目的:探讨黄芪多糖对深Ⅱ度烧伤大鼠创面愈合的影响及其机制。方法:采用实验研究方法。取50只雄性7周龄SD大鼠，按照随机数字表法分为正常组、单纯烧伤组、黄芪多糖组、抑制剂组和抑制剂+黄芪多糖组，每组10只。除正常组外，其余4组大鼠均在背部制作1个深Ⅱ度烧伤创面。正常组、单纯烧伤组大鼠腹腔注射生理盐水，其余3组大鼠分别注射黄芪多糖和/或整合素连接激酶（ILK）抑制剂。注射7 d后，计算4组烧伤大鼠创面愈合率，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测5组大鼠血清中γ干扰素、白细胞介素2（IL-2）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量。取正常组大鼠正常皮肤组织及4组烧伤大鼠创面组织，测定水分并计算水分占比，采用ELISA法检测γ干扰素、IL-2和TNF-α的含量，采用实时荧光定量反转录PCR法检测表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）以及ILK mRNA表达量，采用蛋白质印迹法检测ILK、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、糖原合成激酶-3β（GSK-3β）及磷酸化GSK-3β（p-GSK-3β）蛋白表达量。对数据行单因素方差分析、LSD检验。结果:注射7 d后，黄芪多糖组大鼠创面愈合率为（67±5）%，明显高于单纯烧伤组的（52±4）%和抑制剂+黄芪多糖组的（59±5）%（ P值均<0.05）；抑制剂+黄芪多糖组大鼠创面愈合率明显高于抑制剂组的（48±4）%（ P<0.05）。注射7 d后，与正常组大鼠血清或正常皮肤组织比较，单纯烧伤组大鼠血清中γ干扰素、TNF-α、IL-2含量和创面组织水分占比均明显升高（ P<0.05）；与黄芪多糖组比较，单纯烧伤组和抑制剂+黄芪多糖组大鼠血清中γ干扰素、TNF-α、IL-2含量及创面组织水分占比均明显升高（ P<0.05）；与抑制剂组比较，抑制剂+黄芪多糖组大鼠血清中γ干扰素、TNF-α、IL-2含量及创面组织水分占比均明显降低（ P<0.05）。注射7 d后，与正常组大鼠正常皮肤组织比较，单纯烧伤组大鼠创面组织中γ干扰素、TNF-α和IL-2含量均明显升高（ P<0.05）；与黄芪多糖组比较，单纯烧伤组和抑制剂+黄芪多糖组大鼠创面组织中γ干扰素、TNF-α和IL-2含量均明显升高（ P<0.05）；与抑制剂组比较，抑制剂+黄芪多糖组大鼠创面组织中γ干扰素、TNF-α和IL-2含量均明显降低（ P<0.05）。注射7 d后，与正常组大鼠正常皮肤组织比较，单纯烧伤组大鼠创面组织中EGF、bFGF、ILK mRNA表达量及ILK、p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达量均明显升高（ P<0.05）；与黄芪多糖组比较，单纯烧伤组和抑制剂+黄芪多糖组大鼠创面组织中EGF、bFGF和ILK mRNA表达量及ILK、p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达量均明显降低（ P<0.05）；与抑制剂组比较，抑制剂+黄芪多糖组大鼠创面组织中EGF、bFGF和ILK mRNA表达量以及ILK、p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达量均明显升高（ P<0.05）。正常组大鼠正常皮肤组织以及4组烧伤大鼠创面组织中Akt和GSK-3β蛋白表达量比较，差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:黄芪多糖可能通过激活ILK/Akt/GSK-3β信号通路，减轻深Ⅱ度烧伤大鼠全身和局部炎症反应，减轻组织水肿，促进愈合因子表达，从而促进创面愈合。

