目的:探讨microRNA-145(miR-145)靶向沉默PLK1基因对肾小管上皮细胞增殖、凋亡的影响及相关机制。方法:采用lipofectamine 2000试剂将miR-145转染肾小管上皮细胞，按不同转染结果分为对照组、阴性对照组及miR-145转染组，采用RT-PCR法检测肾小管上皮细胞中miR-145水平，采用CCK-8实验检测细胞增殖能力，采用流式细胞术检测细胞转染miR-145后细胞周期的分布，采用Western blot实验检测胃癌细胞Bax、Cyclin B1、PCNA及Bcl-2的表达水平，采用荧光素酶报告实验检测miR-145与PLK1基因的靶向关系。结果:RT-PCR实验显示miR-145转染组肾小管上皮细胞miR-362表达水平(4.1±0.6)显著高于对照组(1.2±0.2)和阴性对照组(1.3±0.3)( P<0.05)。CCK-8实验显示肾小管细胞转染miR-145后，肾小管细胞的增殖水平低于对照组及阴性对照组( P<0.05)。采用流式细胞术显示各组肾小管细胞G0/G1期比例比较，差异无统计学意义( P>0.05)。miR-145转染组肾小管细胞S期比例为(14.16±2.82)%，显著低于对照组[(21.22±3.81)%]及阴性对照组[(22.56±2.69)%]( P<0.05)；miR-145转染组肾小管细胞G2/M期比例为(26.37±4.51)%，显著高于对照组[(24.57±2.02)%]及阴性对照组[(22.46±2.74)%]( P<0.05)。miR-145组Bax相对水平为(0.36±0.04)，显著高于对照组(0.25±0.03)及阴性对照组(0.24±0.04)( P<0.05)。miR-145组Cyclin B1、PCNA、Bcl-2相对水平分别为(0.18±0.03)、(0.27±0.03)、(0.16±0.02)，显著低于对照组[(0.28±0.02)、(0.36±0.04)、(0.32±0.03)]及阴性对照组[(0.30±0.03)、(0.40±0.03)、(0.33±0.03)]( P<0.05)。通过生物信息学预测结果显示miR-145可与PLK1基因的3'-UTR结合，经荧光素酶报告基因实验进行验证，显示肾小管细胞在共转染miR-145及PLK1野生型载体后，荧光素酶相对活性显著下降( P<0.05)，其他各实验组的肾小管上皮细胞的荧光素酶相对活性无明显下降( P<0.05)。RT-PCR实验显示miR-145转染组肾小管上皮细胞PLK1基因表达水平(0.31±0.13)显著低于对照组(1.03±0.15)及阴性对照组(1.04±0.17)( P<0.05)。 结论:miR-145可靶向抑制肾小管上皮细胞中PLK1基因表达水平，抑制细胞的增殖能力，诱发细胞发生凋亡，为肾纤维化治疗提供实验依据。

目的:研究miR-27b-3p对乳腺癌细胞辐射抵抗的影响。方法:通过检索基因表达(GEO)数据库，筛选分析miR-27b-3p在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达水平。利用实时荧光定量PCR技术分析其在不同乳腺癌细胞系中的表达水平。通过细胞克隆形成、免疫荧光和5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EDU)检测技术评价miR-27b-3p对乳腺癌细胞辐射抵抗作用。采用荧光素酶报告基因技术确定miR-27b-3p的靶基因PLK2，并在乳腺癌细胞中进一步验证miR-27b-3p的辐射抵抗作用。结果:与正常乳腺组织和细胞相比，miR-27b-3p在乳腺癌组织( t＝2.99， P<0.01)和乳腺癌细胞中表达水平显著上调( t＝21.21、32.88， P<0.05)。尤其在抗辐射细胞MCF-7R中升高更加明显( t＝25.63， P<0.05)。过表达miR-27b-3p增强了MCF-7细胞的克隆形成能力( t＝10.32， P<0.05)，且随着辐照剂量的增加，miR-27b-3p对MCF-7增殖能力的保护效应逐渐凸显( t＝8.77、8.26、8.03， P<0.05)；干扰miR-27b-3p则抑制MCF-7R细胞克隆形成数( t＝40.00， P<0.05)，且随着辐照剂量的增加，进一步削弱了MCF-7R细胞的增殖能力( t＝8.54、8.32、8.23， P<0.05)。报告基因实验结果表明，PLK2是miR-27b-3p的直接靶标。过表达PLK2抑制了miR-27b-3p介导的乳腺癌细胞辐射抵抗(MCF-7： t＝9.66， P<0.05；MCF-7R： t＝6.42， P<0.05)。 结论:miR-27b-3p可通过靶向PLK2提高乳腺癌细胞的辐射抗性。

