目的:建立绵马贯众药材超高效液相色谱（UPLC）特征图谱及含量测定方法，对不同产地绵马贯众药材进行综合评价。方法:采用UPLC对15批不同产地绵马贯众药材进行特征图谱测定，并结合聚类分析、偏最小二乘法分析对其质量进行评价，同时采用紫外分光光度法进行总黄酮含量测定。结果:所建立的特征图谱共确定了21个共有峰，并通过对照品比对指认了其中4个成分。聚类分析及偏最小二乘法分析显示，辽宁省鞍山市、吉林省延边朝鲜族自治州、黑龙江省佳木斯市、吉林省吉林市样品具有一定的一致性，而总黄酮含量测定结果显示，不同产地之间样品含量差异较大。结论:建立绵马贯众药材的UPLC特征图谱及总黄酮含量测定方法，可用于全面评价不同产地绵马贯众药材的质量。不同产地绵马贯众样品质量较为接近，但3个产地药材总黄酮含量差异较大。

目的 评价抗寄生虫中药水提物和有机溶剂粗提物体外对细粒棘球蚴的作用效果.方法 从感染绵羊肝脏细粒棘球蚴包囊中分离原头节,体外培养24h后,取活性大于95％的原头节(100 μl,约100个)加入96孔板,分别加入终浓度为0.8 mg/ml(低浓度组)、1.6 mg/ml(中浓度组)、3.2 mg/ml(高浓度组)的鸦胆子、苦楝皮、辣蓼、石榴皮、使君子、槟榔、贯众、鱼藤、马蔺子、五倍子和仙鹤草等11种抗寄生虫中药的水提物,体外作用72 h后,伊红染色法检测原头节活性,倒置显微镜观察下观察原头节的形态,计算死亡率;同时设相同浓度的阿苯达唑组和空白对照组.从具有体外抗原头节作用的中药中提取黄酮、多糖、皂苷和生物碱等粗提物,分别以终浓度1.00 mg/ml体外作用于原头节72 h后,观察原头节形态,计算死亡率;同时设空白对照组.对体外抗原头节效果明显的粗提物进行液相色谱与串联质谱联用分析.组间比较采用单因素ANOVA分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 中药水提物作用72h后,鸦胆子、苦楝皮、辣蓼水提物高浓度组原头节边缘模糊,结构松散,基质溶解;其余8种中药水提物高浓度组原头节形态正常,各部分结构清晰;阿苯达唑组原头节生发层有轻微损伤;空白对照组原头节形态正常.体外培养72 h后,鸦胆子、苦楝皮和辣蓼水提物高浓度组原头节的死亡率分别为(99.63±0.57)％、(90.89±1.10)％和(51.93±0.60)％,中浓度组分别为(85.97±1.50)％、(81.14±1.19)％、(42.46±0.56)％,低浓度组分别为(78.34±1.35)％、(77.27±0.92)％、(36.66±0.60)％,与空白对照组[(0.62±0.51)％]相比差异均有统计学意义(F=180 678.22、41 488.99、44 346.38,19 543.86、27 887.32、34 590.79,20 059.467、41 953.68、17 993.77,均 P＜0.01),与阿苯达唑组[(30.03±2.02)％]比较差异均有统计学意义(F=6 585.72、4 210.84、646.46,2 956.80、2 849.68、210.83,2 365.92、2 712.28、58.12,均 P＜0.01);其余8种中药水提物高、中、低浓度组原头节的死亡率与对照组比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).鸦胆子黄酮、苦楝皮黄酮、鸦胆子皂苷、辣蓼皂苷和辣蓼生物碱组原头节皱缩、结构松散、基质溶解,原头节死亡率分别为(98.33±2.89)％、(96.67±5.77)％、100％、(99.33±1.15)％和(56.67±2.11)％,与空白对照组[(10.33±2.51)％]比较差异均有统计学意义(F=1 584.00、563.71、3 808.47、3 099.52、14.65,均P＜0.01);其余中药粗提物组原头节的死亡率与对照组比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).液相色谱与串联质谱联用分析结果显示,正、负离子模式下分别鉴定出741、398种代谢产物,其中正离子模式下从鸦胆子黄酮粗提物中鉴定出差异显著的黄酮类化合物4种,分别为漆黄素、5-甲基-7-甲氧基异黄酮、儿茶素和甜橙黄酮;负离子模式下鉴定出8种,分别为原花青素B2、槲皮素-3β-D-葡萄糖苷、枸桔苷、橙皮素、槲皮素、木犀草素、芹菜素和黄豆黄素.结论 鸦胆子、苦楝皮和辣蓼水提物,鸦胆子黄酮、苦楝皮黄酮、鸦胆子皂苷和辣蓼皂苷有明显体外抗细粒棘球蚴的作用,且效果优于阿苯达唑.

