本文报道了1例多囊肾孕妇2次妊娠胎儿均颈项透明层（nuchal translucency，NT）增厚。第一次妊娠胎儿孕12周 +5 NT值5.1 mm，孕32周早产后新生儿因呼吸功能不全及重度窒息夭折。此次妊娠胎儿孕12周NT值5.7 mm，经全外显子组测序及Sanger测序验证，证实已夭折患儿及胎儿 NEB基因均存在母源性c.4255_4256del及父源性c.18366+2T>C复合杂合变异，均为致病变异，诊断胎儿为先天性多发性关节挛缩症6型（arthrogryposis multiplex congenita 6，AMC6），经遗传咨询，孕妇选择终止妊娠。全外显子组测序联合多重连接探针扩增技术诊断孕妇为 PKD1基因25~43号外显子大片段缺失导致的多囊肾1型患者。

目的:探讨NEB基因突变致杆状体肌病的临床、肌肉病理和基因突变特点。方法:回顾性分析2019—2021年于山东大学齐鲁医院神经肌肉病理研究室确诊的3例杆状体肌病患者的临床表现、辅助检查、肌肉病理和基因检测的结果，同时结合相关文献进行复习。结果:3例患者均为青春期起病，起病症状均为双下肢无力，体格检查均可见高腭弓和狭长脸，肌电图提示肌源性损害。3例患者的肌肉活组织检查（活检）均可见肌营养不良样表现和肌纤维内杆状体结构堆积。病例1 ATP酶染色可见Ⅰ型纤维优势和群组化。基因检测发现病例1存在NEB基因c.21522+3A>G和c.3471dupC（p.N1158Qfs *5）2种突变；病例2存在c.21522+3A>G和c.18991_18992delAG（p.Q6332Afs *8）复合杂合突变；病例3存在c.21522+3A>G和c.3448A>T（p.K1150 *）复合杂合突变。3例患者的NEB基因均存在c.21522+3A>G突变，文献复习发现该突变仅在中国人群中有报道；c.3471dupC（p.N1158Qfs *5）、c.18991_18992delAG（p.Q6332Afs *8）和c.3448A>T（p.K1150 *）经查阅文献目前国内外均无报道。根据美国医学遗传学与基因组学学会指南的相关内容，c.21522+3A>G、c.3471dupC（p.N1158Qfs *5）、c.3448A>T（p.K1150 *）和c.18991_18992delAG（p.Q6332Afs *8）均被评级为致病变异。 结论:杆状体肌病的起病年龄和症状表现具有异质性，肌肉活检和基因检测是杆状体肌病最重要的诊断方法。NEB基因c.21522+3A>G突变可能在中国人群中是较常见的突变。

目的:探讨NEB基因突变所致杆状体肌病患者的临床、病理和基因突变特点。方法:收集1997年1月至2020年1月于焦作市人民医院肌病中心，经肌肉活组织检查（活检）病理和基因检测明确诊断为NEB基因突变所致杆状体肌病患者的临床和病理资料，采用二代测序方法对所有患者进行NEB基因检测，并对基因突变特点进行分析。结果:共收集11例杆状体肌病患者，其中男性8例，女性3例，有6例分别来自2个家系。患者就诊年龄为11~52岁，发病年龄为6~23岁，病程为5~35年。神经系统检查：11例患者中8例有高腭弓长脸型，双上肢肌张力正常，腱反射减低，近端肌力Ⅲ~Ⅴ级，远端肌力Ⅴ级。双下肢肌张力减低，腱反射消失，近端肌力Ⅱ~Ⅳ级，远端肌力Ⅲ~Ⅴ级。均无吞咽困难和呼吸肌受累。11例患者中有7例行肌肉活检，病理检查可见肌纤维大小不等，有萎缩肌纤维和代偿性肥大纤维，偶见变性坏死肌纤维。7例患者均可见不同程度的杆状体聚集。5例患者行电镜检查，均发现肌原纤维间有杆状体聚集，且多位于Z带附近，未发现有核内杆状体。11例患者基因检测结果均发现致病基因NEB，并且共检测到9个不同的突变位点，其中外显子区域突变位点8个，内含子区域突变位点1个。其中c.21522+3A>G位点突变10例，c.1623delT位点突变3例，c.17611C>T位点突变3例。其余位点c.4417C>T、c.2549delA、c.21065dupA、c.3520G>A、c.20943G>A、c.192G>A突变各1例。结论:NEB基因突变所致杆状体肌病的临床表型有较大的异质性，肌肉病理检查发现杆状体聚集是诊断该病的重要依据。内含子区域的c.21522+3A>G位点是本组NEB基因最常见的突变位点，c.17611C>T、c.2549delA、c.3520G>A、c.21065dupA、c.20943G>A和c.192G>A为NEB基因新的突变位点。

