支气管肺发育不良是早产儿特别是极低出生体重儿最常见的慢性呼吸系统疾病之一，其中肺发育不成熟、炎症损伤、氧化应激及损伤后异常修复是关键因素。白三烯是5-脂氧合酶途径的促炎介质，参与支气管肺发育不良的发生。孟鲁司特作为白三烯受体拮抗剂，通过抗炎、抗氧化及抗纤维化等作用可能在支气管肺发育不良治疗中起到一定作用。该文将综述孟鲁司特在支气管肺发育不良中应用的潜在作用机制及相关临床研究进展。

目的:探讨棕榈酸（PA）是否可诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞发生铁死亡。方法:将小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞分为正常对照组、PA组（1.0 mmol/L）、PA+凋亡抑制剂（Z-VAD-FMK）组（5 μmol/L）、PA+铁死亡抑制剂（Fer-1）组（5 μmol/L）、PA+坏死抑制剂（Nec-1）组（5 μmol/L），每组设置3个平行组。采用CCK8法检测细胞存活率，电镜观察细胞超微结构改变，FerroOrange试剂盒检测细胞内Fe 2+水平，丙二醛（MDA）试剂盒检测MDA水平，流式法检测活性氧（ROS）水平，实时荧光定量PCR法检测凋亡基因半胱氨酸蛋白酶3（ caspase3）、坏死基因受体结合丝氨酸苏氨酸激酶3（ RIPK3）、铁死亡相关基因长链脂酰辅酶A合成酶4（ ACSL4）、花生四烯酸-15-脂加氧酶（ ALOX15）、前列腺素内过氧化物合酶2（ Ptgs2）、铁蛋白重链（ FTH）、铁蛋白轻链（ FTL）和谷胱甘肽过氧化物酶4（ GPX4）的mRNA表达水平，Western blotting法检测活化型caspase3（cleaved caspase3）、RIPK3、ACSL4、ALOX15和Ptgs2的蛋白表达水平。两组间比较采用 t检验。 结果:与PA组相比，PA+Z-VAD-FMK组、PA+Fer-1组和PA+Nec-1组MIN6的存活率均更高（ P<0.01）。PA组MIN6细胞电镜下可见凋亡、坏死、及铁死亡相关的形态学特征。与对照组相比，PA组MIN6细胞内Fe 2+相对荧光强度、MDA水平、总ROS均更高； caspase3、 RIPK3、 ACSL4、 Ptgs2、 ALOX15的mRNA相对表达量均更高， FTH和 GPX4的mRNA相对表达量均更低；cleaved caspase3、RIPK3、ACSL4、ALOX15和Ptgs2的蛋白相对表达量均更高（均 P<0.01）。与PA组相比，PA+Fer-1组Fe 2+相对荧光强度、MDA水平、总ROS均更低； ACSL4、 Ptgs2、 ALOX15的mRNA相对表达量均更低， FTH和 GPX4的mRNA相对表达量均更高；ACSL4、ALOX15和Ptgs2的蛋白相对表达量均更低（均 P<0.01）。 结论:PA可诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞发生铁死亡。

