目的 基于功能模型对痹祺胶囊进行拆方研究,阐明痹祺胶囊的配伍规律,揭示痹祺胶囊配伍的合理性.方法 在各功能实验中,动物分组分别为空白组(抗炎实验和扭体实验除外),模型组(热板实验除外),阳性药组,痹祺胶囊组,益气养血组,活血通络组,抗炎止痛组.益气养血功能实验中,采用环磷酰胺建立大鼠免疫低下模型,测定各给药组对模型大鼠外周血细胞数量、血浆促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)含量、脾脏指数及脾脏CD4+/CD8+细胞比例的影响.活血通络功能实验中,采用iv高分子右旋糖苷建立大鼠血循环障碍模型,测定并对比各组肠系膜微循环毛细血管体积流量、全血黏度、凝血酶时间(thrombin time,TT)的影响.在抗炎功能实验中,采用巴豆油建立小鼠耳肿模型,测定各组耳肿胀度及耳肿胀抑制率.在中枢镇痛功能实验中,采用小鼠热板致痛实验法,测定并对比各组末次给药后60、90 min时小鼠舔足反应时间.在外周镇痛功能实验中,采用小鼠醋酸扭体实验法,测定并对比各组发生扭体反应的次数.结果 痹祺胶囊与益气养血组可增加气血两虚模型大鼠外周血细胞如白细胞、红细胞及血红蛋白数量(P＜0.01),升高血浆EPO含量(P＜0.01),降低脾脏指数(P＜0.05、0.01),提高脾脏CD4+/CD8+细胞比例(P＜0.05、0.01).痹祺胶囊与活血通络组可升高血循环障碍模型大鼠肠系膜毛细血管体积流量(P＜0.01),降低不同切速下全血黏度和红细胞聚集指数(P＜0.01),延长血浆TT(P＜0.01).痹祺胶囊与抗炎止痛组可降低耳肿模型小鼠耳肿胀度(P＜0.01),可延长正常小鼠给药90min时热板舔足时间(P＜0.01),可抑制醋酸所致小鼠产生扭体反应的次数(P＜0.01).结论 益气养血组药党参、茯苓、白术为痹祺胶囊主要发挥益气养血功能的配伍药味;活血通络组药川芎、丹参、三七、地龙、牛膝为痹祺胶囊主要发挥活血通络功能的配伍药味;抗炎止痛组药马钱子、甘草为痹祺胶囊主要发挥抗炎止痛功能的配伍药味.

