共刺激分子OX40及其同源配体OX40L都是肿瘤坏死因子超家族成员，OX40与OX40L相互作用后产生的信号在机体免疫应答中起重要调控作用。OX40/OX40L在一些疾病中的过表达使其成为潜在的治疗靶点，但关于OX40/OX40L在疾病免疫活动中的调节作用仍有许多问题待探究。文章概述了OX40/OX40L的免疫特性及其在自身免疫性疾病、炎症性疾病和肿瘤中的免疫作用与应用。

目的:探讨急性脑梗死患者外周血调节性T细胞(Treg)上共刺激分子OX40的表达情况及其临床意义。方法:选择苏州大学附属第一医院神经内科自2019年4月至l2月收治的75例首次发病的急性脑梗死患者纳入病例组，选择同期招募的年龄、性别与病例组相匹配的36例健康志愿者纳入对照组。采用免疫荧光标记和流式细胞技术检测2组受试者肘静脉血中CD4 +CD25 +CD127 low Treg细胞上OX40的表达，并分析病例组的OX40 +Treg细胞比例与其美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、缺血半暗带体积、核心梗死灶体积、梗死灶体积的相关性，同时比较病例组的OX40 +Treg细胞比例在血管内治疗或静脉溶栓前后的变化。 结果:与对照组比较，病例组的外周血Treg细胞比例明显降低，OX40 +Treg细胞比例明显升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。病例组的外周血OX40 +Treg细胞比例与其NIHSS评分呈正相关关系( r s=0.271， P=0.018)，与其缺血半暗带体积、核心梗死灶体积、梗死灶体积亦均呈正相关关系( r s=0.435， P=0.000； r s=0.343， P=0.003； r s=0.245， P=0.034)。病例组中血管内治疗患者的术后第7天外周血OX40 +Treg细胞比例较术前明显降低，静脉溶栓患者的术后第3、7天外周血OX40 +Treg细胞比例较术前明显降低，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:OX40在急性脑梗死患者外周血Treg细胞上异常表达，并与神经功能缺损、影像学表现及再灌注治疗密切相关。

目的:探讨OX40L作为H7N9全病毒灭活疫苗(whole-virion inactivated vaccine，WIV)免疫佐剂的保护效果。方法:将50只BALB/c小鼠随机分为5组进行肌肉免疫：未免疫组(对照组)、单独疫苗组(1.5 μg WIV)、佐剂疫苗组(1.5 μg WIV＋0.6/1.8/3.0 μg OX40L/Fc)。免疫后21 d，通过ELISA和血凝抑制(hemagglutination inhibition，HI)试验检测免疫小鼠血清中各类抗体水平，并使用50×半数致死量(median lethal dose，LD 50)的H7N9流感病毒适应株攻击小鼠，记录小鼠体重变化及存活率，以评价OX40L/Fc与H7N9 WIV共免疫后的保护效果。免疫后7 d，通过流式细胞术探究OX40L佐剂效应的机制。 结果:与单独疫苗组相比较，共免疫OX40L/Fc可使小鼠血清中的特异性IgG抗体水平显著升高，3组佐剂疫苗组(1.5 μg WIV＋0.6/1.8/3.0 μg OX40L/Fc)的抗体几何平均滴度(lgGMT)分别为3.79、4.40和4.20。共免疫显著增加了IgG1和IgG2a抗体的滴度，但对Th1/Th2免疫应答平衡没有显著影响。与单独疫苗组相比较，共免疫1.8 μg和3.0 μg OX40L/Fc小鼠的HI抗体水平分别为6.25±0.50和5.70±0.97，差异有统计学意义( P<0.05)。共免疫1.8 μg和3.0 μg OX40L/Fc能够有效保护80%和75%的小鼠抵抗致死剂量病毒的攻击，损失的体重少于单独疫苗组，1.8 μg OX40L/Fc为最佳浓度。流式细胞术显示，与单独疫苗组相比，OX40L(0.6/1.8/3.0 μg)能够促进趋化因子受体CXCR5和程序性细胞死亡蛋白PD-1高效表达，增强H7N9 WIV免疫后淋巴结中滤泡辅助性T(Tfh)细胞的增殖( P均<0.05)。 结论:OX40L能够通过增殖Tfh细胞以增强H7N9 WIV诱导的抗体反应。

