目的:探讨骨髓增生异常性肿瘤(myelodysplastic syndrome,MDS)患者基因突变与临床特征、预后及急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)转化风险间的相关性.方法:回顾性分析100例连续的初治MDS患者的临床资料,采用第二代测序技术检测患者中34种MDS疾病相关突变基因,分析该队列中不同基因的突变发生率及分布情况,探讨高频基因突变(突变率≥10%)与患者临床特征、预后及转化为AML风险之间的关系.结果:100例MDS患者共检出32种基因突变,有84%患者出现至少1种基因突变,基因突变最多见于MDS伴多系病态造血(MDS with multilineage dysplasia,MDS-MLD)患者(39.3%);≥60岁老年患者中有82.8%(53/64)出现基因突变.基因突变中,ASXL1突变发生率最高(26.0%),其他突变率大于10%的基因(高频基因)还包括TET2、U2AF1、DNMT3A、RUNX1、TP53和SF3B1.ASXL1易与RUNX1共突变,与TP53突变共排斥.在基因突变与临床特征相关性分析中,ASXL1突变组骨髓原始细胞比例高于ASXL1未突变组;U2AF1突变组血小板计数少于U2AF1未突变组,老年患者中DNMT3A突变(85.7%)高于年轻患者(14.3%);RUNX1突变组白细胞计数高于RUNX1未突变组;TP53突变组中位国际预后评分系统-修订版(International Prognostic Scoring System-Revised,IPSS-R)评分(6.0分)高于TP53未突变组(4.5分),P=0.016;TP53突变组中位乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)数值(420 U/L)高于TP53未突变组(222 U/L)(P=0.002).本研究中位随访时间为18.6个月,中位生存时间27.1个月,多因素分析表明,TP53突变是总体生存期(overall survival,OS)短的独立危险因素.随访期间,15例(15%)患者发生AML转化,而DNMT3A基因突变是MDS患者发生AML转化的独立危险因素(HR=3.73).结论:本研究中MDS患者的MDS相关基因突变率为84%,TP53突变与患者不良预后有关,DNMT3A突变与患者易于发生AML转化有关.

骨髓增生异常性肿瘤(myelodysplastic neoplasms,MDS)是起源于造血干经细胞和(或)祖细胞的一组异质性髓系肿瘤.欧美流行病学调查揭示,MDS发病率为(4～5)/10万,且随年龄增长而增加,中位诊断年龄为73～76岁.根据世界卫生组织(World Health Organization,WHO)2001年诊断标准,在2004年至2007年对中国上海地区约390万人的调查中发现,MDS平均发病率为1.51/10万,中位发病年龄为62岁,其中约1/3的患者会转化为急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML);53%的患者因血细胞减少引发的感染、出血或合并症而死亡.老年MDS患者由于合并症较多、体质较弱,无论是治疗选择、疾病转归都有其特点.老年MDS患者的白细胞计数、血红蛋白水平和骨髓原始细胞比例均稍高于年轻患者,而其中性粒细胞计数和血小板计数较年轻患者明显增高.此外,老年MDS患者发生基因突变的数量更多,平均每例患者可发生1.8个基因突变,其中以ASXL1、TET2、SF3B1、STAG2、SRSF2和TP53突变更多见;而年轻患者的突变数量为平均每例患者发生1.2个基因突变,且以U2AF1、ASXL1和RUNX1突变较常见.异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)是MDS唯一的根治疗法,年轻患者可行清髓性移植,但老年患者只能行减低剂量预处理(reduced-intensity conditioning,RIC)的allo-HSCT治疗.老年MDS患者的自然病程和预后差异很大,由年龄(>70岁)、脆弱指数、分子国际预后评分系统(international prognosis scoring system,IPSS)分组等组成的MDS综合预后评分,能更好地预测MDS患者化疗的耐受性和治疗不良反应.本共识根据国内外老年MDS研究的最新循证证据,经学组专家共同讨论后制定,旨在规范中国老年MDS患者的诊断和治疗的全程管理.

