目的:基于永离有丝分裂基因A相关激酶9(NEK9)/转移相关肿瘤基因家族2(MTA2)信号通路泛素化修饰探讨胃癌(GC)的转移机制.方法:使用癌症基因组图谱(TCGA)和Kaplan-Meier Plotter数据库分析NEK9表达与GC分期、预后之间的关联.体外实验中,将GC细胞分为:对照组、shNC 组、shNEK9 组、shNC+NC-OE 组、shNEK9+NC-OE 组和 shNEK9+MTA2-OE 组.分别采用 MTT 和Transwell法测定细胞的增殖、迁移和侵袭,并通过 Western blot检测 NEK9、MTA2、上皮间充质转化(EMT)标记和PI3K/AKT信号通路蛋白表达.结果:TCGA数据库分析显示,NEK9 mRNA在肿瘤组织中的表达明显上调,并且与TNM分期较晚和NEK9高表达者的预后较差密切相关.此外,NEK9在7个GC细胞系中的表达明显高于正常胃上皮GES-1细胞(P＜0.05).与对照组相比,shNEK9组细胞活力、相对集落形成、EdU阳性细胞数、侵袭和迁移细胞数均显著降低(P＜0.05).此外,在shNEK9组细胞中,E-钙粘蛋白水平上调(P＜0.05),波形蛋白水平下调(P＜0.05).通过免疫共沉淀试验证明NEK9与MTA2有相互作用.NEK9敲低加速了 HGC-27细胞中MTA2的降解,并且 MTA2泛素化在NEK9沉默的细胞中增加.与shNEK9+NC-OE组组相比,shNEK9+MTA2-OE组相对集落形成、EdU阳性细胞数和迁移和侵袭数均显著增加(P＜0.05).结论:NEK9在GC中明显上调,其敲低在体外抑制GC细胞的生长和转移.NEK9可能通过去泛素化途径稳定 MTA2进而激活PI3K-AKT信号通路来对GC细胞产生促癌影响.

目的:探讨抑制转移相关基因1(MTA1)的表达对人食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用脂质体转染法将MTA1 siRNA转染至人食管癌Eca109细胞，同时设置转染对照组和空白对照组。通过实时荧光定量PCR法和Western blot法检测转染对Eca109细胞中MTA1 mRNA和蛋白表达的影响。采用MTT法检测各组Eca109细胞的增殖能力，采用平板克隆实验检测各组Eca109细胞的克隆形成能力，采用流式细胞术检测各组Eca109细胞的凋亡情况，采用Western blot法检测各组Eca109细胞增殖细胞核抗原(PCNA)和凋亡相关蛋白caspase-3和cleaved caspase-3蛋白的表达水平。结果:人食管癌Eca109细胞转染MTA1 siRNA 48 h后，实时荧光定量PCR法检测结果显示，空白对照组、转染对照组和MTA1 siRNA组Eca109细胞中MTA1 mRNA的相对表达量分别为1.00±0.10、0.98±0.09和0.21±0.03，MTA1 siRNA组Eca109细胞中MTA1 mRNA的表达水平被抑制，与空白对照组和转染对照组比较，差异有统计学意义( P<0.05)。而空白对照组与转染对照组比较，MTA1 mRNA的表达水平差异无统计学意义( P>0.05)。Western blot法检测结果与实时荧光定量PCR法检测结果一致。MTT法检测结果显示，与空白对照组和转染对照组比较，MTA1 siRNA组Eca109细胞在48、72和96 h时的吸光度( A)值均明显降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；而空白对照组与转染对照组48、72和96 h时的 A值差异无统计学意义(均 P>0.05)。平板克隆形成实验检测结果显示，空白对照组、转染对照组和MTA1 siRNA组Eca109细胞的克隆形成数分别为(58.64±6.86)个、(60.02±7.04)个和(18.10±3.16)个，差异有统计学意义( P<0.05)；空白对照组与转染对照组比较，细胞克隆形成能力差异无统计学意义( P>0.05)。流式细胞术检测结果显示，空白对照组、转染对照组和MTA1 siRNA组Eca109细胞的凋亡率分别为(2.13±0.54)%、(2.27±0.61)%和(32.61±5.28)%。MTA1 siRNA组Eca109细胞的凋亡率明显升高，与空白对照组和转染对照组比较，差异有统计学意义( P<0.05)；而空白对照组与转染对照组比较，差异无统计学意义( P>0.05)。Western blot法检测结果显示，MTA1 siRNA组Eca109细胞中PCNA蛋白的表达下调，cleaved caspase-3蛋白的表达水平升高，与转染对照组和空白对照组比较，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:抑制MTA1基因的表达能够抑制人食管癌Eca109细胞的增殖，诱导细胞凋亡，其过程可能与下调PCNA蛋白的表达、促进caspase-3蛋白的活化有关。

