目的 探究畅舟通便方对功能性便秘(functional constipation,FC)合并抑郁大鼠的干预机制.方法 采用盐酸小檗碱法联合慢性不可预知温和刺激建立功能性便秘合并抑郁样行为大鼠模型,随机分为空白组、模型组、乳果糖组及畅舟通便方高、中、低剂量组,干预 5 周.分别于干预前、干预后计算粪便含水量;干预结束后计算小肠推进率;分别于干预前、干预后采用强迫游泳实验、糖水偏好实验评估大鼠的抑郁样行为水平;HE染色观察结肠黏膜形态;尼氏染色观察海马CA1、DG区锥体细胞形态和数量;Western Blot法检测各组大鼠结肠组织的TRP离子通道香草香素 4 型(TRPV4)及海马脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体(TrkB)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)蛋白相对表达量.结果 与空白组比较,模型组大鼠的粪便含水率明显减少(P＜0.001),小肠推进率明显降低(P＜0.01),糖水偏好指数明显下降(P＜0.001),海马CA1 区、DG区的锥体细胞数量明显减少(P＜0.001),结肠TRPV4 以及海马BDNF、TrkB、MAPK、CREB蛋白含量均明显下降(均P＜0.001).与模型组比较,畅舟通便方高、中、低剂量组及乳果糖组大鼠的粪便含水率均明显增高(P＜0.001,P＜0.01);畅舟通便方高、低剂量组及乳果糖组的小肠推进率明显增高(P＜0.01,P＜0.05);畅舟通便方高、中、低剂量组及乳果糖组的糖水偏好指数明显升高(P＜0.01,P＜0.05);结肠病理无异常;畅舟通便方高、中、低剂量组及乳果糖组的海马CA1、DG区锥体细胞数目明显增多(P＜0.01,P＜0.001);畅舟通便方高、中、低剂量组及乳果糖组的结肠TRPV4 含量明显增加(P＜0.001),海马BDNF、TrkB、MAPK、CREB蛋白含量均明显增加(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).结论 畅舟通便方干预后可明显提高功能性便秘合并抑郁模型大鼠结肠的TRPV4 含量,增加粪便含水量,促进肠蠕动,可改善便秘;同时TRPV4 可激活BDNF/TrkB/MAPK通路,引发下游CREB的增高,从而改善神经可塑性,减轻部分抑郁样行为.

目的 研究红花黄色素(safflower yellow,SY)对氢溴酸东莨菪碱(scopolamine hydrobromide,SCOP)诱导的记忆障碍模型小鼠学习记忆的作用.方法 6月龄C57BL/6J小鼠随机分为 Control 组、Model 组、SY-H 组、SY-M 组、SY-L 组、石杉碱甲(huperzine-A)组,每组12只.采用SCOP建立记忆障碍模型,通过行为学实验评价记忆障碍模型小鼠的空间学习记忆和认知能力,ELISA试剂盒测定小鼠皮层胆碱能神经系统功能,尼氏染色观察脑组织病理变化情况,Western blot检测各组小鼠脑组织突触可塑性及BDNF/TrkB/CREB通路相关蛋白表达.结果 与Model组相比,各给药组小鼠学习记忆能力提高;海马和皮层神经元排列整齐,细胞形态趋于完整,正常神经元数量升高;皮层胆碱能神经系统功能显著改善,突触可塑性相关蛋白表达量升高,脑组织BDNF/TrkB/CREB信号通路激活.结论 SY能显著改善SCOP诱导的认知障碍小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能是通过改善胆碱能神经系统功能,激活BDNF/TrkB/CREB信号通路,调节突触可塑性,改善神经元损伤,进而发挥神经保护作用.

近年来，中医药治疗AD得到广泛关注。中药调控AD的信号通路研究主要集中在脑源性神经营养因子（BDNF）/酪氨酸激酶B（TrkB）通路、PI3K/Akt通路、MAPK通路、蛋白激酶A（PKA）/cAMP应答元件结合蛋白（CREB）通路、NF-κB通路及Wnt通路这6条通路。

