目的 探讨CT定量参数在四肢骨折延迟愈合中表达及诊断价值.方法 前瞻性选取我院收治的300例四肢骨折患者(2020年5月至2023年5月),统计术后16周骨折延迟愈合情况,并根据骨折延迟愈合情况分组,比较2组CT定量参数、细胞间隙连接蛋白43(Cx43)、骨形成蛋白2(BMP-2),Pearson相关系数分析两者间相关性,绘制受试者工作特征曲线(ROC)及曲线下面积(AUC)分析预测效能.结果 (1)术后16周,300例四肢骨折患者共8例失访,42例延迟愈合,发生率为14.38％;(2)术后2周、6周、8周,延迟组BMD、BSICSA、BSICSMI及血清Cx43、BMP-2表达均低于正常组(P＜0.05);(3)Pearson相关系数显示,术后8周,四肢骨折延迟愈合患者BMD、BSICSA、BSICSMI与BMP-2、Cx43呈显著正相关(P＜0.05);(4)术后2周、6周、8周,BSICSA+BSICSMI+BMD预测四肢骨折延迟愈合效能(AUC:0.914、0.926、0.937)近似于BMP+Cx43(AUC:0.898、0.916、0.925),其中术后8周三者联合预测效能最大.结论 CT定量参数(BSICSA、BMD、BSICSMI)在四肢骨折延迟愈合患者中呈低表达,三者联合预测效能高,有助于临床医师制定个性化防治措施,减少四肢骨折延迟愈合风险.

目的 研究D-半乳糖(D-galactose,D-gal)对小鼠睾丸TM4支持细胞连接功能损伤以及淫羊藿素(icaritin,ICT)的改善作用机制.方法 首先将TM4细胞分为正常对照组、不同浓度D-gal处理组,Western blot检测TM4细胞连接功能相关蛋白(ZO-1、Occludin、β-catenin 和 Cx43)以及 ERα/FAK信号通路相关蛋白(ERα、FAK和pY397-FAK)表达水平的变化;随后MTT筛选ICT药物浓度,并将TM4细胞分为正常对照组、D-gal处理组、D-gal处理+不同浓度ICT组,Western blot检测上述蛋白表达水平变化;分子对接研究ERα与ICT之间的相互作用,并预测两者之间的亲和力;最后将TM4细胞分为正常对照组、D-gal处理组、ERα抑制剂组、D-gal+ICT组、ERα抑制剂+ICT组,Western blot检测上述蛋白表达水平的变化.结果 D-gal可浓度依赖性下调连接功能相关蛋白(ZO-1、Occludin、β-catenin 和 Cx43)以及 ERα/FAK信号通路相关蛋白(ERα、FAK和pY397-FAK)表达水平;给予ICT药物后,上述蛋白表达水平均明显上调;ERα和ICT分子对接结果显示,ERα的Asp351氨基酸残基与ICT之间形成2个距离为3.4 ?和2.4 ?的氢键,且两者之间的对接结合能小于-7 kcal·mol-1;ERα抑制剂处理TM4细胞后,上述蛋白表达水平均明显下调,给予ICT后,上述蛋白表达水平未有明显变化.结论 D-gal可导致TM4细胞连接功能损伤,而ICT可改善其损伤,机制可能与上调ERα/FAK信号通路相关.

Background::Dysfunction of the gap junction channel protein connexin 43 (Cx43) contributes to myocardial ischemia/reperfusion (I/R)-induced ventricular arrhythmias. Cx43 can be regulated by small ubiquitin-like modifier (SUMO) modification. Protein inhibitor of activated STAT Y (PIASy) is an E3 SUMO ligase for its target proteins. However, whether Cx43 is a target protein of PIASy and whether Cx43 SUMOylation plays a role in I/R-induced arrhythmias are largely unknown.Methods::Male Sprague-Dawley rats were infected with PIASy short hairpin ribonucleic acid (shRNA) using recombinant adeno-associated virus subtype 9 (rAAV9). Two weeks later, the rats were subjected to 45 min of left coronary artery occlusion followed by 2 h reperfusion. Electrocardiogram was recorded to assess arrhythmias. Rat ventricular tissues were collected for molecular biological measurements.Results::Following 45 min of ischemia, QRS duration and QTc intervals statistically significantly increased, but these values decreased after transfecting PIASy shRNA. PIASy downregulation ameliorated ventricular arrhythmias induced by myocardial I/R, as evidenced by the decreased incidence of ventricular tachycardia and ventricular fibrillation, and reduced arrythmia score. In addition, myocardial I/R statistically significantly induced PIASy expression and Cx43 SUMOylation, accompanied by reduced Cx43 phosphorylation and plakophilin 2 (PKP2) expression. Moreover, PIASy downregulation remarkably reduced Cx43 SUMOylation, accompanied by increased Cx43 phosphorylation and PKP2 expression after I/R.Conclusion::PIASy downregulation inhibited Cx43 SUMOylation and increased PKP2 expression, thereby improving ventricular arrhythmias in ischemic/reperfused rats heart.

