目的:基于TGF-β1-Smads信号通路探讨活血利水复方治疗自发性高血压的潜在机制,为阐明活血利水复方治疗自发性高血压药效提供基础理论和实验依据.方法:选取14周龄雄性自发性高血压大鼠,随机分为正常对照组、模型组、卡托普利组、活血利水复方低剂量组和活血利水复方高剂量组,每组20只.采用尾动脉无创血压仪监测大鼠血压;采用苏木精—伊红(HE)染色检测大鼠主动脉超微结构.免疫组化染色检测各组主动脉转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达情况.免疫共沉淀检测各组Smad2-Smad3复合物、Smad2-Smad3-Smad4复合物的表达情况.酶联免疫吸附法(ELⅠSA)检测大鼠血清TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4、Smad7、CTGF的表达情况.结果:与正常对照组比较,模型组血压增高(P＜0.01);与模型组比较,卡托普利组从治疗后第2周开始到第4周血压降低(P＜0.01),活血利水复方低剂量组从治疗后第3周至第4周血压降低(P＜0.05,P＜0.01),活血利水复方高剂量从治疗后第1周至第4周血压显著下降(P＜0.01).经活血利水复方干预后缓解了自发性高血压大鼠的病理改变,改善了高血压血管重构.模型组TGF-β1、CTGF、TIMP1、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达显著升高,卡托普利组、活血利水方高剂量组、活血利水方低剂量组的TGF-β1、CTGF、TIMP1、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达降低,尤其卡托普利组和活血利水方高剂量组降低尤为显著.卡托普利组、活血利水复方高剂量组、活血利水复方低剂量组相对于模型组Smad2-Smad3、Smad2、Smad3、Smad4表达减少,尤其卡托普利组、活血利水复方高剂量组相对于模型组Smad2-Smad3、Smad2、Smad3、Smad4表达显著减少.与模型组对比,活血利水复方低剂量组TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4表达显著下降(P＜0.05),Smad7、CTGF表达差异无统计学意义(P＞0.05).与模型组对比,卡托普利组TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4、CTGF表达显著下降(P＜0.05或P＜0.01),Smad7表达显著升高(P＜0.05);活血利水复方高剂量组TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4、CTGF均有不同程度的降低(P＜0.05或P＜0.01),Smad7表达升高(P＜0.05).结论:活血利水复方可以通过TGF-β1-Smads信号通路干预有效治疗自发性高血压,为自发性高血压后期的临床治疗及相关研究提供了理论依据.

目的 探讨肠道交感神经在颈动脉窦压力感受器电刺激(carotid baroreceptor stimulation,CBS)改善肥胖相关性高血压(obesity-related hypertension,OH)中的作用.方法 20只雄性SD大鼠随机分为正常对照(C-sham)组、OH假手术(OH-sham)组、OH植入CBS刺激仪(OH-CBS)组、OH腹腔注射6-羟基多巴胺(OH-6-OHDA-sham)组,每组各5只.采用高脂饮食和10％果糖水喂养4周建立OH模型.所有大鼠均在第4周末植入CBS刺激仪,OH-CBS组仪器发放电刺激,OH-sham组、C-sham组和OH-6-OHDA-sham组仪器不发放刺激,OH-6-OHDA-sham组于第6周腹腔注射6-OHDA.每周测量所有大鼠的血压及体质量;12周后,称重内脏脂肪含量,检测血清糖脂代谢指标;取回肠组织,免疫荧光染色法检测酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)、黏糖蛋白 2(mucin-2,MUC2)、胞质紧密粘连蛋白 1(zonula occludens-1,ZO-1),实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测 MUC2、ZO-1 和白细胞介素-22(interleukin-22,IL-22)水平.结果 与C-sham组比较,OH-sham组的肠道TH过量表达(P＜0.05),血压、体质量、内脏脂肪含量、血清低密度脂蛋白、葡萄糖、游离脂肪酸、甘油三酯、总胆固醇明显升高(P＜0.05),血清高密度脂蛋白、IL-22、MUC2、ZO-1的表达降低(P＜0.05);OH-CBS组和OH-6-OHDA-sham组则明显减少高脂、高糖喂养下的TH过度表达,降低OH大鼠血压、体质量、内脏脂肪含量、血清低密度脂蛋白、葡萄糖、游离脂肪酸、甘油三酯、总胆固醇,升高血清高密度脂蛋白、IL-22、MUC2、ZO-1的表达(P＜0.05).结论 肠道交感神经在CBS改善OH中起着重要作用.

