Dysferlin肌病是一种常染色体隐性遗传性疾病，由编码Dysferlin蛋白的DYSF基因突变引起，主要在青年中起病，临床特点是缓慢进展性肌无力，血清肌酸激酶显著升高。Dysferlin肌病在临床上易误诊，本文报道Dysferlin肌病被误诊为肝炎和多发性肌炎1例。

目的:报告1例由 LMNA基因错义变异所致的先天性肌营养不良症(congenital muscular dystrophy，CMD)，并分析该错义变异的致病性。 方法:对患儿行肌肉活检术；肌肉组织行HE、免疫化学染色以及电镜检查以明确其临床诊断；同时提取患儿及其父母外周血中DNA物质，进行全外显组测序法(trio-whole exome sequencing, trio-WES)检测以明确肌病基因诊断，并通过Sanger测序法验证检出变异，对检出变异进行生物信息学预测。结果:患儿肌肉活检组织在光镜和电镜下均可见大量的坏死肌纤维组织伴炎症细胞浸润；免疫组化显示Dysferlin呈阳性；结合其临床特点以先天性运动发育迟缓和肌酶升高为主，"CMD"临床诊断基本明确。家系trio-WES分析发现，患儿 LMNA基因上第6外显子存在一个c.1072G>A (p. E358K)杂合错义变异，该变异国内外尚未见报道(PS2);在主要人群基因频率数据库中均不存在(PM2)；该变异经多种变异预测软件预测结果均提示为有害变异(PP3)；导致编码蛋白第358位氨基酸改变，影响调控中间丝蛋白形成的Filament功能域(aa：30-386)的功能(PM1)。根据美国医学遗传学和基因组学学会(ACMG)指南，判定该新发错义变异为可能致病性变异(PS2+PM1+PM2+PP3)，可明确该患儿的基因诊断。 结论:LMNA基因c.1072G>A (p. E358K)可能为该患儿罹患CMD的致病原因，该结果可为患儿家系的遗传咨询和产前诊断提供依据。新的 LMNA致病变异扩充了 LMNA基因的变异谱。

目的:观察超早期推拿对骨骼肌急性钝挫伤模型大鼠肌细胞膜修复相关蛋白dysferlin表达的影响,探寻dysferlin在骨骼肌钝挫伤肌细胞膜修复中的作用机制.方法:SD大鼠55只,随机分为正常对照组(n=5)、自然恢复组(n=25)、推拿组(n=25).根据推拿治疗的天数计时,自然恢复组和推拿组分别在ld、2d、3d、5d、7d五个时间点处死,每亚组每个时间点5只,在腓肠肌标记的区域内取肌肉组织,HE观察组织的形态变化,运用Western blot检测蛋白dysferlin的表达情况,并进行统计学分析.结果:HE结果显示,与正常对照组相比,骨骼肌钝挫伤后,1d和2d肌纤维出现肿胀;3d出现炎性细胞浸润且自然恢复组比推拿组更加严重;5d炎性细胞浸润更加明显;7d推拿组炎性细胞较5d明显减少,结缔组织形成较少,7d自然恢复组有大量的结缔组织填充在肌纤维之间.WB结果显示:dysferlin在模型组中比在正常对照组中的表达明显增多;各个相应时间点推拿组较自然恢复组表达量明显增多(P＜0.05),且随着时间的推移dysferlin在推拿组各亚组、自然恢复组各亚组中的表达量呈逐渐上升趋势.结论:在骨骼肌急性钝挫伤模型大鼠腓肠肌修复过程中,超早期推拿可增加膜修复蛋白dysferlin的表达,促进破裂的肌细胞膜及时修复,可能有利于损伤肌细胞的修复,从而帮助受损的骨骼肌修复.

背景:目前关于 dysferlin 的研究多集中在肌肉疾病(如肌营养不良)上,而针对运动后肌损伤发生后细胞膜的修复与dysferlin的关系鲜有研究.目的:观察急性离心运动后大鼠腓肠肌细胞膜通透性及膜修复蛋白dysferlin及calpain3表达变化,为深化肌组织再生分子机制及肌肉疾病的运动治疗提供理论参考.方法:将32只大鼠随机分为对照组、运动后24,48,72 h组.采用免疫组织化学染色、Western blot及qRT-PCR等方法检测大鼠腓肠肌细胞膜完整性和dysferlin,calpain3蛋白及基因表达.结果与结论:与对照组相比,运动后24 h组血清肌酸激酶活性、Calpain3 mRNA,dysferlin蛋白表达及骨骼肌细胞膜损伤程度均增高(P ＜ 0.05或P ＜ 0.01);运动后 24,48 h组大鼠dysferlin mRNA表达量高于运动后72 h组(P ＜ 0.05).结果说明,离心运动后24 h,骨骼肌细胞膜损伤最为严重,人体通过Ca2+内流,激活了细胞内钙激活酶calpain3基因表达,进而通过促进膜特异性修复蛋白dysferlin表达修复受损的骨骼肌细胞膜.

