目的 探讨第四鳃裂畸形的诊断与治疗方法.方法 对1例颈部双侧第四鳃裂畸形的患者临床资料进行总结与文献回顾分析.结果 患者,17岁,男性,颈部无痛性肿块10年,专科检查:颈前偏右皮下可触及一肿块,大小约4.0 cm × 3.0 cm,边界清楚,形态规则,质软,触有波动感,无明显压痛.颈前偏左可见一大小约0.5 cm × 0.5 cm的瘘口,瘘口可见黄色清亮液体流出,周围皮肤局部红肿,皮肤表面温度升高;计算机断层扫描检查示:右侧锁骨上区、颈前区见类圆形囊性低密度影,大小约4.4 cm × 3.4 cm,其内片絮状等密度影,边缘见结节状钙化,周围脂肪间隙模糊,增强扫描囊壁轻度强化,内容物未见明显强化;其左侧可见直径约1.4 cm类圆形结节影,增强扫描环形强化,周围皮肤增厚,皮下脂肪间隙模糊;双侧颈部见多发小淋巴结显示,较大者短径约0.8 cm;甲状腺大小、形态未见明显异常,其内未见明显异常密度影.入院诊断为右颈部第四鳃裂囊肿,左颈部第四鳃裂瘘管.在全麻静脉复合麻醉下行右侧鳃裂囊肿切除术+左侧鳃裂瘘管切除术.术后病理检查提示为右鳃裂囊肿,左鳃裂瘘管.伤口 Ⅰ期愈合,术后随访6个月无复发.文献回顾复习结果表明,第四鳃裂畸形是鳃器的先天性发育异常,发生率仅占所有鳃裂畸形的1％,常发生于左侧.解剖学位置常位于颈根部、锁骨上区,表现为与甲状腺相毗邻的囊肿或窦道.通过其解剖学位置、影像学检查或喉镜检查结合术后病理结果明确诊断,需要与颈部肿块如甲状舌管囊肿、淋巴结转移瘤等相鉴别.主要治疗手段为外科手术和内窥镜烧灼内瘘口,预后一般较好,有复发风险,但很少发生癌变.结论 第四鳃裂畸形十分罕见,应早期识别,避免过多无效的手术引流,减少切除时的潜在并发症并彻底切除病变防止复发.

[目的]华北大黑鳃金龟Holotrichia oblita是花生等多种农作物、果林及苗圃的重要害虫,长期以来主要以化学防治为主.本研究测定了球孢白僵菌Beauveria bassiana菌株JCF对华北大黑鳃金龟幼虫和成虫的致病力,为华北大黑鳃金龟的生物防治提供真菌资源.[方法]对罹患病害的华北大黑鳃金龟虫尸上的寄生真菌进行分离及回接试验,分离纯化出致病菌株JCF;利用光学显微镜观察菌株形态学特征,PCR扩增JCF的rDNA-ITS序列并测序,构建JCF系统发育树对菌株进行分子鉴定;采用浸渍法和田间模拟试验测定其对华北大黑鳃金龟成虫和幼虫的致病力.[结果]JCF菌株菌落初期为白色绒状,后期变为黄色或浅黄色絮状,背面无色.产孢细胞呈瓶状簇生于分生孢子梗上,分生孢子梗呈穗状,着生在营养菌丝上;分生孢子单生,透明,近球形,直径(2.0～3.5)μm×(1.5～2.0)μm.rDNA-ITS序列分子鉴定表明菌株JCF为球孢白僵菌.这一球孢白僵菌菌株JCF对华北大黑鳃金龟成虫的致死中浓度(medium lethal concentration,LC50)值为2.124 × 107孢子/mL,用其2 × 108,1 × 108和5 × 107孢子/mL孢悬液处理华北大黑鳃金龟成虫时,致死中时(medium lethal time,LT50)值分别为6.267,6.852和7.455 d;球孢白僵菌JCF菌株对华北大黑鳃金龟1,2和3龄幼虫的LC50值分别为5.47 ×106,1.59 ×108,2.50×108孢子/mL;1 × 108孢子/mL浓度下,球孢白僵菌JCF菌株对华北大黑鳃金龟1和2龄幼虫的LT50值分别为8.6和18.6 d;5 ×108孢子/mL浓度下,球孢白僵菌JCF菌株对华北大黑鳃金龟2和3龄幼虫的LT50值分别为10.3和13.2 d.田间模拟试验2 ×108孢子/mL球孢白僵菌JCF孢悬液对华北大黑鳃金龟成虫和幼虫同样表现出良好的致病效果.[结论]球孢白僵菌菌株JCF对华北大黑鳃金龟成虫和幼虫均有较高致病力,为开发白僵菌制剂防治金龟科害虫提供了新的菌种资源,对生物防治金龟科害虫具有潜在的应用价值.