目的 基于网络药理学方法探讨痹祺胶囊的配伍规律,阐释其治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的机制内涵.方法 按照痹祺胶囊及其单味药材的功效将其分为益气养血组、活血通络组、抗炎镇痛组,并分别选取药材中的特征成分,依据反向药效团匹配方法和TCMSP、Uniprot等数据库预测化合物作用靶点,与通过OMIM、DisGeNet、GeneCards等数据库收集RA相关靶点相互交互,将交互靶点借助Omicsbean、STRING等数据库平台对获得靶点进行基因本体功能和京都基因与基因组百科全书通路富集分析,利用Cytoscape软件构建"药材-化合物-靶点-通路-功效"网络.结果 通过网络药理学预测,得到益气养血组11个成分的67个潜在靶点,蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络分析发现白蛋白、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、造血前列腺素合成酶 D、丝裂原活化蛋白激酶 1(mitogen-activated protein kinase1,MAPK1)、雄激素受体、β2肾上腺素能受体等可能为关键核心靶点,主要通过神经营养信号通路、造血细胞谱系、破骨细胞分化、MAPK信号通路等40条相关通路,通过调控骨髓造血微环境、骨形成与代谢平衡、免疫调节等生物过程发挥益气养血作用;得到活血通络组20个成分的117个潜在靶点,进一步PPI网络分析发现蛋白激酶B1(protein kinase B1,AKT1)、基质金属蛋白酶 9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、肿瘤蛋白 p53(tumor protein p53,TP53)、纤连蛋白、信号转导子和转录激活子3、C-C基序趋化因子(C-Cmotifchemokine2,CCL2)、表皮生长因子受体、细胞间黏附分子1、IL17A等可能为核心靶点,并通过血小板激活、VEGF信号通路、IL-17信号通路等77条相关通路调控凝血和纤溶系统、血管增生、抗炎镇痛等生物过程发挥活血通络、止痛的作用;得到抗炎镇痛组8个成分的180个潜在靶点,进一步PPI网络分析发现TNF、AKT1、IL-6、TP53、IL1B、VEGFA、前列腺素G/H合成酶2、CCL4、CCL3等可能为潜在核心靶点,通过IL-17信号通路、T和B细胞受体信号通路、血清素能突触、趋化因子信号通路、核因子-κB信号通路、花生四烯酸代谢等77条通路干预中枢和外周敏化、抗原呈递、免疫细胞激活、炎症反应等生物过程发挥抗炎镇痛的作用.结论 痹祺胶囊中党参、茯苓、白术组成的益气养血组主要在造血系统、免疫系统和骨形成和代谢等方面发挥"固本"的作用,丹参、三七、川芎、牛膝、地龙组成的活血通络组主要在血液系统、炎症反应等方面发挥"活血化瘀"的作用,马钱子、甘草组成的抗炎镇痛组主要在免疫调控、炎症反应、中枢和外周镇痛等方面发挥"除湿止痛"的作用,各组之间的靶点和通路互有交叉,又各有侧重,充分体现了痹祺胶囊在治疗RA中多成分、多靶点、多通路的特点,为其配伍理论的深入研究奠定了基础.

丹芪偏瘫胶囊,有益气活血、开窍醒脑、活血通络的功效,用于气虚血瘀型缺血性中风病中经络恢复期.主要成分有黄芪甲苷、丹酚酸B、芍药苷、Z-藁本内酯、龙脑、α-细辛脑、β-细辛脑等,通过影响多靶点多通路发挥抗脑卒中作用.在动物实验及临床研究中均证实:丹芪偏瘫胶囊参与脑卒中及并发症的治疗,发挥作用与抗炎、抗细胞凋亡、神经保护和神经再生、抗氧化应激、增加脑血流量、改善认知功能有关.对丹芪偏瘫胶囊治疗脑卒中及并发症的临床研究和基础研究进行综述,以期为该制剂的再开发利用提供理论依据.

背景:研究发现,糖皮质激素可抑制甲状旁腺素1受体(parathyroid hormone typeⅠreceptor,PTH1R)/蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)信号轴中关键基因表达,干扰骨髓间充质干细胞向成骨、成血管方向分化,导致骨内血供、骨组织结构的破坏.课题组前期研究结果表明骨痹通消颗粒可诱导血管形成、抑制成骨细胞凋亡,对激素性股骨头坏死具有一定的防治作用,其机制尚未明确.目的:观察骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗效果,从PTH1R/PKA信号轴探讨其作用机制.方法:采取腹腔注射脂多糖和臀肌注射醋酸泼尼松龙建立激素性股骨头坏死模型,将造模成功的60只C57小鼠随机分成模型组、骨痹通消颗粒组和通络生骨胶囊组,每组20只,另选取12只健康小鼠作为正常对照组,分别灌胃相应药物12周后,苏木精-伊红染色观察股骨头组织形态学变化,酶联免疫吸附测定法检测血清中骨碱性磷酸酶、Ⅰ型氨基端延长肽、甲状旁腺激素、骨钙素、碱性磷酸酶水平,Western blot和RT-qPCR法检测股骨头组织中PTH1R、PKA、MEF2、SOST、GNAS的蛋白及基因表达水平.结果与结论:骨痹通消颗粒可能通过降低小鼠血清甲状旁腺激素水平,抑制PTH1R/PKA信号轴的激活,进一步上调SOST、MEF2的表达,提高骨碱性磷酸酶、Ⅰ型氨基端延长肽、骨钙素、碱性磷酸酶水平,从而改善股骨头坏死情况,与通络生骨胶囊干预效果相当,推测骨痹通消颗粒可能通过调节PTH1R/PKA信号轴发挥防治激素性股骨头坏死的作用.