目的:研究伴环状铁粒幼红细胞增多（RS）的骨髓增生异常综合征（MDS-RS）患者的基因突变特征及其临床意义。方法:收集2001年1月至2019年6月于中国医学科学院血液病医院新诊断的255例原发性MDS-RS患者资料。129例采用一代测序、126例采用包含112个血液肿瘤相关基因的二代测序（NGS）进行基因突变分析。结果:共193例（75.7%）检出SF3B1突变，其中SF3B1 K700E突变147例（76.2%）。非SF3B1基因突变较常见的有TET2（16.7%）、ASXL1（14.3%）、U2AF1（11.1%）、TP53（7.9%）、SETBP1（6.3%）和RUNX1（6.3%）。RS 5%~<15%患者SETBP1突变率显著高于RS≥15%患者（21.4%对4.5%， P=0.044），其余基因突变率差异无统计学意义（ P值均>0.05）。在114例NGS检出SF3B1突变的患者中，RS 5%~<15%患者SF3B1等位基因突变频率（VAF）与骨髓RS比例呈正相关（ r=0.486， P=0.078）；RS≥15%组SF3B1突变型患者骨髓RS比例显著高于野生型患者[40.0%（15.0%~80.0%）对25.5%（15.0%~82.0%）， P<0.001]，且SF3B1 VAF与骨髓RS比例呈正相关（ P=0.009， rs=0.261）。全部患者SF3B1突变型与野生型年龄、ANC、PLT、平均红细胞体积、RS比例、IPSS-R染色体核型及IPSS-R预后分组等方面差异有统计学意义（ P值均<0.05）。多因素分析显示，SF3B1突变是影响总生存（OS）时间的独立良好预后因素（ HR=0.265，95% CI 0.077~0.917， P=0.036），TP53突变是独立不良预后因素（ HR=6.272，95% CI 1.725~22.809， P=0.005）。根据SF3B1和TP53突变状态将MDS-RS患者分为四组：SF3B1和TP53均突变组、SF3B1和TP53均野生组、SF3B1野生伴TP53突变组及SF3B1突变伴TP53野生组，四组患者OS时间差异显著（ P<0.001）。组间两两比较显示SF3B1突变伴TP53野生组OS时间显著长于SF3B1野生伴TP53突变组、SF3B1和TP53野生组，而与SF3B1和TP53均突变组比较差异无统计学意义。 结论:SF3B1突变在MDS-RS中的发生率较高，几乎均是错义突变，以K700E突变最为常见。SF3B1突变是MDS-RS患者生存的独立良好预后因素，TP53突变是独立不良预后因素，二者联合可更精细地指导MDS-RS患者预后分层。

目的:探讨较低危组和较高危组骨髓增生异常综合征（MDS）患者基因突变及基因突变功能组的差异。方法:回顾性病例系列研究。回顾性分析2018年1月至2023年8月就诊于东南大学附属中大医院227例MDS患者的临床资料。根据修订版国际预后积分系统（IPSS-R），将MDS患者分为较低危组（IPSS-R评分≤3.5分）96例与较高危组（IPSS-R评分>3.5分）131例。采用二代测序检测骨髓标本中58个MDS常见基因突变，取基因突变结果中突变率较高的24个基因纳入研究，并根据基因功能将24个突变基因分为8类。比较较低危组与较高危组临床资料、基因突变及基因突变功能组的差异。结果:227例MDS患者中至少检测出1种基因突变的患者为177例（78.0%），其中突变率较高的5种基因依次为ASXL1[21.6%（49/227）]、TET2[18.5%（42/227）]、TP53[15.4%（35/227）]、DNMT3A[13.2%（30/227）]、U2AF1[10.1%（23/227）]。按基因功能分类，最常见突变组为甲基化相关基因[31.3%（71/227）]，其次为剪接体相关基因[24.7%（56/227）]。较低危组血小板计数、中性粒细胞计数均高于较高危组，骨髓原始细胞比例、基因突变率及存在≥3种基因突变率均低于较高危组（均 P<0.05）。较低危组中突变率较高的5种基因依次为TET2[21.9%（21/96）]、DNMT3A[14.6%（14/96）]、ASXL1[13.5%（13/96）]、SF3B1[12.5%（12/96）]、U2AF1[8.3%（8/96）]，较高危组中突变率较高的5种基因依次为ASXL1[27.5%（36/131）]、TP53[23.7%（31/131）]、TET2[16.0%（21/131）]、DNMT3A[12.2%（16/131）]、U2AF1[11.5%（15/131）]，较低危组ASXL1、TP53、ETV6、NRAS基因突变率均低于较高危组（均 P<0.05）。较低危组及较高危组中甲基化相关基因突变比例均最高，但两组比较差异无统计学意义[32.3%（31/96）比30.5%（40/131）， χ2＝0.08， P>0.05]；两组肿瘤因子抑制物相关基因突变、转录因子相关基因突变、染色质修饰相关基因与RAS途径相关基因突变比例比较，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:较高危组较较低危组MDS患者常见基因突变率高，且基因突变数量多。

