目的:建立一种快速、灵敏、可视化的H7亚型禽流感病毒等温核酸扩增检测方法。方法:针对H7N9禽流感病毒的HA片段保守区序列设计引物、探针，优化反应温度，建立H7亚型禽流感病毒的重组酶聚合酶扩增结合侧流层析试纸条检测技术，评价其特异性和敏感性，并与Real time PCR方法进行比较。结果:该方法检测H7亚型禽流感病毒的最低检出限为20拷贝/μL，与其他流感/禽流感病毒无交叉反应，反应可在20~50℃温度范围内进行，临床样本检测结果与Real time PCR法一致性为100.0％。结论:该检测方法具有快速、特异及灵敏的特点，为在基层和现场快速检测H7亚型禽流感病毒提供了新的方法。

目的:探讨新型冠状病毒肺炎(以下简称新冠肺炎)肝功能损害的影响因素及其临床意义。方法:采用回顾性病例对照研究方法。收集2020年2月9—27日吉林大学第一医院第5批援鄂医疗队在华中科技大学同济医学院附属同济医院中法院区收治的51例新冠肺炎患者的临床病理资料；男27例，女24例；平均年龄为68岁，年龄范围为36～86岁。所有患者参照《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第六版)》进行治疗。观察指标：(1)患者临床资料。(2)肝功能及肝功能损害治疗情况。(3)肝功能损害影响因素分析。正态分布的计量资料以 ± s表示，偏态分布的计量资料以 M(范围)表示。计数资料以绝对数或百分比表示，组间比较采用 χ2检验。采用Logistic回归分析进行单因素分析。 结果:(1)患者临床资料：51例患者中，新冠肺炎普通型21例，重型19例，危重型11例。31例伴有≥1种慢性疾病史，20例无慢性疾病史；13例有饮酒史，38例无饮酒史；7例有肝炎病史，44例无肝炎病史；入院时5例存在感染性休克，5例合并全身炎症反应综合征(SIRS)，41例无休克和SIRS。51例患者体质量指数为(24±3)kg/m 2、发病至入院时间为(13±5)d、体温为36.5 ℃(36.0～38.1 ℃)、心率为82次/min(50～133次/min)、呼吸频率为20次/min(12～40次/min)。51例患者入院24 h内白细胞计数为6.3×10 9/L(2.2×10 9/L～21.7×10 9/L)、肌酐为75 μmol/L(44～342 μmol/L)，B型钠尿肽为214 ng/L(5～32 407 ng/L)。(2)肝功能及肝功能损害治疗情况：51例患者丙氨酸氨基转移酶为31 U/L(7～421 U/L)，天冬氨酸氨基转移酶为29 U/L(15～783 U/L)，γ－谷氨酰转移酶为36 U/L(13～936 U/L)，碱性磷酸酶为76 U/L(41～321 U/L)，直接胆红素为4.9 μmol/L(2.6～14.3 μmol/L)，间接胆红素为5.8 μmol/L(2.6～23.9 μmol/L)，活化部分凝血活酶时间为37.2 s(30.9～77.1 s)，凝血酶原时间为13.9 s(12.5～26.7 s)；51例患者上述指标异常比例分别为47.1%(24/51)、47.1%(24/51)、35.3%(18/51)、13.7%(7/51)、7.8%(4/51)、2.0%(1/51)、21.6%(11/51)、19.6%(10/51)。51例患者中普通型、重型、危重型发生肝功能损害分别为10、9、10例。51例患者中22例肝功能正常(其中1例入院24 h后发生呼吸衰竭行机械通气)，29例肝功能异常(其中9例入院24 h后发生呼吸衰竭行机械通气)，两者比较，差异有统计学意义( χ2＝5.57， P<0.05)。(3)肝功能损害影响因素分析。单因素分析结果显示：新冠肺炎临床分型危重型是影响患者发生肝功能损害的相关因素(优势比＝10.000，95%可信区间为1.050～95.231， P<0.05)。 结论:伴有肝功能损害的新冠肺炎患者呼吸衰竭发生率增加。新冠肺炎临床分型危重型是影响患者发生肝功能损害的相关因素。

