共刺激分子OX40及其同源配体OX40L都是肿瘤坏死因子超家族成员，OX40与OX40L相互作用后产生的信号在机体免疫应答中起重要调控作用。OX40/OX40L在一些疾病中的过表达使其成为潜在的治疗靶点，但关于OX40/OX40L在疾病免疫活动中的调节作用仍有许多问题待探究。文章概述了OX40/OX40L的免疫特性及其在自身免疫性疾病、炎症性疾病和肿瘤中的免疫作用与应用。

目的:建立一种检测HIV-1特异性CD4 +T细胞亚群功能的活化诱导标记法(activation-induced markers，AIM)，从而更有效地评价HIV-1抗原特异性CD4 +T细胞免疫应答水平。 方法:选取12例未经抗病毒治疗的HIV-1慢性感染者及6例未感染HIV-1的健康人，分别以基于多色流式细胞术的AIM法和细胞内因子染色法(intracellular cytokine staining，ICS)检测抗原特异性T淋巴细胞功能，并探讨两种方法用于评价HIV-1感染者抗原特异性T细胞免疫应答的能力。结果:AIM法检测HIV-1慢性感染者中HIV-1抗原特异性PD-1 +CD25 +CD4 +T、CD69 +CD200 +CD4 +T、CD69 +ICOS + CD4 +T细胞阳性的比例为11/12、8/12和7/12，检测CD69 +ICOS +CD8 +T、CD137 +CD69 +CD8 +T、PD-1 +CD25 +CD8 +、OX40 +PD-1 +CD8 +T细胞阳性的比例为8/12、8/12、7/12、7/12。ICS法检测HIV-1抗原特异性IL-2 +CD4 +T、IFN-γ +CD4 +T、TNF-α +CD4 +T细胞阳性的占比为2/12、2/12、0；IFN-γ +CD8 +T、TNF-α +CD8 +T、IL-2 +CD8 +T细胞阳性的占比为12/12、10/12、5/12。 结论:AIM法在评价CD4 +T细胞功能方面更为敏感，可作为ICS法的补充，两种方法联合使用可更全面地评估抗原特异性T淋巴细胞反应。

免疫检查点由抑制性和刺激性分子组成，抑制性检查点程序性死亡蛋白1（PD-1）和细胞毒性T淋巴细胞抗原4（CTLA-4）抑制剂已经广泛用于肿瘤临床治疗，刺激性检查点GITR、OX40、4-1BB、ICOS、CD40和STING激动剂正在进行临床试验。影响刺激性检查点分子的免疫检查点激动剂发展迅速，免疫激动剂抗体将成为治疗实体瘤的重要药物。

目的:探讨程序性细胞死亡受体-1(programmed cell death-1，PD-1)抗体对非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma，NHL)患者免疫功能表达的影响，并分析不良反应的预防。方法:选取2013年4月至2016年8月于河北省唐山市人民医院接受治疗的NHL确诊患者共计100例，并将其分为研究组和对照组，每组各50例。研究组接受PD-1抗体治疗，对照组患者依据病情给予NHL化疗治疗。免疫组化法检测治疗前后两组患者免疫检查点OX40、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor，GITR)、CD28、PD-1、血清T细胞免疫球蛋白黏液素3(T cell immnoglobulin and mucin 3，TIM-3)、淋巴细胞活化因子-3(lymphocyte activation gene-3，LAG-3)表达情况，并统计分析两组患者治疗后不良反应情况。结果:治疗前，研究组与对照组患者共刺激性免疫检查点OX40、GITR、CD28表达水平，共抑制性免疫检查点PD-1、TIM-3、LAG-3表达水平及美国东部肿瘤合作组(Eastern Cooperative Group，ECOG)评分比较差异均无统计学意义( P>0.05)。治疗后，研究组患者OX40、GITR、CD28、TIM-3水平明显高于对照组，PD-1水平明显低于对照组，差异均有统计学意义[%：(9.75±3.02)比(6.35±2.85)，(7.48±1.62)比(5.37±1.56)，(16.37±3.42)比(13.46±3.56)，(15.48±3.45)比(13.24±3.83)，(0.87±0.22)比(1.32±0.36)， t＝5.79、6.63、4.17、3.07、7.54 ， P值均<0.05]，两组患者LAG-3水平差异无统计学意义( P>0.05)。治疗后，研究组ECOG评分明显高于对照组，不良反应发生率明显低于对照组，差异有统计学意义[(4.61±1.46)分比( 2.74±0.66)分，10.00%比26.00%， t ＝8.25、 χ2＝4.34， P值均<0.05]。 结论:PD-1抗体治疗可有效提高NHL患者免疫共刺激分子的表达，同时抑制PD-1表达，下调患者免疫共抑制，以此改善NHL患者免疫系统状态。

