目的:研究麦冬皂苷D对脂多糖（LPS）诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的保护作用及其作用机制。方法:培养小鼠巨噬细胞RAW264.7，按随机数字表法分为正常对照组、模型组和麦冬皂苷D预处理组。采用CCK-8法检测麦冬皂苷D对RAW264.7细胞活性的影响；采用ELISA法检测细胞上清液TNF-α、IL-1β、IL-6、活性氧自由基（ROS）、MDA、SOD水平；Western Blot检测细胞NF-κB、TLR4、核因子E2相关因子（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达。结果:与模型组比较，麦冬皂苷D组细胞上清液TNF-α、IL-1β、IL-6、ROS、MDA水平降低（ P<0.05），SOD水平升高（ P<0.05），NF-κB［（0.76±0.10）比（2.26±0.17）］、TLR4［（0.98±0.09）比（1.74±0.19）］蛋白表达降低（ P<0.05），Nrf2［（0.85±0.03）比（0.54±0.03）］、HO-1［（0.97±0.11）比（0.37±0.04）］蛋白表达升高（ P<0.05）。 结论:麦冬皂苷D可能通过抑制TLR4/NF-κB通路减轻炎症反应，并激活Nrf2/HO-1通路减轻氧化损伤，发挥保护作用。

目的:探索麦冬皂苷D对小鼠放射性肺损伤的防护作用及其机制。方法:60只C57BL/6雌性小鼠按随机抽样法分为4组：健康对照组、单纯照射组、照射+麦冬皂苷D组、照射+地塞米松组，每组15只。用6 MV X射线15 Gy单次照射小鼠。于照射前3 d开始，照射+麦冬皂苷D组给予10 mg/kg麦冬皂苷D溶液腹腔注射，照射+地塞米松组给予10 mg/kg地塞米松溶液腹腔注射，健康对照组和单纯照射组给予生理盐水腹腔注射，每日1次，至照后1周。于照射后3 d、1周、6周取材，苏木精－伊红(HE)染色法和Masson染色法观察肺组织病理学变化，免疫组织化学法观察8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、p53、p53上调凋亡因子(PUMA)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、Ⅰ型胶原纤维(Collagen Ⅰ)、Ⅲ型胶原纤维(Collagen Ⅲ)表达，蛋白提取及免疫印迹实验(Western blot)法进一步验证凋亡相关蛋白p53、PUMA、Caspase-3的表达，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测转化生长因子β1(TGF-β1)和白介素6(IL-6)的表达。结果:照后1周，麦冬皂苷D能减轻肺组织的出血、渗出、水肿、炎症浸润，降低了照射后肺组织8-OHdG、p53、PUMA、caspase-3氧化应激及凋亡相关蛋白的表达( t＝8.39、12.60、5.92、7.00， P<0.05)。在照后3 d、1周、6周，麦冬皂苷D降低了小鼠血液中TGF-β1( t＝9.32、8.97、6.83， P<0.05)和IL-6( t＝8.22、7.80、8.28， P<0.05)的表达。在照射后6周，麦冬皂苷D可减轻肺间质的Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ生成( t＝6.41、7.50， P<0.05)。 结论:麦冬皂苷D对放射性肺损伤有防护作用，可缓解放射性肺炎和肺纤维化早期的胶原沉积，其作用机制可能是通过减轻机体氧化应激，减少炎症相关因子的表达，抑制肺组织细胞凋亡，从而抑制胶原产生。