目的:探讨自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat, SHR)脑缺血再灌注后血压和血清生物钟蛋白水平的变化以及两者的关联性。方法:采用大脑中动脉闭塞法在授时因子时间(zeitgeber time, ZT)0点制备SHR脑缺血再灌注模型，模型制作后连续监测24 h内收缩压。每隔3 h取大鼠尾静脉血，应用酶联免疫吸附法检测血清生物钟蛋白(CLOCK、BMAL1、PER1和CRY1)水平变化。应用Pearson相关分析判断脑缺血再灌注后血压昼夜节律模式与生物钟蛋白水平波动的关系。结果:假手术组大鼠存在多种血压模式，包括杓型(53%)、非杓型(27%)、超杓型(13%)和反杓型(7%)，以杓型模式为主。相比之下，模型组大鼠血压紊乱程度加重，以非杓型为主，比例高达40%；超杓型和反杓型比例也有所提高，分别为27%和13%；杓型血压占比降至20%。模型组血清CLOCK水平相对稳定，而BMAL1、PER1和CRY1的昼夜节律与假手术组相比出现明显改变。Pearson相关分析显示，PER1与杓型( r＝-0.565， P＝0.002)和超杓型( r＝-0.531， P＝0.001)血压模式呈负相关，与非杓型血压呈显著正相关( r＝0.620， P<0.001)。 结论:SHR脑缺血再灌注后血压昼夜节律模式发生明显紊乱，且与Per1基因的调控密切相关。

目的:探讨肿瘤坏死因子α（TNF-α）与慢性血栓栓塞性肺动脉高压（CTEPH）大鼠肺血管重塑的关系。方法:2020年1-6月选取哈尔滨医科大学实验动物中心提供的Wister大鼠104只，采用随机数字表法分为CTEPH组（52只）、假手术组（52只）。CTEPH组经左颈外静脉注入栓子，制备CTEPH模型，假手术组注入等量0.9%氯化钠注射液。栓塞7 d、1个月时检测相关指标。结果:栓塞7 d、1个月，假手术组血浆TNF-α［（45.62±1.65）ng/L、（46.24±2.82）ng/L］均低于CTEPH组的（47.15±1.58）ng/L、（48.85±2.96）ng/L（ t=3.48、3.31，均 P < 0.05）；栓塞后7 d、1个月，假手术组肺动脉平均压（mPAP）均低于CTEPH组（ t=1.89、3.11，均 P < 0.05）；栓塞后7 d、1个月，假手术组肺动脉TNF-α mRNA均低于CTEPH组（ t=3.06、3.36，均 P < 0.05）；栓塞后7 d、1个月，假手术组肺动脉管壁面积/管总面积（WA/TA）均低于CTEPH组（ t=1.73、4.17，均 P < 0.05）；血浆TNF-α与肺动脉TNF-α mRNA表达呈正相关（ r=0.82， P < 0.05）；血浆TNF-α、肺动脉TNF-α mRNA与mPAP均呈正相关（ r=0.62、0.73，均 P < 0.05），与WA/TA均呈正相关（ r=0.61、0.63，均 P < 0.05）。 结论:TNF-α可能经促进肺动脉压提升、血管重塑参与CTEPH发病。