目的:观察5-脂氧合酶(5-LOX)对肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)极化的影响。方法:2020年1月从人外周血分离单核细胞，经佛波酯、脂多糖和γ-干扰素诱导，通过流式细胞术对诱导后的巨噬细胞鉴定；构建包装5-LOX过表达慢病毒和对照慢病毒，分为过表达组和对照组感染巨噬细胞。通过蛋白质印迹法(Western blot)检测过表达效果；通过流式细胞术检测巨噬细胞极化相关表面蛋白CD68、CD163表达水平；通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测巨噬细胞极化相关蛋白白细胞介素(IL)-12、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、IL-10表达水平；通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测巨噬细胞相关细胞因子干扰素调节因子4(IRF4)、干扰素调节因子5(IRF5)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、精氨酸酶1(Arg1)的mRNA表达水平。实验数据采用配对样本 t检验。 结果:5-LOX过表达组CD163[(1.73±0.35)%比(0.72±0.07)%， t＝4.831， P<0.05]，IL-10[(72.91±0.14) pg/ml比(20.75±0.90) pg/ml， t＝71.396， P<0.01]、TGF-β1[(27.88±3.11) pg/ml比(10.06±0.70) pg/ml， t＝10.284， P<0.01]分泌和Arg1(2.98±0.05， t＝21.193， P<0.01)、IRF4(1.91±0.06， t＝20.294， P<0.01)的mRNA表达高于对照组；同时CD68[(0.85±0.03)%比(2.13±0.16)%， t＝11.523， P<0.01]，iNOS[(12.80±1.99) pg/ml比28.40±2.16) pg/ml， t＝5.745， P<0.05]、IL-12[(122.37±7.49) pg/ml比(379.44±2.70) pg/ml， t＝70.493， P<0.01]分泌和TNF-α(0.34±0.02， t＝21.843， P<0.01)、IRF5(0.42±0.01， t＝46.868， P<0.01)的mRNA表达低于对照组。 结论:5-LOX表达的上调促进了M1型TAMs向促瘤性的M2表型极化。

目的:通过网络药理学挖掘和实验方法，考察麦冬五味子联用方抗动脉粥样硬化的作用，探讨其作用机制。方法:从TCMGeneDIT数据库系统中，挖掘麦冬、五味子靶点蛋白，构建麦冬-五味子多成分-蛋白网络，提取显著性差异的子网络中蛋白并进行信号通路映射。将ApoE-等位基因敲除小鼠按随机数字表法分成对照组，模型组，低、中、高剂量组和阿托伐他汀钙片组，每组6只。除对照组外，其余各组以H10540高脂饲料喂饲12周。第4周开始给药，阿托伐他汀钙片组灌胃阿托伐他汀钙片混悬液6 mg/kg，低、中、高剂量组灌胃麦冬五味子混煎液4.68、2.34、1.17 g/kg，1次/d，连续灌胃8周。采用油红染色观察动脉粥样硬化主动脉管壁病理学改变。采用Western blot法检测肝组织促分裂素原活化蛋白激酶p38(mitogen-activated protein kinases p38, p38)、ATP结合盒亚家族G成员1(ATP binding cassette subfamily G member 1, ABCG1)、Toll样受体4(toll-like receptor 4, TLR4)、热休克蛋白90α家族A成员1 (heat shock protein 90 alpha family class A member 1, HSP90AA1)、MMP-9和花生四烯酸5脂氧合酶(arachidonate 5-Lipoxygenase, ALOX5)蛋白表达，以及脑组织核因子E相关因子(nuclear factor related factor, Nrf2)和血红素加氧酶1(hemeoxygenase 1, HO-1)蛋白表达。结果:发现麦冬五味子联用方中有11个成分，与数据库中挖掘到的37个蛋白有匹配，构成48个结点、190条边界的成分-蛋白网络，提取显著性差异蛋白网络中 P<0.05的子网络1个。与模型组比较，低、中、高剂量组小鼠肝组织p-p38/p38 [(2.12±0.12)、(1.76±0.11)、(1.69±0.10)比(2.45±0.16)]、TLR4[(1.98±0.10)、(1.64±0.11)、(1.55±0.12)比(2.68±0.06)]、HSP90AA1[(1.79±0.10)、(1.66±0.09)、(1.59±0.11)比(2.06±0.07)]、MMP-9[(1.84±0.11)、(1.75±0.12)、(1.66±0.08)比(2.68±0.10)]蛋白表达降低( P<0.05)，ABCG1[(0.53±0.08)、(0.78±0.09)、(0.81±0.10)比(0.45±0.04)]、ALOX5[(0.59±0.04)、(0.67±0.09)、(0.88±0.07)比(0.47±0.02)]蛋白表达升高( P<0.05)，脑组织细胞质Nrf2[(1.62±0.12)、(1.32±0.09)、(1.14±0.06)比(2.12±0.08)]蛋白表达降低( P<0.05)，细胞核中Nrf2[(1.12±0.09)、(1.61±0.07)、(1.68±0.11)比(1.07±0.08)]蛋白表达升高( P<0.05)，HO-1[(1.16±0.09)、(1.73±0.11)、(1.82±0.08)比(1.05±0.04)]蛋白表达升高( P<0.05)。 结论:本研究采用网络药理学和分子生物学方法，阐释了麦冬五味子联用防治动脉粥样硬化的分子机制，并且在氧化应激诱导Nrf2途径上进行验证，为联用方的进一步研究提供参考。