目的:探讨麦冬皂苷D联合沉默环氧合酶-2(COX-2)基因对人胰腺癌BxPC-3细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法:将BxPC-3细胞分为空白对照组、麦冬皂苷D高剂量组(40 μmol/L)、中剂量组(20 μmol/L)、低剂量组(10 μmol/L)；将沉默COX-2后的细胞分为空白组、COX-2抑制组(50 pmol/ml siRNA-COX-2)、麦冬皂苷D组(20 μmol/L)与联合用药组(麦冬皂苷D 20 μmol/L+50 pmol/ml siRNA-COX-2)，采用CCK-8法检测细胞增殖活力，划痕实验检测细胞迁移距离，Transwell法检测细胞侵袭程度，采用实时定量PCR(RT-qPCR)法检测BxPC-3细胞中COX-2基因的相对表达水平，蛋白质印迹法检测BxPC-3细胞中COX-2、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白相对表达水平。结果:空白对照组，麦冬皂苷D高、中、低剂量组的细胞增殖率分别为(100.0±4.9)%、(71.8±5.4)%、(80.5±5.8)%和(89.7±5.7)%，细胞迁移距离分别为(279.8±24.0)μm、(141.9±21.2)μm、(168.8±37.1)μm和(224.6±19.9)μm，侵袭数量吸光度( A)值分别为1.107±0.095、0.390±0.030、0.596±0.017和0.826±0.034，差异均具有统计学意义( F＝19.770， P<0.001； F＝48.270， P<0.001； F＝198.400， P<0.001)，麦冬皂苷D高、中、低剂量组均明显低于空白对照组(均 P<0.05)；COX-2基因相对表达水平分别为1.007±0.178、0.387±0.169、0.567±0.142和0.740±0.030，蛋白相对表达水平分别为1.000±0.033、0.654±0.085、0.762±0.110和0.881±0.049，差异均具有统计学意义( F＝10.280， P＝0.004； F＝11.780， P＝0.003)，麦冬皂苷D高、中剂量组均低于空白对照组(均 P<0.05)，麦冬皂苷D低剂量组与空白对照组差异均无统计学意义(均 P>0.05)；选择麦冬皂苷D中剂量(20 μmol/L)作为后续实验浓度。沉默COX-2后，空白组、COX-2抑制组、麦冬皂苷D组和联合用药组的细胞增殖率分别为(100.0±2.8)%、(68.4±6.7)%、(67.7±5.9)%和(57.0±8.5)%，迁移距离分别为(274.4±23.8)μm、(217.0±18.8)μm、(186.2±18.6)μm和(115.7±15.8)μm，侵袭数量 A值分别为1.143±0.092、0.791±0.058、0.715±0.026和0.424±0.058，差异均具有统计学意义( F＝34.430， P<0.001； F＝103.400， P<0.001； F＝131.100， P<0.001)，各处理组细胞的增殖率、迁移距离、侵袭数量均明显低于空白组(均 P<0.001)；与COX-2抑制组和麦冬皂苷D组相比，联合用药组细胞增殖、迁移、侵袭能力均被明显抑制(均 P<0.05)；COX-2抑制组与麦冬皂苷D组相比，仅迁移距离差异有统计学意义( P<0.05)。各组COX-2蛋白相对表达水平分别为0.995±0.037、0.779±0.060、0.806±0.076和0.645±0.079，HIF-1α蛋白相对表达水平分别为1.083±0.104、0.749±0.070、0.736±0.070和0.394±0.016，VEGF蛋白相对表达水平分别为1.016±0.103、0.757±0.090、0.745±0.021和0.603±0.023，差异均具有统计学意义( F＝14.650， P＝0.001； F＝45.220， P<0.001； F＝18.180， P<0.001)，各处理组3种蛋白表达水平均明显低于空白组(均 P<0.05)；与COX-2抑制组和麦冬皂苷D组相比，联合用药组COX-2、HIF-1α与VEGF蛋白相对表达水平均显著降低(均 P<0.05)；COX-2抑制组与麦冬皂苷D组相比，3种蛋白表达差异均无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:麦冬皂苷D联合沉默COX-2基因能抑制胰腺癌细胞增殖、迁移与侵袭，其机制可能与抑制COX-2通路并降低HIF-1α、VEGF蛋白表达水平有关。

目的 采用多成分定量分析结合化学计量学和熵权逼近理想解排序(TOPSIS)法综合评价益肺清化膏质量.方法 采用高效液相色谱法测定14批益肺清化膏(S1～S14)中党参炔苷、紫丁香苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、黄芪紫檀烷苷、黄芪异黄烷苷、黄芪甲苷、去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、鸡矢藤次苷甲酯、车叶草苷酸、车叶草苷、麦冬甲基黄烷酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B的含量,然后利用化学计量学(主成分分析和正交偏最小二乘-判别分析)和熵权TOPSIS法对14批益肺清化膏的质量进行评价.结果 化学计量学结果显示,14批益肺清化膏可聚为3类,编号S1～S6的样品为第Ⅰ类,编号S7～S10的样品为第Ⅱ类,编号S11～S14的样品为第Ⅲ类;毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、鸡矢藤次苷甲酯、黄芪甲苷、黄芪紫檀烷苷、党参炔苷、麦冬甲基黄烷酮A和桔梗皂苷E的变量重要性投影值均大于1.熵权TOPSIS分析结果显示,14批样品的最优解的欧氏贴近度在0.152 9～0.736 6之间,以编号S14样品最高(0.736 6).结论 14批益肺清化膏中以编号S14样品的质量最优,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷等8个成分可能是影响益肺清化膏质量的差异标志物.

