目的:观察Ⅰ型小肠闭锁肠腔隔膜组织黏膜Toll样受体4(toll-like receptor-4，TLR4)和髓样分化蛋白88(myeloid differential protein-88，MyD88)信号通路分子表达，并探索胚胎期TLR4/MyD88依赖性信号通路与肠管再通过程的相关性。方法:收集16例术中证实为Ⅰ型小肠闭锁患儿的肠腔隔膜组织。其中，空肠闭锁13例(男5例，女8例)，回肠闭锁3例(男1例，女2例)；手术年龄为出生后1~3 d。以同一患儿行肠切除肠吻合过程中钳取收集的正常肠壁组织为对照组。组织标本转入快速组织处理系统进行组织标本连续切片。采用常规HE染色进行定位，采用免疫组织化学染色和观察TLR4和MyD88，以及该信号通路下游的肿瘤坏死因子受体相关分子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6，TRAF6)和白细胞介素-1受体相关激酶4(interleukin-1 receptor associated kinase-4，IRAK4)在正常新生儿肠壁组织黏膜层内、隔膜组织黏膜层内的表达。各组分别随机取4个视野(非肌肉区域)，应用图像分析软件Image pro plus 6.0测量积分光密度(IOD)值和面积(Area)并计算出平均光密度(OD)值。OD＝IOD/Area。采用双盲法分析比较免疫组织化学平均光密度值并进行统计学分析。结果:免疫组织化学结果显示，正常肠壁组织黏膜层TLR4、MyD88、TRAF6和IRAK4分子表达不明显，但上述指标在隔膜组织黏膜层表达显著。半定量结果显示，TLR4、MyD88、TRAF6和IRAK4分子在新生儿正常肠壁黏膜层的相对表达量分别为0.010、0.0122、0.1008和0.0102，而其在隔膜组织黏膜层的相对表达量分别为0.048、0.1072、0.0887和0.0468，两相比较，差异均有统计学意义( P＝0.001、0.0046、0.0016和0.001)。 结论:Ⅰ型肠闭锁隔膜黏膜层TLR4、MyD88、TRAF6和IRAK4分子表达相对正常肠壁组织增多，提示TLR4/MyD88信号通路可能与Ⅰ型肠闭锁隔膜组织的形成或发展具有相关性。

目的:通过TCGA数据库中膀胱尿路上皮癌(BLCA)中炎症反应相关基因(IRRGS)的表达数据和临床数据，构建BLCA分子亚型和预后分子标签，探索其在BLCA中的预后作用。方法:检索TCGA数据库中412例BLCA患者的转录组数据及临床预后数据，利用R语言中NMF包对BLCA中的IRRGS表达进行无监督聚类分析，构建基于IRRGS的BLCA分子亚型，探索不同亚型的预后情况和肿瘤微环境情况；采用LASSO-Cox回归进行BLCA预后相关甲基化标志物筛选，并构建预后分子标签，进一步分析其在BLCA中的预后作用。结果:基于BLCA转录组数据和生存数据，发现200种IRRGS中有33种基因与BLCA预后相关(均 P<0.05)，基于33种IRRGS构建BLCA分子亚型，将412例BLCA患者分为3个亚组，不同亚型具有不同预后，且不同亚型具有不同肿瘤微环境；基于33种IRRGS采用LASSO-Cox回归分析从中筛选出9种与BLCA预后相关IRRGS(DCBLD2、IL-10、IRAK2、IRF1、LDLR、PVR、RIPK2、SEMA4D、TLR2)，并联合9种IRRGS构建预后分子标签，结果显示，该分子标签可以很好地判断BLCA患者预后。 结论:基于IRRGS构建的BLCA分子亚型，不同亚型间预后不同；不同亚型间肿瘤微环境不同。基于9种IRRGS构建的BLCA预后分子标签可以很好地判断BLCA预后，提示IRRGS在BLCA中可发挥重要作用。