目的 研究大建中汤对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)大鼠内脏痛的影响及神经-免疫-内分泌网络的分子机制.方法 将新生大鼠48只,随机分为正常对照组(control组)、肠易激综合征模型组(IBS组)、酮替芬组(Ketotifen组)、低剂量大建中汤治疗组(DJZT-L)、中剂量大建中汤治疗组(DJZT-M)、高剂量大建中汤治疗组(DJZT-H).采用母婴分离法制备IBS内脏痛大鼠模型,利用腹壁撤退反应(abdominal withdrawal reflex,AWR)评估大鼠内脏敏感性;免疫组化法测定大鼠下丘脑星形胶质细胞(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、小胶质细胞(OX-42);免疫蛋白印迹(Western blot,WB)检测结肠和下丘脑P物质(substance P,SP);甲苯胺蓝染色法检测结肠组织肥大细胞(mast cell,MC)脱颗粒率;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)测定分析结肠组织SP、特异性IgE(sIgE)和组胺.结果 与正常大鼠相比,模型大鼠中60、40和20 mm Hg压力下AWR评分明显升高(P＜0.05),下丘脑GFAP、OX-42、SP表达显著上升(P＜0.05),结肠组织中肥大细胞脱颗粒率、sIgE、组胺和SP表达显著上升(P＜0.05);与模型大鼠相比,大建中汤高剂量组(40和20 mm Hg压力),大建中汤中剂量组(60、40和20 mm Hg压力)的AWR评分,下丘脑GFAP、OX-42、SP,结肠肥大细胞脱颗粒率、sIgE、组胺、SP表达明显下降(P＜0.05).结论 大建中汤能够降低IBS模型大鼠内脏痛,可能与其抑制SD大鼠结肠组织中肥大细胞活性,进而影响免疫神经网络有关.

探讨过氧麦角甾醇(ergosterol peroxide,EP)对人肝癌细胞凋亡的影响及其作用机制.利用cell counting kit-8(CCK-8)法检测 0(空白对照)、2.5、5、10、20、40、80 μmol·L-1的EP作用于HepG2、SK-Hep-1 细胞 24、48、72 h后的细胞活力,并计算24、48、72 h的半数抑制浓度(IC50).正式实验以 0(空白对照)、10、20、40 μmol·L-1的EP与HepG2 细胞共培养 48 h后,使用活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光探针法检测EP对细胞内ROS的影响,使用线粒体膜电位荧光探针染色检测EP对细胞内线粒体膜电位的影响,使用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡数,使用AO/EB染色法检测不同浓度的EP对细胞凋亡形态的影响.使用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测不同浓度的EP 对线粒体凋亡途径相关蛋白B细胞淋巴瘤 2(Bcl-2)、细胞色素C(Cyt-C)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶 3(caspase-3)、活化的胱天蛋白酶 3(cleaved caspase-3)、胱天蛋白酶 9(caspase-9)、活化的胱天蛋白酶 9(cleaved caspase-9)蛋白表达的影响.结果表明,不同浓度的EP均可抑制肝癌细胞增殖,且呈浓度和时间依赖性.与空白对照组相比,EP药物处理组ROS水平显著升高(P<0.05),线粒体膜电位显著下降(P<0.05),细胞总凋亡率显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著下调,Cyt-C、Bax、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3 表达均显著上调(P<0.05).综上所述,EP可能通过调控线粒体介导的凋亡途径抑制肝癌细胞增殖,并诱导其凋亡.

