目的:探讨睾丸消退性生殖细胞肿瘤的临床病理特征及鉴别诊断。方法:回顾性分析上海交通大学医学院附属瑞金医院2016至2020年收治的3例睾丸消退性生殖细胞肿瘤的临床、影像学资料、病理形态学和免疫表型特征，并复习相关文献。结果:3例患者平均年龄32岁。例1术前甲胎蛋白水平升高（810.18 μg/L），因腹膜后占位行“根治性胰十二指肠切除术+腹膜后病损切除”。术后病理示胚胎性癌，需除外性腺转移，行彩超见右侧睾丸实性占位，部分区域低回声伴散在钙化。例2为“右锁骨上淋巴结穿刺标本”，胸片提示双肺多发转移灶，穿刺活检病理示转移性胚胎性癌，行双侧睾丸彩超见右侧睾丸内异常钙化灶。例3因发现右侧睾丸囊实性占位伴钙化。3例均行“根治性右侧睾丸切除术”。大体观察：睾丸瘢痕区界限清楚，灰白-棕黄，单灶或多灶，最大径0.6~1.5 cm。镜下观察：瘢痕内见淋巴细胞和浆细胞浸润、玻璃样变的管状结构影、簇状血管增生、吞噬含铁血黄素的巨噬细胞；瘢痕周边见萎缩和硬化的生精小管、簇状的间质细胞（Leydig cells）增生、管内微小或粗颗粒状钙化，其中例1见精原细胞瘤和原位生殖细胞肿瘤，例2见原位生殖细胞肿瘤，例3见生精细胞不典型增生。免疫表型：胚胎性癌表达SALL4、广谱细胞角蛋白（CKpan）和CD30；精原细胞瘤和原位生殖细胞肿瘤表达OCT3/4、SALL4、CD117；不典型增生的生精细胞表达CD99和SALL4，Ki-67阳性指数约20%，而OCT3/4、CD117均阴性。结论:睾丸消退性生殖细胞肿瘤罕见，性腺外的生殖细胞肿瘤首先要考虑到来自性腺睾丸转移的可能性，如果在睾丸内发现瘢痕，一定要判断是否为睾丸消退性生殖细胞肿瘤，消退机制可能与肿瘤免疫介导和局部缺血性损伤的微环境有关。

目的 探讨淋巴浆细胞淋巴瘤累及骨髓的临床病理特征、免疫表型、诊断及鉴别诊断.方法 回顾性分析51例淋巴浆细胞淋巴瘤患者的骨髓活检、免疫组织化学、流式细胞学、免疫固定电泳及Ig基因重排检查结果并复习相关文献.结果 男31例,女20例.淋巴浆细胞淋巴瘤累及骨髓的异常细胞比例在0.5％～95％不等,肿瘤性淋巴细胞增生模式以结节型为主,其周围及淋巴细胞间常见浆细胞少量增生,肥大细胞较常见,含铁血黄素颗粒多见.62.7％(32/51)为结节性骨髓浸润,29.4％(15/51)为弥漫性骨髓浸润,7.8％(4/51)为间质性骨髓浸润.51例行免疫组织化学,100％(51/51)均表达B细胞相关抗原(CD20、CD19、PAX-5),21％(11/51)表达CD23,浆细胞比例较低,0.5％～10％不等,限制性表达Ig轻链,70.6％(36/51)表达胞浆型单克隆Ig轻链Kappa;29.4％(15/51)表达胞浆型单克隆Ig轻链Lambda,Ki-67增殖指数在5％～10％.51例行流式细胞学免疫分型,均可见单克隆小B淋巴细胞及少量单克隆浆细胞.其中23例做了免疫固定电泳,17例是IgM-KAP型M蛋白,6例是IgM-LAM型M蛋白.11例做了 Ig基因重排,10例检测到IGHV、IGK基因克隆性重排,1例检测到IGK基因克隆性重排.结论 淋巴浆细胞淋巴瘤累及骨髓以结节性浸润多见,浆细胞比例可以很低,诊断需结合临床表现、骨髓活检、免疫组化、流式细胞学、免疫固定电泳及Ig基因重排检测综合诊断.