目的:探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)来源外泌体微小RNA(miR)-20a对前列腺癌细胞间通讯连接(GJIC)、侵袭和转移能力的影响及其机制。方法:构建CAFs来源近红外荧光蛋白(IRFPs)标记外泌体，以不同浓度(0、10、100、200 mg/L)与PC-3细胞共培养。蛋白质印迹法检测PC-3细胞中CX43蛋白的相对表达水平；荧光漂白恢复技术测定PC-3细胞间缝隙连接功能；Transwell小室侵袭和迁移实验检测PC-3侵袭能力。构建高表达和低表达miR-20a的CAFs，分别与PC-3细胞共培养，检测缝隙链接蛋白43(Connexin 43, CX43)表达、细胞缝隙连接功能、细胞迁移和侵袭能力。双荧光素酶报告实验验证PC-3细胞中miR-20a与CX43基因是否直接结合。用Student’ t检验分析组间差异。 结果:PC-3细胞的CX43表达水平及细胞缝隙连接功能均随外泌体浓度增加而降低(0.715±0.058、0.544±0.039、0.313±0.028和0.196±0.020， F＝19.031， P<0.05)，差异有统计学意义。Transwell小室检测结果表明，CAFs来源外泌体促进PC-3细胞迁移[各组每视野穿膜细胞数分别为(176.0±9.2)、(485.0±12.8)、(159.5±9.7)和(198.0±10.5)个， F＝11.475， P<0.01]和侵袭[各组每视野穿膜细胞数分别为(150.0±8.4)、(443.0±21.7)、(182.0±11.2)和(153.5.0±10.1)个， F＝16.306， P<0.01]，差异有统计学意义；增强细胞缝隙连接能抑制此效应( F＝14.052， P<0.01； F＝14.804， P<0.01)。高表达miR-20a组的PC-3细胞的CX43表达水平(0.126±0.062比0.834±0.103， t＝9.430， P<0.05)、荧光恢复率[(25.02±7.85)%比(46.65±6.98)%， t＝5.782， P<0.05]均显著低于低表达miR-20a组，但细胞的迁移[(502.5±18.6)个比(128.5.0±9.4)个， t＝9.120， P<0.05]和侵袭能力(458.0±16.8比194.5±9.2， t＝6.286， P<0.05)均显著高于表达miR-20a组，差异均有统计学意义。双荧光素酶报告实验结果显示，野生型CX43的PC-3细胞中，转染miR-20a的细胞荧光活性显著低于miR-NC组(0.46±0.08比0.99±0.14， t＝10.208， P<0.05)，差异有统计学意义；而突变型CX43的PC-3细胞中，miR-20a组与miR-NC组细胞荧光活性差异无统计学意义(0.94±0.06比0.97±0.08， t＝0.142， P>0.05)。 结论:CAFs来源外泌体miR-20a通过直接作用CX43基因，下调PC-3细胞CX43的表达，从而显著降低细胞间通讯连接功能，增强前列腺癌细胞的增殖、侵袭和转移能力。