目的:明确肺高血压(PH)大鼠肺组织肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)表达的变化。方法:SPF级健康雄性SD大鼠16只，8周龄，体质量200~220 g，采用随机数字表法分为2组( n＝8)：对照组(C1组)和PH1组。采用皮下注射野百合碱的方法制备大鼠PH模型。模型制备开始后28 d时，测量大鼠平均肺动脉压力(mPAP)，计算Fulton指数，计算肺中小动脉中膜厚度百分比，计算肌化血管百分比，Western blot法检测肺组织TRAF6、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、磷酸化信号转导和转录激活因子(p-STAT3)和G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)表达，计算p-STAT3/STAT3，免疫共沉淀法检测TRAF6与STAT3的相互作用。原代培养正常大鼠肺动脉平滑肌细胞(C2组)和PH大鼠肺动脉平滑肌细胞(PH2组)于6孔板( n＝3)。采用qPCR法检测TRAF6 mRNA表达，Western blot法检测TRAF6、STAT3、p-STAT3和Cyclin D1表达。 结果:与C1组比较，PH1组大鼠mPAP、Fulton指数、肺中小动脉中膜厚度百分比及肌化血管百分比升高，肺组织TRAF6和Cyclin D1表达上调，p-STAT3/STAT3升高( P<0.05或0.01)，免疫共沉淀结果显示，TRAF6和STAT3相互作用。与C2组比较，PH2组TRAF6及其mRNA表达上调，Cyclin D1表达上调，p-STAT3/STAT3升高( P<0.05或0.01)。 结论:PH大鼠肺组织TRAF6表达上调，可能与促进STAT3活化，导致肺血管重构有关。

目的:评价依达拉奉对醛固酮诱导大鼠高血压时肾损伤的影响。方法:清洁级健康雄性SD大鼠24只，6~8周龄，体重200~220 g，采用随机数字表法分为3组( n＝8)：假手术组(S组)、高血压组(H组)和依达拉奉组(E组)。采用皮下置入醛固酮微量渗透泵(给药速率0.75 μg·kg -1·h -1)4周的方法制备大鼠高血压模型。E组皮下置入醛固酮微量渗透泵，每日经尾静脉注射依达拉奉10 mg/kg，H组注射生理盐水10 ml/kg，连续4周。于微量渗透泵置入前、置入1、2、3、4周时测量大鼠尾动脉收缩压。给药4周后，测定24 h尿白蛋白浓度、血浆Cr和BUN浓度，取双侧肾脏称重，测定右肾重量/体重(RKW/BW)比值，采用PAS法测定肾小球系膜外基质面积/肾小球面积百分比(M/G)，采用Masson染色法测定胶原容积分数(CVF)，采用Western blot法测定肾组织醛固酮受体(MCR)和Ⅰ型胶原蛋白表达。 结果:与S组比较，H组微量渗透泵置入后收缩压升高，24 h尿白蛋白浓度、血浆Cr和BUN浓度升高，RKW/BW比值、M/G和CVF升高，肾组织Ⅰ型胶原蛋白和MCR表达上调( P<0.05)；与H组比较，E组微量渗透泵置入后收缩压降低，24 h尿白蛋白浓度、血浆Cr和BUN浓度降低，RKW/BW比值、M/G和CVF降低，肾组织Ⅰ型胶原蛋白和MCR表达下调( P<0.05)。 结论:依达拉奉可减轻醛固酮诱导的高血压大鼠的肾损伤，其机制与下调MCR表达有关。

