目的 探讨儿童自身免疫性多内分泌腺病综合征Ⅰ型(APS-Ⅰ)临床特征及AIRE基因变异.方法 回顾分析河南省儿童医院2019年5—10月收治的2例APS-Ⅰ病儿临床资料,并复习相关文献,对已报道中国儿童APS-Ⅰ临床表型及基因型进行总结.结果 2例男性APS-Ⅰ病儿,病例1,12岁,3岁慢性念珠菌感染,12岁重度贫血;病例2,15岁,7岁甲状旁腺功能减退,8岁慢性念珠菌感染,15岁肾上腺皮质功能减退症和重度贫血.高通量测序提示AIRE基因变异,病例1为c.44G>A(p.R15H)和c.1036C>T(p.Q346*)杂合突变,病例2为c.38T>C(p.L13P)和c.1400+2T>C杂合突变,其中c.1036C>T(p.Q346*)和c.1400+2T>C为HGMD及ClinVar数据库未报道过的变异位点,经美国人类遗传学和基因组学医学学会(ACMG)指南评估分别为疑似致病及致病变异.2例病儿给予药物治疗后临床症状缓解.分别检索PubMed、万方和CNKI数据库,共检索到22例确诊为APS-Ⅰ中国病儿,包括本研究2例,共24例,其中15例基因诊断,有14种基因变异,无热点变异,9例临床诊断.结论 新的变异位点扩大了AIRE基因变异谱,APS-Ⅰ临床表现多样,且出现时间跨度大,相关抗体及AIRE基因检测有助于疾病早期诊断,多学科诊疗提供个体化的治疗策略.

本文报道一例中年起病的女性患者，先后出现肾上腺皮质功能减退症、甲状旁腺功能减退症和亚临床甲状腺功能减退症，在内分泌科疑诊为自身免疫性多内分泌腺病1型（APS1），给予对症治疗。同时伴有皮肤多发血管瘤，进行性加重的多浆膜腔积液、肝脾大、周围神经病变，影像学提示肋骨、椎体骨质密度增高，后查外周血血管内皮生长因子（VEGF）水平升高，AIRE基因阴性，在血液科诊断为POEMS综合征。应用全身化疗后多系统损害得到缓解，肾上腺皮质功能和甲状旁腺功能有所恢复，对症治疗药物可减量或停用。本例提示中年起病的类APS1表现需考虑到其他疾病的可能，POEMS综合征患者出现的内分泌系统损害需长期随访，有病情缓解药物减量的可能。

目的:开发一种基于腺苷到肌苷的脱氨基(A-to-I RNA编辑,ATIRE)的预后模型用于改善乳腺癌的个体化治疗.方法:首先使用单变量Cox回归分析来获得训练集中与总生存(OS)相关的ATIRE位点,然后进行最小绝对收缩和选择算子(LASSO)回归算法来确定最佳预后ATIRE位点,进行多因素Cox比例风险回归分析建立风险模型,纳入ATIRE风险评分和临床病理学特征变量构建预后列线图,绘制校准曲线并计算一致性指数以评价模型的预测概率与实际的一致性,通过决策曲线分析(DCA)评价该模型的临床收益价值.结果:确定18个预后位点用来构建预后模型,并生成ATIRE风险评分.高风险评分患者的中位生存时间显著缩短,列线图在预测乳腺癌的OS概率方面表现良好.校准曲线表现出优异的一致性,决策曲线显示其具有更高的净收益.结论:分析ATIRE事件在预测乳腺癌生存中的作用,基于AITRE的预后模型可以帮助临床医师更好进行临床决策.

目的 观察伴或不伴冻结步态的早中期帕金森病患者运动功能和生活质量的差异,分析冻结步态与患者运动功能和生活质量的相关性.方法 2021年4月至2022年12月,在北京协和医学院门诊选取60～80岁早中期帕金森病患者132例,根据是否并发冻结步态分为冻结步态组(n = 43)和非冻结步态组(n = 89).采用冻结步态问卷(FOGQ)、Berg平衡量表(BBS)、计时起立-行走测试(TUGT)、5次起坐试验(FTSST)、等速肌力测试、统一帕金森病评分量表(UPDRS)和39项帕金森病生活质量问卷(PDQ-39)进行评定.结果 冻结步态组BBS评分小于非冻结步态组(Z =-2.354,P<0.05),TUGT、FTSST、UPDRS第二和第三部分评分以及帕金森病生活质量指数(PDSI)明显大于非冻结步态组(Z>3.074,t = 2.748,P<0.01).FOGQ评分与BBS、UPDRS第二和第三部分评分,以及PDSI显著相关(|r|>0.392,P<0.001).结论 冻结步态的发生影响早中期帕金森病患者的运动功能、日常生活活动能力和生活质量,增加跌倒风险.