目的:总结儿童白细胞介素1受体相关激酶4（IRAK4）缺陷症的临床特点。方法:回顾性分析2019年6月至2020年8月多次入住深圳市儿童医院神经内科的1例确诊IRAK4缺陷症患儿的临床资料及诊治经过，并分别以“IRAK4基因变异”“白细胞介素1受体相关激酶4缺陷症”“IRAK4 gene variation”“IRAK4 deficiency”为检索词分别在中国知网、万方、维普及PubMed数据库查询建库至2021年1月的相关文献，总结分析该病的临床特点。结果:患儿 男，6岁，易反复患呼吸道感染性疾病，予抗菌药物治疗后好转，临床表现有严重的肺炎链球菌脑膜脑炎、多发性硬化、侵袭性椎间盘炎、炎性骨质破坏。家系全外显子测序显示其IRAK4基因存在1个纯合移码变异：NM_016123. 3：c.540del（p.Phe180Leufs*26），父母均为杂合子。10篇英文文献共详细报道23例，加上本例，合计24例患儿，其中男13例、女11例，起病年龄8日龄至7岁，主要表现为复发性侵袭性细菌感染23例，肺炎链球菌脑膜炎11例，肺炎链球菌和（或）金黄色葡萄球菌败血症9例，铜绿假单胞菌脑膜炎、沙门菌感染、金黄色葡萄球菌皮肤脓肿、复发性病毒感染各1例。有2例合并自身免疫性疾病，1例为自身免疫性脑炎，1例为幼年特发性关节炎。24例患儿中10例死亡，其中9例在婴儿期死亡。存活患儿中多确诊早且预防性使用抗菌药物和静脉注射用人免疫球蛋白，但易感性逐年降低，14岁可接近正常儿童。24例患儿中IRAK4基因纯合变异21例，复合杂合变异3例。共有15种变异，移码变异9种、无义变异4种、错义变异2种。有一个备选变异热点：c.877 C>T，有3例。结论:IRAK4缺陷症主要表现为复发侵袭性细菌感染，以肺炎链球菌脑膜炎或败血症多见，少数伴自身免疫性疾病。婴儿期病死率高，早期确诊并治疗可避免重症或病死。

目的:探索RA患者外周血白细胞介素1受体相关激酶1（IRAK1）的表达，并分析其与疾病活动及CD4 + T细胞亚群的相关性。 方法:①采用ELISA检测77例RA组患者和24名健康对照组外周血中IRAK1的活性表达量；②收集RA患者的一般资料及临床观察指标（包括DAS28评分、ESR、CRP、外周血CD4 + T细胞亚群等）；③采用独立样本 t检验或Mann-whitney U检验进行两组间的比较；采用Spearman秩相关及多元线性回归分析IRAK1的表达水平与各临床观察指标的相关性。 结果:① RA组外周血IRAK1的表达相比于健康对照组显著升高（ P<0.001）。② RA组外周血CD4 + T细胞亚群，较健康对照组相比，调节性T细胞（Treg）绝对值、Treg%均降低（ P<0.001），辅助性T细胞17（Th17）绝对值、Th17%、Th17/Treg比值均升高（ P<0.001），且Th1/Th2比值明显升高（ P<0.05）。③随着RA患者疾病活动度的增加，IRAK1的活性表达量也增加，RA组外周血IRAK1的表达与ESR、受累关节的个数、DAS28评分呈正相关（ r=0.23， P<0.05； r=0.24， P<0.05； r=0.27， P<0.05）；同时，又与Treg%呈负相关（ r=-0.27， P<0.05），与Th17/Treg比值呈正相关（ r=0.23， P<0.05）；而与Th1/Th2比值无明显相关性（ P>0.05）。多元逐步回归分析进一步显示，RA组的IRAK1与ESR、受累关节个数均呈正相关（ β=0.34， P=0.019； β=0.27， P=0.004；），与Treg %呈负相关（ β=-0.23， P=0.057， R2=0.219）。 结论:RA患者外周血IRAK1表达上调，且与疾病活动度相关；IRAK1高表达所致Treg减少、Th17/Treg失衡可能是RA疾病发生、发展的主要因素之一。

目的:筛选T-2毒素致大鼠关节软骨细胞损伤的差异表达环状RNA（circular RNA，circRNA），探索软骨损伤机制。方法:将24只SD大鼠（雄性，体重为60 ~ 80 g）按随机数字表法分为T-2毒素组和对照组，每组12只，分别给予100 ng·g -1·d -1 T-2毒素和等量去离子水灌胃处理，干预4周后，收集关节软骨进行转录组学测序。采用Deseq2软件[ P < 0.05且|log 2（fold change）| > 1，fold change为差异表达倍数]筛选大鼠差异表达circRNA。基于内源竞争RNA（competing endogenous RNAs，ceRNA）假说，采用miRanda软件预测差异表达circRNA的微小RNA（microRNA，miRNA，miR）靶点，Cytoscape 3.10.0软件绘制circRNA-miRNA相互作用网络。采用MiRWalk 3.0、MiRDB、miRTarBase软件预测下游靶基因，Cytoscape 3.10.0软件绘制circRNA-miRNA-mRNA相互作用网络图。采用基因本体论（Gene Ontology，GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）通路分析靶基因的生物学功能及富集通路。 结果:共筛选出19个差异表达circRNAs（10个上调、9个下调）。预测得到1 320个miRNAs靶点和16个靶基因。靶基因富集分析发现，丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）和核因子κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）信号通路显著富集（均 P < 0.05）；肿瘤坏死因子受体相关因子6（tumour necrosis factor receptor-associated factor 6，Traf6）和白细胞介素-1受体相关激酶1（interleukin-1 receptor-associated kinase 1，Irak1）富集在MAPK和NF-κB信号通路中，其对应的miRNA和circRNA分别为miR-146a-5p和chr2：94716330|94720889。 结论:成功筛选出19个大鼠关节软骨细胞损伤差异表达circRNAs，其中chr2：94716330|94720889可通过miR-146a-5p/Traf6/Irak1轴调控MAPK和NF-κB信号通路，诱导关节软骨细胞损伤。