目的:探讨不典型慢性粒细胞白血病（aCML）的临床特点及诊断方法。方法:对四川省宜宾市第二人民医院南岸院区收治的1例年轻aCML患者的临床资料、骨髓形态学、免疫学、遗传学及分子生物学特点进行分析。结果:患者骨髓涂片示：粒细胞系明显增生，占0.875，伴显著发育异常和不成熟的粒细胞增多，原始粒细胞占0.170，成熟粒细胞胞质内颗粒明显增多、增粗；骨髓穿刺活组织检查示：骨髓增生极度活跃，幼稚粒细胞增多，网状纤维广泛增生（骨髓纤维化2~3级）；左腹股沟淋巴结切除活组织检查病理示：淋巴结结构破坏，组织细胞背景中可见巨核细胞及不成熟粒细胞，符合髓外造血；骨髓流式细胞免疫表型示：粒细胞群约占有核细胞81.6%，异常表达CD56、CD14dim，粒细胞系发育模式异常；白血病中常见30种融合基因筛查均为阴性；聚合酶链反应（PCR）检测示：BCR-ABL1融合基因p210型、BCR-ABL1融合基因p190型、BCR-ABL1融合基因p230型、CALR基因第9号外显子、JAK2 V617F突变均为阴性。Sanger测序示：MPL-W515基因突变、CSF3R基因第14号和17号外显子、BRAF基因突变、SRSF2均为阴性；二代测序示：ASXL1基因突变阳性，NM_015338.5：c.2077C>T（p.R693*），突变频率为47.7%；U2AF1基因突变阳性，NM_006758.2：c.101C>A（p.S34V），突变频率为51%；PDGFRA、PDGFRB、SETBP1、SF3B1、STAT3、STAT5B等均为阴性。染色体核型分析示：47，XX，add（5）（q33），+8，-10，+mar[8]。综合诊断为aCML，BCR-ABL1阴性。结论:BCR-ABL1阴性aCML的诊断依赖于形态学、免疫学、遗传学和分子生物学综合诊断，二代测序在鉴别诊断及靶向药物治疗方面尤为重要；年轻患者的早期诊断及治疗极具挑战性，应引起临床医生重视。

目的:提高对伴（t9；22）（q34；q11）/BCR-ABL融合基因阳性骨髓增生异常综合征（MDS）的认识。方法:回顾性分析中国医学科学院血液病医院2015年收治的1例原发性t（9；22）（q34；q11）/BCR-ABL p190（+）MDS铁粒幼红细胞性贫血伴多系发育异常患者的临床资料，并进行相关文献复习。结果:患者，男性，69岁，血红蛋白84 g/L，白细胞和血小板计数正常。骨髓穿刺涂片分类计数，原始细胞比例为0.01，粒系和红系细胞有发育异常形态学改变。染色体核型为46，XY，t（9；22）（q34；q11）[8]/46，XY[12]。BCR-ABL融合基因检测p190 16.67%，p210和p230均阴性。二代测序结果显示存在SF3B1 p.K700E突变（VAF 44.9%）和TET2 p.G1814fs*6（VAF 43.4%）。确诊为MDS铁粒幼红细胞性贫血伴多系发育异常。结论:费城染色体阳性MDS罕见，预后极差，确诊后尽早接受造血干细胞移植可能是最佳治疗选择。