现今全球肥胖患病率明显增加，胰岛素抵抗(IR)在肥胖进展中有具有明确的作用。而IR与高甘油三酯(TG)血症、高密度脂蛋白－胆固醇(HDL－C)浓度降低和炎症增加有关，由此会带来葡萄糖代谢恶化，导致高血糖、葡萄糖耐量受损(IGT)或2型糖尿病(T2DM)，所有这些均会促进动脉粥样硬化性心血管疾病(CVD)的发生 [1]。作为回应，全球范围内出现了针对减重和降低CVD风险提出的膳食建议，内容包括以下几方面：(1)传统减重膳食：以常量营养素为重点的膳食，如限制能量膳食(calorie restrict diet，CRD)、低碳水化合物膳食(low carbohydrate diet，LCD)和低血糖指数膳食(low glycemic index diet，LGID)、低脂膳食(low fat diet，LFD)和高蛋白膳食(high protein diet，HPD)。强调常量营养素对新陈代谢和能量稳态不同贡献为重点的健康膳食模式，如地中海膳食(Mediterranean diet，地中海饮食)、终止高血压膳食(dietary approaches to stop hypertension，DASH)、素食和中国"传统江南膳食"等 [2,3]。(2)间歇性禁食(intermittent fasting，IF)：指以特定时间段(从12 h到几天不等)禁食为目标的膳食模式，减少或不减少能量摄入 [2]。本文旨在描述各类减重和降低CVD风险膳食的特点，以期为临床工作者提供合适的膳食选择依据。

目的:探究过硫谷胱甘肽（glutathione persulfate，GSSH）是否可以改善雄性肥胖小鼠的低睾酮水平，并探讨其作用机制。方法:将45只小鼠平均分为3组，低脂饮食（low-fat diet，LFD）组：喂LFD 10周，随后45 d继续LFD同时每天腹腔注射生理盐水（normal saline，NS），记为LFD+NS组（ n=15）；高脂饮食（high-fat diet，HFD）组：喂HFD 10周，随后45 d继续HFD同时每天腹腔注射NS，记为HFD+NS组（ n=15）；HFD+GSSH组（ n=15）：HFD 10周，随后45 d HFD同时每天腹腔注射GSSH（200 mg/kg）。处理结束后所有小鼠眼眶取血，断颈处死小鼠并解剖取出睾丸，分别用ELISA、qPCR以及Western blotting的方法检测小鼠血清睾酮和丙二醛（malondialdehyde，MDA）水平、睾酮关键合成酶（StAR、3β-HSD、Cyp11a1、Cyp17a1）以及抗氧化蛋白（StAR、3β-HSD、NR5A1、EHD3）表达水平等。此外，用100 μmol/L的GSSH处理小鼠睾丸碎片后检测睾酮合成酶表达水平。最后用50 μmol/L和100 μmol/L的GSSH分别处理小鼠睾丸间质TM3细胞株24 h后，加入100 μmol/L的H 2O 2，继续培养TM3细胞24 h，然后收集细胞检测NR5A1、SOD与Nrf2蛋白表达水平。 结果:①给药结束后，LFD+NS组、HFD+NS组与HFD+GSSH组小鼠的体质量分别是（30.67±1.22）g、（40.43±1.56）g、（33.30±0.95）g；HFD+NS组体质量增加了24.53%，给药前后差异有统计学意义（ P=0.002），而LFD+NS组、HFD+GSSH组的体质量在给药前后差异均无统计学意义（均 P>0.05）。②HFD+NS组小鼠睾酮浓度为（12.9±1.7）μg/L，显著低于LFD+NS组［（18.3±1.2）μg/L］，差异有统计学意义（ P=0.020）；HFD+GSSH组小鼠睾酮浓度为（25.4±2.1）μg/L，显著高于HFD+NS组，差异有统计学意义（ P=0.030）。RT-PCR检测结果显示，与LFD+NS组小鼠相比，HFD+NS组小鼠睾丸所有被检测的睾酮合成关键基因（ StAR、3β- HSD、 Cyp11a1及 Cyp17a1）表达水平都显著下降（ P=0.003、 P=0.007、 P<0.001、 P<0.001）。这些基因的表达水平则在HFD+GSSH组小鼠睾丸中得到了恢复（ P=0.002、 P<0.001、 P<0.001、 P=0.006）。③与LFD+NS组小鼠［（9.00±1.59）nmol/mL］相比，HFD+NS组小鼠血清MDA水平［（10.61±1.73）nmol/mL］显著升高（ P=0.016）；与HFD+NS组小鼠相比，HFD+GSSH组小鼠血清MDA水平［（9.23±0.94）nmol/mL］下降，且具有统计学意义（ P=0.048）。④HFD+NS组的肥胖小鼠睾丸中NR5A1、EHD3、StAR与3β-HSD蛋白水平与LFD+NS组小鼠相比明显下调（ P=0.002、 P=0.012、 P=0.004、 P=0.043），HFD+GSSH组小鼠睾丸中NR5A1、EHD3、StAR与3β-HSD蛋白水平与HFD+NS组的肥胖小鼠相比则显著上升（ P<0.001、 P=0.017、 P=0.004、 P<0.001）。⑤TM3细胞在H 2O 2的存在下，NR5A1、Nrf2与SOD的表达水平皆发生显著下调（ P<0.001、 P=0.002、 P=0.004）。 结论:GSSH通过提高睾酮合成所需关键基因表达而改善HFD喂养的雄鼠睾酮水平。