目的 从黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)中分离制备出 2 种多糖APS-Ⅰ(相对分子质量＞2×106)、APS-Ⅱ(相对分子质量 1×104),明确APS、APS-Ⅰ、APS-Ⅱ对葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎的疗效.方法 对APS-Ⅰ、APS-Ⅱ进行分离制备,并进行相对分子质量、糖醛酸含量、单糖组成以及糖苷键连接方式测定.建立BALB/c小鼠溃疡性结肠炎模型,分别给予APS、APS-Ⅰ、APS-Ⅱ,记录小鼠疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分、结肠长度、脾脏指数、肝脏指数;采用苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理变化;测定结肠组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性和Th1 相关细胞因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)以及Th2 相关细胞因子白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、IL-10 水平;采用qRT-PCR检测结肠组织TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-10 mRNA表达;免疫组化法测定结肠组织T细胞特异性转录因子(transcription factor T-bet,T-bet)、GATA结合蛋白 3(GATA binding protein 3,GATA-3)蛋白表达,比较APS、APS-Ⅰ、APS-Ⅱ疗效.结果 APS中共有 2 个组分APS-Ⅰ、APS-Ⅱ,其相对分子质量分别为＞2×106、1×104,糖醛酸质量分数分别为 26.25%、1.62%.单糖结果显示,APS-Ⅰ和APS-Ⅱ均由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,APS-Ⅰ中甘露糖、阿拉伯糖和半乳糖占比均大于APS-Ⅱ.糖苷键结果显示,APS-Ⅰ以 1,4 连接的葡萄糖和 1,6 连接的半乳糖为主,APS-Ⅱ以 1,4 连接的葡萄糖为主.与模型组比较,APS-Ⅰ可显著改善结肠长度降低、体质量减轻、DAI 评分增加、脾脏和肝脏指数增加等临床症状(P＜0.05、0.01、0.001),减轻结肠组织病理损伤,降低结肠组织中MPO活性及TNF-α、IFN-γ水平(P＜0.01、0.001),升高结肠组织中IL-4、IL-10 水平(P＜0.05、0.01、0.001),下调结肠组织TNF-α、IFN-γ mRNA表达和T-bet蛋白表达(P＜0.05、0.001),上调IL-4、IL-10 mRNA表达和GATA-3 蛋白表达(P＜0.05、0.01).而APS-Ⅱ在MPO活性、IFN-γ水平以及IL-4、IL-10 mRNA表达和T-bet、GATA-3 蛋白表达方面与模型组相比无显著差异.结果 表明APS-Ⅰ对溃疡性结肠炎的治疗效果优于APS-Ⅱ.结论 APS-Ⅰ是APS治疗溃疡性结肠炎的主要成分,其活性可能与其糖醛酸含量、多糖的种类以及糖苷键连接方式有关,APS-Ⅰ治疗溃疡性结肠炎可能通过调节Th1/Th2 免疫平衡实现.

研究黄芪-丹参对急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织中磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路和自噬水平的影响.将SD雄性大鼠 50 只随机分成假手术组、模型组、自噬抑制组、自噬诱导组、黄芪丹参组.除假手术组大鼠行气管内滴注生理盐水,其余各组均滴注脂多糖(LPS)5 mg·kg-1制备ALI模型;造模手术前 7 d,黄芪丹参组大鼠每天予以中药 5 g·kg-1灌胃给药,自噬抑制组、自噬诱导组大鼠每天分别予以氯喹 10 mg·kg-1、雷帕霉素 15 mg·kg-1腹腔注射给药;于LPS造模 24 h后收集标本,观察肺组织病理学,测定肺湿重/干重比值、支气管肺泡灌洗液(BALF)中乳酸脱氢酶(LDH)活性和总蛋白浓度,Western blot检测微管相关蛋白 1 轻链-3(LC3)、beclin-1、p62、PI3K、Akt、mTOR蛋白的表达.结果显示,与假手术组相比,模型组大鼠肺组织病理学评分、肺湿重/干重比值、BALF中LDH活性和蛋白浓度均明显升高,自噬抑制组均进一步升高,而自噬诱导组、黄芪丹参组较模型组降低;且黄芪-丹参能够促进ALI大鼠肺组织中LC3-Ⅱ和beclin-1蛋白表达,减少p62 表达,以及抑制p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达.以上结果提示,黄芪-丹参能够减轻LPS诱导的ALI大鼠肺组织损伤和肺水肿,作用机制与其下调PI3K/Akt/mTOR信号通路从而增强自噬有关.