目的:研究缝隙连接蛋白43(CX43)对胶质母细胞瘤(S24-GBM)细胞间网络连接的影响及其在GBM放射抵抗中的作用。方法:采用基因敲除S24-GBM干细胞(S24-GBMSCs)表面CX43的表达或生胃酮(CBX)特异性阻断CX43的功能后，用多光子激光扫描显微镜观察S24-GBMSCs移植裸鼠大脑中肿瘤细胞表面微管(TMs)的形成和小分子物质(Ca 2＋＋和SR101)在细胞间的传递。采用MRI检测放射对GBM体积变化的影响，记录和分析裸鼠生存时间。 结果:与对照组相比，敲除CX43基因后S24-GBMSCs的TMs明显缩短，TMs参与形成的网络连接减少；细胞间Ca 2＋同步性和SR101扩散能力下降，肿瘤体积缩小，荷瘤裸鼠生存时间显著延长( P均<0.01)；CBX可以抑制Ca 2＋和SR101的扩散，延缓GBM的生长，但不影响TMs的形成( P>0.05)。采用CBX阻断TMs形成缺陷的S24-GBMSCs表面CX43的功能可以进一步增强上述效应，提高S24-GBM对放射的敏感性( P均<0.05)。 结论:CX43参与S24-GBM细胞间网络连接的形成，影响细胞间信号分子的传递，在S24-GBM放射抵抗中起着重要作用。

目的:通过筛选骨关节炎（OA）中差异表达离子通道相关基因（IRGs），为其治疗提供新策略。方法:使用骨关节炎软骨细胞单细胞转录组测序数据（HRA002569）和软骨组织转录组测序数据（GSE168505），分析323个IRGs表达情况，筛选到1个骨关节炎上调的离子通道相关基因GJA1（编码connexin 43蛋白，CX43）。对应激型软骨细胞进行拟时序分析，解析GJA1在不同状态应激型软骨细胞的生物学功能。通过文献检索，筛选CX43抑制剂；利用alphafold3和RFdiffusion方法，设计CX43结合短肽。使用Wilcoxon秩和检验进行差异表达检验，使用Bonferroni法进行 P值校正。 结果:通过OA单细胞和常规转录组数据分析，与323个IRGs取交集，GJA1在OA患者受损软骨细胞中显著上调（log2FC＝0.278，校准 P<0.01）。GJA1在OA发展中起重要作用。文献检索结果显示氯苯吩嗪可能是CX43特异性抑制剂；利用机器学习方法，设计4条结合短肽靶向抑制CX43，为OA治疗提供新策略。 结论:GJA1在OA患者应激型软骨细胞中表达上调，与OA发展和疼痛相关。

目的:探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在激素性股骨头坏死(ONFH)骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达及其对细胞增殖的作用。方法:收集20例激素性股骨头坏死和20例股骨颈骨折患者的股骨骨髓，分离培养BMSCs，培养至第3代用于实验。构建携Cx43的重组慢病毒载体，转染、筛选获得阳性细胞。实验分为A组：激素性股骨头坏死患者BMSCs组；B组：激素性股骨头坏死患者BMSCs经Cx43重组慢病毒感染组；C组：激素性股骨头坏死患者BMSCs经空载体感染组；D组：股骨颈骨折患者BMSCs组。检测上述分组中细胞增殖，细胞内活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)水平，增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白E1(Cyclin E1)、Cx43 mRNA的表达水平。两组间比较采用 t检验。 结果:D组细胞增殖能力高于A、B、C组，B组细胞增殖能力高于A、C组；D组线粒体膜电位明显高于A、B、C组(11.07±0.63比4.84±0.42、9.18±0.35、6.09±0.46， t＝70.618、10.761、57.631， P<0.05)。B组线粒体膜电位明显高于A、C组(9.18±0.35比4.84±0.42、6.09±0.46， t＝57.719、46.456， P<0.01)，但仍低于D组；D组ROS水平明显低于A、B、C组(82.71±6.98比258.91±10.87、108.22±5.33、263.54±12.79， t＝－93.457、－8.453、－11.304， P<0.05)。B组的ROS水平明显低于A、C组(108.22±5.33比258.91±10.87、263.54±12.79， t＝－65.134、－9.562， P<0.01)，但仍高于D组；经Cx43重组慢病毒感染后，B组Cx43 mRNA量显著增多，感染效果满意；过表达Cx43能明显促进PCNA、Cyclin D1、Cyclin E1基因转录。 结论:激素性股骨头坏死BMSCs中Cx43表达明显降低，过表达Cx43能显著地促进BMSCs增殖。