目的:探讨不同SF3B1基因型在骨髓增生异常综合征（MDS）患者中的分布情况以及在生存预后中的价值。方法:回顾性分析2014年1月至2022年1月南京医科大学第一附属医院诊断的377例初诊 MDS患者临床资料，根据不同SF3B1基因型将其分为SF3B1野生型（SF3B1 WT）317例，其中男214例，女103例，年龄63（49，71）岁；SF3B1 K700E突变型（SF3B1 K700E）39例，其中男17例，女22例，年龄65（52，73）岁；以及SF3B1非K700E突变型（SF3B1 non-K700E）21例，其中男13例，女8例，年龄67（63，73）岁。采用靶向测序技术检测与MDS相关的20项基因突变情况；Kaplan-Meier法比较3组患者总生存期（OS）和无进展生存期（PFS）；Cox回归对MDS进行单因素和多因素分析。 结果:与SF3B1 non-K700E患者相比，SF3B1 K700E患者中性粒细胞数更高（ P=0.002）。根据IPSS评分，SF3B1 K700E患者处于低危和中危-1分组的例数多于SF3B1 non-K700E患者数（ P=0.023）。利用靶向测序检测20个基因突变情况发现，与SF3B1 WT患者相比，SF3B1 K700E患者ASXL1和U2AF1突变率明显降低（ P=0.018和 P=0.003）；与SF3B1 non-K700E患者相比，SF3B1 K700E患者ASXL1突变率降低（ P=0.029）。生存分析显示，与SF3B1 WT和SF3B1 non-K700E患者相比，SF3B1 K700E患者OS明显延长（ P<0.001和 P=0.045）；在不伴骨髓原始细胞增多（<5%）的MDS患者中，与SF3B1 WT患者相比，SF3B1 MUT患者OS和PFS均明显延长（ P<0.001和 P<0.001）；在伴骨髓原始细胞数增多（≥5%）的MDS患者中，SF3B1 WT和SF3B1 MUT患者OS和PFS差异均无统计学意义（ P>0.05）；在IPSS评分中危-1的MDS患者中，与SF3B1 WT患者相比，SF3B1 K700E患者OS和PFS均明显延长（ P=0.010和 P=0.013）。多因素回归分析提示SF3B1 K700E是影响MDS生存预后的独立保护因素（ HR=0.461，95% CI 0.262~0.811， P=0.007）。 结论:相比于SF3B1 WT患者，SF3B1 K700E和SF3B1 non-K700E患者预后更好，其中SF3B1 K700EMDS患者的OS明显优于SF3B1 non-K700E的患者，而SF3B1 MUT不能克服骨髓原始细胞增多的不良预后，提示SF3B1突变类型在骨髓原始细胞不增多的MDS患者中具有重要的预后价值。

目的:探讨JAK2、MPL和CALR驱动基因突变情况与BCR-ABL阴性骨髓增殖性肿瘤（MPN）的3种疾病类型[原发性骨髓纤维化（PMF）、真性红细胞增多症（PV）、原发性血小板增多症（ET）]选择间的关系。方法:采用高通量测序靶向检测156例BCR-ABL阴性MPN患者的32种MPN相关基因，分析患者一般情况、驱动基因及伴随基因突变特点等因素与MPN疾病类型的关系。结果:患者疾病类型与年龄关系的分析显示，在JAK2 V617F阳性状态下，PMF患者中60岁以上者的比例较高。通过高通量测序检测，在46例JAK2、MPL或CALR突变患者中检出22种伴随异常基因，其中PV 4例（8.3%），ET 20例（29.4%），PMF 22例（55.0%）。PV仅检出DNMT3A突变，而剪接因子相关基因SF3B1、SRSF2和U2AF1突变仅出现在PMF患者。根据JAK2 V617F突变的变异等位基因频率（VAF值）进行对比分析，结果显示，PV相关的VAF值最高（68.15%），其次为PMF（37.7%）和ET（23.0%），而MPN的3种疾病类型间JAK2 V617F纯合状态比例的差异有统计学意义。且在JAK2突变阳性状态下，PV和ET患者基因突变个数均明显低于PMF。结论:MPN患者的年龄、驱动基因（JAK2、MPL和CALR）的突变特点（VAF值、纯合状态）以及伴随异常基因的种类和突变个数等因素，与驱动基因突变状态下MPN疾病类型的选择密切相关，其相关性有助于我们进一步认识MPN和早期评估疾病风险。