应用RACE技术克隆脊尾白虾血蓝蛋白大亚基基因,并通过攻毒实验揭示脊尾白虾血蓝蛋白基因的先天免疫防御作用,为脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)的免疫防治研究提供依据和思路.研究成功克隆了脊尾白虾血蓝蛋白大亚基基因全长cDNA序列,该大亚基cDNA全长2192 bp,开放式阅读框长2034 bp,5′非编码区长21 bp,3′非编码区长137 bp,将该基因命名为EcHcL.EcHcL编码667个氨基酸,前21个氨基酸组成信号肽,推测成熟肽的分子量为78.5 kD.Blast比对结果显示,由脊尾白虾血蓝蛋白EcHcL序列推导的氨基酸序列与日本沼虾、凡纳滨对虾血蓝蛋白氨基酸序列的同源性分别达到87％、73％,其M结构域氨基酸序列与斑节对虾、日本对虾等物种同源性性高达90％ 左右,由此推断该cDNA序列属于血蓝蛋白家族.组织表达分析结果显示,EcHcL基因在脊尾白虾鳃、卵巢、肝胰腺、心脏、肠、肌肉、胃、腹神经节、眼柄、血细胞中均有表达,肝胰腺中相对表达量最高.Real-time PCR分析发现EcHcL基因在金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌和对虾白斑综合征病毒(WSSV)感染后脊尾白虾肝胰腺和血细胞中的表达量显著增加,并具有不同的时空表达模式,推测脊尾白虾EcHcL基因在免疫防御中具有重要作用.

为了解中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)"水瘪子”病发生发展的过程,揭示疾病的本质,对病蟹进行了较全面的病理特点分析研究.根据病蟹肝胰腺颜色,将病蟹划分为浅黄、浅粉、乳白和灰白4个发病阶段.研究结果表明,随着病情的发展,病蟹肝胰腺与蟹重比逐渐减少,腔液与蟹重比逐渐增加,肝胰腺管直径逐渐缩小,各发病阶段病蟹的这些指标都与健康蟹有极显著差异(P＜0.01),病蟹肝胰腺与蟹重比除乳白阶段与灰白阶段之间和腔液与蟹重比除浅粉阶段与乳白阶段和乳白阶段与灰白阶段之间以及肝胰腺管直径除乳白阶段与灰白阶段之间的差异均不显著(P＞0.05)和浅粉阶段与乳白阶段之间的差异显著(P＜0.05)外,其他各发病阶段之间这些指标均有极显著差异(P＜0.01);4个发病阶段病蟹6种组织器官中肝胰腺、鳃、肌肉组织和心脏组织病理变化具有相似性,浅黄阶段主要是以组织器官水肿和萎缩为主,是一种可逆的组织病理过程,但在浅粉阶段肝胰腺和肌肉组织出现细胞坏死,以后发病阶段更为严重,鳃和心脏组织在乳白阶段出现细胞坏死,坏死是一种不可逆的组织病理过程,神经团和肠道组织病理变化不明显.根据不同发病阶段的病理特点,在未来确定病因后通过消除病因等方法,只有在病理变化处于可逆状态的浅黄阶段,病蟹才有恢复的可能,才有防控和挽救价值,而浅粉阶段以后的病蟹由于主要器官组织细胞崩解坏死处于不可逆的病理过程,即使病因消除病蟹已不可能恢复,这样的病蟹应及时清除,减少继续养殖造成进一步的经济损失.