目的:采用网络药理学和分子对接技术挖掘清肺解毒汤(QFJDT)治疗肺纤维化(PF)的作用机制.方法:通过TCMSP数据库,获取QFJDT的配方活性成分,利用Swiss Target Prediction数据平台对靶标进行预测.使用GeneCards数据库收集PF相关的靶标,并与药物作用靶标相比较,筛选出共同部分,作为药物成分作用的预测靶标.进而使用Cytoscape3.6.1绘制"药物-成分-基因-疾病"网络图、构建蛋白互作网络(PPI),并筛选出核心靶标.最后对潜在作用靶点进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,建立成分-靶点-通路网络,并对关键靶点进行核心化合物分子对接.结果:从TCMSP中获取QFJDT有效活性成分280个,靶点4571个;从GeneCards数据库获取PF相关基因5149个;通过构建"药物-成分-基因-疾病"网络获得QFJDT治疗PF的关键靶点224个;通过GO富集分析发现QFJDT治疗PF与3340个生物过程有关,包括抗氧化反应、对活性氧的反应等.KEGG富集涉及164条信号通路,表明QFJDT主要通过糖尿病并发症中的AGEs-RAGE信号通路等发挥治疗PF的作用,最后以花生四烯酸5-脂氧合酶靶蛋白与QFJDT中15个主要活性成分进行分子对接,发现橘皮素、香豆酚C、山奈酚等多个成分均表现出较好的亲和力,表明其与PF已知靶标有直接作用关系.结论:QFJDT包含多个与PF有抑制作用的药效成分,可通过多成分多靶标协同起效的作用机制发挥药效,本文可进一步为研究QFJDT治疗PF的药效物质基础及作用靶点提供参考.

目的 探讨萝卜硫素(SFN)调节花生四烯酸 5-脂氧合酶基因(arachidonic acid 5-lipoxygenase,ALOX5)/核因子kappa B(NF-κB)信号通路调节巨噬细胞糖酵解对糖尿病肾病(DN)进展的影响.方法 生物信息学分析SFN治疗DN的靶基因.使用30 mmol/L高葡萄糖(HG)处理人近端肾小管上皮细胞系(HK-2 细胞)诱导体外DN模型.将HK-2 细胞分为如下组:正常糖(NG)组、HG组、HG+SFN(3 mmol/L)组、HG+ALOX5 组、HG+SFN(3 mmol/L)+ALOX5 组、HG处理的巨噬细胞+HK-2 细胞组、HG+SFN(3 mmol/L)处理的巨噬细胞+HK-2 细胞组、HG+ALOX5 转染处理的巨噬细胞+HK-2 细胞组、HG+SFN(3 mmol/L)+ALOX5 转染处理的巨噬细胞+HK-2 细胞组.CCK-8 检测细胞活力,原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(TUNEL)法检测细胞凋亡;葡萄糖和乳酸试剂盒检测各组细胞中葡萄糖和乳酸水平;Western blot检测各组细胞中ALOX5、NF-κB以及糖酵解相关蛋白己糖激酶-2(HK2)、丙酮酸激酶M2(PKM2)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)的表达;使用链脲佐菌素(STZ)构建DN小鼠模型,DN小鼠给与SFN(0.5 mg/kg)治疗;检测小鼠各项生化指标,HE染色检测肾组织病理变化;Western blot检测小鼠肾脏巨噬细胞中糖酵解相关蛋白己糖激酶-2(HK2)、丙酮酸激酶M2(PKM2)、葡萄糖转运蛋白 1(GLUT1)的表达.结果 生物信息学分析结果显示 ALOX5 是 SFN 治疗DN的靶基因.与HG组相比,SFN处理增强HK-2 细胞活力并抑制细胞凋亡(P<0.05);同时,SFN处理抑制HG诱导的巨噬细胞糖酵解相关蛋白的表达,减弱巨噬细胞介导的HK-2 细胞损伤(P<0.05);Western blot 结果表明 SFN 抑制ALOX5 和NF-κB 的表达(P<0.05);小鼠实验结果显示,SFN治疗改善DN小鼠肾功能和肾组织病理学改变,抑制肾组织中巨噬细胞糖酵解相关蛋白的表达(P<0.05).结论 SFN通过抑制ALOX5/NF-κB信号通路抑制巨噬细胞糖酵解从而改善DN进展.