目的 分析老年急性脑梗死患者血清可溶性OX40配体(sOX40L)、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-4(ADAMTS-4)联合检测对患者预后的预测价值.方法 选取2019年7月-2023年8月就诊于河北省保定市第一中心医院的老年急性脑梗死患者作为脑梗组(n=121),并根据预后mRS评分分为预后良好组(n=78)和预后不良组(n=43),根据不同脑损伤程度分为轻度(n=31)、中度(n=57)和重度损伤组(n=33),另选取体检健康者作为健康组(n=68).用酶联免疫吸附法检测血清sOX40L、ADAMTS-4水平并进行比较;收集患者临床资料并分析;用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清sOX40L、ADAMTS-4水平对老年急性脑梗死患者预后的预测价值;logistic回归分析影响老年急性脑梗死患者预后的因素.结果 脑梗组血清sOX40L、ADAMTS-4水平高于健康组,差异均有统计学意义(t=13.946、14.297,P均<0.05);且血清sOX40L、ADAMTS-4水平随着脑损伤程度的加重而升高,差异均有统计学意义(F=31.900、22.080,P均<0.05).预后不良组血清sOX40L、ADAMTS-4水平高于预后良好组,差异均有统计学意义(t=10.240、9.433,P均<0.05),两组患者的脑梗死部位、入院时NIHSS评分、Hcy水平差异均有统计学意义(t=5.178、8.818、6.121,P均<0.05).后循环脑梗死、NIHSS高评分、Hcy、sOX40L、ADAMTS-4水平升高均是老年急性脑梗死患者预后不良的危险因素(P均<0.05).sOX40L、ADAMTS-4、两者联合预测老年急性脑梗死患者预后的曲线下面积(AUC)分别为 0.872、0.879、0.952,联合预测价值更高(Z 联合vs.sOX40L=2.794,P=0.005;Z 联合vs.ADAMTS-4=2.340,P=0.019).结论 老年急性脑梗死患者血清sOX40L、ADAMTS-4水平显著升高,两者水平变化可能成为预测急性脑梗死预后的指标,且两者联合预测价值更高.

目的 探究B群链球菌暴露后蜕膜间质细胞死亡和炎症信号的相关性.方法 选取 2017 年 10 月至2019 年 10 月于保定市第二中心医院妇产科分娩的孕妇 100 例,分为早产组 27 例和足月顺产组 73 例,取孕妇阴道拭子和蜕膜间质组织,检测B群链球菌阳性率、蜕膜间质细胞凋亡情况、血清炎性因子水平、NLRP3、Caspase-1、OX40、OX40L、PD-1和PD-L1 mRNA表达,分析B群链球菌暴露后蜕膜间质细胞死亡和炎症信号的相关性.结果 2 组孕妇B群链球菌阳性率、蜕膜间质细胞凋亡情况、血清炎性因子水平、NLRP3、Caspase-1、OX40、OX40L、PD-1 和 PD-L1 mRNA表达比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).早产组孕妇的GBS阳性率和蜕膜组织细胞凋亡值分别为 37.04%和(46.73±4.92),足月顺产组的GBS阳性率和蜕膜组织细胞凋亡值仅为 9.59%和(6.03±2.04);早产组孕妇的血清炎性因子水平高于足月顺产组,蜕膜间质细胞凋亡的孕妇血清炎性因子水平高于未凋亡的孕妇,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 B群链球菌暴露后蜕膜间质细胞死亡和炎症信号存在相关性,蜕膜间质细胞死亡会引发炎性因子水平升高.

