目的:探索5-羟甲基糠醛(5-HMF)影响心血管发育的机制。方法:以10、25、50 μg/ml的5-HMF处理受精8 h后的AB系斑马鱼幼鱼，用E3溶液处理同胞幼鱼作为对照组，进行形态组织学观察，吖啶橙染色检测细胞凋亡，实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测相关基因表达。用抗氧化剂N-乙酰-l-半胱氨酸(NAC)和Wnt信号通路激活剂(BML)处理幼鱼进行挽救实验，比较各组幼鱼心血管发育情况。数据比较采用单因素方差分析。结果:高浓度5-HMF处理组幼鱼心率、心包水肿程度、静脉窦-动脉球距、凋亡染色面积[(76.23±2.59)次/20 s、(65.83±3.12)%、(18.38±2.33) μm、(8 639.28±798.06)]均高于对照组[(14.39±3.41)次/20 s、(0.84±0.12)%、(14.39±0.76) μm、(1 420.84±359.34)]，差异有统计学意义( t＝9.312、8.590、11.784、9.786， P<0.05)。高浓度5-HMF处理组幼鱼心脏发育相关基因心脏特异性同源盒转录因子(nkx2.5)、T-框蛋白5(Tbx5)、锌指转录因子(gata4)和血管发育相关基因血管内皮生长因子A旁系同源基因(VEGF-A)的表达水平(0.48±0.06、0.34±0.04、0.64±0.08、0.78±0.13)均低于对照组(1.00±0.12、1.00±0.17、1.00±0.13、1.00±0.18)，差异有统计学意义( t＝5.624、4.439、5.804、6.872， P<0.05)。而凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)和p53的表达水平(2.56±0.36、3.65±0.48)均高于对照组(1.00±0.18、1.00±0.13)，差异有统计学意义( t＝7.283、6.392， P<0.05)。NAC和BML可以挽救5-HMF引起的表型异常。 结论:高浓度5-HMF提高了斑马鱼幼鱼活性氧水平，抑制Wnt信号通路的转导，最终导致斑马鱼幼鱼心血管发育异常。

目的:研究白术清炒过程中颜色变化与5-羟甲基糠醛(5-HMF)的相关性,并通过其炮制过程中各指标的动态变化分析炮制拐点.方法:清炒法炮制白术,运用薄层扫描仪、MATLAB软件评估白术生品及炮制品的颜色值,测定氧化值,HPLC法测定5-HMF含量,SPSS21.0软件分析颜色与5-HMF含量的相关性并建立回归模型.结果:相关性分析显示,色调H与亮度Ⅰ呈极显著正相关,与氧化值、5-HMF含量均呈极显著负相关;饱和度S与亮度Ⅰ呈显著负相关,与氧化值呈极显著正相关;亮度Ⅰ与氧化值、5-HMF含量均呈极显著负相关;氧化值与5-HMF含量呈极显著正相关.5-HMF含量与颜色值的回归模型为Y(5-HMF)= 24.928-43.398X(H),R2 = 0.908,拟合度高,模型有效.结论:白术清炒过程中其颜色与5-HMF含量显著相关,依据其颜色变化预测炮制过程中5-HMF的含量具有可行性,并且依据各指标动态变化可分析炮制拐点,为白术清炒过程中炮制程度的判断提供参考依据.

目的 采用指纹图谱结合聚类分析(hierarchical clustering analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PC A)和偏最小二乘法-判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)等进行化学模式识别,对狗脊药材指纹图谱数据进行分析,筛选特征性指标成分并以此建立狗脊有效成分的定量分析,为狗脊质量控制提供科学依据.方法 采用Agilent Eclipse XDB-C18柱(250 mm × 4.6mm,5.0 μm),以甲醇-1％醋酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量为1.0mL/min,柱温为30 ℃,检测波长为280nm,HPLC法建立9个产地16批样品狗脊的指纹图谱,运用相似度分析、HCA、PCA和PLS-DA等化学模式识别技术筛选出不同产地狗脊化学成分的特征成分作为狗脊有效成分,并定量分析.结果 16批狗脊HPLC指纹图谱标定10个共有峰,相似度在0.695～0.954;通过HCA、PCA和PLS-DA较好的区分各产地狗脊,综合分析筛选5-羟甲基糠醛、原儿茶酸、原儿茶醛、紫云英苷4个成分作为狗脊有效成分,质量分数分别在0.022 8％～1.339 4％、0.006 2％～0.713 3％、0.020 0％～0.234 5％、0.011 2％～0.106 5％.特征图谱和含量测定结果显示广西产地狗脊药材质量较优.结论 该研究建立的狗脊药材指纹图谱及含量测定方法稳定、可靠,重现性好,可为全面评价狗脊药材质量提供参考.