目的:观察Ⅰ型小肠闭锁肠腔隔膜组织黏膜β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TIR-domain-containing adapter-inducing interferon-β，TRIF)、肿瘤坏死因子受体相关因子蛋白3(tumor receptor associated factor，TRAF3)、干扰素-β(interferon-beta，IFN-β)和干扰素-λ1(interferon -λ1，IFN-λ1)分子的表达特征，探索胚胎期Toll样受体4(toll like receptor 4，TLR4)-TRIF非依赖性信号通路与肠管再通过程的相关性。方法:采用免疫组化技术观察和比较新生儿正常肠壁和Ⅰ型肠闭锁隔膜组织黏膜层内TRIF通路内重要分子的表达特征。收集16例患儿组织标本(解放军总医院儿科医学部1例，首都儿科研究所1例，河北医科大学第二医院6例，哈尔滨市儿童医院5例，长春市儿童医院3例)，均为术中证实的Ⅰ型肠闭锁隔膜组织，为隔膜组；以同一患儿术中行肠切除、肠吻合过程中钳取收集的正常肠壁组织为对照组。患儿手术年龄为出生后1~3 d，其中空肠闭锁13例(男5例，女8例)，回肠闭锁3例(男1例，女2例)。将组织标本转入快速组织处理系统进行组织标本连续切片。采用常规HE染色进行定位，隔膜组和对照组各16例，每个病例染色后随机取4个视野(非肌肉区域)，应用图像分析软件Image pro plus 6.0测量积分光密度(integral-optical density ，IOD)和面积(Area)，并计算出平均吸光度( A)(OD)。OD＝IOD/Area。采用 t检验和双盲法分析免疫组化平均光密度。 结果:新生儿正常肠壁组织黏膜层的TRIF、TRAF3、IFN-β和IFN-λ1的分子表达不明显或低表达，在隔膜组织黏膜层表达显著。半定量分析结果显示，TLR4、MyD88、TRAF6和IRAK4分子在隔膜组织黏膜层表达比新生儿正常肠壁黏膜层多，二者差异有统计学意义(隔膜组织分别为0.6 316±0.0 268，0.5 066±0.0 378，0.6 091±0.0 270，0.3 841±0.0 610，正常肠壁分别为0.4 333±0.0 409，0.3 758±0.0 365，0.4 108±0.0 263，0.2 108±0.0 573， P值分别为0.0 042，0.0 360，0.0 057，0.0 137。 结论:TLR4/MyD88信号通路参与了Ⅰ型肠闭锁隔膜组织的形成或发展。

目的 设计并合成具有抗肿瘤活性的白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK4)降解剂.方法 将IRAK4蛋白配体与E3连接酶配体经不同类型和长度的连接链进行连接,合成目标化合物,其结构经MS谱和 1H NMR谱确证.以大B细胞淋巴瘤细胞OCI-LY10为测试细胞株,对所合成的目标化合物进行体外抗肿瘤活性评价以及对IRAK4的降解测试.结果 合成了9个靶向IRAK4的降解剂,活性测试结果显示目标化合物均可抑制大B细胞淋巴瘤细胞OCI-LY10细胞增殖,其中化合物Ⅲ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ对IRAK4有较强的降解活性,半数最大降解浓度(DC50)值在1～10 nmol·L-1.结论 利用蛋白降解靶向嵌合体技术,通过对IRAK4的降解,实现对肿瘤细胞的增殖抑制,值得进一步研究.

