目的 研究绵马贯众Dryopteris crassirhizoma中间苯三酚类化合物并探讨其抑菌活性.方法 采用硅胶、Sephadex LH-20、半制备液相及重结晶等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据(MS、1H-NMR、13C-NMR)鉴定结构;采用美国临床实验室标准研究所(CLSI)制定的M38-A2和M07-A9方案分别研究化合物对真菌和细菌的抑菌活性.结果 从绵马贯众50％乙醇提取物中分离得到10个间苯三酚类化合物,分别鉴定为1-丁酰基间苯三酚(1)、1-甲基-3-丁酰基间苯三酚(2)、2-乙酰基-4-丁酰基间苯三酚(3)、1-甲基-3-乙酰基-5-丁酰基间苯三酚(4)、黄绵马酸PB(5)、异黄绵马酸AB (6)、异黄绵马酸AB (6)、黄绵马酸AA (7)、绵马酸ABA (8)、黄绵马酸AB (9)、绵马酸ABP (10).化合物8对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌表现出与阳性对照头孢西丁相当的抑制活性,最小抑菌浓度(MIC)均达到2.5 μg/mL.结论 化合物1～4首次从绵马贯众中分离得到.化合物8对真菌和细菌都有明显的抑菌活性.

黄绵马酸AB是香鳞毛蕨中具有多种生物活性的双环型间苯三酚衍生物.对黄绵马酸AB采用逆合成分析法进行结构分析,利用拼合原理设计合成了黄绵马酸AB.以间苯三酚为原料,经维尔斯迈尔-哈克反应、还原反应和酰基化反应合成2-甲基-4-丁酰基间苯三酚,经酰基化反应、烷基化反应和脱酰基反应合成绵马酸片段,最后以N,N-二甲基亚甲基碘化铵活化反应得到黄绵马酸AB.中间体和黄绵马酸AB经MS、1H NMR和13C NMR进行结构确证,目标产物总收率达14.7％,设计的黄绵马酸AB合成路线原料易得且操作简便.

目的 筛选妊娠母体血清中与21三体综合征相关的代谢标志物,探讨21三体综合征发病相关的代谢通路,进一步明确21三体综合征的发病机制,以指导临床针对性地对高风险人群进行早筛查和早诊断.方法 选取胎儿核型为21-三体综合征的孕妇(T21组)与胎儿核型正常的孕妇(正常组)作为研究对象,采用超高效液相色谱-串联质谱分析检测两组孕妇血清中的代谢物;分别通过主成分分析、随机森林分析和Welch-t检验等方法,探讨与21三体综合征可能相关的特异性代谢标志物及代谢途径.结果 T21组与正常组间差异最大的前30种代谢物,包括间酪胺磺胺、N1,N12-二乙酰精胺、羧乙基γ-氨基丁酸、邻磺基左旋酪氨酸、戊糖酸、2-氮己环酮、苯酚硫酸盐等,它们分别涉及氨基酸代谢、糖代谢、脂类代谢、多肽代谢、核苷酸代谢、血红素代谢等多种代谢途径,这些代谢物有望成为21三体综合征产前筛查的特异性代谢标志物.结论 本研究成功筛选获得了30种与21三体综合征可能相关的特异性代谢标志物及相关代谢通路,为临床针对性地对高风险人群进行早筛查和早诊断提供了新思路.

本研究改进了新型抗流感病毒药物玛巴洛沙韦(1)的合成工艺.甲基麦芽酚(2)经苄基保护、羟醛缩合、氧化反应得3-苄氧基-4-氧代-4H-吡喃-2-甲酸(6),6经酯化、肼解反应得3-苄氧基-1-[(叔丁氧基羰基)氨基]-4-氧代-1,4-二氢吡啶-2-羧酸甲酯一水合物(8).8与2-(2,2-二甲氧基乙氧基)乙胺(9)经胺酯交换、环合、手性拆分得(R)-7-苄氧基-3,4,12,12a-四氢-1H-[1,4](嗯)嗪并[3,4-c]吡啶并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6,8-二酮(13),13经保护基交换并与7,8-二氟-6,11-二氢二苯并[b,e]硫杂草-11-醇(15)反应得(R)-12-[(S)-7,8-二氟-6,11-二氢二苯并[b,e]硫杂草-11-基]-7-正己氧基-3,4,12,12a-四氢-lH-[1,4](嗯)嗪并[3,4-c]吡啶并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6,8-二酮甲磺酸盐(16),16在氯化锂作用下水解并与氯甲基碳酸甲酯反应得1,纯度99.09％,de 99.88％,ee 99.99％.本研究在制备6时,改变投料方式,并用氨基磺酸和亚氯酸钠代替次氯酸钠作氧化剂,使反应时间缩短,收率由36％提高至70％;制备[3-苄氧基-2-[[2-(2,2-二甲氧基乙氧基)乙基]胺甲酰基]-1,4-二氢-4-氧代吡啶-1-基]氨基甲酸叔丁酯(10)时,通过密闭反应减少9的用量,降低了反应成本.改进后的工艺反应条件温和,后处理简便,总收率8％(以2计).