该研究旨在探讨黄芪多糖可能通过调节细胞自噬提高宫颈癌HeLa细胞对顺铂的化疗敏感性,并探讨其作用的可能机制.该实验将HeLa细胞分为对照组、顺铂组、黄芪多糖组和黄芪多糖联合顺铂组,分别运用MTT法检测各实验组宫颈癌HeLa细胞增殖抑制情况;流式细胞术检测各实验组HeLa细胞的凋亡及周期情况;RT-PCR法检测自噬相关蛋白beclin1,LC3Ⅱ,p62的mRNA表达情况;Western blot法检测自噬相关蛋白beclin1,LC3Ⅱ,LC3Ⅰ,p62的表达水平.MTT结果显示,与对照组相比,各给药组均可明显抑制HeLa增殖(P<0.05),联合给药组的抑制作用更加显著(P<0.01).流式细胞术结果显示,与对照组相比,各给药组HeLa的凋亡率均明显增加(P<0.05),其中联合给药组的凋亡率显著增加(P<0.01);与对照组相比,各给药组HeLa细胞均发生了明显的周期阻滞,以G0/G1期的阻滞最为明显,其中联合给药组G0/G1期的阻滞显著.RT-PCR和Western blot结果显示,与对照组相比,beclin1、LC3Ⅱ基因及蛋白表达上调,p62基因及蛋白的表达下调,联合给药组的上述相应变化更加显著.通过以上实验结果的分析,推测黄芪多糖可能通过调节细胞自噬来增加宫颈癌HeLa细胞对顺铂的化疗敏感性,这一作用的可能机制是通过上调自噬相关蛋白beclin1,促进LC3Ⅰ转化为LC3Ⅱ,下调自噬标记蛋白p62,增强HeLa细胞自噬活性,从而增加HeLa细胞对顺铂化疗的敏感性.

目的 探讨黄芪多糖对糖尿病心肌氧化应激的影响.方法 将16只6～8周龄的雄性健康转基因SOD2+/-KO小鼠(C57BL/6J背景)按照随机数字表法随机分为转基因组及黄芪多糖转基因组(n=8);将24只正常对照小鼠分为对照组、糖尿病组及黄芪多糖糖尿病组(n=8).糖尿病组和黄芪多糖糖尿病组采用链脲佐菌素腹腔注射法制作糖尿病动物模型,糖尿病模型建成功后,给予黄芪多糖糖尿病组和黄芪多糖转基因组小鼠黄芪多糖注射液治疗16周,其余组则给予等量生理盐水灌胃.采用超声心动图检测心脏功能,HE染色观察心肌组织结构,超声电镜观察心肌超微结构,免疫组化法检测心肌细胞增殖活性,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,荧光定量法检测心肌活性氧(ROS)含量,Western blot法检测心肌SOD2蛋白含量,SODⅡ试剂盒检测心肌SOD2酶活性.结果 与对照组比较,糖尿病组和转基因组LVSP、±LVdp/dt下降,LVEDP升高,心肌组织和超微结构存在严重损伤,细胞凋亡和坏死程度增加,SOD2活性被显著抑制,而黄芪多糖治疗组小鼠以上指标均得到改善(P＜0.05).结论 黄芪多糖能抑制糖尿病心肌的氧化应激损伤.