目的:检测转移相关蛋白1(MTA1)在甲状腺癌细胞系和甲状腺癌组织的表达，探讨其是否参与介导了甲状腺癌细胞的上皮-间充质转化(EMT)。方法:采用蛋白质印迹法(Western blot)检测MTA1在5个甲状腺癌细胞株和来自河南大学第一附属医院的153例甲状腺癌组织的蛋白质表达水平。应用小分子干扰RNA(siRNA)抑制MTA1，光学显微镜下观察对细胞形态的影响，Western blot检测对EMT信号通路蛋白的影响。采用 T检验和方差分析进行统计学分析。 结果:MTA1在未分化甲状腺癌细胞系HTh83和KMH-2中高表达，而在乳头状癌细胞系TPC-1、K1和滤泡状癌细胞系FTC133中低表达或者不表达。MTA1在30%的甲状腺癌组织中高表达。MTA1在颈淋巴结阳性者中的表达高于在颈部淋巴结阴性者中的表达( χ2＝44.449， P<0.01)，差异有统计学意义，在有远处转移者中的表达高于在无远处转移者中的表达( χ2＝14.807， P<0.01)，差异有统计学意义，与原发灶大小无明显相关( χ2＝0.627， P>0.05)，差异无统计学意义。应用siRNA抑制MTA1在HTh83细胞中的表达，能够使该细胞系由间质样转变成上皮样生长。Western blot检测发现抑制MTA1的表达可以使N-Cadherin的表达明显升高，而同时E-Cadherin表达明显降低。 结论:MTA1可能在未分化甲状腺癌细胞中表达水平更高，与转移扩散关系密切，可能参与了甲状腺癌的EMT。

目的:探讨高压氧(HBO)干预对体外培养的正常和缺氧状态人视网膜色素上皮(RPE)细胞氧化损伤的影响。方法:体外培养正常和缺氧状态(200 μmol/L CoCl 2干预)人RPE-19细胞，随机分成对照组(正常对照组和缺氧对照组)和HBO组[正常HBO组(0.15 MPa HBO组，0.20 MPa HBO组，0.25 MPa HBO组)和缺氧HBO组(缺氧+0.15 MPa HBO组，缺氧+0.20 MPa HBO组，缺氧+0.25 MPa HBO组)]。各HBO组在纯氧下分别暴露60、90 min，每隔24 h暴露一次，共暴露2次。以MTT法检测各组RPE细胞的增殖活力；以免疫细胞化学方法检测RPE细胞内8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)的表达量；以Western blotting法检测RPE细胞内人8-羟基鸟嘌呤糖苷酶(hOGG1)的表达量。每组实验均重复3次。 结果:在HBO干预60、90 min后，对于正常RPE细胞，与正常对照组相比，各压力HBO干预组细胞OD 570值均降低( P<0.01)，且随着压力的升高而降低( P<0.05)；细胞内8-OHdG表达量明显增加( P<0.01)，且随着压力的升高而增加( P<0.05)；细胞内hOGGl表达量增加( P<0.01)，且在60min组随着压力的升高而降低( P<0.05)。对于缺氧RPE细胞，与缺氧对照组相比，各压力HBO干预组细胞OD 570值均升高( P<0.01)，且在60 min组随着压力的升高而升高( P<0.01)；细胞内8-OHdG表达量明显降低(60 min P<0.01, 90 min P<0.05)，且60 min组随着压力的升高而降低( P<0.05)；细胞内hOGGl表达量明显增加( P<0.01)，且随着压力的升高而增加(60 min P<0.05, 90 min P<0.01)。 结论:HBO暴露可导致正常RPE细胞的氧化损伤，但可修复缺氧导致的RPE细胞的氧化损伤。