目的 探讨N-[N-(3,5-双氟酚内氨酰)]-S-苯氨基乙酸t-丁基酯(DAPT)预处理对脑缺血/再灌注损伤小鼠的神经保护作用及其机制.方法 雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、大脑中动脉缺血/再灌注组(模型组)、DAPT预处理+大脑中动脉缺血/再灌注组(DAPT预处理组).DAPT预处理组小鼠造模前连续7 d每天腹腔注射1次DAPT,而模型组和假手术组小鼠腹腔注射等量生理盐水.采用线栓法建立小鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型,在小鼠脑缺血2 h及再灌注24 h后采用Longa生物学评分对小鼠的神经功能缺损状况进行评估;采用TUNEL染色评估小鼠神经元细胞凋亡情况及2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察小鼠脑梗死体积;Western blot检测小鼠脑组织Notch1、Hes1及Hes5蛋白相对表达水平;实时荧光定量PCR(RT-PCR)分析小鼠脑组织的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和信号转导与转录激活因子3(STAT3)的mRNA相对表达水平;ELISA法对小鼠脑组织中IL-1β和TNF-α的表达水平进行检测.结果 假手术组的神经元凋亡数、脑梗死体积、Longa生物学评分分别为(4.00±1.58)个、0 mm3、0分,模型组分别为(75.00±2.74)个、(42.37±0.85)mm3、(2.12±0.39)分,DAPT预处理组分别为(33.60±2.41)个、(19.87±1.18)mm3、(1.29±0.25)分,以上指标3组组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05).模型组的IL-1β、TNF-α表达水平,GFAP mRNA、STAT3 mRNA相对表达水平显著高于假手术组(P<0.05),而DAPT预处理组上述指标较模型组显著降低(P<0.05);模型组Hes1、Hes5和Notch1蛋白相对表达水平较假手术组明显升高(P<0.05),而DAPT预处理组上述指标较模型组明显降低(P<0.05).结论 DAPT预处理能抑制Notch信号通路并下调Hes1、Hes5及STAT3、GFAP水平,从而对脑缺血/再灌注损伤小鼠产生神经保护作用.

采用硅胶柱色谱、中压色谱、Sephadex LH-20柱色谱及制备型HPLC等方法对香鳞毛蕨Dryopteris fragrans进行化学成分研究,通过1D,2D NMR,IR等波谱学方法并结合文献对分离得到的化合物进行结构鉴定.从该植物全草95％乙醇提取物中分离纯化得到2个间苯三酚类化合物,分别鉴定为2',4',6'-三羟基-5'-乙酸甲酯-3'-甲基-1'-丁酰酚(1)和绵马酚B(2).其中化合物1为新化合物,命名为香蕨酚.

目的 建立绵马贯众配方颗粒的HPLC指纹图谱.方法 采用HPLC,色谱柱以C18为填充剂,乙腈-1％醋酸溶液为流动相,流速为1.0mL·min-1进行梯度洗脱,检测波长为330 nm;采用液质联用技术(LC-MS)获得特征峰的分子量和分子离子碎片,结合对照品和文献比对等方法进行特征峰结构指认.结果 绵马贯众配方颗粒的指纹图谱呈现12个共有峰,7个共有峰进行了指认,分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、4β-羧甲基-(-)-表儿茶素、圣草次苷、3-甲基丁酰基间苯三酚-4,6-二-C-葡萄糖苷、1-甲基-3-丁酰基间苯三酚.结论 建立了绵马贯众配方颗粒的HPLC指纹图谱,方法重复性、稳定性好,可用于绵马贯众配方颗粒的生产全过程的质量控制.

目的 研究香鳞毛蕨Dryopteris fragrans的化学成分.方法 运用硅胶柱色谱、大孔吸附树脂柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及制备型HPLC等方法进行分离纯化,通过核磁共振、质谱等波谱学方法并结合文献对分离得到的化合物进行结构鉴定.结果 从香鳞毛蕨水提物中分离得到6个化合物,分别鉴定为1-丁酰基-2-羟基-4-甲氧基-3-甲基间苯三酚-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、5,7-二羟基-2-甲基色原酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(2)、monnierisidesA(3)、异荭草素(4)、荭草素(5)和异牡荆黄素(6).结论 化合物1为新化合物,命名为绵马苷;化合物2、3、5、6为首次从该植物中分离得到.

目的 探究《中华人民共和国药典》(2020年版)(简称"《中国药典》")收载的清蒸炮制法,在不同炮制时间(0～48 h)下对何首乌中主要化学成分含量的影响.方法 制备《中国药典》清蒸样品;建立超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)测定何首乌中26种成分的分析方法并进行检测.结果 建立了准确可靠的UPLC-MS/MS测定何首乌中蒽醌、二苯乙烯苷、黄酮、酚类化合物含量的方法;随着蒸制时间的延长,26种成分的含量发生了明显变化:游离蒽醌类成分(大黄素、大黄素甲醚)先降低后升高,结合蒽醌类成分(大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-1-O-葡萄糖苷、大黄素-6-O-葡萄糖苷)、大黄酸、大黄素-1-甲醚、cis-THSG、虎杖苷、表儿茶素和芦丁先升高后降低,大黄素二蒽酮、大黄素-8-O-(6'-甲基丙二酰)吡喃葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-(6'-甲基丙二酰)吡喃葡萄糖苷、trans-THSG、白藜芦醇、2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-(2"-O-阿魏酰)-β-D-吡喃葡萄糖苷、儿茶素和决明酮-8-O-β-D-葡萄糖苷降低,酚类成分升高.结论 本方法操作简单、准确度高、重复性好,可以用于何首乌中26种化学成分的定量检测分析.制首乌中26种成分的含量与蒸制时间密切相关,蒽醌类、二苯乙烯苷类、黄酮类、酚类发生规律性变化,对何首乌质量产生重要影响.