Background::Although existing mycological tests (bronchoalveolar lavage [BAL] galactomannan [GM], serum GM, serum (1,3)-β-D-glucan [BDG], and fungal culture) are widely used for diagnosing invasive pulmonary aspergillosis (IPA) in non-hematological patients with respiratory diseases, their clinical utility in this large population is actually unclear. We aimed to resolve this clinical uncertainty by evaluating the diagnostic accuracy and utility of existing tests and explore the efficacy of novel sputum-based Aspergillus assays. Methods::Existing tests were assessed in a prospective and consecutive cohort of patients with respiratory diseases in West China Hospital between 2016 and 2019 while novel sputum assays (especially sputum GM and Aspergillus-specific lateral-flow device [LFD]) in a case-controlled subcohort. IPA was defined according to the modified European Organization for Research and Treatment of Cancer/Mycoses Study Group criteria. Sensitivity and specificity were computed for each test and receiver operating characteristic (ROC) curve analysis was performed. Results::The entire cohort included 3530 admissions (proven/probable IPA = 66, no IPA = 3464) and the subcohort included 127 admissions (proven/probable IPA = 38, no IPA = 89). Sensitivity of BAL GM (≥1.0 optical density index [ODI]: 86% [24/28]) was substantially higher than that of serum GM (≥0.5 ODI: 38% [39/102]) ( χ2 = 19.83, P < 0.001), serum BDG (≥70 pg/mL: 33% [31/95]) ( χ2 = 24.65, P < 0.001), and fungal culture (33% [84/253]) ( χ2 = 29.38, P < 0.001). Specificity varied between BAL GM (≥1.0 ODI: 94% [377/402]), serum GM (≥0.5 ODI: 95% [2130/2248]), BDG (89% [1878/2106]), and culture (98% [4936/5055]). Sputum GM (≥2.0 ODI) had similar sensitivity (84% [32/38]) (Fisher’s exact P = 1.000) to and slightly lower specificity (87% [77/89]) ( χ2 = 5.52, P = 0.019) than BAL GM (≥1.0 ODI). Area under the ROC curve values were comparable between sputum GM (0.883 [0.812-0.953]) and BAL GM (0.901 [0.824-0.977]) ( P = 0.734). Sputum LFD had similar specificity (91% [81/89]) ( χ2 = 0.89, P = 0.345) to and lower sensitivity (63% [24/38]) ( χ2 = 4.14, P = 0.042) than BAL GM (≥1.0 ODI), but significantly higher sensitivity than serum GM (≥0.5 ODI) ( χ2 = 6.95, P = 0.008), BDG ( χ2 = 10.43, P = 0.001), and fungal culture ( χ2 = 12.70, P < 0.001). Conclusions::Serum GM, serum BDG, and fungal culture lack sufficient sensitivity for diagnosing IPA in respiratory patients. Sputum GM and LFD assays hold promise as rapid, sensitive, and non-invasive alternatives to the BAL GM test.