目的:基于网络药理学方法、分子对接技术和动物实验验证探讨通塞颗粒治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的作用机制.方法:①预测分析.通过中药系统药理学分析平台筛选通塞颗粒的活性成分及其对应靶点;利用人类基因(Genecards)、在线人类孟德尔遗传数据系统(OMIM)等数据库检索AECOPD疾病基因;绘制韦恩图并获取药物-疾病共同靶点;构建通塞颗粒活性成分-靶点网络图和蛋白质相互作用网络图,根据网络关系筛选核心靶点;借助R语言软件进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,使用AutoDockTool 1.5.6 软件对通塞颗粒关键活性成分和核心靶点进行分子对接.②实验验证.随机将 50 只SD大鼠分为对照组、模型组、中药组、西药组、联合组各 10 只.除对照组外,其余各组均构建AECOPD大鼠模型,并于急性加重前 2 d及其后 4 d予药物灌胃治疗.治疗结束后检测各组大鼠的肺功能指标[0.3 s用力呼气容积(FEV0.3)、用力肺活量(FVC)、0.3 s用力呼气容积与用力肺活量的比值(FEV0.3/FVC)、呼气流量峰值(PEF)],检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-17含量,通过苏木精-伊红染色法(HE)观察气道与肺组织的病理改变,采用免疫印迹法和酶联免疫吸附测定法初步验证网络药理学的预测结果.结果:通塞颗粒治疗AECOPD的关键活性成分为槲皮素、芹黄素、木犀草素、山奈酚、β-谷甾醇,主要作用于肿瘤抑制蛋白 53(TP53)、丝裂原活化蛋白激酶 3(MAPK3)等核心靶点.GO富集分析和KEGG通路富集分析结果表明,通塞颗粒治疗AECOPD与TNF、IL-17 等信号通路干预氧化应激、减少细胞凋亡、抑制炎症反应有关.分子对接结果显示,通塞颗粒的关键活性成分与治疗AECOPD的核心靶点均有较好的结合活性.动物实验研究结果显示,模型组FVC、FEV0.3、FEV0.3/FVC、PEF值均较对照组降低(P＜0.05).中药组、西药组以及联合组的FVC、FEV0.3、PEF值均较模型组升高(P＜0.05);联合组FEV0.3/FVC值较模型组升高(P＜0.05).中药组FVC、FEV0.3、FEV0.3/FVC、PEF值与西药组比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).联合组 FVC、PEF值均较中药组及西药组升高(P＜0.05);联合组 FEV0.3 较西药组升高(P＜0.05).模型组血清TNF-α、IL-17 含量均高于对照组(P＜0.05);中药组、西药组及联合组的TNF-α、IL-17 含量均低于模型组(P＜0.05);联合组血清TNF-α、IL-17 含量均低于中药组、西药组(P＜0.05).模型组肺组织磷酸化P65/非磷酸化P65、磷酸化AKT/非磷酸化AKT、磷酸化MAPK1/3/非磷酸化MAPK1/3 和非磷酸化TP53/GAPDH蛋白表达含量均高于对照组(P＜0.05);中药组、西药组以及联合组上述蛋白表达含量均低于模型组(P＜0.05);联合组上述蛋白表达含量均低于中药组、西药组(P＜0.05).结论:通塞颗粒治疗AECOPD具有多成分、多靶点、多通路、整体调节的作用特点,为后续深入研究提供了数据支持.

[目的]探究芍药汤剂及颗粒剂成分的区别,以及对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的疗效差异.[方法]采用超高效液相色谱-四级杆-时间飞行质谱仪联用技术(ultra-high-performance liquid chromatography-quadrupole/time of flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF/MS)检测两种剂型芍药汤样品,以MassLynx 4.1软件结合UNIFI软件分析结果.建立UC小鼠模型,随机分组,灌胃给药后,计算体质量下降率、疾病活动状态(disease activity index,DAI),以苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察结肠病理变化,原位末端转移酶标记(terminal-deoxynucleoitidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)检测细胞凋亡率,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细 胞介素-10(interleukin-10,IL-10)含量.[结果]芍药汤汤剂检出以小檗碱、芍药苷等为主的25种成分,颗粒剂检出以小檗碱、白杨黄素等为主的27种成分,两种剂型共同检出芍药苷、小檗碱等13种成分.与模型组比较,给药各组体质量下降率、DAI指数、病理学评分显著下降(P＜0.001);结肠上皮细胞凋亡率显著下降(P＜0.001,P＜0.01),血清TNF-α含量显著下降(P＜0.001),IL-10含量明显上升(P＜0.05).与颗粒剂比较,汤剂可明显降低体质量下降率(P＜0.05)o[结论]两种剂型芍药汤共同检出以芍药苷、小檗碱为主的13种成分,均对UC模型小鼠肠道炎症有明显改善作用;与颗粒剂相比,汤剂在改善小鼠体质量下降和保护结肠组织损伤方面疗效较好.