目的:探讨急性脑梗死患者外周血调节性T细胞(Treg)上共刺激分子OX40的表达情况及其临床意义。方法:选择苏州大学附属第一医院神经内科自2019年4月至l2月收治的75例首次发病的急性脑梗死患者纳入病例组，选择同期招募的年龄、性别与病例组相匹配的36例健康志愿者纳入对照组。采用免疫荧光标记和流式细胞技术检测2组受试者肘静脉血中CD4 +CD25 +CD127 low Treg细胞上OX40的表达，并分析病例组的OX40 +Treg细胞比例与其美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、缺血半暗带体积、核心梗死灶体积、梗死灶体积的相关性，同时比较病例组的OX40 +Treg细胞比例在血管内治疗或静脉溶栓前后的变化。 结果:与对照组比较，病例组的外周血Treg细胞比例明显降低，OX40 +Treg细胞比例明显升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。病例组的外周血OX40 +Treg细胞比例与其NIHSS评分呈正相关关系( r s=0.271， P=0.018)，与其缺血半暗带体积、核心梗死灶体积、梗死灶体积亦均呈正相关关系( r s=0.435， P=0.000； r s=0.343， P=0.003； r s=0.245， P=0.034)。病例组中血管内治疗患者的术后第7天外周血OX40 +Treg细胞比例较术前明显降低，静脉溶栓患者的术后第3、7天外周血OX40 +Treg细胞比例较术前明显降低，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:OX40在急性脑梗死患者外周血Treg细胞上异常表达，并与神经功能缺损、影像学表现及再灌注治疗密切相关。

目的:探讨OX40在新诊断2型糖尿病（T2DM）患者外周循环滤泡辅助性T细胞（cTfh）表面的表达特性及其与胰岛素抵抗（IR）的相关性。方法:选取2020年11月至2021年12月于苏州大学附属第一医院内分泌科住院的新诊断T2DM患者，并选取同时期体检中心的健康志愿者作为对照。测量研究对象身高、体重并计算体重指数（BMI），收集研究对象空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）等，并计算血清胰岛素曲线下面积（AUC INS）和稳态模型评估胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）等，检测研究对象外周血中cTfh细胞比例及其表面OX40的表达。采用 t检验或χ 2检验进行组间比较，采用Pearson相关分析法分析HOMA-IR与临床指标的相关性，采用多重线性回归分析法分析HOMA-IR的影响因素。 结果:共纳入160例研究对象。其中，T2DM组96例，对照组64名。与对照组相比，T2DM组OX40 +Tfh细胞比例升高，分别为（3.95±1.62）%和（7.51±5.32）%，差异具有统计学意义（ t=4.29， P=0.006）。Pearson相关分析结果显示，HOMA-IR与OX40 +Tfh细胞比例（ r=0.569）、BMI（ r=0.450）和AUC INS（ r=0.341）均呈正相关（ P均<0.001）。多重线性回归分析结果显示，OX40 +Tfh细胞比例（ B=0.284，95%CI 0.029~0.538， P=0.017）、BMI（B=0.249，95%CI 0.030~0.486， P=0.022）增加均对新诊断T2DM患者IR程度造成独立的正向影响。 结论:T2DM患者cTfh表面OX40上调表达，OX40 +Tfh细胞比例增加可能是影响新诊断T2DM患者IR的独立危险因素。