肝细胞癌(HCC)是我国常见的恶性肿瘤。目前，肝切除仍是早期HCC的主要治疗手段，但能获得根治性切除的病例不足20%，超80%患者确诊时已是晚期。采用联合或序贯肝动脉化疗栓塞(TACE)、射频消融、分子靶向药物、免疫检查点抑制剂(ICIs)等方案已成为目前治疗晚期肝癌的主要模式。当前关于免疫检查点抑制剂的研究主要集中在程序性细胞死亡蛋白(PD-1)及其配体(PD-L1)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4 (CTLA-4)等。自Nivolumab及Pembrolizumab获批用于HCC二线治疗以来，越来越多的免疫检查点抑制剂联合方案相继进入临床试验阶段，初步显示了其在HCC免疫治疗方面的良好临床效果和应用前景。本文就目前免疫检查点抑制剂药物的单药、联合治疗方案在HCC中的相关研究展开综述。

目的:探讨磁共振成像(MRI)特征视觉评分在路易体痴呆(DLB)诊断、DLB分级诊断中的应用价值。方法:本研究前瞻性收集了102例DLB患者和102例认知正常中老年人作为正常对照组(NC)。全部研究对象均进行了MRI检查和神经心理学评估。根据临床痴呆评定量表(CDR)评分将入组的DLB患者分为轻度(CDR＝1.0)、中度(CDR＝2.0)和重度(CDR＝3.0)3组。对MRI检查结果进行视觉评分，评定量表包括：内侧颞叶萎缩(MTA)、全脑皮质萎缩-额叶(GCA-F)、后部皮质萎缩(PCA)、脑白质损害(Fazekas)、脑微出血(CMBs)和埃文斯指数(EI)。分别比较上述指标在DLB组和NC组之间、不同严重程度的DLB组之间的统计学差异。结果:神经心理学方面DLB组[16.0(11.0，21.0)]分的简易精神状态检查(MMSE)评分明显低于NC组[29.0(28.0，30.0)]分( Z＝－12.31， P<0.001)，DLB组[9.5(6.0，15.0)]分的蒙特利尔认知评估测试(MoCA)评分明显低于NC组[28.0(27.0，29.0)]分( Z＝－12.40， P<0.001)，DLB组[32.0(23.8，40.0)]分的日常生活能力(ADL)评分明显高于NC组[20.0(20.0，20.0)]分( Z＝－11.98， P<0.001)。DLB患者的所有MRI视觉评定量表的评分均高于NC组( P<0.001)。不同严重程度的DLB患者之间比较，MTA评分差异有统计学意义( P0<0.001)，轻度组[1.0(1.0，2.0)]分的MTA低于中度组[2.0(1.0，2.0)]分( P1<0.001， P2<0.001)；中度组[2.0(1.0，2.0)]分的MTA低于重度组[2.0(2.0，3.0)]分、( P1＝0.003， P2＝0.010)。 结论:评价了多种视觉评分在DLB诊断中的意义，并明确了MTA可用于协助诊断DLB及区分DLB严重程度，为临床诊断提供了新的辅助工具。