目的 建立双波长高效液相法(High performance liquid chromatography,HPLC)比较研究山萸肉酒制前后配伍入六味地黄汤(以下分别简称六(山),六(酒))中7种药效成分:莫诺苷、马钱苷、獐牙菜苷、芍药苷、没食子酸、5-羟甲基糠醛以及丹皮酚的含量变化;探究六(山)、六(酒)干预绝经后骨质疏松症模型大鼠去卵巢术后90天的作用及其机制.方法 ①采用双波长HPLC法测定山萸肉酒制前后配伍入六味地黄汤中七种药效成分的含量.色谱条件:Hypersil C18色谱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈-0.3%磷酸,梯度洗脱(0-7 min,0%-8%乙腈;7-15 min,8%-10%;15-20 min,10%-15%;20-30 min,15%-23%;30-50 min,23%-45%),流速0.6 mL·min-1,检测波长:240 nm(莫诺苷、马钱苷、獐芽菜苷、芍药苷),274 nm(没食子酸、5-羟甲基糠醛、丹皮酚),柱温30℃,进样量20 μL.②6-8月龄SD大鼠,分假手术组、模型组、阳性药物组、山萸肉配伍入六味地黄汤组(六(山)组)和酒萸肉配伍入六味地黄汤组(六(酒)组),去卵巢术后第5天开始给药,每周称重,并于术后90天取各组大鼠5只,称重后麻醉,取血清,双侧股骨,并取脏器(子宫、脾、肝、双肾以及心脏)称重.分别采用全自动生化仪以及化学发光微粒子免疫检测法检测大鼠血清钙(Calcium,Ca)、磷(Phosphorus,P)水平和雌二醇(Estradiol,E2)水平;双能X线骨密度仪测定大鼠骨密度(Bone mineral density,BMD)值;HE染色法观察大鼠骨组织形态学变化.结果 ①山萸肉酒制前后配伍入六味地黄汤中均含有上述7种药效成分,且六(酒)中7种药效成分总含量高于六(山)(P<0.01).其中,六(酒)中没食子酸、5-羟甲基糠醛高于六(山)(P<0.01),而莫诺苷含量则较六(山)低(P<0.01).②与假手术组比较:模型组大鼠血清中Ca、P、E2水平及子宫指数降低(P<0.01),BMD值降低(P<0.01),骨组织结构损害程度加深,表现为骨髓腔增大、脂肪细胞逐渐增多,骨小梁排列稀释,骨小梁数量变少甚至出现断裂.③与模型组比较,六(山)组及六(酒)组大鼠血清中的E2、Ca、P水平及子宫指数均升高(P<0.05),骨组织结构有明显改善,BMD值明显升高(P<0.05);六(酒)组肝脏、脾脏指数升高(P<0.05).结论 山萸肉酒制前后配伍入方六味地黄汤后均含有莫诺苷,马钱苷,獐牙菜苷,芍药苷,没食子酸,5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethyl furfural,5-HMF)以及丹皮酚七种药效成分,可有效干预PMOP;其中,酒萸肉入方的六味地黄汤抗骨质疏松作用优于山茱萸入方的六味地黄汤,其机制可能与六(酒)中七种有效成分的总含量高于六(山),该7种成分与成骨细胞、破骨细胞增殖分化密切相关,从而可调节骨代谢失调,提高骨密度,改善PMOP有关.可为2020版药典六味地黄丸选用酒萸肉入方及临床上应用六味地黄汤防治PMOP提供一定的实验依据.