目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗合并高血压缺血性脑卒中大鼠的疗效并探讨相关作用机制。方法:采用随机数字表法将72只雄性自发性高血压大鼠(SHR)分为空白组、模型组及BMSCs组，每组24只大鼠。将模型组及BMSCs组大鼠制成大脑中动脉闭塞(MCAO)脑梗死模型，空白组不给予任何特殊处理。于造模24 h后BMSCs组大鼠经尾静脉注射1 ml BMSCs溶液(细胞浓度为1×10 6个/ml)，同期模型组及空白组则分别注射1 ml磷酸盐缓冲液(PBS)。在术后3 d、7 d及14 d时分别对各组大鼠进行改良神经功能缺损评分(mNSS)及2，3，5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色，并采用RT-PCR和Western blot技术分别检测各组大鼠梗死侧脑组织血管内皮生长因子(VEGF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)mRNA及蛋白表达。 结果:在术后3 d、7 d及14 d时，BMSCs组神经功能缺损评分[(7.4±1.34)分vs (9.2±0.84)分，(6.2±0.84)分vs (8.8±0.84)分，(5.0±1.00)分vs (7.8±0.84)分]、脑梗死面积占比[(39.09±1.66)% vs (45.78±1.26)%，(26.20±1.47)% vs (43.11±1.06)%，(22.45±1.45)% vs (38.16±0.87)%]均较模型组明显降低( P<0.01)；随着术后时间延长，BMSCs组脑梗死面积逐渐减小。在术后3 d、7 d及14 d时，空白组、模型组VEGF及GDNF mRNA表达组间差异均无统计学意义( P>0.05)；与空白组及模型组比较，BMSCs组缺血脑组织中VEGF、GDNF蛋白表达及mRNA表达均明显增强，组间差异均具有统计学意义( P<0.05)。 结论:BMSCs移植对合并高血压的缺血性脑卒中大鼠具有神经保护作用，其治疗机制可能与上调缺血脑组织中VEGF、GDNF含量有关。

目的:评价丙泊酚对大鼠肺动脉高压致右心室肥厚的影响。方法:清洁级健康成年雄性Wistar大鼠22只，体重250～280 g，采用随机数字表法分为3组：对照组(C组， n＝8)、肺动脉高压组(PH组， n＝6)和丙泊酚组(P组， n＝8)。PH组及P组腹腔注射野百合碱60 mg/kg制备大鼠肺动脉高压模型，C组腹腔注射等容量生理盐水。P组于造模后2周开始腹腔注射丙泊酚100 mg/kg，2次/周，连续注射6周。分别于造模前和给药结束后测量大鼠体重，计算体重差值(△BW＝给药结束后体重－给药前体重)。于给药结束后，采用心脏超声测量右室舒张末期前后径(RVEDD)、右室前壁舒张末期厚度(RVWTd)、室间隔舒张末期厚度(IVSd)、左室后壁舒张末期厚度(LVPWd)、肺动脉瓣口最大峰值流速(PV)。然后处死大鼠，取肺组织和右心室心肌组织，HE染色观察病理学结果，Masson染色观察右心室心肌组织纤维化程度；采用免疫组化法测定肺组织和右心室心肌组织IL-6和TNF-α的表达水平。 结果:与C组比较，PH组△BW和PV降低，RVWTd、IVTd和RVEDD增加，肺小动脉壁厚度和右心室心肌细胞穿核面积增加，肺组织和右心室心肌组织IL-6和TNF-α的表达上调( P<0.05或0.01)，光镜下肺组织炎症细胞浸润及结构紊乱，右心室心肌细胞间隙增宽，出现明显纤维化；与PH组比较，P组△BW和PV升高，RVWTd、IVTd和RVEDD减少，肺小动脉壁厚度及右心室心肌细胞穿核面积减少，肺组织和右心室心肌组织IL-6和TNF-α的表达下调( P<0.05或0.01)，光镜下可见肺组织炎症细胞浸润、结构紊乱、右心室心肌细胞间隙及纤维化程度明显改善。 结论:丙泊酚可减轻大鼠肺动脉高压致右心室肥厚，其机制可能与降低早期炎症反应有关。