目的 研究益气解毒复方对实验性自身免疫性重症肌无力(Experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG)大鼠胸腺中自身免疫调节因子(Aire)及转录因子维甲酸相关核孤儿受体(ROR-γt)/叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)相关炎症因子表达的影响.方法 通过免疫诱导注射鼠源性AchR-α亚基97-116肽段复制EAMG模型,分为正常组、模型组、阳性对照组(强的松)及益气解毒复方高、中、低剂量组,每组10只.观察大鼠行为学及Lennon评分,检测血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)水平,Western blot检测EAMG大鼠胸腺组织中Aire和Foxp3的表达,RT-PCR检测各组大鼠胸腺组织中RORγt的表达情况.结果 与治疗前相比,各药物组Lennon分级评分显著降低;与强的松组相比,益气解毒复方各剂量组Lennon评分无明显差异(P>0.05).RT-PCR结果,模型组胸腺内RORγt mRNA相对表达量明显高于正常组(P<0.05),各药物组胸腺中RORγt mRNA相对表达量明显低于模型组(P<0.05).Western blot结果,与正常组比较,模型组Aire和Foxp3蛋白的表达量均显著降低(P<0.05);与模型组比较,各药物组大鼠胸腺中Aire和Foxp3蛋白的表达量均显著升高(P<0.01).ELISA结果,模型组大鼠血清IL-6含量明显高于正常组(P<0.01),而TGF-β1含量明显低于正常组(P<0.01);给药后,各药物组IL-6含量明显降低,TGF-β1含量明显升高(P<0.01).结论 益气解毒复方能改善EAMG大鼠肌无力症状,其作用机制可能通过上调Aire蛋白表达,调节免疫炎症反应,影响Th17/Treg分化,从而调控ROR-γt/Foxp3免疫平衡发挥调节自身免疫反应的作用,可能是其治疗MG的作用机制之一.

背景:自身免疫调节因子(autoimmune regulator gene,Aire)及Wnt信号通路在小鼠胚胎干细胞多能性的维持及分化中都发挥着重要作用,但Wnt信号与Aire是否参与了小鼠胚胎干细胞向胸腺上皮祖细胞的分化尚未可知.目的:探讨Wnt信号通路和自身免疫调节因子与胚胎干细胞分化的关系.方法:采用两步分化方法定向诱导小鼠胚胎干细胞分化为内胚层再分化为胸腺上皮祖细胞,然后用Aire shRNA慢病毒感染小鼠胚胎干细胞,嘌呤霉素筛选单克隆稳定株,再采用两步分化方法进行诱导分化,分别于定向诱导分化第0,3,10天,采用细胞免疫荧光、流式细胞术、Western blot、Real-Time qPCR检测相关基因及蛋白的表达变化.结果与结论:①定向诱导分化第0天,免疫荧光染色显示SSEA1、OCT4表达呈阳性;②定向诱导分化第3天,免疫荧光染色显示SOX17、FOXA2表达呈双阳性;③定向诱导分化第10天,流式细胞术结果显示EPCAM1、K5、K8表达呈阳性;④与未分化的小鼠胚胎干细胞相比,诱导分化的胸腺上皮祖细胞中Wnt7a、β-catenin、Gsk-3β蛋白表达升高,Aire蛋白表达降低;⑤与未分化的小鼠胚胎干细胞相比,诱导分化的胸腺上皮祖细胞中Wnt7a、β-catenin、Gsk-3β及Aire mRNA表达升高;⑥与正常培养的小鼠胚胎干细胞及其最终分化的胸腺上皮祖细胞相比,敲低Aire基因的小鼠胚胎干细胞及其最终分化的胸腺上皮祖细胞中Wnt7a、β-catenin、Gsk-3β蛋白表达水平降低.综上所述,Wnt信号通路和Aire共同参与了小鼠胚胎干细胞定向诱导分化为小鼠胸腺上皮祖细胞的过程.

目的 分析自身免疫性调节因子(AIRE)在重症肌无力(MG)患者外周血中的表达及其影响因素.方法 收集2016年1月～2017年1月空军军医大学唐都医院收治的MG患者临床资料及外周血标本,分为全身型(GMG)组(16例)、眼肌型(OMG)组(14例)、对照组(10例).采用流式细胞术分析各组AIRE因子、Tfr细胞及Tfh细胞比值.结果 GMG组AIRE因子阳性表达较OMG组和对照组下降(P＜ 0.001),而OMG组和对照组差异无统计学意义(P＞0.05).AIRE因子阳性表达与Tfr/Tfh比值呈正相关(r=0.605,P＜ 0.001),而与QMG评分及临床绝对评分均呈负相关(r=-0.622,P＜0.001;r=-0.513,P=0.004).结论 AIRE可能参与了MG的发病过程,低水平AIRE在诱导MG发病的过程中可能起关键作用.