目的 建立多元统计分析和熵权逼近理想解排序法的绵马贯众炭Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizoma Carbonisatum质量评价方法.方法 收集不同产地的16批次样品,以绵马贯众素ABBA为内参物,采用一测多评(QAMS)法同时检测绵马贯众炭中白绵马素AA、二去甲基伪绵马素AA、伪绵马素、白绵马素AP、绵马酸ABA、绵马贯众素ABBA、山柰素、大豆素、去甲氧基荚果蕨素、异槲皮素和圣草次苷含量;采用多元统计分析和熵权逼近理想解排序(entropy weight technique for order preferenceby similarity to ideal solution,EW-TOPSIS)法对绵马贯众炭质量进行评价.结果 外标法方法学验证符合《中国药典》2020年版规定,所建立的相对校正因子耐用性良好,QAMS法可用于绵马贯众炭中11个成分含量的同步检测;多元统计分析结果显示16批样品呈现一定的区域差异,去甲氧基荚果蕨素、绵马贯众素ABBA、伪绵马素和山柰素是引起不同批次绵马贯众炭分组的主要变量因子,EW-TOPSIS法结果显示16批绵马贯众炭质量评价贴近度(Jb)为0.137 1～0.7067,S12～S16的排序位于前5位,表明吉林产地所得绵马贯众炭整体质量较好.结论 所建立的集HPLC-QAMS、多元统计分析及EW-TOPSIS法于一身的综合质量评价方法,省时便捷,为绵马贯众炭的品质评价和质量控制提供参考.

复方青黛丸(胶囊、片)是临床治疗银屑病的国家基本药物,现已广泛应用于寻常型银屑病血热证的治疗之中.尽管复方青黛制剂具有一定的临床使用优势,但因该制剂所引起的如胃肠道不适、肝损伤等不良反应正在引起关注.国家药品监督管理局曾通报了复方青黛制剂造成的不良反应.通过文献检索和总结发现复方青黛制剂中单味药青黛、绵马贯众、白鲜皮具有一定的胃肠毒性和肝毒性.因此,从药味组成、不良反应、毒性成分及毒性机制等方面对复方青黛制剂进行综述,为该药的临床合理使用奠定基础.

绵马贯众是我国传统中药,在中医临床上运用广泛.现代药理学研究表明,绵马贯众具有抗病毒、抗菌、抗肿瘤、抗氧化、止血、驱虫等药理作用,化学成分以间苯三酚类、黄酮类和萜类为主.对绵马贯众的本草考证、化学成分和药理作用进行综述,并从植物亲缘学及化学成分特有性、传统药效药性、化学成分可测性和网络药理学 4 个方面对绵马贯众质量标志物(Q-marker)进行预测分析,结果显示,白绵马素AP、白绵马素BB、绵马素BB、山柰素、大豆素、里白醇等可作为其Q-marker,为建立和完善绵马贯众质量标准提供参考.

目的 研究绵马贯众Dryopteris crassirhizoma中间苯三酚类化合物并探讨其抑菌活性.方法 采用硅胶、Sephadex LH-20、半制备液相及重结晶等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据(MS、1H-NMR、13C-NMR)鉴定结构;采用美国临床实验室标准研究所(CLSI)制定的M38-A2和M07-A9方案分别研究化合物对真菌和细菌的抑菌活性.结果 从绵马贯众50％乙醇提取物中分离得到10个间苯三酚类化合物,分别鉴定为1-丁酰基间苯三酚(1)、1-甲基-3-丁酰基间苯三酚(2)、2-乙酰基-4-丁酰基间苯三酚(3)、1-甲基-3-乙酰基-5-丁酰基间苯三酚(4)、黄绵马酸PB(5)、异黄绵马酸AB (6)、异黄绵马酸AB (6)、黄绵马酸AA (7)、绵马酸ABA (8)、黄绵马酸AB (9)、绵马酸ABP (10).化合物8对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌表现出与阳性对照头孢西丁相当的抑制活性,最小抑菌浓度(MIC)均达到2.5 μg/mL.结论 化合物1～4首次从绵马贯众中分离得到.化合物8对真菌和细菌都有明显的抑菌活性.