目的 探讨儿童耳部肿块的诊断和外科治疗方法.方法 回顾性总结苏州大学附属儿童医院2008年1月—2016年12月住院治疗的54例耳部肿块患儿.肿块位于耳廓21例,耳前13例,耳后沟13例,耳垂下后方6例,耳道口1例.病理类型:表皮样囊肿12例,皮样囊肿16例,钙化上皮瘤9例,鳃裂囊肿4例,血管瘤2例,脉管畸形8例,幼年型黄色肉芽肿1例,木村病2例.治疗均采用外科手术治疗,完整切除肿块.其中耳后区游离皮瓣植皮修复创面2例,耳后带蒂皮瓣修复创面1例,"音符瓣"修复创面1例,行面神经解剖6例,行肿物及腮腺浅叶切除2例.结果 54例患儿耳部肿块均彻底切除,无器官功能异常,无明显外形变化,治愈率为100％.1例行肿物及腮腺浅叶切除后出现轻度面瘫,在手术后3个月内完全恢复.结论 对该区疾病的充分认识有利于早期诊断.外科手术治疗,完整切除肿块是治愈耳部肿块有效方法.手术切口的设计,面神经的解剖与保护,有助于完整切除肿块,避免并发症.

资料 病例1男性,41岁,台湾人,祖籍广东. 发现右颈部肿块半年余,曾在瑞士作颈部肿块活检,报告为"淋巴结炎".患者一般情况良好,无鼻塞及回吸涕带血,无低热、盗汗等结核症状. 体检;右颈部淋巴结肿大,质韧,位于颈部中下方,余未触及肿大浅表淋巴结. B超:除右颈部外未发现肿大淋巴结.胸部X线示心、肺未见异常. 颈部MRI:右颈部多发肿大淋巴结,并有囊肿形成(图1A、B). 颈部囊肿穿刺抽出淡黄色液体.结核抗体(-). 初步诊断为右鳃裂囊肿合并淋巴结肿大,性质待定. 正电子发射断层计算机成像( positron emission tomography CT,PET -CT )检查:右侧咽隐窝稍膨隆伴氟脱氧葡萄糖( fluorodeoxyglucose , FDG)代谢增高,右侧颈部淋巴结肿大伴FDG代谢异常增高,考虑鼻咽癌伴淋巴结转移(图1C). 鼻咽活检:低分化鳞状细胞癌(图1D).

在人工养殖的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖池中发现了黄鳃症状的病例,造成较大损失.为了确定该病的主要病原菌,探索药物防治途径,进行了病原菌的分离,并采用PCR技术及16S rDNA测序对分离的病原菌进行鉴定;鉴定后的主要病原菌通过人工感染凡纳滨对虾确定其致病性,石蜡切片观察其鳃组织的病理组织学变化;最后,通过药敏试验确定致病菌的药物敏感性.人工感染试验显示罗尼氏弧菌(Vibrio shilonii)和微小杆菌(Exiguobacterium)共同侵染时可引起凡纳滨对虾黄鳃病,病虾鳃组织变黄,同时出现典型细菌性侵染后的病理变化:鳃丝肿大,组织松散,甚至糜烂.药敏试验结果显示罗尼氏弧菌对吡哌酸、氧氟沙星、氟甲喹和恶喹酸等具有较高的敏感性,对磺胺二甲嘧啶、氨苄青霉素等不敏感;微小杆菌对氨苄西林钠、氧氟沙星、多西环素和氟甲喹等具有较好的敏感性,对磺胺二甲嘧啶、氨苄青霉素、甲氧苄啶等不敏感,可考虑将氧氟沙星和氟甲喹作为治疗该病的候选药物.结果为进一步探索凡纳滨对虾黄鳃病致病机理及有效防治提供了基础资料.