目的:观察重症肌无力(MG)患者免疫治疗前后自身免疫性调节因子(AIRE)及Tfr/Tfh比值变化,分析其与MG严重程度的相关性.方法:收集16例全身型MG(GMG)患者、14例眼肌型MG(OMG)患者、10例健康体检者(对照组)的外周血标本,并收集10例接受免疫抑制治疗1个月并获得随访的GMG患者(治疗组)外周血标本;采用流式细胞术检测AIRE阳性细胞、Tfr细胞及Tfh细胞数量,计算Tfr/Tfh比值;观察治疗组治疗前后AIRE及Tfr/Tfh比值变化,分析AIRE阳性表达率、Tfr/Tfh比值与MG严重程度的相关性.结果:治疗组GMG患者治疗后AIRE阳性表达率及Tfr/Tfh比值较治疗前均有显著提高(P＜0.01),治疗组AIRE阳性表达率与OMG组及对照组比较差异均无统计学意义(P=0.164,P=0.862);治疗组Tfr/Tfh比值低于对照组(P＜0.001),而与OMG组比较差异无统计学意义(P=0.685);GMG患者AIRE阳性表达率及Tfr/Tfh比值与MG定量评分(QMG)评分及临床绝对评分均呈负相关(P＜0.05).结论:AIRE阳性表达率及Tfr/Tfh比值与MG严重程度呈负相关,免疫治疗可提高AIRE及Tfr/Tfh比值.

目的 探索γ射线照射诱导胸腺损伤后胸腺内IL-22表达水平的变化趋势,并研究IL-22在胸腺损伤后T细胞免疫重建中的作用.方法 建立非致死剂量γ射线照射诱导的小鼠胸腺损伤模型,分别设置正常对照组和全身照射(TBI)组,ELISA法检测小鼠胸腺及血浆中IL-22的含量;分别给予TBI组小鼠PBS或重组小鼠IL-22腹腔注射处理,设为TBI+PBS组和TBI+IL-22组,计数胸腺内总细胞和外周血白细胞含量,同时使用流式细胞术分析胸腺上皮细胞(thymic epithelial cells,TEC)、各阶段胸腺细胞以及外周血T细胞的含量,实时定量PCR分析胸腺中与TEC功能相关的基因Foxn1、Ccl25、Aire和Dll4的mRNA表达水平.结果 ①照射后小鼠胸腺内IL-22表达水平高于未经照射处理的正常对照小鼠(P值均＜ 0.05);②给予TBI组小鼠IL-22腹腔注射后,TBI+IL-22组小鼠胸腺内IL-22含量高于TBI+PBS组(P值均＜0.05);③照射后第14天,TBI+IL-22组胸腺内Foxn1、Ccl25、Aire和Dll4mRNA表达水平均高于TBI+PBS组(P值均＜0.05),同时,TBI+IL-22组胸腺总细胞计数[(5.93±3.19)×106/ml对(1.42±0.46)×106/ml,t=3.128,P=0.033]和外周白细胞计数[(3.08±0.94)×106/ml对(1.43±0.30)×106/ml,t=3.730,P=0.015]均高于TBI+PBS组.流式细胞术分析示,照射后第14天TBI+IL-22组小鼠胸腺内TEC和各胸腺细胞亚群含量均高TBI+PBS组(P值均＜0.05),照射后第7天和14天TBI+IL-22组外周血T细胞含量均高于TBI+PBS组(P值均＜0.05).结论 γ射线照射处理可导致小鼠胸腺内IL-22的含量升高,注射外源性IL-22可增加胸腺内IL-22含量.输注外源性IL-22可促进受损胸腺内TEC功能的修复,并增加各胸腺细胞亚群以及外周血中T细胞的数量.

自身免疫性多发性内分泌腺病综合征(APS)是免疫耐受机制破坏导致多个内分泌腺体功能受损的一组临床综合征.根据遗传学特征等差异,APS被分为三类:APS-1型,APS-2型以及X连锁多内分泌腺功能障碍IPEX.APS-1型是由于自身免疫调节基因(AIRE)突变导致的常染色体单基因遗传病,APS-2型是一组多基因(HLA及非HLA基因)遗传相关器官特异性自身免疫性疾病,而IPEX则与FOXP3基因突变相关.APS患者相关自身抗体的出现往往预示器官功能的损伤,诊断时测定自身抗体较基因检测具有更高的性价比.及早精确诊断并采用免疫调节治疗有可能阻止器官发生不可逆免疫损伤.