目的 建立检测抗感颗粒以绵马贯众易混淆品单芽狗脊贯众投料的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法.方法 单芽狗脊贯众药材中山柰苷含量远超过绵马贯众,通过测定抗感颗粒中山柰苷的含量,可以判断生产企业是否存在以单芽狗脊贯众投料的情况.具体测定条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相为含0.02％甲酸的乙腈-0.02％甲酸溶液,梯度洗脱;质谱采用电喷雾正离子模式(ESI+),多反应监测(MRM)定量分析,以m/z 579.2→287.1作为定量离子对.结果 山柰苷在272.46 ～5 449.25 pg内线性关系良好,回归方程为Y=139.217 2 X-2 901.93,相关系数r=0.999 6,平均回收率(n=6)为94.97％,RSD为0.85％.在检测收集的12批样品中,2家企业的7批样品山柰苷含量异常偏高,可能存在以单芽狗脊贯众投料的情况.结论 建立的方法简便、准确、可靠,可用于检测抗感颗粒中单芽狗脊贯众的使用情况.

目的 研究绵马贯众中间苯三酚类化合物对H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)的抑制作用.方法 通过检索建立了由34个间苯三酚类化合物组成的配体库,从Protein Data Bank中下载的X-ray晶体三维结构文件,采用AutoDock Vina软件及LigPlot+软件筛选出与NA结合能较低且与NA形成氢链作用较强的分子;采用荧光法检测化合物对NA活性的作用.结果 通过分子对接筛选出4个(绵马酸ABA、绵马酸ABB、绵马酸ABP、绵马贯众素ABBA)与NA有较好结合的化合物,并对这4个化合物进行活性验证,结果表明绵马贯众素ABBA对NA抑制作用最强,IC50值为(26.73 ±0.57)μmol/L.结论 绵马贯众中绵马贯众素ABBA具有较好的抗H1N1流感病毒NA的作用,为开发新的抗流感病毒药物奠定了基础.

目的 基于绵马贯众中间苯三酚类成分寻找具有良好抗流感病毒活性的化合物.方法 将25个绵马贯众中间苯三酚类化合物与12种流感病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)进行分子对接,通过评价结合能、结合模式及发生相互作用的重要氨基酸等指标进行虚拟筛选.通过神经氨酸酶抑制实验验证其中4个候选化合物体外抑制NA的活性,在此基础上,采用犬肾MDCK细胞通过细胞病变(CPE)法对候选化合物M22的抗病毒活性进行进一步的验证.结果 通过分子对接筛选出5个与NA有较好结合能力的候选化合物;NA抑制实验结果表明候选化合物中M22对NA抑制作用最显著;CPE实验结果表明M22对多种流感病毒毒株均具有较好的抑制作用.结论 绵马贯众中候选化合物M22具有较好的抗流感病毒作用,为开发新的抗流感病毒药物的深入研究奠定了基础.

目的 优化绵马贯众总多酚的超声提取工艺,并评价其抗氧化活性.方法 以总多酚提取量为评价指标,在单因素试验基础上采用响应面法对提取时间、乙醇体积分数、料液比进行筛选.然后,通过测定对DPPH自由基清除能力、总还原能力来评价其抗氧化活性.结果 最佳条件为提取时间81 min,乙醇体积分数84％,料液比1∶27,总多酚平均提取量3.352 mg/g.绵马贯众提取物对DPPH自由基清除能力、总还原能力的IC50分别为86.47、86.05 μg/mL.结论 该方法稳定合理,绵马贯众提取物具有较强的抗氧化活性.