为了探究血蓝蛋白的分子多样性,对脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)血蓝蛋白大亚基变体进行了研究.基于脊尾白虾转录组文库血蓝蛋白大亚基变体EcHcL1和2序列,利用RACE和生物信息学技术,对2种变体进行全长cDNA扩增和序列分析.结果发现EcHcL1和2 cDNA全长分别为2239和2132 bp,编码685和676个氨基酸.EcHcL1和2氨基酸序列在进化上相对保守,且均具有血蓝蛋白的典型结构域,包括铜离子结合区域、保守His位点和Ig-like区等,其中EcHcL1多了一个酪氨酸酶结构域,推测可能与色素代谢及酚氧化酶活性有关.组织表达分布结果显示EcHcL1和2在血细胞、肝胰腺、肠、腹神经节、心脏、卵巢、眼柄、胃、鳃和肌肉等组织中均有表达,且均在肝胰腺和血细胞中表达较高.采用Real-time PCR方法对病原感染后2种变体的mRNA表达情况进行分析.结果发现,EcHcL1在金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌和白斑综合征病毒(WSSV)胁迫脊尾白虾12-48h中出现较高表达量,最高表达量约为对照组的1.5-4倍;EcHcL2在胁迫后24-48h后,与对照组相比,表达量约上升2-9倍.由此说明,脊尾白虾血蓝蛋白大亚基变体与免疫防御密切相关,可能在抵抗病原微生物感染中发挥作用.

采用浸渍法测定了黄绿绿僵菌Metarhizium flavoviride菌株Ma130821对暗黑鳃金龟Holotrichia parallela Motschulsky幼虫的毒力,采用室内盆栽拌土法、环施法和穴施法施用黄绿绿僵菌Ma130821分生孢子粉,测定了该菌株对暗黑鳃金龟幼虫的毒杀效果.结果表明:黄绿绿僵菌菌株Ma130821对暗黑鳃金龟3龄幼虫的侵染致病效应可利用“时间—剂量—死亡率”模型进行模拟分析和参数估计分析,侵染效应常数为0.597.接种后第3天该菌株对暗黑鳃金龟3龄幼虫的致死剂量LC50和LC90的对数值分别为9.2182±0.2968和11.2291±0.4385.在6.20×108孢子/mL黄绿绿僵菌菌悬液对暗黑鳃金龟幼虫侵染致病的LT50和LT90分别为1.5d和3.8d.室内盆栽拌土法、环施法和穴施法施用黄绿绿僵菌菌株Ma130821分生孢子粉对暗黑鳃金龟3龄幼虫均具有良好的毒杀作用,其中拌土法施用后对暗黑鳃金龟幼虫的毒杀效果高于其他两种方法,拌土法、环施法和穴施法施用后对暗黑鳃金龟3龄幼虫的累积死亡率分别为95.69％、84.35％和57.43％,累积僵虫率分别为99.65％、98.65％和99.37％.综合以上结果,黄绿绿僵菌Ma130821对暗黑鳃金龟幼虫具有良好的毒力和毒杀作用,在暗黑鳃金龟的生防制剂开发中具有良好潜力.

为研究水体镉(Cd)暴露对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)鳃的组织学结构、抗氧化状态及免疫相关基因表达的影响, 将黄颡鱼分别暴露于0(对照组)、50和200 μg/L Cd水体中8周后, 取鳃进行分析.结果显示: 鳃中Cd含量随着水体Cd浓度的升高而上升; 组织学分析发现, Cd暴露组鳃出现了动脉瘤、细胞增生、鳃小片弯曲以及细胞脱落等病理变化.同时, Cd暴露导致鳃中谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx)和抗羟自由基(AHR)的活性及过氧化氢(H2O2)的含量升高, 而过氧化氢酶(CAT)的活性及还原型谷胱甘肽(GSH)的含量下降, 但超氧化物歧化酶(SOD)的活性无显著变化.此外, Cd暴露上调了肿瘤坏死因子-α(tnf-α)、主要组织相容性复合体(mhc)、白细胞介素-10(il-10)、转化生长因子-β(tgf-β)和补体因子C3(c3)的表达,而下调了白细胞介素-1β(il-1β)、白细胞介素-8(il-8)及溶菌酶(lys)的转录水平.研究表明, Cd暴露导致黄颡鱼鳃中Cd富集, 进而诱导鳃的组织学损伤、氧化应激和免疫反应.