目的:探讨Polo样激酶1(PLK1)和真核翻译起始因子5A2(EIF5A2)在正常脑组织和胶质瘤组织中的表达，分析两者与胶质瘤临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测2015年3月至2021年8月大庆市人民医院11例正常脑组织和66例胶质瘤组织中PLK1和EIF5A2的表达水平，结合临床资料行 χ2检验相关分析。 结果:PLK1阳性表达率在胶质瘤组织和正常脑组织分别为71.21%(47/66)和9.09%(1/11)，两者差异有统计学意义( χ2＝15.498， P<0.05)；EIF5A2阳性表达率在胶质瘤组织和正常脑组织分别为74.24%(49/66)和9.09%(1/11)，两者差异有统计学意义( χ2＝17.577， P<0.01)。PLK1和EIF5A2表达水平与胶质瘤组织学分级明显相关( χ2＝4.929、5.128， P<0.05)。 结论:PLK1和EIF5A2可能与胶质瘤的发生发展有关，PLK1和EIF5A2有助于评估胶质瘤生物学行为及预后。

目的:探讨结直肠癌组织中结肠癌转移相关基因1(MACC1)和Polo样激酶1(PLK1)表达的临床意义。方法:收集2016年4月至2021年3月大庆油田总医院资料完整的结104例结直肠癌组织标本及癌旁正常组织标本，采用免疫组织化学法检测各组织中MACC1蛋白和PLK1蛋白表达，采用 χ2检验分析评估MACC1和PLK1的表达水平与结直肠癌临床病理因素之间的关系。 结果:MACC1蛋白在结直肠癌组织中表达率为73.08%(76/104)，明显高于癌旁组织中表达率15.39%(16/104)，两者差异有统计学意义( χ2＝70.165， P<0.01)；PLK1蛋白在结直肠癌组织中表达率为57.70%(60/104)，明显高于癌旁组织中表达率24.04%(25/104)，两者差异有统计学意义( χ2＝24.371， P<0.01)。MACC1表达水平与结直肠癌淋巴结转移、浸润深度、TNM分期明显相关( χ2＝4.697、6.307、6.899， P<0.05)，PLK1表达水平与结直肠癌淋巴结转移、组织学分化程度、TNM分期明显相关( χ2＝5.446、5.5076、6.307， P<0.05)。 结论:MACC1蛋白和PLK1蛋白表达与结直肠癌侵袭和转移密切相关，检测上述两种指标，并与临床指标结合，将能更准确判断结直肠癌生物学行为及预后、并指导临床治疗。

目的:探讨Polo样激酶4(Plk4)在脑胶质瘤中的表达特征、生物学功能及其相关分子机制。方法:纳入癌症基因组图谱(TCGA)数据库(689例)、中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库(693例)中脑胶质瘤患者的胶质瘤样本的转录组和临床数据，纳入基因型和基因表达量关联(GTEx)数据库中正常脑组织标本的转录组数据(255例)。比较脑胶质瘤标本与正常脑组织中，以及不同病理学分级脑胶质瘤标本中Plk4 mRNA表达量的差异；采用log-rank检验法比较Plk4 mRNA低表达组与高表达组患者总生存期的差异。取人星形胶质细胞、U87、LN229、U251及A172细胞株行相关研究。采用小干扰RNA(siRNA)转染法敲低U87和LN229细胞中Plk4的表达；采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测Plk4 mRNA的表达；采用蛋白质免疫印迹法检测Plk4蛋白的表达；采用EdU实验和Transwell实验观察Plk4对胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。取4周龄雌性BALB/c-nu裸鼠20只，将U87细胞注射于小鼠腹部制备胶质瘤异种荷瘤模型，观察Plk4敲低组(肿瘤内注射siRNA-Plk4， n＝10)与无义序列组(肿瘤内注射无序列Plk4， n＝10)治疗21 d(7次)后肿瘤体积和重量的差异。取敲低Plk4的U87细胞，采用蛋白组学和磷酸化组学的关联分析方法探讨Plk4在胶质瘤中的生物学功能及其分子机制。 结果:与星形胶质细胞相比，U87、LN229、U251及A172细胞株中Plk4 mRNA的表达水平均升高；TCGA联合GTEx数据库数据分析显示，低级别胶质瘤及胶质母细胞瘤标本中Plk4 mRNA的表达量均高于正常脑组织；对CGGA数据库中标本的分析显示，Plk4 mRNA的表达量随世界卫生组织(WHO)病理学分级的升高而升高；2个数据库中Plk4 mRNA高表达组患者的总生存期均短于低表达组患者。EdU实验显示，敲低Plk4表达的U87和LN229细胞的EdU阳性率均低于其无义序列细胞。Transwell实验显示，敲低Plk4表达的U87和LN229细胞的穿胶数和迁移数均低于其无义序列细胞。体内实验结果表明，Plk4敲低组的裸鼠皮下肿瘤的生长速度明显慢于无义序列组。上述数据比较差异均有统计学意义(均 P<0.01或0.05)。在蛋白组学分析中，共鉴定到428个差异表达蛋白。在磷酸化组学分析中，共鉴定到1 180个差异表达的磷酸化肽段，对应于728个磷酸化蛋白。将蛋白组学和磷酸化组学的结果进行关联分析后发现，蛋白组学和磷酸化组学关联上2 197个蛋白，其中66个只在蛋白水平有改变，590个只在磷酸化水平有改变，25个在蛋白和磷酸化水平均有改变。对只在磷酸化水平有改变的590个蛋白进行基因本体(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析发现，590个蛋白的功能主要为细胞进程和生物学调控等，主要富集的通路是志贺菌病和神经退行性变途径等。 结论:Plk4 mRNA在脑胶质瘤中呈高表达，可能与患者的预后有关；其机制可能通过细胞进程等信号通路促进胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭有关。Plk4可能是脑胶质瘤诊断和预后的分子标志物和药物治疗潜在的靶点。