目的:探讨免疫标记物CC-趋化因子受体7（CCR7）抗原在慢性淋巴细胞白血病（CLL）诊断和鉴别诊断中的价值。方法:收集南京医科大学第一附属医院2015年1月至2018年12月间收治的B型慢性淋巴细胞增殖性疾病（B-CLPD）患者643例，包括327例CLL、58例套细胞淋巴瘤（MCL）、34例滤泡淋巴瘤（FL）、36例边缘区淋巴瘤（MZL）、10例毛细胞白血病或其变异型（HCL/HCL-v）、40例华氏巨球蛋白血症（WM），以及48例CD5 +B型慢性淋巴细胞增殖性疾病未分类（B-CLPD-U）和90例CD5 -B-CLPD-U。同时收集本院健康管理中心2018年20名正常对照样本。利用流式细胞术检测B-CLPD患者免疫表型及CCR7表达，采用荧光原位杂交技术（FISH）分析了共济失调毛细血管扩张突变基因（ATM）缺失、13q14缺失、P53缺失和12三体，并利用Sanger测序分析了剪接因子3b亚基1（ SF3B1）、 NOTCH1、肿瘤蛋白53（ TP53）和免疫球蛋白重链可变区（ IGHV）的基因突变情况。计量资料的比较采用Mann-Whitney检验，率的比较采用χ 2检验。CCR7的诊断价值和最佳阳性界值利用受试者工作特征（ROC）曲线计算。 结果:CCR7在典型CLL和非典型CLL中阳性表达率分别为90.8%（257/283）和84.1%（37/44），阳性率差异无统计学意义（χ 2=1.228， P=0.268）。CCR7在CLL中阳性表达率为89.9%（294/327），平均荧光强度（MFI）为278（246，307），而CCR7在MCL、CD5 +B-CLPD、CD5 -B-CLPD、FL、WM、HCL/HCL-v和MZL中的阳性表达率分别为10.3%（6/58）、6.3%（3/48）、8.9%（8/90）、0、0、0和13.9%（5/36），MFI分别为114（106，128）、112（106，117）、110（104，121）、108（105，119）、111（105，124）、112（108，115）和109（105，120），与CLL相比，其他类型B-CLPD中CCR7阳性表达率较低，差异具有统计学意义（χ 2=181.3、177.8、232、164.7、180.8、62.6、129， P<0.01）。另外CCR7阳性用于鉴别CLL与其他类型B-CLPD的敏感度、特异度和准确度分别为89.9%、93.0%和92.3%。CCR7 +CLL患者CD49d阳性表达率为13.9%，低于CCR7 -CLL患者（42.1%）（χ 2=7.6， P=0.01）；而13q14缺失发生率为50.3%，高于CCR7 -CLL患者（20%）（χ 2=6.56， P=0.01）。 结论:CCR7在CLL与其他类型B-CLPD鉴别诊断中具有重要的临床价值。

骨髓增殖性肿瘤（MPN）的突变主要包括驱动突变和非驱动突变，驱动突变主要有JAK2、CALR和MPL突变，而非驱动突变主要有ASXL1、DNMT3A、TET2、SF3B1、EZH2、TP53、SRSF2、USAF1突变等。驱动突变与非驱动突变以及其克隆演进等会影响MPN的血栓形成及疾病转化。MPN的克隆造血可以出现在诊断前几十年，甚至胎儿阶段。在克隆造血出现后，直至疾病出现及进展，包括基因突变顺序、炎症状态、干扰素治疗等都会影响MPN的疾病表型及克隆造血。虽然随着二代测序等技术的进步，目前对于MPN克隆造血及其演进的认识有了较大进展，但仍然存在许多局限。本文主要从MPN的基因突变及其对血栓形成、白血病和纤维化转化的影响和克隆演进的影响因素等几个方面进行论述，旨在总结克隆造血及其演进对MPN并发症、预后或生存等的影响。