目的:探讨中药复方解表清里方体内抑制甲型H1N1 流感病毒株复制的作用及机制.方法:使用随机数字法,将132 只SPF级小鼠平均分为空白组、模型组、磷酸奥司他韦组(剂量为0.037 5 g/kg)、解表清里方高、中、低剂量组(剂量分别为6.05、3.02 和1.51 g/kg),每组22 只.空白组不进行任何操作,用甲型流感病毒[A/Brisbane/02/2018(H1N1),pdm09-like virus(H1N1)]滴鼻法感染其他组小鼠,在造模2h后,空白组和模型组用生理盐水灌胃,其他组给予相应剂量的药物,各组灌胃7d.给药期间每日定期检测小鼠体质量及活动状态,在造模第 3 天和第 7 天取材,检测小鼠肺指数和肺部病理改变;qPCR法检测肺组织中病毒核酸载量;蛋白质印迹法检测造模第 7 天小鼠肺组织中 TLR7、MyD88 和IRAK4蛋白表达水平.结果:解表清里方可以减轻全身症状,降低肺指数,延缓小鼠体质量下降(P<0.05,P<0.01),改善肺组织病理损伤,降低鼠肺病毒滴度(P<0.01),上调肺组织中TLR7、MyD88 和I-RAK4 蛋白表达量(P<0.05,P<0.01),其中解表清里方高剂量组的疗效最优.结论:解表清里方可剂量依赖性改善小鼠肺部感染、降低病毒复制,其机制可能与TLR7-MyD88-IRAK4 信号通路有关.

目的 观察疏肝健脾解毒方辅助光动力疗法对女性尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒(HPV)病毒载量、免疫调节的作用.方法 选取2022 年3 月—2022 年10 月收治的 108 例女性尖锐湿疣,随机数字表法分为 2 组,每组 54例.2 组均采取常规基础治疗,对照组配合光动力疗法,观察组配合疏肝健脾解毒方辅助光动力疗法,疗程 3 个月.观察2 组临床疗效、HPV病毒载量、转阴率、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-10、T淋巴细胞亚群、MyD88 信号通路蛋白表达[白细胞介素-1 受体相关激酶-1(IRAK1)、IRAK4、肿瘤坏死因子受体相关因子 6(TRAF6)]、女性性功能指数(FSFI)、尖锐湿疣生活质量评定量表(CECA10)评分及随访 3 个月复发情况.结果 观察组总有效率96.30%(52/54)高于对照组81.48%(44/54)(P＜0.05).治疗1、3 个月后,观察组HPV病毒载量、血清IL-10 水平以及IRAK1、TRAF6、IRAK4 表达量低于对照组,转阴率、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、血清 IFN-γ 和 IL-2 水平以及FSFI、CECA10 评分高于对照组(P＜0.05).观察组复发率 9.26%(5/54)低于对照组 27.78%(15/54)(P＜0.05).结论 疏肝健脾解毒方辅助光动力疗法对女性尖锐湿疣疗效显著,能降低HPV病毒载量,提高转阴率,抑制炎症反应及MyD88 信号通路蛋白表达,调控机体免疫功能,阻断病情进展及复发.

目的 观察大黄灵仙方调控白细胞介素-1受体相关激酶(interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK)-1和IRAK-4以及成纤维生长因子-3激活酶1MAP3K7结合蛋白2(TGF-3 activator 1 map3k7-binding protein 2,TAB2)的表达水平,探讨其缓解胆管细胞炎症的作用机制,为预防肝胆管结石的形成及术后复发提供理论依据.方法 将45只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为9组,空白组、模型组、大黄灵仙颗粒组、激活核转录因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)阻断剂组、p38丝裂活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)阻断剂组、NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂组、NF-κB阻断剂+大黄灵仙颗粒组、p38MAPK阻断剂+大黄灵仙颗粒组、NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂+大黄灵仙颗粒组,每组大鼠5只.除空白组以外,其余各组大鼠于胆总管处一次性注射5 mg/kg内毒素脂多糖以构建肝内胆管感染动物模型.第7天灌胃结束后取材,取大鼠完整胆管树组织,采用蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测IRAK-1、IRAK-4、TAB2蛋白及mRNA表达量.结果 (1)与空白组比较,模型组IRAK-1、IRAK-4、TAB2蛋白及mRNA表达量升高(P＜0.05);(2)与模型组比较,大黄灵仙颗粒组、NF-κB阻断剂组、p38MAPK阻断剂组、NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂组、NF-κB阻断剂+大黄灵仙颗粒组、IRAK-1、IRAK-4、TAB2的蛋白及mRNA表达量降低(P＜0.05),NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂+大黄灵仙颗粒组IRAK-1、IRAK-4、TAB2蛋白及TAB2 mRNA表达量均显著下降(P＜0.05);(3)与大黄灵仙颗粒组比较,NF-κB阻断剂+大黄灵仙颗粒组、NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂+大黄灵仙颗粒组IRAK-1、IRAK-4、TAB2的蛋白表达量和NF-κB阻断剂+p38MAPK阻断剂组的IRAK-1、IRAK-4、TAB2 mRNA表达量均下降(P＜0.05).结论 大黄灵仙方可缓解内毒素脂多糖诱导的大鼠胆管炎症反应,抑制炎症因子的异常表达,促使胆道恢复至非炎症状态,从而达到预防肝胆管结石的形成及术后复发的目的,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB/MAPK信号通路下游IRAK-1、IRAK-4和TAB2因子的活化有关.