目的:观察小青龙汤加减治疗小儿支原体肺炎的临床疗效.方法:将 92 例小儿支原体肺炎患者按照随机数字表法分为对照组和研究组,每组46 例.对照组给予常规治疗,肺炎急性期使用布地奈德雾化液雾化治疗,肺炎症状缓解期使用孟鲁司特钠咀嚼片口服治疗.研究组在对照组治疗的基础上给予小青龙汤加减治疗.观察两组患者临床疗效、肺功能[用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、最大呼气流速(peak expiratory flow,PEF)以及第1 秒用力呼气容积(forced expiratory volume in the first second,FEV1)]、气道高反应性、复发情况,并检测血清白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-5 与外周血嗜酸性粒细胞(eo-sinophil,EOS)水平.结果:研究组有效率91.30%,对照组有效率为 76.09%,研究组有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).研究组治疗后FVC、PEF、FEV1 水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).研究组治疗后最小诱发累积量、促使气道阻力增加至基础值的135%所需要的组胺累积剂量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).研究组治疗后血清IL-4、IL-5 与外周血EOS低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).研究组复发率为19.05%(8/42),对照组复发率为42.86%(15/35),研究组复发率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:小青龙汤加减治疗治疗小儿支原体肺炎,能改善患者肺功能,减轻患儿气道高反应性,调节血清IL-4、IL-5 水平以及外周血EOS水平,降低复发率.

目的 比较雾化肺表面活性物质(PS)与微创PS治疗新生儿呼吸窘迫综合征的临床疗效.方法 回顾性选取2020年2月至2022年2月海南省妇女儿童医学中心呼吸窘迫综合征患儿100例,依据PS治疗方法分为雾化组和微创组,各50例.雾化组通过振动筛网雾化器系统注射PS,微创组在喉镜引导下经声门向气管插入一次性使用呼吸道用吸引导管,向气管注入PS.比较两组患儿机械通气参数[吸气峰压、呼气末正压(PEEP)、呼吸频率],血气指标[吸入氧浓度(FiO2)、动脉血氧分压(PO2)、动脉血氧饱和度(SaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)],肺功能[第1 s用力呼气容积(FEV1)、用力呼气量(FVC)、FEV1/FVC],炎症因子[核因子-κB(NF-κB)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)]水平,支气管肺发育不良发生情况.使用PS(PS)次数、吸氧时间、无创通气时间、总通气时间、住院时间、临床疗效及并发症发生情况.结果 治疗后,两组患儿的吸气峰压、PEEP、FiO2、PaCO2均明显低于治疗前,PaO2、SaO2、FEV1、FEV1/FVC均明显高于治疗前,差异均有统计学意义(P＜0.05);但两组患儿治疗后的吸气峰压、PEEP、呼吸频率、FiO2、PO2、SaO2、PaCO2、FEV1、FVC、FEV1/FVC之间的差异均无统计学意义(P＞0.05).治疗后,两组患儿的NF-κB、IFN-γ、CRP、降钙素原水平均明显低于治疗前,IL-10水平均明显高于治疗前,差异均有统计学意义(P＜0.05);但两组患儿治疗后的NF-κB、IFN-γ、IL-10、CRP、PCT水平比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).雾化组患儿的支气管肺发育不良发生率为40.00％,明显低于微创组(64.00％),差异有统计学意义(P＜0.05).雾化组患儿的吸氧时间、住院时间分别为(45.02±7.12)、(63.02±9.45)d,明显短于微创组[(56.02 ±9.25)、(74.02±9.25)d],差异均有统计学意义(P＜0.05);但两组患儿的使用PS次数、无创通气时间、总通气时间之间的差异均无统计学意义(P＞0.05).两组患儿的总有效率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).两组患儿的并发症发生率之间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 雾化PS与微创PS治疗新生儿呼吸窘迫综合征的临床疗效相当,但雾化PS更能减少患儿的支气管肺发育不良的发生,缩短患儿的吸氧时间和住院时间.