目的 探讨子宫内膜异位症(以下简称内异症)患者卵泡液、卵泡刺激素(FSH)及骨形态发生蛋白-15(BMP-15)对离体培养的人黄素化颗粒细胞增殖及其孕酮分泌的影响.方法 取因管性/男方因素不孕行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者促排卵后取卵日卵丘颗粒细胞.对照组用全DMEM/F-12培养液培养,试验组用分别加入12 μg/L卵泡刺激素(FSH),为FSH组、6μg/L BMP-15(BMP-15组)、5％管性/男方因素不孕患者卵泡液(管性组)、5％内异症因素不孕患者卵泡液(内异组)、5％内异症因素不孕患者卵泡液+ 12 μg/L FSH(内异+FSH组)、5％内异症因素不孕患者卵泡液+6 μg/L BMP-15(内异+BMP-15组)的DMEM/F-12培养液培养.48 h后用血球计数法观察细胞的生长速度,采用化学发光法检测培养上清液孕酮的水平.结果 与对照组比,FSH组细胞增殖增加,内异组及内异+ BMP15组细胞增殖受抑制,差异均有统计学意义.与对照组比FSH组、管性组及内异组的颗粒细胞培养上清液的孕酮水平显著升高.内异组与管性组比孕酮分泌降低;在内异组中加入FSH(内异+FSH组)后,孕酮分泌水平比对照组及单纯内异组显著增加,加入BMP-15(内异+BMP-15组)后,孕酮分泌水平比对照组增加,与单纯内异组差异无统计学意义.结论 FSH可以促进颗粒细胞的增殖及孕酮分泌功能,BMP-15对颗粒细胞的增殖及孕酮分泌功能无明显影响.内异症患者卵泡液对颗粒细胞的增殖及孕酮分泌均有抑制作用,FSH可以逆转其抑制作用,BMP-15不能改变内异症患者卵泡液的作用结局.

报告1例臀部巨大表皮囊肿.患者男,61岁.右侧臀部肿块逐渐增大30年余.皮肤科检查:右臀部可及一肿块,半球形,约12 cm×10 cm,表面色素沉着,质地较软,皮温正常,无溃疡及渗出,压痛(-).皮损组织病理检查:臀部表皮囊肿,可见囊壁为表皮样上皮,伴有颗粒层及吞噬角化物的多核巨细胞反应,周围间质内散在慢性炎症细胞浸润及含铁血黄素沉积.诊断:臀部表皮囊肿.患者在连续硬膜外麻醉下行右侧臀部肿块切除术,术后恢复良好.

目的 探讨骨形态发生蛋白 9 (bone morphogenetic protein-9 ,BMP-9 )对人卵巢黄素化颗粒细胞雌激素(estradiol,E2)和孕激素(progesterone,P)分泌功能的影响.方法 收集因输卵管因素行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization embryo transfer,IVF-ET)患者的颗粒细胞.将颗粒细胞在不同的浓度 BMP-9(0、3、6、12 μg/L)单独及与卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)75 U/L共培养 72 h,采用酶联免疫吸附测定法检测颗粒细胞 E2、P的浓度,Western-blot检测颗粒细胞中 E2生成相关因子芳香酶化 P450(aromatase P450,P450 arom)、P生成相关因子类固醇急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,StAR)的表达水平.结果 单独 BMP-9培养时,BMP-9 各浓度组分泌的 E2和P浓度变化不大,差异均无统计学意义(P＞0.05);加入 FSH 后,BMP-9 各浓度组分泌的E2变化不大,而P浓度则随着BMP-9 浓度的增加,出现下降趋势,各浓度组间差异均有统计学意义(P＜0.05).单独BMP-9 培养时,P450 arom蛋白、StAR蛋白表达水平在 BMP-9 各浓度组变化不大,各组间差异无统计学意义(P＞0.05);加入 FSH 后,BMP-9 各浓度组分泌的 P450 arom 蛋白变化不大,而 StAR 蛋白浓度则随着BMP-9 浓度的增加,出现下降趋势,各浓度组间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 BMP-9 在缺少 FSH刺激下对颗粒细胞分泌 E2、P无明显影响;BMP-9 可抑制 FSH 诱导的P的生物合成,对 E2无明显影响;BMP-9 可作为黄素化抑制剂,防止卵泡提前黄素化,并调控卵泡的发育.