目的:鉴定胃腺癌新的预后标志物和治疗靶点。方法:通过Gene Expression Omnibus(GEO)数据库下载GSE33335和GSE63089基因表达数据集，共含有70例胃腺癌组织和配对的胃正常组织基因芯片数据，使用R语言分析胃癌组织和胃正常组织间差异表达基因。通过String在线分析工具构建差异表达基因的蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络。使用Cytoscape软件和分子复合物检测(MCODE)插件分离出关键基因集。使用在线数据库鉴定分离出与预后相关的关键基因，分别用数据库信息和南通大学附属医院2019年7—9月收治的32例胃腺癌组织和癌旁正常组织从mRNA和蛋白水平进行验证。结果:使用R语言分析显示，2个数据集中有128个共同差异表达基因，其中85个基因在胃腺癌组织中表达上调，43个基因在胃腺癌组织中表达下调。通过String在线工具和Cytoscape软件建立了PPI网络和MCODE模型，获得27个关键基因，其中有25个基因与胃腺癌患者的预后有关( P<0.05)。25个与预后相关的基因中，有14个基因在胃腺癌组织中表达显著，其中有3个基因[垂体瘤转化基因1(PTTG1)、细胞周期蛋白B1(CCNB1)和polo样激酶1(PLK1)]在细胞周期途径中显著富集。PTTG1在胃腺癌和胃正常组织中的阳性表达率分别为68.8%(22/32)和18.8%(6/32)，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:PTTG1在胃腺癌组织和胃正常组织中存在表达差异，是胃腺癌形成的关键基因。过表达PTTG1的胃腺癌患者预后更差。PTTG1可能通过调控细胞周期参与胃腺癌的发生发展。

目的:探讨Polo样激酶1(PLK1)以及鼠双微体基因2(MDM2)在胃癌组织的表达及其与临床病理因素之间的关系。方法:选取长治医学院附属和济医院和长治市人民医院2017年4月至2021年3月病理确诊的99例胃癌组织和癌旁组织，应用免疫组织化学方法检测组织中PLK1蛋白以及MDM2蛋白表达水平，采用 χ2检验并结合临床资料分析PLK1蛋白和MDM2蛋白与胃癌临床病理特征之间的关系。 结果:胃癌组织PLK1蛋白表达率为79.80%(79/99)、对应癌旁组织PLK1蛋白表达率为12.12%(12/99)，两者差异有统计学意义( χ2＝91.283， P<0.01)，胃癌组织MDM2蛋白表达率为66.67%(66/99)、对应癌旁组织MDM2蛋白表达率为26.26%(26/99)，两者差异有统计学意义( χ2＝32.486， P<0.01)。PLK1表达水平与胃癌TNM分期、淋巴结转移明显相关( χ2＝5.602、6.550， P<0.05)；MDM2表达水平与胃癌TNM分期、组织学分化程度、淋巴结转移明显相关( χ2＝5.263、9.949、4.583， P<0.05)。 结论:PLK1蛋白和MDM2蛋白过度表达可能促进胃癌恶性增殖及转移，联合检测上述两项指标有助于判断胃癌恶性程度、转移潜能和预后。