目的 探讨八宝丹(Ba Bao Dan,BBD)对阿霉素诱导的斑马鱼心脏损伤的作用.方法 建立化疗药物阿霉素(doxorubicin,Dox)诱导的斑马鱼心肌损伤模型,在体视显微镜下观察BBD在不同浓度下对心包水肿比例及心率的干预作用;采用转基因斑马鱼Tg(mpx:EGFP)原位观察BBD对心脏中性粒细胞浸润的抑制作用;观察BBD对超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的影响;Real-time qPCR检测铁死亡相关因子包括谷胱甘肽过氧化物酶 4(glutathione peroxidase 4a,gpx4a)、前列腺素内过氧化物合成酶(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,ptgs2)、花生四烯酸 5 脂氧合酶(arachidonate 5-lipoxygenase,alox5a)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员 4(acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,acsl4)的mRNA表达;采用亚铁离子荧光探针检测斑马鱼心脏亚铁离子的积累情况.结果 BBD能够减缓Dox导致的斑马鱼心包水肿和心率减慢,减少心脏中性粒细胞的浸润(P＜0.05);降低MDA的浓度(P＜0.05),同时增强SOD和CAT的活性(P＜0.05);显著抑制铁死亡,减少斑马鱼心脏亚铁离子的积累,抑制ptgs2、alox5a、acsl4 的表达(P＜0.05),同时促进gpx4a的表达(P＜0.05).结论 BBD通过抑制脂质过氧化的发生调节铁死亡从而减弱Dox诱导的斑马鱼心肌损伤,改善心功能.

目的:探讨花生四烯酸12-脂氧合酶(arachidonate 12-lipoxygenase,ALOX12)在结肠癌患者癌组织中的表达及意义.方法:回顾性收集257例结肠癌患者肿瘤及瘤旁组织,免疫组化法检测ALOX12的表达,比较肿瘤及瘤旁组织内表达差异并分析其表达与患者临床病理特征的相关性.随访并探讨ALOX12表达与患者5年总生存率的关系,并采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线.运用单因素及多因素Cox回归综合分析影响结肠癌患者5年总生存率的因素.结果:与瘤旁组织相比,ALOX12在肿瘤中阳性表达率更高(63.8％vs.33.1％),差异具有统计学意义(P＜0.001).ALOX12表达与患者年龄、性别l、肿瘤部位均无明显相关性(P＞0.05),而与TNM分期、淋巴结转移有显著相关性(P＜0.05).ALOX12高表达患者的5年总生存率明显低于低表达患者(P＜0.001).此外,单因素和多因素Cox回归分析结果显示年龄、TNM分期、淋巴结转移、ALOX12表达是影响患者5年总生存率的独立影响因素(P＜0.05).结论:ALOX12高表达与结肠癌TNM分期、淋巴结转移相关,可作为预测患者病情及预后的潜在指标.