目的:探讨OX40L作为H7N9全病毒灭活疫苗(whole-virion inactivated vaccine，WIV)免疫佐剂的保护效果。方法:将50只BALB/c小鼠随机分为5组进行肌肉免疫：未免疫组(对照组)、单独疫苗组(1.5 μg WIV)、佐剂疫苗组(1.5 μg WIV＋0.6/1.8/3.0 μg OX40L/Fc)。免疫后21 d，通过ELISA和血凝抑制(hemagglutination inhibition，HI)试验检测免疫小鼠血清中各类抗体水平，并使用50×半数致死量(median lethal dose，LD 50)的H7N9流感病毒适应株攻击小鼠，记录小鼠体重变化及存活率，以评价OX40L/Fc与H7N9 WIV共免疫后的保护效果。免疫后7 d，通过流式细胞术探究OX40L佐剂效应的机制。 结果:与单独疫苗组相比较，共免疫OX40L/Fc可使小鼠血清中的特异性IgG抗体水平显著升高，3组佐剂疫苗组(1.5 μg WIV＋0.6/1.8/3.0 μg OX40L/Fc)的抗体几何平均滴度(lgGMT)分别为3.79、4.40和4.20。共免疫显著增加了IgG1和IgG2a抗体的滴度，但对Th1/Th2免疫应答平衡没有显著影响。与单独疫苗组相比较，共免疫1.8 μg和3.0 μg OX40L/Fc小鼠的HI抗体水平分别为6.25±0.50和5.70±0.97，差异有统计学意义( P<0.05)。共免疫1.8 μg和3.0 μg OX40L/Fc能够有效保护80%和75%的小鼠抵抗致死剂量病毒的攻击，损失的体重少于单独疫苗组，1.8 μg OX40L/Fc为最佳浓度。流式细胞术显示，与单独疫苗组相比，OX40L(0.6/1.8/3.0 μg)能够促进趋化因子受体CXCR5和程序性细胞死亡蛋白PD-1高效表达，增强H7N9 WIV免疫后淋巴结中滤泡辅助性T(Tfh)细胞的增殖( P均<0.05)。 结论:OX40L能够通过增殖Tfh细胞以增强H7N9 WIV诱导的抗体反应。

目的 研究大建中汤对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)大鼠内脏痛的影响及神经-免疫-内分泌网络的分子机制.方法 将新生大鼠48只,随机分为正常对照组(control组)、肠易激综合征模型组(IBS组)、酮替芬组(Ketotifen组)、低剂量大建中汤治疗组(DJZT-L)、中剂量大建中汤治疗组(DJZT-M)、高剂量大建中汤治疗组(DJZT-H).采用母婴分离法制备IBS内脏痛大鼠模型,利用腹壁撤退反应(abdominal withdrawal reflex,AWR)评估大鼠内脏敏感性;免疫组化法测定大鼠下丘脑星形胶质细胞(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、小胶质细胞(OX-42);免疫蛋白印迹(Western blot,WB)检测结肠和下丘脑P物质(substance P,SP);甲苯胺蓝染色法检测结肠组织肥大细胞(mast cell,MC)脱颗粒率;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)测定分析结肠组织SP、特异性IgE(sIgE)和组胺.结果 与正常大鼠相比,模型大鼠中60、40和20 mm Hg压力下AWR评分明显升高(P＜0.05),下丘脑GFAP、OX-42、SP表达显著上升(P＜0.05),结肠组织中肥大细胞脱颗粒率、sIgE、组胺和SP表达显著上升(P＜0.05);与模型大鼠相比,大建中汤高剂量组(40和20 mm Hg压力),大建中汤中剂量组(60、40和20 mm Hg压力)的AWR评分,下丘脑GFAP、OX-42、SP,结肠肥大细胞脱颗粒率、sIgE、组胺、SP表达明显下降(P＜0.05).结论 大建中汤能够降低IBS模型大鼠内脏痛,可能与其抑制SD大鼠结肠组织中肥大细胞活性,进而影响免疫神经网络有关.