目的 建立参黄养阴胶囊多组分定量控制的方法,探索化学模式识别及灰色关联度分析(GRA)模型在参黄养阴胶囊质量评价中的应用.方法 采用HPLC同时测定参黄养阴胶囊中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rd、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、美迪紫檀素、丹参素钠、丹酚酸B、丹参酮ⅡA、麦冬甲基黄烷酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B的含量.采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱,以乙腈-0.5%磷酸为流动相,梯度洗脱,检测波长分别为203、280、296 nm.通过化学模式识别和GRA对多组分含量结果进行分析,构建参黄养阴胶囊综合质量评价体系.结果 外标法方法学验证结果均符合要求.化学模式识别分析显示,丹酚酸B、芒柄花苷、丹参酮ⅡA、毛蕊异黄酮、人参皂苷Rb3和人参皂苷Rb1是影响参黄养阴胶囊产品质量的主要因子.GRA相对关联度为0.319 8～0.642 1,有利于分析产品间的差异.结论 多成分定量联合化学模式识别及GRA可用于参黄养阴胶囊的质量评价.

目的 探讨麦冬皂苷D调节白细胞介素-6(IL-6)/Janus激酶2(JAK2)/转录激活因子3(STAT3)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞凋亡的影响.方法 将体外培养的A549 AT Ⅱ细胞均随机分为4组:对照组、LPS组、LPS+麦冬皂苷D组、LPS+麦冬皂苷D+colivelin(JAK2/STAT3信号激活药)组,除对照组外其余各组细胞建立损伤模型的同时以麦冬皂苷D和colivelin分组处理.以细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验、流式细胞术分别检测各组细胞增殖与凋亡情况;以蛋白质印迹法检测各组细胞IL-6/JAK2/STAT3信号通路蛋白表达水平.结果 对照组、LPS组、LPS+麦冬皂苷D组、LPS+麦冬皂苷D+colivelin组的A549细胞凋亡率分别为(2.52±0.73)％、(52.43±4.14)％、(1.67±0.52)％和(47.94±3.43)％,IL-6 蛋白水平分别为0.14±0.03、0.49±0.05、0.17±0.04 和 0.45±0.06,p-JAK2/JAK2 蛋白水平分别为0.17±0.04、0.64±0.08、0.19±0.06 和 0.61±0.07,p-STAT3/STAT3蛋白水平分别为 0.20±0.06、0.69±0.10、0.22±0.07 和 0.65±0.09;AT Ⅱ 细胞凋亡率分别为(3.01±0.69)％、(55.16±3.94)％、(2.35±0.71)％和(50.28±3.78)％,IL-6 蛋白水平分别为 0.11±0.03、0.87±0.13、0.19±0.04和 0.84±0.12,p-JAK2/JAK2 蛋白水平分别为 0.13±0.04、0.56±0.08、0.15±0.03和0.53±0.07,p-STAT3/STAT3 蛋白水平分别为 0.30±0.08、0.79±0.14、0.33±0.09和0.75±0.13.上述指标:对照组、LPS+麦冬皂苷D组与LPS组比较,LPS+麦冬皂苷D+colivelin组与LPS+麦冬皂苷D组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 麦冬皂苷D可通过抑制IL-6/JAK2/STAT3信号通路激活而降低LPS诱导的炎症与氧化应激水平,最终减轻LPS诱导的肺泡上皮细胞凋亡.

目的 建立麦门冬汤基准样品的指纹图谱并结合化学模式识别法进行评价,同时建立多指标成分含量测定方法.方法 采用超高效液相色谱-蒸发光散射检测器(UPLC-ELSD)和UPLC-二极管阵列检测器(PDA)建立麦门冬汤的指纹图谱,明确共有峰归属并进行相似度分析、聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析等化学模式识别研究.测定样品中10种指标性成分的质量分数.结果 建立麦门冬汤基准样品2套指纹图谱方法,相似度均大于0.90,标定了24个共有峰,分别来自方中麦冬、甘草、人参3个药味;化学模式识别法将20批样品分为5类,筛选出影响不同批次基准样品质量差异的5种关键成分;甲基麦冬二氢高异黄酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B、麦冬皂苷D和麦冬皂苷C、麦冬龙脑苷、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、甘草苷、甘草酸质量分数均值的±30%范围分别为0.001%～0.003%、0.002%～0.004%、0.003%～0.005%、0.04%～0.08%、0.02%～0.03%、0.08%～0.16%、0.06%～0.11%.结论 建立的麦门冬汤基准样品质量分析方法科学、准确且稳定,可为经典名方麦门冬汤相关制剂的开发研究及其质量控制提供参考依据.