目的:运用逆转录解旋酶等温扩增（RT-tHDA）和侧流层析技术，建立新型冠状病毒（2019-nCoV）核酸检测新方法。方法:收集2020年1至4月东部战区总医院基础医学实验室共143份2019-nCoV PCR阴性核酸标本和20份PCR阳性核酸标本。针对2019-nCoV N基因和E基因保守区序列各设计5对引物，扩增产物进行凝胶电泳分析，筛选出RT-tHDA最佳引物。分别扩增高浓度（5×10 5 拷贝/ml）、低浓度（5×10 2拷贝/ml）模拟标本，利用侧流层析试纸条（LFD）检测RT-tHDA扩增产物，使结果可视化。优化显色和扩增时间，建立tHDA-LFD最佳反应体系。该方法检测各低、中、高3种浓度的模拟标本15次，以阳性符合率来评估方法学精密度。制备模拟标本评价方法学检测限。分别检测甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒、冠状病毒229E，评价tHDA-LFD法的交叉反应性。采用tHDA-LFD法检测本实验室收集保存的163份标本，进行临床诊断效能评价。 结果:采用一步法RT-tHDA结合LFD，建立扩增时间为60 min的2019-nCoV核酸检测方法。该方法检测3种浓度的模拟标本，阳性符合率为100%，精密度和重复性较好，且与其他6种呼吸道病原体均未出现交叉反应。该方法检测N基因、E基因的最低检测限均为5×10 2 拷贝/ml。诊断效能评价结果显示，该法敏感度为95.00%（19/20），特异度为100.00%（143/143），阳性预测值为100.00%（19/19），阴性预测值为99.31%（143/144）。和金标准qPCR法相比，两种方法的 Kappa值为0.971（ P<0.000 1），一致性较好。 结论:本研究成功建立了基于tHDA-LFD法的2019-nCoV可视化检测方法。

目的:系统评价低碳水化合物饮食（low-carbohydrate diet，LCD）和低脂肪饮食（low-fat diet，LFD）在非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）生活方式治疗中的价值。方法:计算机检索PubMed、Embase、Web of Science、Cochrane、中国知网和万方数据库以及相关研究的参考文献和会议记录。由2名研究者独立筛选文献、提取数据、质量评价，采用R 4.4.1软件和RevMan 5.4.1进行Meta分析。使用随机效应模型分析异质和非异质结果。通过亚组分析识别异质性调节因子。采用漏斗图和peters检验分析潜在的发表偏倚。结果:搜索确定了1 170篇文章，其中9项研究符合本研究的纳入标准，包括510例参与者。Meta分析结果显示，LCD相比于LFD在NAFLD患者治疗后肝脏脂肪含量（intrahepatic lipid content，IHLC）的减少中差异没有统计学意义（ SMD：-0.31，95% CI：0.97～0.35， P=0.36），两种饮食模式治疗后的丙氨酸转氨酶 （SMD：-0.35，95% CI：0.94～0.24， P=0.24）和天冬氨酸转氨酶（ SMD：-0.45，95% CI：1.63～0.72， P=0.45）的降低差异无统计学意义。在亚组分析中，干预时间的不同可能是研究间异质性的原因。Meta分析未见明显发表偏倚。 结论:检索自随机对照研究的证据不支持LCD对NAFLD的治疗效果优于LFD。