目的 检测外源性添加骨形态发生蛋白-9(BMP-9)基因重组蛋白对体外培养黄素化颗粒细胞增殖的影响.方法 因输卵管因素行体外受精-胚胎移植患者90例的卵泡液,分离提取黄素化颗粒细胞,体外培养添加重组BMP-9的试验组,采用CCK-8,实时定量PCR检测颗粒细胞的增殖情况.结果 体外培养24、48、72 h,对照组与试验组颗粒细胞均呈稳定增殖,添加BMP9重组蛋白可显著促进人卵巢黄素化颗粒细胞的体外增殖,CCK-8试剂盒测定吸光度值试验组均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其中体外培养48 h与对照组比较颗粒细胞增殖率最高(P<0.05).BMP-9基因重组蛋白能够显著上调PCNAmRNA的表达水平(P<0.05).结论 外源性添加BMP-9能够促进体外培养人卵巢黄素化颗粒细胞的增殖.

目的·探讨卵巢颗粒细胞11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-hydroxysteroid dehydrogenases,11β-HSDs)的表达亚型与多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)卵巢局部皮质醇(氢化可的松)代谢的相关性.方法·按照2003年鹿特丹诊断标准纳入PCOS组患者24例,同时纳入对照组患者21例.取卵日收集行体外受精/卵胞质内单精子显微注射(IVF/ICSI)的PCOS组患者和对照组患者的卵泡液和黄素化颗粒细胞,采用酶联免疫吸附测定法检测2组卵泡液中皮质醇、可的松水平,免疫荧光方法验证11β-HSD1、11β-HSD2在黄素化颗粒细胞上的表达以及实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR,RT-qPCR)方法检测黄素化颗粒细胞中11β-HSD1、11β-HSD2的表达差异,并进一步分析卵巢局部皮质醇水平与黄素化颗粒细胞中11β-HSD1、11β-HSD2表达的相关性.结果·与对照组相比,PCOS组患者卵泡液中皮质醇水平显著增高[(477.3±35.3) nmol/L vs (292.0±36.4) nmol/L,P=0.014],而可的松无显著变化.11β-HSD1和11 β-HSD2皆在黄素化颗粒细胞上有表达.与对照组相比,PCOS组患者黄素化颗粒细胞11 β-HSD1 mRNA表达(P=0.033)及还原酶活性(P=0.006)均显著增加,而11β-HSD2 mRNA表达和氧化酶活性无显著改变.Pearson相关性分析显示,卵巢局部皮质醇的浓度与黄素化颗粒细胞11β-HSD1表达成正相关(r2=0.347 6,P=0.001),而与黄素化颗粒细胞1 1β-HSD2表达无相关性.结论·PCOS患者卵巢局部皮质醇增加可能与卵巢颗粒细胞11β-HSD1表达及还原酶活性增加有关.

目的·研究多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)合并代谢综合征(metabolic syndrome,MS)患者卵巢颗粒细胞瘦素基因(leptin,Lep)启动子甲基化及瘦素分泌特征.方法·选取2016年9—12月于上海交通大学医学院附属瑞金医院生殖医学中心因输卵管因素进行体外受精助孕的患者20例,单纯PCOS患者(PCOS组)及PCOS合并MS患者(PCOS-MS组)各10例.化学发光法检测血清性激素和糖代谢指标,甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法检测脂代谢指标,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清及卵泡液瘦素水平,联合亚硫酸氢钠的限制性内切酶分析法检测颗粒细胞瘦素基因启动子甲基化程度,并采用Wilcoxon秩和检验和χ2检验对结果进行统计分析.结果·2组患者年龄及基础性激素水平并无差异.与PCOS组相比,PCOS-MS组胰岛素抵抗指数、三酰甘油水平显著升高(P=0.045,P=0.044),高密度脂蛋白水平有所下降(P=0.048),血清及卵泡液中瘦素水平明显升高(P=0.031,P=0.042),黄素化颗粒细胞瘦素DNA启动子转录起始位点上游299～556序列CpG岛甲基化位点明显减少(P=0.026),优质胚胎率也有所下降(P=0.043).结论·血清及卵泡液中瘦素水平的升高,黄素化颗粒细胞瘦素DNA启动子甲基化程度的降低及优质胚胎比例的下降,可能是导致PCOS合并MS患者生育力下降的部分原因.