核小体重塑与去乙酰化酶(NuRD)复合物是同时具有组蛋白去乙酰化和染色质重塑活性的独特复合物，在转录调节和DNA损伤修复过程中发挥重要功能。近年研究发现，NuRD复合物在γ珠蛋白的调控中，亦发挥重要作用。NuRD复合物中的多个亚基，如染色质螺旋酶DNA结合蛋白(CHD)、甲基化CpG结合蛋白(MBD)、GATA锌指结合域蛋白(GATAD)2、组蛋白去乙酰化酶(HDAC)1/2，以及转移相关蛋白(MTA)亚基等，通过不同机制参与沉默γ珠蛋白表达，并且NuRD复合物与其他调控γ珠蛋白表达的转录因子之间亦有相互作用。基于提升γ珠蛋白的表达是治疗β血红蛋白病的策略之一，笔者拟就NuRD复合物及其亚基在γ珠蛋白表达调控中的具体机制的研究进展进行综述，旨在为治疗β血红蛋白病寻找新的分子调控靶点提供参考。

目的:分析轻中度阿尔茨海默病（AD）患者肌肉力量与认知功能、内侧颞叶萎缩（MTA）间的相关性。方法:选取2021年1—12月在苏州大学附属第二医院神经内科记忆障碍门诊确诊的80例AD患者（轻度41例，中度39例）和同期体检中心体检的43名对照者（NC），收集一般资料、肌少症相关指标、神经心理学测试与MTA评分。肌少症相关指标中四肢骨骼肌量指数（ASMI）评估肌肉量，握力与5次起坐时间评估肌肉力量，6 m步速评估躯体功能。认知功能量表为简易精神状态量表（MMSE）、蒙特利尔认知评估量表（MoCA）、记忆与执行功能筛查量表（MES）、数字符号转换测验（DSST）、数字广度测试（DST）、词语流畅性试验（VFT），DST包括顺序（FDST）和倒序（BDST）。受试者均行3.0 T颅脑冠状位三维梯度回波序列磁共振检查，MTA量表评估内侧颞叶萎缩程度。分析三组肌少症相关指标、认知评分、MTA评分间的差异，并且两两之间进行偏相关分析。结果:80例AD患者，男24例、女56例，年龄（72±7）岁，其中轻度AD患者41例，中度AD患者39例；43名NC，男19名、女24名，年龄（70±6）岁。中度AD组病程长于轻度AD组［34.0（25.0，43.5）个月比24.0（11.0，34.0）个月， P<0.001］。三组肌少症相关指标及MTA评分比较，组间差异均有统计学意义（均 P<0.001），如5次起坐时间［（13.6±1.8）s比（11.5±1.7）s比（10.3±1.9）s， P<0.001］，MTA评分［2.0（2.0，3.0）分比1.0（1.0，2.0）分比0（0，0）分， P<0.001］。神经心理学测试中，轻、中度AD组MMSE、MoCA、MES、VFT得分均低于NC组，且中度AD组低于轻度AD组（均 P<0.001）。AD组肌少症相关指标中，尤其是肌肉力量，与多个认知功能领域和MTA评分相关。握力与MMSE、MoCA、MES、FDST（ r=0.387、0.418、0.522、0.484，均 P<0.001）、DSST（ r=0.327， P=0.006）、VFT得分（ r=0.354， P=0.003）呈正相关，与MTA评分（ r=-0.631， P<0.001）呈负相关；5次起坐时间与MMSE、MoCA、MES、DSST、FDST、VFT（ r=-0.583、-0.587、-0.814、-0.591、-0.552、-0.485，均 P<0.001）、BDST（ r=-0.355， P=0.003）得分呈负相关，与MTA评分（ r=0.836， P<0.001）呈正相关；ASMI与MMSE、MoCA、MES、DSST、FDST得分（ r=0.257、0.238、0.428、0.282、0.364，均 P<0.05）呈正相关，与MTA评分（ r=-0. 377， P=0.001）呈负相关；6 m步速与MMSE、MoCA、MES、DSST、FDST（ r=0.419、0.486、0.699、0.559、0.500，均 P<0.001）、BDST和VFT得分（ r=0.384、0.377，均 P=0.001）呈正相关，与MTA评分（ r=-0.803， P<0.001）呈负相关。 结论:轻中度AD患者认知功能广泛性受损，肌肉量、肌肉力量、躯体功能均明显减退。相较肌肉量与躯体功能，肌肉力量下降与广泛性认知功能减退和MTA程度增加显著相关。