目的·探讨黄芪多糖APS-Ⅱ-2对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致绒毛膜羊膜炎诱发的肺泡化阻滞的改善作用及可能机制.方法·对孕16.5 d SD大鼠羊膜腔注射LPS,构建支气管肺发育不良模型.根据羊膜腔注入药物,将孕鼠随机分为对照组(Salirne组)、LPS+Saline组、LPS+APS-Ⅱ-2组.LPS+APS-Ⅱ-2组新生鼠出生后第1～3日腹腔注射APS-Ⅱ-2溶液[50 mg/(kg·d)];Saline组和LPS+Saline组腹腔注射等体积生理盐水.取第1、3日新生鼠肺组织,苏木精-伊红(H-E)染色观察病理改变.SD大鼠骨髓巨噬细胞培养,分为PBS组、LPS+PBS组、LPS+APS-Ⅱ-2组,利用全转录组测序技术(RNA-sequence)筛选APS-Ⅱ-2抑制炎症的可能靶点.结果·APS-Ⅱ-2可改善新生鼠肺组织病理状态,LPS+APS-Ⅱ-2组大鼠出生第1日肺泡数较LPS+Salme组增多(P=0·033),第1、3日次级突起增多(P=0.002,P=0.026),第1、3日平均内衬间隔减小(P=0.006,P=0.004).RNA-sequence结果显示APS-Ⅱ-2抑制一些炎症因子表达,如Toll样受体Tlr3、Tlr7、Tlr8;也促进一些有抗炎作用因子的表达,如花生四烯酸15-脂加氧酶Alox15和CD74.结论·APS-Ⅱ-2可通过调节炎症反应减轻LPS诱发的绒毛膜羊膜炎,进而改善支气管肺发育不良模型肺组织病理状态.

该文旨在观察黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)对IL-6和TNF-α所致炎性微环境中骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)白介素-6受体(IL-6 receptor,IL-6R)、肿瘤坏死因子受体(tumor necrosis factor receptor,TNFR表达的影响,探讨IL-6和TNF-α导致BMSCs炎性损伤的可能物质基础.首先运用100 ng/mL IL-6和50 ng/mL TNF-α建立炎性微环境.设立对照组(control组)、模型组(D组)和50 μg/rnL黄芪多糖干预组(H组).之后,应用ELISA法检测sIL-6R的表达水平.免疫荧光法检测IL-6R、gp130、TNFR Ⅰ、TNFRⅡ的表达水平.Westem blot技术检测抑癌基因P53、PTEN和原癌基因Ras、C-myc的蛋白表达水平.检测结果显示,与对照组比较,模型组细胞上清液中的sIL-6R含量降低,模型组细胞IL-6R、gp130、TNFR Ⅰ、TNFR Ⅱ、Ras、C-myc表达均升高,P53、PTEN表达均降低.与模型组比较,黄芪多糖组细胞上清液sIL-6R含量升高,细胞IL-6R、gp130、TNFR Ⅰ、TNFR Ⅱ、Ras、C-myc表达均下降,而P53、PTEN表达均升高.结果提示,黄芪多糖能够减弱炎性微环境对刺激BMSCs表达IL-6R、TNFR的影响作用,并且维护肿瘤相关基因表达的相对稳定性.

背景:黄芪多糖是中药材黄芪中重要的天然有效成分,具有抗应激、抗氧化、抗自由基和降血糖等药理作用.目的:分析黄芪多糖对血管紧张素Ⅱ诱导心肌肥大的作用及可能的机制.方法:大鼠心肌细胞株H9c2:中山大学实验中心馈赠.将培养的H9c2心肌细胞随机分为空白对照组,血管紧张素(10-6 mol/L)组;血管紧张素(10-6 mol/L)+黄芪多糖(10-6 mol/L)高浓度组;血管紧张素(10-6 mol/L)+黄芪多糖(10-7 mol/L)中浓度组;血管紧张素(10-6 mol/L)+黄芪多糖(10-8 mol/L)低浓度组.在体积分数10％FBS的DMEM培养液中培养48 h,检测H9c2心肌细胞表面积、蛋白浓度、细胞存活率及肥大相关基因心房利钠肽、脑利钠肽的mRNA表达,观察黄芪多糖对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥大的作用.结果与结论:①与空白对照组相比,血管紧张素Ⅱ组H9c2心肌细胞表面积显著增加(P<0.05),加入黄芪多糖后,H9c2心肌细胞表面积减小,尤其黄芪多糖高浓度组心肌细胞表面积较空白对照组明显减小(P<0.05);②血管紧张素Ⅱ组细胞总蛋白含量及心肌细胞肥大相关基因的mRNA表达较空白对照组增加(P<0.05),黄芪多糖高浓度组H9c2心肌细胞总蛋白含量及黄芪多糖高、中浓度组心肌细胞肥大相关基因的mRNA的表达显著下调(P<0.05);③与血管紧张素组相比,黄芪多糖高、中浓度组能明显提升心肌细胞存活率(P<0.05);④结果说明,黄芪多糖可有效抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大.