目的 观察雾水葛提取物对人泪腺上皮细胞活力和炎症的影响,鉴定活性单体并探索药理机制.方法 选取宁波市眼科医院收治的一位25岁女性泪腺炎患者,分离培养其人泪腺上皮细胞,免疫荧光法检测细胞标志物表达以鉴定细胞,不同剂量脂多糖(LPS)诱导细胞炎症反应,四甲基偶氮唑盐比色(MTT)检测细胞活力筛选LPS最佳剂量.使用水、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分别提取雾水葛活性成分,MTT法检测不同溶剂和剂量雾水葛提取物对人泪腺上皮细胞活力的影响.通过电喷雾质谱和核磁共振谱图确定氯仿提取物中活性成分的结构,将鉴定得到的5种化合物(LF1～5)进行药物靶标的预测,Western Blot法检测5种化合物的雾水葛提取物对人泪腺上皮细胞炎症相关蛋白表达的影响.结果 (1)细胞鉴定:角蛋白(CK)14、CK7、E-钙黏蛋白(E-cadherin)等阳性表达确定得到的是人泪腺上皮细胞和少量肌上皮细胞.(2)剂量筛选:处理48 h和72 h后,当LPS浓度为80 mg/L时,细胞活力开始低于对照组,差异有统计学意义(t48 h=6.827、t72 h=6.222,均P=0.002),故LPS浓度80 mg/L、处理时间为24 h为最佳诱导方法 .高浓度下,不同雾水葛提取物都具有对细胞活力的抑制作用,2.5、5、10、20 μg/mL为提取物的适宜浓度.(3)雾水葛氯仿提取物中物质鉴定:LF-1为(-)-Epicatechin,LF-2为8-(2-Pyrrolidinone-5-yl)-(-)-epicatechin,LF-4为3'-Demethylicariside E3,LF-3、LF-5为首次发现.(4)药物靶标筛选:5种氯仿提取物中,一共有5个共同靶点,分别为花生四烯酸5-氧化酶活化蛋白(ALOX5)、白细胞介素(IL)-2、IL-6、核因子κB1(NF-κB1)和血管内皮生长因子A(VEGFA).(5)炎症相关蛋白:5种雾水葛的氯仿提取物都能不同程度地抑制炎症相关蛋白的水平,其中以LF-3的抑制效果最佳.结论 雾水葛提取物能够抑制LPS诱导的人泪腺上皮细胞的炎症反应,其中以氯仿提取物中的LF-3成分的药理活性最佳.

目的 探讨铁死亡在交通相关PM2.5加重哮喘小鼠气道炎症中的作用及其机制.方法 50只BALB/c小鼠随机分为5组:生理盐水(NS)组、哮喘(卵清蛋白OVA)组、OVA联合交通源PM2.5低、中、高暴露(分别为1.8、3.6、7.2 mg/kg·bw)组.使用ELISA方法检测肺组织中几-6和TNF-α的水平;比色法评估肺组织匀浆上清中的还原性谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)以及Fe2+的水平;用western blot法检测前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和肿瘤蛋白p53(p53)、磷酸化p53(p-p53)、亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶1(SAT1)、花生四烯酸15-脂氧合酶(ALOX15)的蛋白表达,并通过qRT-PCR法检测以上除p-p53外其他指标的mRNA表达.采用单因素方差分析比较多组数据,用Tukey检验进一步多重比较.结果 PM2.5刺激明显增加了哮喘小鼠肺组织中IL-6和TNF-α水平,尤其在PM2.4高暴露组(FIL-6=17.910,P＜0.001;FTNF-α=5.414,P＜0.05).所有PM2.5暴露组的GSH均下降,其中PM2.5高暴露组的GSH降低最显著(FGSH=13.560,P＜0.001).PM2.5中、高暴露组 MDA 和 Fe2+显著高于 OVA 组(FMDA=55.230,P＜0.001;F铁=17.660,P＜0.001).PM2.5暴露后PTGS2、ACSL4、ALOX15的蛋白和mRNA表达增高,而GPX4的表达降低.p53、SAT1和ALOX15的蛋白及mRNA表达水平随PM2.5剂量增加而呈现明显的剂量效应,p-p53与p53的蛋白表达趋势一致.结论 交通相关PM2.5可能通过p53/SAT1/ALOX15通路诱导哮喘小鼠肺部铁死亡并加重哮喘炎症.