目的:明确基质金属蛋白酶-8(MMP-8)对食管鳞癌EC109细胞增殖、迁移能力的影响，探索其可能的作用机制。方法:培养食管上皮细胞Het-1A和食管鳞癌细胞株(EC109、CEC2、KYSE150、TE-1细胞)，采用PCR实验筛选出MMP-8低表达细胞系EC109细胞进行质粒转染，其中MMP-8过表达质粒为MMP-8过表达组，空载体质粒为空载体组。采用流式细胞分选技术扩增培养成功转染的细胞，并构建稳转细胞系。通过MTT实验和细胞划痕愈合实验检测两组细胞增殖、迁移能力的变化，通过qRT-PCR实验检测两组细胞中增殖迁移相关基因的mRNA表达情况。结果:在各食管鳞癌细胞株中，MMP-8在EC109细胞系中表达水平最低。与空载体组相比，MMP-8过表达组细胞增殖、迁移能力明显增强，增殖、迁移相关基因AKT1、RAC1、p53、EGFR、MTA1和RARRES1 mRNA表达水平明显升高，差异有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:MMP-8蛋白可增强食管鳞癌EC109细胞的增殖、迁移能力。MMP-8过表达可促进增殖、迁移相关基因mRNA表达，可能与其促进EC109细胞增殖、迁移有关。

目的:探讨电针（electroacupuncture, EA）对脑缺血再灌注损伤后血管再生的影响及肿瘤转移相关蛋白1（metastasis-associated genes 1, MTA1）在其中的作用。方法:80只8~10周龄C57小鼠采用随机数字表法分为5组（每组16只）：假手术组（Sham组）、脑缺血再灌注损伤组[大脑中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion, MCAO）组]、EA治疗组（EA组）、对照干扰小RNA（small interfering RNA, siRNA）组（Control siRNA组）、MTA1 siRNA组。Sham组不做任何处理；MCAO组行MCAO，在建模后第3天仅接受麻醉及针刺，不给予EA刺激，连续5 d；EA组MCAO建模后第3天，在"百会"穴进行EA治疗，连续5 d；Control siRNA组MCAO建模后在缺血半暗带区注射对照siRNA，后续处理同EA组；MTA1 siRNA组MCAO建模后在半暗带区注射MTA1 siRNA，后续处理同EA组。采用神经功能学评分、2，3，5-氯化三苯基四氮唑（2, 3, 5-triphenyltetrazolium chloride, TTC）和TUNEL染色法分别测定神经功能、脑梗死面积和神经元凋亡数量，同时采用Western blot法检测MTA1、裂解的胱天蛋白酶-3（cleaved caspase-3）和血管性血友病因子（von willebrand factor, vWF）蛋白水平；RT-PCR法测定MTA1 mRNA水平；免疫荧光法标记血管内皮并计算血管密度；比较各组小鼠MCAO术前、术中及术后PaO 2、PaCO 2、pH、脑血流量及肛温变化情况。 结果:与MCAO组比较，EA组和Control siRNA组神经功能学评分、vWF蛋白水平及血管密度增加（ P<0.05），而脑梗死面积、cleaved caspase-3蛋白水平及神经元凋亡数量减少（ P<0.05）；EA组MTA1蛋白水平及MTA1 mRNA水平增加（ P<0.05）。与Control siRNA组比较，MTA1 siRNA组神经功能学评分、vWF蛋白水平及血管密度降低（ P<0.05），脑梗死面积、cleaved caspase-3蛋白水平及神经元凋亡数量增加（ P<0.05）。与Sham组比较，其余4组小鼠术中脑血流量明显减少（ P<0.05），MCAO组和EA组MTA1蛋白水平及MTA1 mRNA水平增加（ P<0.05）。其余各组指标差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:EA通过上调MTA1促进血管生成改善脑缺血再灌注损伤后神经功能。