目的 分析T2DM合并睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血糖在目标范围内时间(TIR)的特点,以及氧化应激(OS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)与TIR的相关性.方法选取2021年1月至2022年6月于太原糖尿病专科医院治疗的T2DM患者165例,根据呼吸暂停低通气指数(AHI)分为单纯T2DM组(AHI<5 次/h,n=43)、T2DM合并OSAHS 轻度组(OSAHS-G,5≤AHI<15 次/h,n=51)、T2DM合并OSAHS中度组(OSAHS-M,15≤AHI≤30 次/h,n=40)、T2DM合并OSAHS重度组(OSAHS-S,AHI>30次/h,n=31).动态血糖监测TIR,比较各组血清8-异前列腺素 2a(8-iso-PGE2a)、氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等,分析OS、IR对T2DM合并OSAHS的影响.结果 OSAHS-G、OSAHS-M及OSAHS-S组HOMA-IR、8-iso-PGF2a、Ox-LDL高于T2DM组,TIR、SOD及GSH-Px低于T2DM组(P<0.05).Pearson 相关分析显示,TIR 与SOD、GSH-Px 呈正相关(P<0.05 或P<0.01),与8-iso-PGF2a、Ox-LDL、HbA1c、HOMA-IR、DM合并OSAHS严重程度呈负相关(P<0.01).Logistic回归分析显示,TIR、SOD、GSH-Px是T2DM合并OSAHS严重程度的保护因素,8-iso-PGE2a、Ox-LDL是T2DM合并OSAHS严重程度的危险因素.结论 T2DM合并OSAHS患者血糖波动大,TIR降低;T2DM合并OSAHS患者IR加重,OS水平升高,是TIR降低的影响因素.

目的 观察人参益脉方对ApoE-/-小鼠氧化应激及血管老化的影响,探讨其干预血管老化的作用机制.方法 将40只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、西药组(瑞舒伐他汀,2.6 mg/kg)及中药低、高剂量组(人参益脉方,4.29、8.58 g/kg),每组10只,另取10只C57BL/6J小鼠作为正常组.采用西式饮食饲料喂养ApoE-/-小鼠建立血管老化模型,同时各给药组分别予相应药物灌胃,正常组和模型组灌胃等体积纯净水,连续12周.HE染色及Masson染色观察小鼠主动脉组织形态变化,ELISA检测血清氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)含量,比色法测定血清活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽还原酶(GPX)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)含量,Western blot检测主动脉组织沉默信息调节因子1(SIRT1)、p21、p53、NADPH氧化酶4(NOX4)蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组小鼠主动脉可见脂质沉积,内膜及中膜明显增厚,弹性纤维减少,胶原纤维增多;血清ox-LDL、ROS含量显著升高(P<0.01),GSH、GPX、NAD+含量显著降低(P<0.01);主动脉组织SIRT1蛋白表达显著降低(P<0.05),p21、p53蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05).与模型组比较,各给药组主动脉内膜可见少量脂质沉积,各层膜结构较清晰,胶原纤维减少;各给药组血清ox-LDL、ROS含量显著降低(P<0.01),GSH含量显著升高(P<0.05,P<0.01),中药低剂量组NAD+含量显著升高(P<0.05);中药高剂量组主动脉组织p21、NOX4蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01).与西药组比较,中药高剂量组ROS含量显著降低(P<0.01),p53蛋白表达显著降低(P<0.05).与中药低剂量组比较,中药高剂量组p21蛋白表达显著降低(P<0.01),NOX4蛋白表达显著升高(P<0.01).结论 人参益脉方可能通过调节氧化应激水平和相关蛋白表达减轻血管内皮损伤,从而发挥改善血管老化作用.