目的:观察益景汤拮抗高糖诱导的体外血-视网膜内屏障(iBRB)模型基底膜(BM)损害及机制.方法:分离、培养大鼠内皮细胞(ECs)和视网膜微血管周细胞(RMPs)构建体外iBRB模型,随机分成低糖组、高糖组、米诺环素组、益景汤组,分别予25 mmol/L葡萄糖、60 mmol/L葡萄糖、60 mmol/L葡萄糖+10 μg/mL米诺环素、60 mmol/L葡萄糖+10％益景汤含药血清干预,各组干预12 h后终止孵育.采用Western blot法检测各组BM相关蛋白[Ⅳ型胶原(collagen Ⅳ,C Ⅳ)、层黏连蛋白(laminin,LN)]及 MMPs/TIMPs 相关蛋白(MMP-2、MMP-3、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2)的表达.结果:与低糖组相比,高糖组、米诺环素组、益景汤组C Ⅳ蛋白表达增加,高糖组、米诺环素组LN蛋白表达增加(均P＜0.05).益景汤及米诺环素能够抑制高糖诱导的C Ⅳ、LN蛋白表达增加,益景汤组、米诺环素组与高糖组相比具有差异(均P＜0.05).与低糖组相比,高糖组、米诺环素组MMP-2、MMP-3、MMP-9 蛋白表达增加(均 P＜0.05).益景汤能够抑制高糖诱导的MMP-2、MMP-3、MMP-9蛋白表达增加,益景汤组与高糖组相比具有差异(均P＜0.05).低糖组、高糖组、米诺环素组、益景汤组各组之间TIMP-1、TIMP-2表达未见明显差异(均P＞0.05).结论:益景汤可能通过调控MMP-2、MMP-3、MMP-9、C Ⅳ、LN的表达,干预高糖介导的BM重塑,抑制iBRB的损害,从而干预DR.

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)H19对滋养细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)和金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)表达谱的影响。方法:在人早孕期绒毛外滋养细胞系HTR-8中过表达H19或干扰H19的表达，采用PCR及qPCR检测MMP和TIMP家族成员的mRNA表达水平。采用Western blot和明胶酶谱技术检测MMP蛋白表达水平及MMP蛋白活性。结果:PCR和qPCR结果显示，过表达H19可上调滋养细胞MMP-2及MMP-9 mRNA表达水平(均 P<0.05)、下调TIMP-3 mRNA表达水平( P<0.05)；而干扰H19表达则下调滋养细胞MMP-2及MMP-9 mRNA表达水平(均 P<0.05)、上调TIMP-3 mRNA表达水平( P<0.05)。Western blot结果显示，过表达H19可上调MMP-2蛋白表达水平( P<0.05)、下调TIMP-3蛋白表达水平(均 P<0.05)；而干扰H19表达则下调MMP-2蛋白表达水平( P<0.05)、上调TIMP-3蛋白表达水平( P<0.05)。明胶酶谱分析结果显示，过表达H19会增强滋养细胞MMP-2蛋白活性，而干扰H19表达会减弱滋养细胞MMP-2蛋白活性。 结论:H19调控滋养细胞MMP-2/TIMP3表达水平及MMP-2蛋白活性。

目的 研究血清、宫颈黏液抗米勒管激素(AMH)、基质金属蛋白酶(MMP)/金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)平衡结合阴道超声检查在二胎备孕妇女卵巢储备功能评估中的应用价值.方法 纳入研究对象共 76 例,为 2021 年 11 月至2022 年9月于东莞市石碣医院接受孕前检查的二胎备孕妇女.对所有受试者均开展阴道超声检查,并按照超声窦卵泡个数的差异分成正常组(卵巢功能正常,窦卵泡个数≥5 个)32 例及低下组(卵巢功能低下,窦卵泡个数<5 个)44 例.比较 2 组各项阴道超声参数,以及血清、宫颈黏液AMH和MMP/TIMP水平.采用Pearson线性相关法分析患者阴道超声参数、血清、宫颈黏液AMH、MMPs/TIMPs参数水平与窦卵泡个数的关系.通过受试者操作特征(ROC)曲线分析阴道超声参数及血清、宫颈黏液AMH、MMP/TIMP 水平单独和联合诊断卵巢功能低下的效能.结果 低下组子宫内膜厚度及卵巢容积分别为(3.83±1.17)mm、(5.59±1.34)cm3,相较于正常组[(4.54±1.52)mm、(7.62±2.41)cm3]更低(均P<0.05).低下组血清AMH水平为(2.11±0.65)ng/ml,相较于正常组(4.65±3.78)ng/ml 更低(P<0.05);而低下组和正常组的宫颈黏液 AMH 均为(0.08±0.02)ng/ml,差异无统计学意义(P>0.05).低下组血清、宫颈黏液MMP/TIMP水平分别为 1.19±0.65、1.34±0.32,相较于正常组(1.07±0.09、1.10±0.27)更高(均P<0.05).经Pearson相关分析发现,低下组窦卵泡个数与子宫内膜厚度、卵巢容积及血清AMH水平均呈正相关,而与血清、宫颈黏液MMP/TIMP水平均呈负相关(均P<0.05).经ROC曲线分析发现,阴道超声参数、血清AMH、血清和宫颈黏液MMP/TIMP水平联合诊断卵巢功能低下ROC曲线下面积为 0.869,高于于各项指标单独诊断(均P<0.05).结论 血清AMH、血清和宫颈黏液MMP/TIMP平衡结合阴道超声检查在二胎备孕妇女卵巢储备功能评估中的应用价值较高.