目的:高通量筛选三阴型乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）预后相关的重要分子标志物，探讨纺锤体检测点蛋白BUB1B表达与TNBC临床病理特征及预后相关性。方法:收集2009—2017年四川大学华西医院诊断TNBC的临床病理资料和预后信息。选取符合纳入标准的新鲜样本47例，肿瘤原发灶石蜡样本139例。对新鲜肿瘤样本进行转录组测序（RNA-seq）与基因表达综合数据库（gene expression omnibus，GEO）数据集GSE38959和GSE65194差异分析并取交集，进行富集分析和蛋白相互作用（protein-protein interaction，PPI）分析。利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析目的基因的表达水平与TNBC预后的关系。采用免疫组织化学染色验证其在TNBC中的表达情况及与临床病理特征和预后的相关性。结果:利用edgeR对47例TNBC肿瘤组织与其中12例正常组织进行差异分析得到1 559个上调基因和1 376个下调基因，与GEO2R对GSE38959和GSE65194差异分析后的差异基因取交集后得到131个基因。富集分析主要富集在细胞周期、JAK-STAT信号通路、p53信号通路。利用Cytoscape分析得到Degree最高的10个基因：TOP2A、BUB1B、MKI67、PLK1、RRM2、PCNA、KPNA2、SMC4、PBK、IGF1。Kaplan-Meier Plotter数据库中分析发现BUB1B表达与TNBC预后显著相关［总生存期，HR=0.52，95% CI（0.35~0.77）， P=0.001；无远处转移生存期，HR=0.72，95% CI（0.52~0.98）， P=0.038］。139例肿瘤原发灶石蜡样本免疫组织化学的结果显示BUB1B低表达与TNBC预后不良具有显著相关性［HR=0.41，95% CI（0.18~0.95）， P=0.024］。 结论:BUB1B蛋白低表达与TNBC预后不良相关，其预后相关分子机制和潜在治疗靶点有待进一步研究。

目的:探讨乳腺癌组织中Polo样激酶1(PLK1)和成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)的表达及其临床意义。方法:收集2017年5月至2022年11月聊城市第二人民医院病理学确诊的乳腺癌癌组织和对应癌旁组织标本116例，采用免疫组织化学方法检测上述组织中PLK1和MYBL2的表达，结合临床病理资料，采用 χ2检验。 结果:PLK1在乳腺癌组织中阳性表达率36.21%(42/116)，明显高于对应癌旁组织中阳性表达率5.17%(6/116)，差异有统计学意义( χ2＝ 34.044， P<0.01)。MYBL2在乳腺癌组织中阳性表达率51.72%(60/116)，明显高于对应癌旁组织中阳性表达率14.66%(17/116)，差异有统计学意义( χ2＝35.942， P<0.01)。PLK1表达水平与乳腺癌患者TNM分期(TNM stage，tumor node metastasis stage)、组织学分级、淋巴结转移明显相关( χ2＝6.942、6.225、4.962， P<0.05)，PLK1表达水平与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小、组织学分型无相关( χ2＝0.005、0.315、0.006， P>0.05)。MYBL2表达水平与乳腺癌患者肿瘤大小、组织学分级、TNM分期、淋巴结转移明显相关( χ2＝5.111、6.293、5.727、5.765， P<0.05)，MYBL2表达水平与乳腺癌患者年龄、组织学分型无相关( χ2＝0.002、0.074， P>0.05)。 结论:乳腺癌组织中PLK1和MYBL2呈高表达，PLK1和MYBL2在乳腺癌发生、发展过程中可能发挥重要作用，与乳腺癌预后密切相关。

目的:探讨Polo样激酶1(PLK1)和细胞分裂周期分子20(CDC20)与食管鳞状细胞癌(ESCC)生物学行为的关系。方法:收集2016年2月至2020年10月诸城市人民医院、解放军第九七○医院和菏泽牡丹人民医院(菏泽市中心医院)病理确诊的65例ESCC患者的癌组织和对应癌旁组织标本，采用免疫组织化学法检测PLK1蛋白和CDC20蛋白水平，采用 χ2检验分析两者的表达与ESCC临床病理学参数之间的关系。 结果:ESCC癌组织中PLK1蛋白阳性表达率为67.69%(44/65)，明显高于对应癌旁组织PLK1蛋白阳性表达率27.69%(18/65)，差异有统计学意义( χ2＝20.844， P<0.01)。PLK1表达水平与ESCC组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关( χ2＝9.628、5.435、5.298， P<0.05)，PLK1表达水平与ESCC性别、年龄无相关( χ2＝0.001、0.027， P>0.05)。ESCC癌组织中CDC20蛋白阳性表达率为72.31%(47/65)，明显高于对应癌旁组织CDC20蛋白阳性表达率23.08%(15/65)，两者差异有统计学意义( χ2＝31.575， P<0.01)。CDC20表达水平与ESCC淋巴结转移、TNM分期明显相关( χ2＝5.052、4.584， P<0.05)，CDC20表达水平与ESCC性别、组织学分化程度、年龄无相关( χ2＝0.019、0.029、1.231， P>0.05)。 结论:ESCC癌组织中PLK1蛋白和CDC20蛋白呈高表达，PLK1蛋白和CDC20蛋白的检测有助于判断ESCC生物学行为。