目的 探究龙血通络胶囊对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导大鼠心肌缺血的保护作用.方法 Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、地奥心血康(62.50mg/kg)组和龙血通络胶囊低、中、高剂量(103.12、206.25、412.50mg/kg)组,每组10只.各组连续28 dig给予相应药物,第27、28天给药1h后,除对照组sc生理盐水外,其余各组sc ISO(150 mg/kg).第1次scISO48h后摘取大鼠心脏,计算心脏指数;采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠心肌组织病理变化;采用ELISA法检测各组大鼠血清中肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)和心肌钙蛋白-Ⅰ(cardiac troponin-Ⅰ,cTn-Ⅰ)水平;采用试剂盒检测大鼠血清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活性以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平;采用TUNEL染色观察大鼠心肌细胞凋亡情况;采用免疫组化法检测心肌组织中核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-relatedfactor2,Nrf2)、血红素加氧酶-1(hemeoxygenase-1,HO-1)和剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved cystein-asparate protease-3,cleaved Caspase-3)蛋白表达.结果 与对照组比较,模型组大鼠心脏指数显著升高(P＜0.001),血清中cTn-Ⅰ、CK-MB、CK、MDA水平以及LDH、AST活性显著升高(P＜0.001),SOD活性降低(P＜0.001),心肌组织出现明显的病理变化(P＜0.001),心肌细胞凋亡率显著升高(P＜0.001),心肌组织中cleaved Caspase-3、Nrf2和HO-1蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05、0.001).与模型组比较,龙血通络胶囊组大鼠心脏指数明显降低(P＜0.001),血清中cTn-Ⅰ、CK-MB、CK、MDA水平以及LDH、AST活性显著降低(P＜0.05、0.01、0.001),SOD活性显著升高(P＜0.001);心肌组织的病理性改变得到改善(P＜0.05);心肌组织中心肌细胞凋亡率显著降低(P＜0.01);心肌组织中cleaved Caspase-3蛋白表达显著降低(P＜0.05、0.01),Nrf2、HO-1蛋白表达显著升高(P＜0.01、0.001).结论 龙血通络胶囊可改善ISO诱导大鼠心肌缺血损伤,其作用机制可能是通过调节Nrf2/HO-1通路,进而抑制氧化应激诱导的细胞凋亡.

目的 探讨龙血通络胶囊联合阿托伐他汀及阿司匹林对老年脑梗死患者血脂及颈动脉斑块的影响.方法 将201 例存在颈动脉斑块的脑梗死老年患者分为常规治疗组(服用阿司匹林和阿托伐他汀)以及龙血通络胶囊组(服用龙血通络胶囊联合阿司匹林及阿托伐他汀),比较两组用药前后血脂指标、颈总动脉收缩期流速及斑块Crouse积分的变化.结果 与治疗前比较,常规治疗组低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平及龙血通络胶囊联合组治疗后三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、LDL-C水平均显著降低(P＜0.05～0.01).两组治疗前TG、TC、LDL-C水平差异无统计意义(均P＞0.05).与常规治疗组比较,龙血通络胶囊组治疗后TC、LDL-C水平显著降低(均P＜0.05),LDL-C下降百分率显著升高(P＜0.01).与治疗前比较,常规治疗组及龙血通络胶囊组治疗后收缩期血流速度显著升高,龙血通络胶囊组治疗后斑块Crouse积分显著降低(均P＜0.05).与常规治疗组比较,龙血通络胶囊组治疗后斑块Crouse积分显著降低(P＜0.01).结论 在阿托伐他汀及阿司匹林基础上加用龙血通络胶囊,能进一步降低血脂水平,改善颈动脉斑块.