目的 分析喉鳞状上皮细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)家族及组织金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of matrix metalloproteinases,TIMPs)的基因表达谱,找出与LSCC相关性最高的基因进行进一步研究,探讨其蛋白的表达与临床病理特征相关性.方法 选取 28 例LSCC患者,采用含人类全基因组的基因芯片来检测MMPs及TIMPs在 4 例LSCC患者中共同上调或下调的基因.采用逆转录聚合酶链反应(reverse tran-scription-polymerase chain reaction,RT-PCR)及western blot检测24 例患者该基因和蛋白的表达来验证基因芯片结果,并研究该蛋白的表达与临床病理特征之间的关系.结果 基因芯片显示MMPs家族在LSCC与癌旁正常细胞之间的差异表达基因有14 个,其中 4 个基因仅表达上调,4 个基因仅表达下调,另有 6 个基因在部分患者中表达上调,而在另一部分患者中表达下调.未发现在 4 例患者中共同表达上调或下调的基因.TIMPs在LSCC与癌旁正常细胞之间全部表达下调,TIMP4 在 4 例患者中全部表达下调.RT-PCR检测结果显示TIMP4 基因在LSCC组织中低表达.western blot检测结果显示TIMP4 蛋白在LSCC组织中低表达,且TIMP4 蛋白的表达与淋巴结转移相关.结论 研究首次发现MMPs家族及TIMPs在LSCC的表达谱,并发现TIMP4 蛋白的表达与LSCC临床病理特征相关.未来TIMP4 蛋白可能作为LSCC潜在的治疗靶点.

目的:基于高效液相色谱法和体外实验探究红景天-鬼箭羽药对(下称"天羽"药对)抗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的配伍规律及作用机制.方法:通过高效液相色谱法测定"天羽"药对的单煎液以及不同配伍比例的合煎液(2∶1,1∶1,1∶2)中红景天苷的含量.通过体外实验CCK-8、PCR和Western Blot法检测肿瘤坏死因子α诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(human fibroblast-like synoviocyte rheumatoid arthritis,HFLS-RA)增殖、mRNA及蛋白表达.结果:"天羽"药对不同配伍比例(2∶1,1∶1,1∶2)的合煎液中红景天苷的含量均高于红景天单煎液,且配伍比例为1∶1时红景天苷的含量最高.CCK-8实验结果表明,"天羽"药对可对HFLS-RA细胞的增殖起到抑制作用.PCR和Western blot实验结果表明,"天羽"药对可显著降低HFLS-RA细胞中p-PI3K、p-AKT、MMP1、MMP3和MMP9 mRNA和蛋白的表达,增加TIMP1 mRNA和蛋白表达.结论:"天羽"药对可有效抑制HFLS-RA细胞增殖,其最佳的配伍比例为1∶1,作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路,进而调节MMPs/TIMPs平衡有关.

目的 探究心房颤动(简称房颤)患者左房心肌中胶原蛋白(Collagen)、弹性蛋白(Elastin)的表达水平以及调控弹性蛋白生成的基质金属蛋白酶(MMPs)、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)蛋白表达水平和纤维化程度.方法 收集房颤患者和窦性心律患者左房组织标本,用HE、Masson染色检测心肌纤维化,用免疫荧光法和蛋白免疫印迹法检测Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、Elastin、MMP-2、MMP-9和TIMP-2的蛋白表达变化.结果 与对照组(n=5)相比,房颤组(n=10)Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ 蛋白表达明显上调(0.42±0.17 vs 0.05±0.04,1.10±0.73 vs 0.23± 0.15,P 均＜0.05),Elastin 蛋白水平下降(0.47±0.27 vs 2.17±1.05,P＜0.05);MMP-2、MMP-9 蛋白表达增加,TIMP-2蛋白表达减少.结论 房颤左房弹性蛋白水平下降,胶原蛋白水平增加,引起纤维化程度加重,这一过程可能受MMP-2、MMP-9和TIMP-2的共同调控.