目的:探讨以胸腔积液为主要临床表现的肺吸虫病（LFD）的临床特征及实用诊断方法。方法:报告1例就诊于十堰市太和医院的49岁男性患者，以"双侧下胸部间断钝痛、呼吸困难1年"为主诉，影像学表现为左侧胸腔积液的LFD患者的临床误诊经过，并分析其误诊原因。结果:本例以胸腔积液为主要表现的LFD患者被误诊为结核性胸腔积液长达1年余，后经内科胸腔镜发现其胸膜组织中存在嗜酸性粒细胞，以及外周血嗜酸性粒细胞绝对值高达2.64 × 109/L；结合患者肺吸虫抗原皮试（IDTPA）及肺吸虫血清抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）阳性结果，确诊为LFD。后患者院外遵医嘱口服吡喹酮（25 mg·kg-1·次-1、3次/d）4个疗程，达到临床治愈。结论:外周血及胸膜活检组织中嗜酸性粒细胞升高对LFD的诊断和疗效分析有重要意义。详细询问个人史，及时进行IDTPA是LFD早发现、早诊断的关键。

[目的]鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是对家禽危害最大的两种支原体,MG、MS的早期诊断是预防和控制禽支原体的关键环节.通过将重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)和测流层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD)相结合,建立一种操作便捷、反应快速、结果可视化、可同时检测MG、MS两种病原的快速检测方法.[方法]基于MG的mgc2 基因、MS的vlhA基因设计特异性引物和探针,优化反应时间、反应温度及引物配比建立双重LFD-RPA快速检测方法,评价其灵敏度、特异性、稳定性,同时对 120 份临床样品进行检测.[结果]双重LFD-RPA检测方法在 37℃下反应 5-10 min即可完成扩增,其RPA-MG-F2/R2、RPA-MS-F1/R1 最佳引物配比为 0.6∶1.4.MG、MS的最低检出限分别为 3.75 copies/μL、3.46 copies/μL.用该方法与OIE推荐的PCR方法对 120 份样品进行检测,二者符合率为 93.3%.[结论]MG、MS双重LFD-RPA检测方法在恒温条件下即可完成扩增,其操作简单、反应快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好,无需使用任何仪器即可观察到结果,适用于基层MG、MS单独感染或混合感染的现场快速检测.

为了揭示西藏高原温带植物旱柳的物候对气候变化响应的时空格局,利用2001-2022年泽当、日喀则和林芝3个观测站旱柳物候期数据(叶芽膨大期(LED)、展叶始期(LUD)、开花始期(FFD)、叶变色末期(LCD)和落叶末期(LFD)),以及逐 日平均气温(Tm)、最高气温(Tmax)、最低气温(Tmin)、气温 日较差(TDR)、相对湿度(RH)、降水量(Pr)、日照时数(S)和≥0℃积温(∑T0)等资料,采用线性回归、Pearson相关系数和逐步回归等方法进行了分析.结果表明:(1)空间上,西藏地区旱柳春季物候期(LED、LUD、FFD)林芝最早、日喀则最迟,秋季物候期(LCD、LFD)相反;生长季长度(LOS)为238～268 d,以林芝最大、日喀则最小.(2)时间尺度上,2001-2022年泽当、日喀则旱柳各物候期均呈推迟趋势,林芝旱柳秋季物候期趋于推迟;林芝和日喀则旱柳LOS显著延长,分别为11.90和6.12 d·10 a-1,泽当旱柳LOS缩短(-4.50 d·10 a-1).(3)旱柳生长季内Tm呈上升趋势,Tmax、Tmin趋势各不相同;泽当和日喀则TDR变大、Pr减少、S增加,林芝正好相反;林芝和日喀则∑T0显著增加,泽当∑T0明显减少.(4)对春季物候期影响最大的气象因子以气温为主,降水仅对泽当、林芝旱柳LCD以及泽当LFD的影响最大;季风指数(MI)只与泽当站旱柳LED、FFD呈显著相关,其他2站物候期相关性不显著;7月MI与Tm、Pr、S均存在显著的相关性,8月MI与S也有显著的负相关关系,这些气象因子虽不是影响物候期的主要因子,也会起到间接作用.