目的 探讨老年股骨转子间骨折行股骨近端防旋髓内钉(proximal femoral nail internal fixation,PFNA)内固定,骨折断端内侧骨皮质的阳性支撑(positive buttress,PB)、中性支撑(neutral buttress,NEB)和阴性支撑(negative buttress,NB)的临床疗效.方法 选取2020年1月至2021年1月宜昌市中心人民医院采用PFNA治疗的87例老年股骨转子间骨折患者.依据术后3 d髋关节正位X线片上头颈骨折块内侧皮质与远侧股骨干骨折端内侧壁的对位关系分为PB组、NEB组和NB组.PB组30例,其中男13例,女17例;年龄61～89岁,平均(71.42±8.24)岁.NEB组36例,其中男16例,女20例;年龄61～90岁,平均(72.81±16.63)岁.NB组21例,其中男7例,女14例;年龄63～88岁,平均(70.68±16.59)岁.记录并比较各组患者的基本情况及损伤特征,测量各组患者手术后第3天及术后6个月髋关节正位X线片颈干角、股骨颈长度,统计患者术后1年随访时的髋关节Harris评分.结果 三组患者均获得13～17个月的随访,平均(14.6±3.8)个月.术后6个月,PB组、NEB组患者股骨颈短缩及颈干角减小程度均显著低于NB组(P＜0.05),NEB组颈干角减小及股骨颈短缩程度低于PB组(P＜0.05).术后12个月,PB组和NEB组患者术侧髋关节Harris评分均高于NB组(P＜0.05).结论 PFNA内固定治疗老年股骨转子间骨折时骨折断端内侧皮质应尽量NEB复位,如若不能应尽量避免NB复位,否则容易导致头颈短缩及髋内翻.

目的:利用生物信息学方法筛选舌癌的关键基因,探讨其与舌癌进展相关的潜在功能和通路机制.方法:分析微阵列数据集GSE13601,筛选出差异表达基因.利用注释、可视化和集成发现数据库(DAVID)进行基因本体论(GO)及京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路分析.利用STRING数据库构建蛋白质相互作用网络、癌症基因组图谱数据库(TCGA)测序数据评估舌癌关键基因的表达.结果:共筛选出 101 个差异表达基因及 20 个关键基因,进一步研究发现,MYH2、MYLPF、NEB、ACTN2、DES、TMP2 等关键基因影响舌癌患者的生存率,并且MYH2、MYLPF、ACTN2、DES、TPM2、TNNC1、MYL1、MYH7 和 TNNI2 等基因的表达与舌癌的临床分期相关.结论:MYH2、MYLPF、NEB、ACTN2、DES、TMP2、MYL1、TNNC1、MYH7 和TNNI2 可能参与舌癌的发生、发展,具备成为舌癌潜在生物标志物和治疗靶点的潜力.

Toll样受体4(TLR4)基因2287T突变体则是我们在中国人中鉴定发现的一种有义突变,为研究该突变体的功能,我们构建了其过表达慢病毒及稳定表达细胞株.一、材料与方法1.GV358-TLR4 2287T质粒构建及鉴定:GV358质粒采用Age Ⅰ内切酶(美国NEB公司)进行单酶切后,自行设计引物扩增TLR4目的片段,两者进行同源重组(In-fusion)连接后转化大肠杆菌D H5α,挑取单克隆测序.采用自行设计定点突变引物以GV358-TLR4质粒为模板进行质粒全长聚合酶链反应(PCR)扩增,Dpn Ⅰ内切酶(美国NEB公司)消化后转化DH5α,挑取单克隆测序.

PEDV N蛋白为高度保守性蛋白,具有极强的免疫原性,因此在临床诊断中具有重要作用.本文对实验室前期制备的针对N蛋白的单克隆抗体9 G11的抗原表位进行精确定位.通过与N蛋白进行免疫印迹反应证明9G11所识别的表位是N蛋白的线性表位.利用NEB十二随机肽库进一步定位9G11核心表位氨基酸,结果显示位于N蛋白75～78位的氨基酸FYYL为9G11所识别的关键氨基酸.对20株PEDV不同亚群代表毒株的对应区域进行同源性分析表明此表位高度保守.确定该抗体识别的抗原表位有助于了解N蛋白的结构与功能,同时也为以表位为基础的快速、准确并具临床应用价值的PEDV诊断方法的建立打下良好基础.

本文报道经肌肉病理及基因诊断确诊的儿童型杆状体肌病2例.2例患者均幼儿期起病,以肌肉无力为首发表现,病程长,进展缓慢.2例患者的肌肉病理光镜均发现Gomori染色及HE染色肌纤维胞浆内尤其肌膜下杆状物质沉积;电镜检查可见致密杆状体位于肌纤维肌膜下,与肌纤维长轴平行,部分肌纤维肌丝灶性溶解、坏死;基因检测发现两患儿分别存在杆状体肌病两种最常见的基因突变:ACTA1基因杂合突变(c.1013A＞C)和NEB基因复合杂合突变(c.18676C＞T及c.9812C＞A).杆状体肌病是一种常色体显性或隐性遗传的少见肌病,肌细胞胞浆中的杆状体是特征性肌肉病理改变.病理诊断和基因诊断是诊断杆状体肌病的金标准.