目的:探究麦冬皂苷 D 调节 cAMP/PKA/CREB 信号通路对炎症性肠病(IBD)大鼠炎性损伤的影响.方法:将大鼠分为对照组、模型组、麦冬皂苷 D 低剂量组、麦冬皂苷 D 高剂量组和麦冬皂苷D高剂量+H-89(cAMP 抑制剂)组.检测大鼠质量和大鼠结肠长度;酶联免疫吸附法检测血清 IL-17、IL-6、IL-10、TNF-α、cAMP 水平;流式细胞术检测大鼠外周血中Th17、Treg 细胞比例;HE 染色检测结肠组织病理损伤;Western blot检测大鼠结肠组织中Bax、Bcl-2 以及cAMP/PKA/CREB信号通路相关蛋白表达.结果:治疗结束后,与对照组相比,模型组大鼠结肠组织显著损伤,体质量、结肠长度、血清IL-10、cAMP 水平、外周血Treg细胞比例、结肠组织Bcl-2、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达显著降低,血清IL-17、IL-6、TNF-α水平、外周血中Th17 比例和Th17/Treg比值、Bax 蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组相比,麦冬皂苷D 低、高剂量组大鼠结肠组织显著减轻,体质量、结肠长度、血清 IL-10、cAMP 水平、外周血Treg细胞比例、结肠组织 Bcl-2、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB 蛋白表达显著升高,血清IL-17、IL-6、TNF-α水平、外周血中 Th17 比例和 Th17/Treg 比值、Bax 蛋白表达显著降低(P<0.05);H-89 可部分逆转麦冬皂苷D对炎症性肠病大鼠的治疗作用(P<0.05).结论:麦冬皂苷D可降低IBD大鼠炎症反应和结肠组织损伤,可能是通过激活cAMP/PKA/CREB信号通路实现的.

目的:建立UPLC-MS/MS多指标含量测定方法,结合多元统计分析比较麦冬和湖北麦冬的差异.方法:采用多反应监测(MRM)模式,Shimadzu Shim-pack gist C18(100 mm×2.1 mm,2 μm)色谱柱,以乙腈-0.1％甲酸溶液为流动相,测定12个成分(6个皂苷类、5个黄酮类和1个有机酸类)的含量,结合聚类分析和正交偏最小二乘判别分析进行综合评价.结果:12个成分在相应的浓度范围内线性关系良好(r≥0.9990),平均加样回收率为98.73％～102.09％,RSD≤3.20％.2种麦冬区分明显,麦冬中大部分成分含量显著高于湖北麦冬.甲基麦冬高黄酮A、甲基麦冬黄烷酮A、山麦冬皂苷B、甲基麦冬黄烷酮B、甲基麦冬高黄酮B、对香豆酸、麦冬苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-β-D-吡喃葡萄糖苷、麦冬皂苷C等8个成分为其质量差异标志物.结论:该方法简便高效,可用于区分麦冬和湖北麦冬.

目的:建立同时测定桔贝合剂中苦杏仁苷、甘草苷、贝母素甲、桔梗皂苷D、黄芩苷和麦冬皂苷D 6个成分含量的一测多评方法.方法:采用Waters T3 C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱;流动相为乙腈-1％乙酸溶液,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;柱温为30℃;蒸发光检散射检测器(ELSD).以甘草苷为内参物,分别建立其他5个成分的相对校正因子,并计算其含量.结果:苦杏仁苷、甘草苷、贝母素甲、桔梗皂苷D、黄芩苷、麦冬皂苷D在各自浓度范围内线性关系良好,10批桔贝合剂中6个成分的一测多评法与外标法的实测值之间无显著性差异,含量分别为 0.116～0.245 mg/mL、0.035～0.048 mg/mL、0.012～0.055 mg/mL、0.086～0.125 mg/mL、0.177～0.432 mg/mL、0.011～0.032 mg/mL.结论:该方法结果准确、重复性好,可用于桔贝合剂的质量控制.