目的:探讨失效模式与效应分析（FMEA）模式对宫颈癌经外周静脉穿刺中心静脉置管（PICC）化疗患者的置管情况及其并发症的影响。方法:选取2018年6月至2022年6月在舟山市妇女儿童医院接受PICC化疗的宫颈癌患者86例进行随机对照研究，按照随机数字表法分为两组，对照组43例予常规护理，观察组43例予FMEA模式护理干预。对比两组患者的置管情况、PICC管理能力、并发症发生情况及生存质量。结果:观察组一次性置管成功率为95.4%（41/43），高于对照组的79.1%（34/43）（χ 2=5.10， P < 0.05）；观察组导管异位率为2.3%（1/43）、导管脱出率为0、导管堵塞率为2.3%（1/43），均低于对照组的13.9%（6/43）、9.3%（4/43）、16.3%（7/43）（χ 2=5.10、3.88、4.19、4.96，均 P < 0.05）。化疗疗程结束时，观察组自我管理能力量表（CPPSM）中带管生活［（25.13±3.28）分］、带管活动［（14.89±2.33）分］、导管维护依从性［（16.04±2.71）分］、导管日常观察［（28.66±3.42）分］、导管异常处理［（13.85±2.60）分］、导管信息获取［（10.43±2.73）分］、导管管理信心［（15.03±2.17）］评分均高于对照组［（23.21±3.25）分、（13.12±2.35）分、（14.32±2.05）分、（26.24±3.45）分、（12.06±2.51）分、（8.61±2.31）分、（13.42±2.13）分］（ t=2.73、3.51、3.32、3.27、3.25、3.34、3.47，均 P < 0.05）。观察组并发症发生率为4.7%（2/43），低于对照组的18.6%（8/43）（χ 2=4.07， P < 0.05）。观察组化疗结束时宫颈癌治疗功能评价量表（FACT-Cx）评分中的生理状况［（23.65±2.93）分］、社会/家庭状况［（23.26±3.73）分］、情感状况［（21.00±2.43）分］、功能状况［（23.25±2.63）分］、附加关注［（52.82±3.89）分］评分均高于对照组的（19.53±2.81）分、（18.93±3.61）分、（16.25±2.51）分、（17.16±2.45）分、（43.98±4.78）分（ t=6.65、5.47、8.92、11.11、8.45，均 P < 0.001）。 结论:FMEA模式用于宫颈癌PICC化疗患者有助于提升置管成功率，提高患者PICC自主管理能力，降低并发症发生率，改善其生存质量。

重症监护病房（ICU）患者死亡的主要原因是脓毒症，脓毒症及脓毒性休克严重影响患者的预后，增加了患者的病死率和再次发病率，早期、及时的干预可以降低脓毒症患者的病死率及复发率。脓毒症的发生可能与连接蛋白43（Cx43）的磷酸化有关，而Cx43的磷酸化需要通过各种信号通路实现。Cx43的相关位点通过不同信号通路发生磷酸化，实现了对脓毒症的精准调节，这些位点可能成为治疗脓毒症的相关靶点，为精准化治疗脓毒症提供方向。本文主要分析蛋白激酶A（PKA）、蛋白激酶C（PKC）、丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）等与Cx43相关的信号通路在脓毒症发生机制中的作用。

目的:评价电针后处理对心肌缺血再灌注大鼠心律失常时微小RNA-1(miRNA-1)表达的影响。方法:清洁级健康成年雄性SD大鼠24只，2～3月龄，体重280～320 g，采用随机数字表法分为3组( n＝8)：假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和电针后处理组(EP组)。采用结扎冠状动脉左前降支30 min再灌注30 min的方法制备大鼠心肌再灌注心律失常模型。开胸后S组只穿线不结扎；EP组于再灌注即刻电针持续刺激双侧内关穴30 min进行后处理。记录再灌注期间心律失常的发生情况；于再灌注30 min处死大鼠取心脏，观察心肌病理学结果，采用qRT-PCR法测定miRNA-1表达，Western blot法检测Kir2.1和缝隙连接蛋白43(Cx43)表达。 结果:与S组比较，I/R组和EP组心律失常发生率升高，心肌miRNA-1表达上调，Kir2.1和Cx43表达下调( P<0.05)；与I/R组比较，EP组心律失常发生率降低，心肌miRNA-1表达下调，Kir2.1和Cx43表达上调( P<0.05)。I/R组和EP组心肌组织病理学损伤较S组加重，EP组病理学损伤较I/R组减轻。 结论:电针后处理减少大鼠再灌注心律失常发生的机制与其下调miRNA-1表达后Kir2.1和Cx43表达上调有关。