目的:评价紫杉醇对肺动脉高压大鼠肥大细胞-趋化因子配体2(CCL2)-巨噬细胞轴的影响。方法:SPF级健康雄性SD大鼠30只，8～10周龄，体重180～220 g，采用随机数字表法分为3组( n＝10)：对照组(C组)、肺动脉高压组(PH组)和紫杉醇组(PTX组)。采用皮下注射野百合碱60 mg/kg的方法制备大鼠肺动脉高压模型，模型制备开始后25 d，PTX组经尾静脉注射紫杉醇2 mg/kg，1次/4 d，共4次。余2组注射等量生理盐水。模型制备后40 d，行平均肺动脉压(mPAP)测定。随后取心脏烘干后分别称重右心室(RV)和左心室加室间隔(LV+S)，计算Fulton指数。取左下肺叶，HE染色测算肺血管中膜厚度比值，免疫组化法计数每个血管周围Tryptase +、CD68 +和CD163 +总细胞数，并计算平均值，计数并计算血管Ki67阳性细胞数量百分比，测算肌化血管比例。ELISA法检测CCL2含量，Western blot法检测裂解caspase-3和Cyclin D1表达。 结果:与C组比较，PH组和PTX组mPAP、Fulton指数、血管中膜厚度比值和肌化血管比例升高，Tryptase +、CD68 +和CD163 +细胞数量增加，Ki67 +细胞百分比升高，肺组织裂解caspase-3表达下调，PH组肺组织Cyclin D1表达上调( P<0.05)，PTX组差异无统计学意义( P>0.05)；与PH组比较，PTX组mPAP、Fulton指数、血管中膜厚度比值及肌化血管比例降低，Tryptase +、CD68 +和CD163 +细胞数量减少，Ki67 +细胞百分比降低，肺组织CCL2和Cyclin D1表达下调，裂解caspase-3表达上调( P<0.05)。 结论:紫杉醇缓解大鼠肺动脉高压的机制与抑制肥大细胞-CCL2-巨噬细胞轴有关。

目的:评价七氟烷对肺动脉高压大鼠右心室心肌纤维化的影响。方法:SPF级健康成年雄性Wistar大鼠18只，体重260~300 g，采用随机数字表法分为3组( n＝6)：对照组(C组)、肺动脉高压组(PAH组)和肺动脉高压+七氟烷组(PS组)。PAH组及PS组腹腔注射野百合碱60 mg/kg制备肺动脉高压模型，C组腹腔注射等容量生理盐水。PS组注射完毕后吸入1.5 MAC七氟烷1 h，2次/周，共6周。于第6周末行心脏超声检查，测量右心室舒张末期前后径(RVEDD)、右心室前壁舒张末期厚度(RVWTd)、室间隔舒张末期厚度(IVSTd)、肺动脉内径(PAID)及肺动脉瓣口最大峰值流速(PV)。于第6周末取大鼠心脏，称量右心室、室间隔和左心室重量，计算Fulton′s指数；取右肺下叶组织，HE染色后测量血管壁外径和血管壁内径，计算血管壁厚度指数(WT)，测量总血管面积和管腔面积，计算管壁面积指数(WA)。取右心室心肌组织，行Masson染色，光镜下观察右心室心肌纤维化程度；行免疫荧光染色，观察右心室心肌组织TGF-β1的表达情况；采用Western blot检测右心室心肌组织转化生长因子β1(TGF-β1)、磷酸化Smad3(p-Smad3)和Smad7的表达水平。 结果:与C组相比，PAH组Fulton′s指数、RVEDD、RVWTd、IVSTd、PAID、WT和WA升高，PV降低，右心室心肌组织TGF-β1和p-Smad3表达上调，Smad7表达下调( P<0.01)，发生心肌纤维化。与PAH组相比，PS组Fulton′s指数、RVEDD、RVWTd、IVSTd、PAID、WT和WA降低，PV升高，右心室心肌组织TGF-β1和p-Smad3表达下调，Smad7表达上调( P<0.05或0.01)，心肌纤维化明显改善。 结论:七氟烷可改善大鼠肺动脉高压致右心室心肌纤维化，其机制可能与抑制TGF-β1/Smad3信号通路激活有关。