目的:评价孕中期大鼠丙泊酚麻醉下手术对子代认知功能及海马组蛋白去乙酰化酶2 (HDAC2)-环腺苷酸效应元件结合蛋白(CREB)-含2B亚基的N-甲基-D-天冬氨酸受体(NR2B)信号通路的影响。方法:孕14 d健康SD大鼠30只，采用随机数字表法分为3组( n＝10)：丙泊酚组(P组)、丙泊酚手术组(S组)和对照组(C组)。S组经尾静脉注射20 mg/kg丙泊酚，继之以20 mg·kg -1·h -1速率连续输注维持麻醉4 h并行剖腹探查术。P组除不行剖腹探查术外，余处理同S组；C组输注等量生理盐水。子鼠出生后30 d，采用Morris水迷宫实验评价子代大鼠学习记忆能力。采用Western blot法检测子代海马组蛋白去乙酰化酶2 (HDAC2)、磷酸化(p-)CREB、NR2B、脑源性神经营养因子(BDNF)和p-酪氨酸激酶B (p-TrkB)表达，TUNEL染色法检测海马神经元凋亡水平。 结果:与C组比较，P组和S组逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，第二象限停留时间缩短，海马HDAC2表达上调，p-CREB、NR2B、BDNF和p-TrkB表达下调，神经元凋亡率增加( P<0.05)；与P组比较，S组逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，第二象限停留时间缩短，海马HDAC2表达上调，p-CREB、NR2B、BDNF和p-TrkB表达下调，神经元凋亡率增加( P<0.05)。 结论:孕中期大鼠丙泊酚麻醉下手术可降低子代认知功能，其机制与调控HDAC2-CREB-NR2B信号通路，促进海马神经元凋亡有关。

目的:观察解郁止痛方对偏头痛抑郁共病模型大鼠行为学的影响，从调控脑源性神经营养因子（BDNF）/ERK1/2/环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）信号通路探讨其作用机制。方法:将36只SD雄性大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、尼莫地平组和中药低、中、高剂量组。采用间歇皮下注射硝酸甘油（10 mg/kg）与慢性不可预知性温和刺激复制偏头痛抑郁共病模型。各组大鼠分别予相应药物干预21 d，1次/d。记录造模前及造模后第10、21天大鼠体重，检测机械痛阈值，采用旷场实验、强迫游泳实验、新奇抑制摄食实验评价大鼠行为学，采用Western blot法检测大鼠海马组织中BDNF、酪氨酸激酶受体B（TrkB）、p-ERK1/2、p-CREB蛋白表达。结果:造模第10、21天，与模型组同时点比较，中药各剂量组大鼠体重、旷场实验水平及垂直运动得分升高（ P<0.05），新奇抑制摄食潜伏时间、强迫游泳不动时间缩短（ P<0.05）；第7、14、21天，与模型组同时点比较，中药各剂量组大鼠机械痛阈值升高（ P<0.05）；中药各剂量组海马组织中p-ERK1/2蛋白表达升高（ P<0.05），中药低、中剂量组BDNF、TrkB、p-CERB蛋白表达升高（ P<0.05）。 结论:解郁止痛方可改善偏头痛抑郁共病大鼠的症状，其作用机制可能通过影响BDNF/ERK1/2/CREB信号通路中蛋白的表达，发挥镇痛抗抑郁作用。

目的:研究川金解郁汤对慢性不可预知性应激(CUMS)诱导的抑郁大鼠模型的神经保护作用。方法:48只成年雄性健康SD大鼠，随机选取12只为对照组，其余大鼠建立CUMS抑郁模型。将建模成功后的大鼠随机分成3组：CUMS组、氟西汀组和川金解郁汤组；分别给予0.9%氯化钠溶液氟西汀、川金解郁汤干预4周。造模后、干预后通过旷场实验、糖水偏爱实验，测定大鼠抑郁水平；干预后采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)mRNA在海马齿状回的表达量，免疫荧光检测BDNF与神经元核心抗原(NeuN)的表达量，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平。结果:造模后，CUMS组、氟西汀组、川金解郁汤组的糖水消耗、糖水偏爱、垂直运动及水平运动结果明显低于对照组(均 P<0.01)；干预后，CUMS组以上指标低于对照组(均 P<0.01)，氟西汀组与川金解郁汤组以上指标均高于CUMS组( P<0.01或 P<0.05)，但低于对照组( P<0.01或 P<0.05)。qRT-PCR结果显示，CUMS组、氟西汀组、川金解郁汤组的BDNF、TrkB、CREB mRNA表达量均明显低于对照组(均 P<0.01)；氟西汀组与川金解郁汤组的上述指标均显著高于CUMS组(均 P<0.01)。免疫荧光结果显示，CUMS组的BDNF、NeuN表达量均显著低于对照组(均 P<0.01)；氟西汀组、川金解郁汤组以上指标均高于CUMS组( P<0.01或 P<0.05)，且川金解郁汤组所有指标及氟西汀组NeuN表达量低于对照组( P<0.01或 P<0.05)。Western blot结果显示，CUMS组的GFAP蛋白表达低于对照组( P<0.01)；氟西汀组GFAP蛋白表达高于CUMS组( P<0.05)。 结论:川金解郁汤可改善大鼠抑郁行为学指标，提高海马齿状回BDNF、TrkB、CREB及NeuN表达，提示川金解郁汤可能通过BDNF/TrkB/CREB通路发挥神经保护作用。