目的:为进一步研究中药单体的抗癌作用提供参考.方法:以"磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路""中药""中药单体""恶性肿瘤""PI3K/Akt/mTOR""Chinese herbal medicine""Traditional Chinese medicine monomer""Neo-plasm""Tumor"等为关键词,在中国知网、万方数据、维普网、PubMed、Embase等数据库中组合查询2008-2018年发表的相关文献,从抑制癌细胞生长和抗耐药两方面对基于磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号传导通路的抗癌中药单体的相关研究结果进行归纳总结.结果与结论:共检索到相关文献330篇,其中有效文献39篇.目前研究证实了不少中药单体具有抗癌作用,包括穿心莲内酯、β-榄香烯、麦冬皂苷、桔梗皂苷、芹菜素、青藤碱等中药单体的抗肺癌作用,漆黄素、秦皮素、华蟾素、黑米花青素、鱼藤素等中药单体的抗乳腺癌作用,地肤子皂苷、蛇床子素、异荭草素、姜黄素等中药单体的抗肝癌作用,龙葵碱、五味子乙素、竹节香附素A、石见穿多糖、瓜蒌果实提取物TKP蛋白、姜黄素等中药单体的抗肠癌作用,二氢青蒿素、黄芩苷、人参皂苷Rg3、没食子酸、白藜芦醇等中药单体的抗胃癌作用,重楼皂苷Ⅰ、川芎嗪的抗胰腺癌、抗前列腺癌作用,姜黄素、苦参碱、黄芪皂苷Ⅱ、新型二萜类化合物Jaridon 6的抗耐药作用等.中药单体可通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号传导通路,发挥诱导癌细胞自噬死亡、促进细胞凋亡、抑制耐药相关基因表达的作用.鉴于目前中药单体本身作用靶点单一、抗癌谱较窄、缺乏临床上标准用药的"头对头试验"的抑瘤效果对比,今后应通过多途径进一步论证这些单体的抗癌作用.

目的:探讨黄芪多糖对脊髓损伤大鼠脊髓运动神经元组织形态及自噬相关蛋白表达水平的影响.方法:选取30只6周龄SPF级SD大鼠,体质量200±30g,采用Allen打击装置处理大鼠T10脊髓,制成脊髓损伤模型,并分为黄芪多糖治疗组、模型组和正常对照组.配置1mg/ml的黄芪多糖注射液,按照10mg/kg的注射量,每天注射1次.术后使用HE染色在7天、14天、28天测量大鼠的运动神经元组织形态;使用Westen Bolt和RT-PCR在0天(6小时)、7天、14天、28天定性、定量检测大鼠Bcl-2、Bax、Beclin1、LC3蛋白表达情况.结果:染色观察发现,模型组大鼠脊髓内部有大量空洞,出现自噬小体,在黄芪多糖治疗组中有少量的自噬小体,脊髓内部空洞较少.相比模型组,黄芪多糖治疗组抗凋亡蛋白Bcl-2显著升高,(P＜0.01),Bax显著降低(P＜0.01),Bcl-2/Bax在7天时显著低于模型组(P＜0.01),7～28天时Bcl-2/Bax显著高于模型组(P＜0.01).Beclin1的表达量在0(6小时)、7天时,黄芪多糖治疗组显著高于模型组(P＜0.01),7、28天时,黄芪多糖治疗组Beclin1的表达量则低于模型组(P＜0.05);0(6小时)、7天时,黄芪多糖治疗组LC3-I/LC3-Ⅱ的比值显著高于模型组(P＜0.01),7～28天时,黄芪多糖治疗组则显著低于模型组(P＜0.01).结论:黄芪多糖通过调节大鼠自噬相关蛋白Bcl-2、Bax、Beclin1、LC3的表达水平,使神经元组织自噬先增强后减弱,达到促进脊髓损伤的康复的效果.