目的 总结Dysferlin肌病的临床表型和基因突变特点.方法 回顾分析两家系3例Dysferlin肌病患者的临床表现、实验室检查、影像学检查、神经电生理学检查、肌肉病理学检查和基因检测结果.结果 Dysferlin肌病临床表现多样,同一家系表现出不同的临床亚型[例1为Miyoshi远端型肌营养不良症,例2(例1之父)为无症状高肌酸激酶血症];肌肉MRI表现为不同程度肌肉脂肪化;肌电图呈肌源性损害;组织学形态可见肌营养不良改变,免疫组织化学染色可见肌细胞胞膜dysferlin表达降低或缺如;基因检测提示DYSF基因外显子4 c.331C＞ T(p.Gln1 11Ter)无义突变(例1和例2)和外显子54c.6141delC移码突变(例1),以及外显子23 c.2311C＞T(p.Gln771Ter)无义突变和外显子27c.2870-2874delAGACC移码突变(例3).结论 Dysferlin肌病存在临床异质性,易误诊和漏诊.详细的病史询问、肌肉组织活检特异性dysferlin显著降低或缺如、DYSF基因突变,有助于Dysferlin肌病的明确诊断和分型诊断.

生物膜的磷脂双分子层将细胞与外界环境分开.大部分细胞会在机械损伤或化学应激下引发质膜损伤,如果不及时修复将会导致细胞死亡.胞外钙离子通过伤口进入细胞,作为损伤的最初信号,会诱发一系列的修复反应.随后,胞内细胞器也释放钙离子,并产生系列细胞行为来应对损伤,维护质膜的完整性.本文介绍了在损伤修复过程的胞吞作用、胞吐作用、胞外小泡脱落等细胞行为.综述了补丁模型、修复帽模型和大损伤修复的模型特点.补丁模型是最早的修复模型,提出后不断得到完善.细胞除了需要在损伤处聚集小泡、融合形成补丁外,还需通过胞吐、胞吞和出芽(小泡脱落)等方式参与伤口修复.本文简要介绍参与质膜修复的重要蛋白质如钙蛋白酶、dysferlin、MG53、膜联蛋白、突触结合蛋白(Syt-ⅤⅡ)、ESCRTⅢ、酸性鞘磷脂酶、细胞骨架蛋白质等在修复过程中的作用.

对2例肢带型肌营养不良(limb-girdle muscular dystrophy,LGMD)患者的临床特点进行分析,并进行相应的肌肉病理学检查,最后通过全外显子测序确定患者的致病基因.病例l进行了肌肉活检,结果支持Dysferlin病;并在其DYSF基因第50号外显子区域发现了c.5639G＞A(p.G1880D),c.5246G＞C(p.R1749P)2个杂合突变,进一步的验证发现2个突变分别来自于患者的母亲和父亲.在病例2的CAPN3基因上发现了2009C＞A(p.A670E)纯合突变,进一步验证发现病例2的父母均携带该杂合突变.病例l诊断为LGMD2B,而病例2诊断为LGMD2A.对于LGMD患者,综合临床、病理学方法以及基因学方法能对疾病做出较为明确的诊断.

肢带型肌营养不良症2B型(limb-girdle muscular dystrophy type 2B,LGMD2B)是由DYSF基因突变引起肌膜蛋白(dysferlin)表达减弱或缺失所导致的一种骨骼肌疾病[1],其特点是发病年龄通常为15～25岁,以肢带肌以及四肢近端肌肉无力为主要表现,以肩胛带和骨盆带肌的不同程度无力或萎缩为主要临床特点,病程进展缓慢.发展到疾病晚期可累积四肢远端肌肉;肌电图显示肌病变化,骨骼肌活检显示严重的肌病改变,包括肌纤维大小的变化,肌纤维分裂,结缔组织的增加以及散发性肌肉坏死[2].

肢带型肌营养不良(LGMD)是一组临床表现为肢带肌无力及萎缩、具有遗传异质性的肌肉疾病.在国内,LGMD是除迪谢内/贝克型肌营养不良、面肩肱肌营养不良及强直性肌营养不良外,发病率最高的一种肌营养不良.LGMD多在少年或成人起病,常就诊于神经内科.因其表现为四肢近端无力,容易与炎性肌病、代谢性肌病等混淆.最终诊断依赖于肌肉活体组织检查免疫组织化学染色、免疫印迹及基因检测.我国的LGMD2B (dysferlinopathy)及LGMD2A(calpainopathy)约占LGMD总数的74.3％.其中LGMD2B比例最高,多在19～27岁起病,早期可以表现为无症状高肌酸激酶血症,中后期绝大部分患者进展为肢带综合征,伴小腿后群变细及血肌酸激酶水平显著升高.第二常见的是LGMD2A,多在7～18岁起病,以伴或不伴翼状肩/跟腱挛缩的肢带综合征为主要表现,血肌酸激酶水平常升高.目前LGMD尚无有效的治疗手段,但自然史研究及基因治疗临床试验为LGMD患者的治疗带来了新的希望.

目的:分析肢带型肌营养不良2B型(LGMD2B)被误诊误治的原因.方法:回顾性分析5例被误诊为多发性肌炎的LGMD2B患者的临床表现与治疗经过,总结其临床特点并分析其被误诊的原因.结果:本组5例LGMD2B均因被误诊为多发性肌炎而辗转就医,均有使用激素治疗,且疗效欠佳,最终通过肌肉活检、免疫组化、基因测序等方法确诊为LGMD2B.结论:LGMD2B和多发性肌炎在临床表现、病理表现上存在一定相似性,故而容易被误诊.临床医生需要提高对LGMD2B的认识,尤其在"多发性肌炎"治疗疗效不佳、病情反复时应警惕可能为LGMD2B,肌肉活检、免疫组化、基因测序等方法可助确诊.