目的:探讨金郁欢汤对抑郁状态-痰瘀互结小鼠的作用机制及BDNF/TrkB/CREB信号的影响.方法:选择成年雄性C57BU6J小鼠30只,根据随机数字表法分为空白组、模型组、氟西汀组、低、中、高剂量金郁欢汤组,每组5只,除空白组外其余组建立抑郁状态-痰瘀互结小鼠模型.造模完成后,氟西汀组灌胃给予3mg/kg氟西汀悬浮灌胃,金郁欢汤低、中、高剂量组分别给予0.2g/kg、0.5g/kg、0.8g/kg金郁欢汤灌胃,对照组、模型组均给予等体积的生理盐水灌胃,1次/d,连续灌胃3周.对比6组小鼠造模前、造模后、给药后的体质量、糖水偏嗜率、水平得分、垂直得分、实验不动时间、实验漂浮时间、海马组织中的BD-NF/TrkB/CREB mRNA 及蛋白表达水平.结果:造模后,空白组的体质量、糖水偏嗜率、水平得分、垂直得分、海马组织中的BD-NF/TrkB/CREB mRNA及蛋白表达水平明显较其余5组低,实验不动、漂浮时间较其余5组高(P均＜0.05).给药后,空白组、氟西汀组、中、高剂量金郁欢汤组体质量、糖水偏嗜率明显较模型组、低剂量组高,低剂量组体质量明显较模型组高(P均＜0.05);空白组的水平、垂直得分明显较其余5组高,氟西汀组、中、高剂量金郁欢汤组以上指标明显较模型组、低剂量组高,低剂量组明显较模型组高(P均＜0.05);空白组的实验不动、漂浮时间明显较其余5组低,氟西汀组、中、高剂量金郁欢汤组实验不动、漂浮时间显较模型组、低剂量组低,低剂量组明显较模型组低(P均＜0.05);BDNF/TrkB mRNA水平、BDNF、TrkB蛋白表达水平:氟西汀组＞高剂量组＞中剂量组＞低剂量组＞空白组＞模型组;其中氟西汀组、高剂量组、中剂量组三组间无差异(P＞0.05),其余组间均有差异(P＜0.05);CREB mRNA水平、BDNF蛋白表达:空白组＞氟西汀组＞高剂量组＞中剂量组＞低剂量组＞模型组;其中空白组、氟西汀组、高剂量组、中剂量组四组间无差异(P＞0.05),其余组间均有差异(P＜0.05).结论:0.5g/kg金郁欢汤可明显改善抑郁状态-痰瘀互结小鼠的抑郁行为,增强海马神经元的修复、再生,可能与其可上调小鼠海马组织的BDNF/TrkB/CREB信号通路相关.

目的:观察电针联合五子衍宗丸对帕金森病小鼠黑质脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)/环磷酸腺苷反应原件结合蛋白(CREB)通路的影响.方法:将108只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、电针组、五子衍宗丸组、联合观察组、抑制剂组、电针+抑制剂组、五子衍宗丸+抑制剂组、联合+抑制剂组9组,每组12只.除正常组、抑制剂组外,其余组给予1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)腹腔注射造模,第1天15 mg/kg,第2天20 mg/kg,第3～7天30 mg/kg,均0.2 mL/次,1次/d.自造模第1天进行干预,电针观察组别给予电针干预,五子衍宗丸观察组别早晚给予五子衍宗丸药液,抑制剂注射组别腹腔注射TrkB抑制剂ANA-12,连续干预14 d.干预结束后对比各组步态实验、旷场实验、爬杆实验结果,小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)及BDNF、TrkB、CREB表达.结果:与正常组比较,模型组出现明显的运动障碍,黑质TH平均荧光强度及TH、BDNF、TrkB、CREB蛋白表达低(P＜0.05);与模型组比较,电针组、五子衍宗丸组、联合观察组运动障碍均得到改善,黑质TH平均荧光强度及TH、BDNF、TrkB、CREB蛋白表达高(P＜0.05);与电针组、五子衍宗丸组比较,联合观察组的运动障碍得到改善,其他指标表达增高(P＜0.05).结论:电针联合五子衍宗丸可能通过调控BDNF/TrkB/CREB信号通路来改善PD小鼠的运动障碍,保护多巴胺能神经元.