目的:通过筛选大黄炭的潜在质量标志物,分析大黄炭炮制过程中潜在质量标志物的变化规律,为大黄炭炮制机理研究与炮制终点判断提供参考.方法:本研究基于经典文献与网络药理学分析,初步筛选大黄炭的潜在质量标志物.以LPS诱导的HUVEC细胞作为大黄炭"凉血化瘀"功效的体外评价模型,进一步验证大黄炭的潜在质量标志物.使用色差仪对大黄炭的颜色特征进行量化,分析大黄炭炮制过程中潜在质量标志物与颜色变化的关联性.结果:大黄炭的潜在质量标志物可分为两类:结合蒽醌与番泻苷为一类,随炮制程度增加而递减,可能与大黄制炭后泻下作用减弱有关;游离蒽醌、没食子酸、5-HMF为另一类,随炮制程度增加而先增后减,可能与大黄制炭后凉血化瘀作用增加有关.结论:大黄炭中结合蒽醌可作为潜在的"减毒"质量标志物,游离蒽醌可作为潜在的"增效"质量标志物.

纤维素乙醇作为一种清洁可再生的绿色能源,具有良好的应用前景.然而酿酒酵母利用木质纤维素原料生产乙醇的发酵过程易受多种抑制物胁迫的影响,因此提高其胁迫耐受性具有重要意义.本研究在细胞内设计了一种氧化还原敏感型基因元件,通过生物传感器Yap1 感应胞内氧化还原状态,以调控抗胁迫基因智能表达.首先,分析了Yap1 调控的天然内源启动子PTRR1、PTRX2 和PMET16 对木质纤维素水解液中典型抑制物的响应强度.其次,根据不同胁迫种类组合相应启动子与抗胁迫的效益基因,构建氧化还原敏感型基因元件提高了酿酒酵母的胁迫耐受性.最后,将表现较好的基因元件GP-CTT和GP-ADH串联整合到一起构建了双基因元件系统,在 5-HMF和H2O2 双重胁迫下细胞的死亡率与野生型相比下降了 69.6%.相较于单基因元件GP-CTT,双基因元件整合菌株的比生长速率、葡萄糖消耗速率和乙醇生产速率分别提高了64.2%、60.1%和 58.9%,重组菌株过氧化氢酶的酶活力提高了 40.2%.本研究通过理性设计氧化还原敏感型基因元件的遗传回路,强化胞内关键抗氧化酶和醛降解途径,系统地提高了酿酒酵母的胁迫耐受性,为动态地提高酵母鲁棒性提供了新的见解.

目的:探讨炒炭程度对广山楂止泻作用、5-羟甲基糠醛(5-HMF)、原儿茶酸、鞣质含量及色差值的影响.方法:以昆明小鼠为研究对象,分为生品高、低剂量组,轻炭高、低剂量组,标炭高、低剂量组,重炭高、低剂量组,空白组,阳性组;采用番泻叶法复制急性腹泻模型,以小鼠腹泻指数和腹泻潜伏期为指标,考察广山楂及各炭品的水提物的止泻作用;采用HPLC法和分光光度法测定样品中5-HMF、原儿茶酸和鞣质的含量;采用分光色差仪测定各炮制品色差值L*、a*、b*.结果:与空白组比较,阳性组与炭品组均降低小鼠的腹泻指数和延长腹泻潜伏期(P＜0.05),生品组降低腹泻指数和缩短腹泻潜伏期,但差异无统计学意义(P＞0.05).5-HMF含量为标炭＞轻炭＞重炭,生品未检测出.原儿茶酸与鞣质含量为标炭最高,其次是轻炭、重炭,生品最低.色差值L*、a*、b*均逐渐降低,与5-HMF、原儿茶酸含量无相关性.结论:广山楂炒炭后能增强止泻作用,并产生新的化学成分5-HMF,原儿茶酸、鞣质含量略有增加,四者与炮制程度相关,研究结果可为广山楂炒炭炮制要求"存性"的科学内涵提供实验依据.

目的 对荆花蜜质量控制指标和药用价值进行研究.方法 收集近 4 年广西都安地区定地饲养模式生产的荆花蜜样品,研究其理化特征和对盐酸哌洛丁胺诱导的小鼠传输障碍便秘模型的影响.结果 经蜜蜂充分酿造的荆花蜜中花粉以荆条花花粉粒为主,水分可稳定达到 20%以下,电导率低于 0.8 mS·cm-1,pH 3.67～3.93,游离酸 27.3～32.3 meq·kg-1、内酯15.6～21.5 meq·kg-1、总酸35.4～53.7 meq·kg-1、淀粉酶17.6～21.5 U、羟甲基糠醛(5-HMF)3.3～11.6 mg·kg-1,总酚含量450～650 mg·kg-1,总黄酮含量 16.3～26.6 mg·kg-1,DPPH清除EC50 67.5～90.1 mg·mL-1.薄层色谱研究结果显示,荆花蜜与其他 10 余种蜂蜜呈现不同的特征图谱,但不同年份荆花蜜的图谱特征相似;每日饮用不同浓度的蜂蜜水溶液,盐酸哌洛丁胺诱导的传输障碍小鼠便秘模型的便秘症状得到明显改善和缓解.结论 为荆花蜜各级各类质量标准制定和其药用价值研究进行了有益探索,以期为后续标准制定和产品开发提供依据.

