因子是肌细胞发生过程中的重要因子，不仅在肌肉的发育、发生中发挥着作用，在指导肌卫星细胞特化、骨骼肌再生中也起着重要的作用。尽管研究者们对这些因子进行了大量的研究，但是它们的功能存在重叠，确切作用机制仍不清楚。本文以生肌调节因子的分子结构为基础，对其在肌肉发育发生、控制卫星细胞功能和再生中的作用进行综述，以期为肌肉骨骼疾病的治疗提供新的思路。

目的:检测力学刺激通过核仁小RNA(snoRNA)调控骨骼肌卫星细胞成肌分化的机制。方法:8周龄雄性C57BL/6小鼠购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，利用随机数表将小鼠随机分为两组，每组有6只小鼠：重力负荷组和后肢去负荷组，构建后肢悬吊小鼠模型检测力学刺激缺失对骨骼肌分化的影响，C2C12细胞购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库，将细胞分为两组：对照组和循环牵张力学组，利用Flexcell FX-5000细胞加力系统构建骨骼肌卫星细胞C2C12循环机械牵张力学刺激模型，利用定量聚合酶链反应(qPCR)检测骨骼肌组织以及C2C12细胞中基因的表达变化，利用蛋白质印迹法(Western blot)检测C2C12细胞中肌细胞增强因子2C(MEF2C)蛋白的表达，利用双荧光素酶报告基因检测SNORD90和miR-18a-3p的结合，两组间的统计差异通过Student’s t检验确定。 结果:HU组小鼠腓肠肌的重量(0.165±0.015)和比目鱼肌的重量(0.141±0.021)低于WB组(0.221±0.013、0.253±0.019， t＝9.574、6.499， P<0.01)，HU组小鼠腓肠肌MEF2C mRNA表达(0.462±0.274)低于WB组(1.000±0.137， t＝9.606， P<0.01)。CMS组C2C12细胞中MEF2C mRNA的表达(18.633±1.532)高于NC组(1.000±0.128， t＝10.687， P<0.01)。pLVX-SNORD90组C2C12细胞中MEF2C mRNA的表达(1.748±0.122)高于pLVX-Vector组(1.000±0.128， t＝9.684， P<0.01)。SNORD90可以通过碱基互补配对的方式结合miR-18a-3p。miR-18a-3p过表达抑制MEF2C蛋白的表达，抑制miR-18a-3p的表达促进MEF2C蛋白的表达，miR-18a-3p影响SNORD90对MEF2C蛋白的表达调控。 结论:力学刺激促进C2C12细胞中SNORD90的表达，SNORD90通过碱基互补配对结合miR-18a-3p并抑制其功能促进MEF2C的表达。

骨骼肌的修复再生是一个极其复杂的生物过程,涉及多种细胞类型:骨骼肌干细胞(即肌卫星细胞)、成纤维脂肪祖细胞、炎性细胞(如巨噬细胞、T细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞)、血管细胞(如内皮细胞和周细胞)和成纤维细胞等.在这些不同类型的细胞中,除了肌卫星细胞直接参与骨骼肌损伤修复外,其他非卫星细胞也发挥重要调节作用,同时这些细胞间相互作用的动力学也决定了肌肉损伤恢复的有效性和时间进程.本文就骨骼肌内不同类型细胞在肌肉修复再生中的作用进行综述和讨论,旨在更深层次地了解肌肉再生机制,为骨骼肌再生医学及肌肉相关疾病的治疗提供理论依据和新的思路.

牵拉伤、钝挫伤以及失神经支配损伤等常见损伤都可以造成骨骼肌的损害,若修复不完全则容易形成瘢痕,影响肌肉功能.骨骼肌损伤在中医学中属于"筋伤"的范畴,推拿作为传统治疗筋伤病的重要方式之一,在治疗骨骼肌损伤中有广泛的应用.近些年逐渐开展了关于推拿修复骨骼肌损伤机制的研究,通过文献总结,发现推拿可通过磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、Notch、Wnt及过氧化物酶体增殖因子活化受体(PPAR)信号通路对骨骼肌的修复产生影响.推拿以肌卫星细胞为重点,通过促进如成肌调节因子(MRFs)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)等正向调节因子的表达,抑制如转化生长因子-β(TGF-β)、生长分化因子-8(GDF-8)、结缔组织生长因子(CTGF)等负向调节因子的表达,以及下调肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)等炎性因子的浓度,来发挥促进肌纤维重塑、防止细胞外基质过度沉积、减轻炎症反应以及减缓骨骼肌纤维化的作用.除此之外,推拿还可以通过促进细胞合理自噬、修复细胞膜、调节氧化应激及脂肪代谢等反应促进组织修复.本文聚焦于推拿修复骨骼肌损伤的机制,以期为进一步研究提供参考.

目的 探讨N6-甲基腺苷(m6A)甲基化相关因子在骨骼肌损伤后修复过程中的时间动态表达及其对损伤过程中巨噬细胞炎症反应的调控作用.方法 建立BaCl2 损伤小鼠腓肠肌模型,对照组和损伤组每组 4 只小鼠.分别于小鼠损伤后第 1、3、5、7、9 天取腓肠肌组织进行实验;分离培养原代腓肠肌肌组织细胞,肌卫星细胞,肌细胞和培养成肌细胞系C2C12细胞,添加地塞米松(DEX,50 μmol/L)处理细胞模拟损伤;脂多糖(LPS,100 μg/L)处理巨噬细胞系RAW264.7 细胞模拟骨骼肌损伤后的炎症反应,LPS处理前添加STM2457(30 μmol/L)抑制m6A甲基转移酶 3(Mettl3)的作用.利用 Real-time PCR和 Western blotting方法检测 m6A甲基化相关因子(Writers,Erasers,Readers)的表达和炎症因子的表达.结果 肌纤维随着损伤时间的延长,出现溶解后逐渐修复,单核/巨噬细胞数量先增加后减少,配对盒 7(Pax7)mRNA水平随着损伤时间的变化先升高后降低.与对照组相比,腓肠肌中的m6A甲基化相关因子的mRNA水平和蛋白水平在损伤第 1 天时变化不显著,到损伤第 3 天显著升高(P＜0.05);损伤后第 5 天与第 3 天相比显著下降(P＜0.05);损伤后第 7 天和第 9 天与对照组相比差异无显著性.DEX降低了原代肌卫星细胞和C2C12 细胞m6A甲基转移酶因子的mRNA表达水平(P＜0.05),升高了甲基化识别酶因子的mRNA表达水平(P＜0.05).骨骼肌肌组织细胞和肌细胞中m6A甲基化相关因子的mRNA水平在DEX处理后均显著升高(P＜0.05).LPS导致巨噬细胞中m6A甲基化相关因子的mRNA和蛋白水平及炎症因子白细胞介素(IL)-6和IL-1β的mRNA表达水平显著升高(P＜0.05),而抑制Mettl3 之后,巨噬细胞炎症因子mRNA水平显著下降(P＜0.05).结论 m6A甲基化相关因子在受损的肌细胞和巨噬细胞炎症反应中被激活,抑制m6A甲基转移酶能够减弱巨噬细胞炎症反应.