目的:采用网络药理学、分子对接和动物实验探讨舒心安神汤治疗抑郁症的作用及机制.方法:通过TCMSP、Swiss Target Prediction、Uniprot数据库筛选舒心安神汤中的活性成分及作用靶点,采用Gene Cards、OMIM、Drug Bank数据库获得抑郁症疾病靶点;用Cytoscape软件构建可视化网络,利用Venny 2.1软件筛选、收集药物与疾病的共有靶点.将筛选出的药物和疾病的共同靶点输入String数据库,获得蛋白质相互作用(PPI)网络图,进一步筛选出核心靶点.于DAVID数据库中对交集基因进行GO富集和KEGG通路分析,预测其富集的信号通路并进行可视化展示,将核心靶点与相关活性成分在CB-Dock在线平台进行分子对接验证,并采用LC-MS对舒心安神汤主要化学成分进行分析鉴定.构建皮质酮诱导抑郁小鼠模型,利用行为学实验、尼氏染色、Western blotting法进行舒心安神汤药效评估并对脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体B(TRKB)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)反映突触可塑性相关蛋白的表达进行考察.结果:网络药理学预测得到舒心安神汤治疗抑郁症的潜在活性成分141个,主要为槲皮素、β-谷甾醇、山柰酚、芍药苷、莫诺苷、斯皮诺素及姜辣素等活性成分,关键靶点包括IL6、ESR1、AKT1和EGFR等,GO富集分析结果发现抑郁反应与蛋白磷酸化调控、细胞外基质激酶结合及蛋白激酶活性等相关.KEGG通路富集结果显示,舒心安神汤治疗抑郁可能通过调节PI3K-AKT、HIF-1及MAPK等信号通路发挥作用.分子对接发现芍药苷、莫诺苷、斯皮诺素、姜辣素与ESR、AKT1和BDNF结合能力较强.LC-MS鉴定出舒心安神汤中含有15种高响应化学成分,与网络药理学核心成分预测基本一致.动物实验结果表明,与模型对照组比较,舒心安神汤20.5 g/kg组的小鼠体质量、蔗糖偏好明显增加,强迫游泳时间和新奇抑制摄食试验潜伏期明显减少(P＜0.05);尼氏染色显示模型对照组小鼠海马CA3区神经元排列欠规则,细胞周围间隙增宽,胞质内尼氏小体明显减少,而舒心安神汤20.5 g/kg组小鼠海马CA3区神经元排列较为规则,细胞周围间隙缩短,尼氏体较为丰富;舒心安神汤20.5 g/kg组能明显上调小鼠海马组织TRKb、p-AKT、BDNF、CREB的蛋白表达(P＜0.05).结论:舒心安神汤可能通过其含有的槲皮素、β-谷甾醇、芍药苷、姜辣素和斯皮诺素等主要成分作用于ESR1、AKT1等靶基因,并影响BDNF/TRKB信号通路及下游相关蛋白等,发挥改善抑郁症的作用,其机制可能与上调BDNF、TRKB、p-AKT及CREB蛋白表达,改善海马神经元可塑性有关.

目的:探究K252a的作用下,"通督解郁"针刺在慢性温和不可预知应激(CUMS)模型大鼠前额叶皮质BDNF/TrkB/CREB通路的作用机理.方法:64只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组、针刺组、模型+DMSO组、模型+K252a组、氟西汀+K252a组和针刺+K252a组,每组8只.造模在CUMS结合孤养法外,针刺组、针刺+K252a组和氟西汀组、氟西汀+K252a组在造模前30 min分别施行手针百会、神庭,电针内关、太冲治疗(频率2 Hz,连续波,电流1 mA,留针30 min)和灌胃治疗;模型+DMSO组和模型+K252a组、氟西汀+K252a组及针刺+K252a组分别在造模前1 h侧脑室注射DMSO溶液和K252a,共21 d.行为学采用体质量、糖水偏好实验以及强迫游泳实验进行评价;免疫组化检测大鼠前额叶组织BDNF、TrkB和CREB阳性细胞平均光密度值IOD;Western blot及PCR法检测大鼠前额叶皮质中相关蛋白及mRNA表达.统计学分析采用LSD检验和非参数检验.结果:与空白组比较,模型组大鼠的体质量差、糖水偏好指数SPI和BDNF、TrkB、CREB的阳性细胞IOD、蛋白及mRNA表达均明显下调,差异具有统计学意义(P＜0.01),强迫游泳的不动时间IT明显上调,差异具有统计学意义(P＜0.01).与模型组比较,针刺组、氟西汀组大鼠的体质量差、SPI和BDNF、TrkB、CREB的阳性细胞IOD、蛋白及mRNA表达均明显上调,差异具有统计学意义(P＜0.01),IT下调,差异具有统计学意义(P＜0.01),模型+K252a组大鼠的体质量差、SPI和BDNF、TrkB、CREB的阳性细胞IOD、蛋白及mRNA表达减少,差异具有统计学意义(P＜0.05),IT增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).与针刺组比较,针刺+K252a组大鼠的体质量差、SPI和BDNF、TrkB、CREB的阳性细胞IOD、蛋白及mRNA表达均减少,差异具有统计学意义(P＜0.05),IT增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:"通督解郁"针刺对CUMS模型大鼠的抑郁行为有明显改善作用,其机制可能上调了前额叶皮质上的BDNF/TrkB/CREB通路,从而起到治疗抑郁症的作用.