回顾性分析 2015 年 7 月至 2020 年 7 月在武汉市第一医院皮肤科经临床和病理确诊的 14 例儿童色素减退型蕈样肉芽肿(HMF)临床、影像、病理、治疗及随访资料.14 例患儿中男 5 例,女 9 例.诊断年龄 4～13 岁,发病年龄 3～12 岁,病程 9 个月～7 年.皮损表现为大小不等、不规则形或类圆形,边界欠清晰的色素减退斑,局部融合.皮肤镜下见色素减退呈波点状、斑马样和网格状模式,血管呈点状、精子样、短细线状和星状血管结构模式.反射式共聚焦显微镜(RCM)下色素减退斑均表现为基底层色素轻度减退,未见明显色素缺失,真表皮交界处及真皮浅层可见较多高折光异形细胞.皮损组织病理示棘层下部和基底层可见异形淋巴细胞浸润,核深染,部分扭曲呈脑回状,部分聚集呈Pautrier微脓疡.免疫组化:CD3 均阳性,CD20 均阴性,4 例仅CD8 阳性,10 例CD8、CD4 均阳性.12 例患儿采用NB-UVB照射治疗,8 例完全消退,4 例部分消退,3 例复发再次照射后完全消退.2 例分别给予糠酸莫米松和他克莫司治疗,6 个月和 8 个月后消退面积>80%.本研究显示皮肤影像有一定辅助诊断价值,NB-UVB治疗HMF安全有效,HMF预后一般良好,但仍需警惕治愈后有疾病复发及进展可能,需进行长期随访.

目的 以"醋制入肝"中药炮制理论为基础,采用HPLC法分析不同醋制时间五味子成分变化,探讨成分变化与抗肝损伤作用关联,明确醋五味子保肝活性物质基础.方法 应用HPLC法建立10批生五味子及醋制1、2、3、4、5、6h五味子指纹图谱,检测五味子醇甲、五味子乙素、五味子甲素、丙烯酰胺、5-羟甲基糠醛(5-HMF)、五味子酯甲水平.以CC14诱导小鼠急性肝损伤为动物模型,结合血清生化指标天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化,运用灰色关联度法联合偏最小二乘法分析其保肝作用成分与药效之间的关联性.结果 10批五味子指纹图谱中,以五味子醇甲色谱峰为参比峰,标定出共有峰23个,其中特征峰6个;对10批生五味子及不同醋制时间下五味子指纹图谱与对照指纹图谱相似度组内对比发现,相似度均在0.913～0.999;随着蒸制时间的延长,五味子中5-HMF整体呈上升趋势:醋制3 h时五味子酯甲较生五味子质量分数略有增加,而后随着时间延长逐渐减小;醋制1～6h内五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素质量分数较生五味子变化不大.与模型组比较,醋制2、3、6h组AST、ALT、TNF-α、MDA水平显著降低,SOD水平显著升高(P＜0.01);醋制1 h组AST、MDA水平显著降低,SOD水平显著升高(P＜0.01);醋制4 h组AST、ALT水平显著降低,SOD水平显著升高(P＜0.01);醋制5 h组AST、ALT、TNF-α水平显著降低,SOD水平显著升高(P＜0.01).组间对比发现,醋制3 h组药效学指标明显较好,随着炮制时间延长,与醋制3h组比较,醋制4、5、6h组血清中AST、ALT、TNF-α、MDA水平有不同程度升高,SOD含量下降.故以醋制3 h五味子指纹图谱与药效学之间关联性建立谱-效关系研究,经灰色关联度法联合偏最小二乘法分析,5-HMF、五味子乙素、五味子醇甲为改善小鼠肝损伤的主要贡献成分.结论 醋制3 h五味子对CC14诱导急性肝损伤小鼠的作用效果最佳,其中五味子乙素、5-HMF及五味子醇甲对小鼠生化指标影响较显著.