目的 研究不同剂量阿托伐他汀钙治疗对动脉粥样硬化患者颈动脉内膜中层厚度(CIMT)和血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、同型半胱氨酸(Hcy)水平的影响.方法 回顾性选取动脉粥样硬化患者的病历资料,根据治疗方案分为低剂量组(阿托伐他汀钙片20 mg·d-1)和高剂量组(阿托伐他汀钙片40 mg·d-1).比较2组患者治疗前后血脂[三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)]水平和颈动脉粥样硬化斑块特征(CIMT、斑块面积)及血清Lp-PLA2、ox-LDL、Hcy水平,记录治疗期间药物不良反应发生情况.结果 低剂量组98例,高剂量组102例.治疗后,高剂量组、低剂量组的TG水平分别为(3.75±0.59)和(5.36±0.83)mmol·L-1,TC 水平分别为(4.07±0.98)和(4.52±1.02)mmol·L-1,HDL 水平分别为(1.89±0.58)和(1.49±0.42)mmol·L-1,LDL 水平分别为(1.85±0.58)和(2.67±0.73)mmol·L-1,CIMT 分别为(1.14±0.18)和(1.30±0.20)mm,斑块面积分别为(18.59±2.17)和(22.72±2.81)mm2,血清 Lp-PLA2 水平分别为(116.27±28.46)和(135.74±25.03)μg·L-1,ox-LDL水平分别为(12.07±2.59)和(13.42±2.25)μg·L-1,Hcy 水平分别为(11.92±3.12)和(15.21±3.06)μmol·L-1,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05).治疗期间,高剂量组、低剂量组的药物不良反应发生率分别为22.55％和14.29％(P＞0.05).结论 与低剂量阿托伐他汀钙相比,高剂量阿托伐他汀钙治疗动脉粥样硬化可更好地改善患者血脂水平,有助于缩小斑块,抑制炎症反应,干预动脉粥样硬化的形成,二者安全性相当.

OX40 is a costimulatory receptor that is expressed primarily on activated CD4+,CD8+,and regulatory T cells.The ligation of OX40 to its sole ligand OX40L potentiates T cell expansion,differentiation,and activation and also promotes dendritic cells to mature to enhance their cytokine production.Therefore,the use of agonistic anti-OX40 antibodies for cancer immunotherapy has gained great interest.However,most of the agonistic anti-OX40 antibodies in the clinic are OX40L-competitive and show limited efficacy.Here,we discovered that BGB-A445,a non-ligand-competitive agonistic anti-OX40 antibody currently under clinical investigation,induced optimal T cell activation without impairing dendritic cell function.In addition,BGB-A445 dose-dependently and significantly depleted regulatory T cells in vitro and in vivo via antibody-dependent cellular cytotoxicity.In the MC38 syngeneic model established in humanized OX40 knock-in mice,BGB-A445 demonstrated robust and dose-dependent antitumor efficacy,whereas the ligand-competitive anti-OX40 antibody showed antitumor efficacy characterized by a hook effect.Furthermore,BGB-A445 demonstrated a strong combination antitumor effect with an anti-PD-1 antibody.Taken together,our findings show that BGB-A445,which does not block OX40-OX40L interaction in contrast to clinical-stage anti-OX40 antibodies,shows superior immune-stimulating effects and antitumor efficacy and thus warrants further clinical investigation.

目的 探讨 3 种中药成分(姜黄素、连翘苷、白藜芦醇)对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAEC)损伤的影响.方法 实验设空白对照组(等体积基础培养液),溶剂对照组[等体积含二甲基亚砜(DMSO)的基础培养液],Ox-LDL组(20μg/mL Ox-LDL),姜黄素①②③④组(20μg/mL Ox-LDL + 2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L姜黄素),连翘苷①②③④组(20μg/mL Ox-LDL + 10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L连翘苷),白藜芦醇①②③组(20μg/mL Ox-LDL + 20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L白藜芦醇),采用四甲基偶氮噻唑盐(MTT)法检测细胞活性,并计算细胞增殖率;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法检测细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)和环氧合酶2(COX-2)mRNA的表达水平.结果 与Ox-LDL组比较,姜黄素、白藜芦醇各剂量组,连翘苷④组细胞增殖率均显著降低(P<0.01 或P<0.05);姜黄素③组、连翘苷②③④组、白藜芦醇各剂量组细胞LC3 mRNA表达水平均显著升高,COX-2 mRNA表达水平均显著降低(P<0.01 或P<0.05).结论 姜黄素、连翘苷和白藜芦醇可抑制Ox-LDL诱导下HAEC的增殖,可激发受损细胞自噬,抑制炎性因子COX-2 表达.