目的:基于网络药理学和分子对接探讨龙加通络胶囊治疗缺血性中风物质基础及作用机制.方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中医药综合数据库(TCMID)以及查阅文献获得穿山龙、刺五加的主要活性成分;使用 PharmMapper数据库预测活性成分靶点,利用人类基因综合数据库(GeneCards)和在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)得到疾病相关靶点,对活性成分靶点与疾病靶点取交集后采用 DAVID数据库进行基因本体(GO)功能以及京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析.最后通过 AutoDock Vina软件对关键靶点和化合物进行分子对接批量处理.结果:筛选出穿山龙、刺五加针对缺血性中风的 14 个活性成分和 179个作用靶点.蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络拓扑分析发现白蛋白(ALB)、蛋白激酶 B1(AKT1)、胱天蛋白酶 3(CASP3)、表皮生长因子受体(EGFR)、酪氨酸激酶(SRC)是穿山龙、刺五加治疗缺血性中风的关键靶点.GO功能分析发现龙加通络胶囊生物过程主要集中在中性粒细胞脱粒、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录过程的正调控、凋亡过程的负调控等多个方面;KEGG信号富集分析主要涉及磷脂酰肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B(PI3K/AKT)、有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)、Ras相关蛋白 1(Rap1)等信号通路.分子对接结果显示活性物质与靶点蛋白之间存在较强的结合力,其中薯蓣皂苷与 AKT1 的结合力最强.结论:穿山龙、刺五加治疗缺血性中风具有多组分、多靶点相互协同的特点,为今后龙加通络胶囊的临床应用提供了理论基础和参考.

目的:建立龙血通络胶囊超高效液相色谱法(UPLC)特征图谱,并测定 7,4′-二羟基黄酮、4,4′-二羟基-2,6-二甲氧基二氢查耳酮、龙血素 A、龙血素 B、紫檀芪 5 个成分的含量.方法:采用 Agilent Infinity Lab Poroshell 120 EC-C18 色谱柱(150 mm×3.0 mm,2.7 μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱,柱温为 35℃,流速为 0.5 mL·min-1,进样体积为 2 μL,检测波长为 280 nm.结果:建立了龙血通络胶囊UPLC特征图谱,标定了 13 批样品中的 11 个共有特征峰,相似度均大于 0.95.5 个成分在相应质量浓度范围内呈良好的线性关系(r＞0.999 5),加样回收率为 97.93%～107.33%,RSD均小于 3.0%.结论:建立的UPLC操作简便、高效准确,可为龙血通络胶囊的质量控制提供参考.

目的:探讨龙血通络胶囊对大鼠脑缺血性损伤的保护作用.方法:建立局灶性脑缺血模型,观察龙血通络胶囊对大鼠病理学改变的影响.建立局灶性脑缺血/再灌注模型,观察龙血通络胶囊对大鼠行为学改变的影响,并测定脑组织匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量.结果:与模型组比较,龙血通络胶囊高、中剂量组可改善行为障碍,降低行为学评分且降低脑组织含水量,同时龙血通络胶囊高、中剂量组可明显升高脑缺血模型脑组织中的SOD、GSH-Px、LDH的水平以及降低iNOS的活性和MDA、NO的含量.结论:龙血通络胶囊对脑缺血性损伤有一定的保护作用,其作用机制可能与抑制脑组织中自由基损伤和iNOS含量有关.

目的:观察补阳还五汤治疗中风后遗症气虚血瘀证的临床疗效及安全性.方法:将70例患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组,每组35例.对照组给予银杏叶胶囊和阿司匹林片治疗,治疗组给予补阳还五汤[当归15 g,三七粉(冲服)2 g,桃仁15 g,红花10 g,炙黄芪60～ 150 g,川芎8 g,赤芍15 g,地龙8 g]治疗,每日1剂.观察两组患者临床疗效、神经功能缺损评分、血液流变学变化和不良反应发生情况.结果:治疗后,治疗组有效率为94.28％,对照组有效率为74.29％,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);神经功能缺损评分和血液流变学情况均优于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);两组患者不良反应比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:补阳还五汤治疗中风后遗症气虚血瘀证临床疗效显著,且安全性良好,具有良好的补气祛瘀、通络活血的治疗作用.