目的:退变椎间盘组织中PDCD5表达量与细胞凋亡、炎症因子、M M Ps/T IM Ps表达量的关系.方法:选择2O15年3月-2O17年2月期间在上海市第七人民医院接受手术治疗的腰椎间盘突出症患者作为LD H组、胸腰椎暴力性骨折患者作为对照组.收集椎间盘组织并测定PDCD5的m RN A 表达量以及凋亡分子、炎症因子、M M Ps/T IM Ps分子的蛋白含量.结果:LD H 组患者椎间盘组织中PDCD5的mRNA表达量显著高于对照组;LDH 组患者椎间盘组织中Caspase-3、Caspase-8、Fas、Caspase-9、Bax、SDF-1、CXCR-4、TNF-α、PGE2、MMP1、MMP2、MMP8、MMP9的蛋白含量显著高于对照组,且与PDCD5的m RN A表达量呈正相关,T IM P1、T IM P2的蛋白含量显著低于对照组且与PDCD5的m R-N A表达量呈负相关.结论:退变椎间盘组织中PDCD5的高表达能够激活细胞凋亡及炎症反应并造成M M Ps/T IM Ps失衡.

目的 探讨复方丹参注射液对孕晚期羊水过少孕妇胎盘组织基质金属蛋白酶(MMPs)、金属蛋白酶组织抑制物(TIMPs)、炎症因子及宫腔环境的影响.方法 孕晚期羊水过少孕妇60例随机均分成常规治疗组(n=30)和复方丹参注射液治疗组(n=30),常规治疗组接受常规水化治疗,复方丹参注射液组加用复方丹参注射液30 mL,用药持续至分娩前结束,同时入选30例正常孕妇作为对照组,胎儿娩出后取胎盘组织检测基质金属蛋白酶-2 (MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制因子-2 (TIMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6),评估各组治疗前后宫腔环境的改变.结果 与对照组比较,常规治疗组MMP-2、MMP-9明显下降,TIMP-2、TIMP-1、IL-6、TNF-α明显升高,复方丹参注射液组MMP-2明显下降,IL-6、TNF-α明显升高;与常规治疗组比较,复方丹参注射液组MMP-2、MMP-9明显升高,TIMP-2、IL-6、TNF-α明显下降;复方丹参注射液组治疗后患者羊水指数(AFI)显著升高,胎儿脐动脉血流收缩期最大血流速率与舒张末期血流速率比值(S/D)、胎儿脉搏指数(PI)显著下降;差异具有统计学意义(P＜0.05),MPP-2、TIMP-2在常规治疗组及复方丹参注射液组内都有负相关(r=-0.506、-0.669).结论 复方丹参注射液能有效改善孕晚期羊水过少孕妇胎盘组织MMPS/TIMPs系统的失平衡和炎症因子的异常表达,改善宫腔环境.

目的:研究冠脉CTA对冠状动脉斑块性质的评估价值及其与炎症分子、MMPs/TIMPs的相关性.方法:选择在本院诊断为急性冠脉综合征的患者作为研究的ACS组、诊断为稳定性心绞痛的患者作为研究的SAP组,同期接受体检的健康者作为研究的对照组.采用冠脉CTA检查判断ACS组患者冠状动脉斑块的性质,采集三组受试者血清并测定炎症分子、MMPs/TIMPs胶原代谢分子的含量.结果:ACS组、SAP组患者血清中MIP-1α、MCP-1、sFGL-2、sCD14、CXCL5、Ⅰ-CTP、Ⅲ-CTP、EMMPRIN的含量显著高于对照组,TIMP1、TIMP2的含量显著低于对照组;ACS组患者血清中MIP-1α、MCP-1、sFGL-2、sCD14、CXCL5、Ⅰ-CTP、Ⅲ-CTP、EMMPRIN的含量显著高于SAP组,TIMP1、TIMP2的含量显著低于SAP组.软斑块、纤维斑块ACS患者血清中MIP-1α、MCP-1、sFGL 2、sCD14、CXCL5、Ⅰ-CTP、Ⅲ CTP、EMMPRIN的含量显著高于钙化斑块患者,TIMP1、TIMP2的含量显著低于钙化斑块患者;软斑块ACS患者血清中MIP-1α、MCP-1、sFGL-2、sCD14、CXCL5、Ⅰ-CTP、Ⅲ-CTP、EMMPRIN的含量显著高于纤维斑块患者,TIMP1、TIMP2的含量显著低于纤维斑块患者.结论:冠脉CTA对冠状动脉斑块性质的评估与炎症反应及MMPs/TIMPs胶原代谢的改变密切相关.

近年来近视的发病率逐年增高.多项针对近视动物模型的实验及人体临床研究均表明基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制剂基质金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)在近视发生发展中发挥着重要作用.笔者从基因表达、mRNA水平、蛋白质浓度等多个方面探讨了MMPs/TIMPs对巩膜及眼内其他组织的影响,并对其与近视发生机制的关系作一总结.