目的:探究硒酵母联合维生素D对桥本甲状腺炎模型大鼠甲状腺激素水平及细胞凋亡的影响。方法:将55只SD大鼠分为对照组( n＝10)和造模组( n＝45)，造模过程死亡5只，剩余造模鼠分为模型、硒酵母、维生素D和联合治疗组，每组10只。检测血中甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、促甲状腺素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酸(FT 3)、游离甲状腺素(FT 4)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-17、IL-23、硒、维生素D 3水平。以HE、TUNEL染色观察甲状腺组织形态和细胞凋亡，以实时定量PCR和Western印迹法检测甲状腺Toll样受体(TLR)2、TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB mRNA和蛋白表达。 结果:与对照组相比，模型组甲状腺细胞被破坏，凋亡数量增加( P<0.05)，TGAb、TPOAb、TSH、TNF-α、IL-6、IL-17、IL-23、TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白水平升高( P<0.05)，FT 3、FT 4、IL-10、硒、维生素D 3水平降低( P<0.05)。与模型组相比，给药3组甲状腺细胞形态较好，凋亡数量减少( P<0.05)，TGAb、TPOAb、TSH、TNF-α、IL-6、IL-17、IL-23、TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB水平下降( P<0.05)，FT 3、FT 4、IL-10、硒、维生素D 3水平上升( P<0.05)。联合治疗组改善情况更好( P<0.05)。 结论:硒酵母联合维生素D通过抑制TLRs/MyD88/NF-κB通路，减少甲状腺细胞凋亡，减轻自身免疫反应损伤，保护甲状腺功能。

目的:甘露糖修饰的脂阿拉伯甘露聚糖(mannose-capped lipoarabinomannan，ManLAM)是结核分枝杆菌细胞壁的主要成分之一，本研究拟探究ManLAM对CE蛋白诱导B细胞抗结核免疫应答的作用及潜在机制。方法:磁珠分选活动性肺结核患者B细胞，ManLAM协同CE蛋白离体刺激，CFSE检测增殖，流式检测B细胞凋亡及活化，ELISA检测细胞因子及抗体亚型分泌水平，酶联斑点试验检测B细胞分化抗体分泌细胞的水平。结果:ManLAM抑制CE蛋白诱导的B细胞增殖、活化、促炎因子释放和分化为CE蛋白特异性IgG分泌细胞，但对凋亡和分化为IgM分泌细胞无显著影响。ManLAM可通过TLR2抑制CE蛋白特异性IgG1和IgG3的分泌，诱导IgG4的分泌。结论:本研究证实ManLAM可抑制B细胞抗结核免疫应答，为结核分枝杆菌免疫逃逸提供了新的理论依据。

目的:探讨短链脂肪酸(SCFAs)对小鼠肾损伤后炎症及纤维化的影响及其作用机制。方法:采用双侧肾动脉夹闭25 min诱导缺血再灌注(I/R)肾损伤建立小鼠肾脏纤维化模型后，小鼠随机分为缺血再灌注组(I/R组)、短链脂肪酸组(I/R＋SCFAs组)和短链脂肪酸合并抗CD25单克隆抗体组(I/R＋SCFAs＋anti-CD25组)，并设假手术组(Sham组)，每组6只。I/R＋SCFAs组和I/R＋SCFAs＋anti-CD25组小鼠在术前1周连续饮用SCFAs溶液，且I/R＋SCFAs＋anti-CD25组小鼠在术前2 d和手术当天给予腹腔注射anti-CD25；Sham组小鼠只分离肾动脉不进行夹闭。建模28 d后收集各组小鼠肾组织，进行病理学检测，免疫组织化学检测CD68、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、叉头盒转录因子P3(Foxp3)和转录因子维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)的表达，Western印迹检测各组肾组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)和核转录因子κB p65(NF-κB p65)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)等蛋白表达水平。结果:与Sham组相比，I/R组小鼠病理损伤较重，肾小管间质纤维化增多，免疫组织化学检测显示肾组织CD68、TNF-α、ICAM-1表达显著升高(P均<0.05)，Western印迹检测TLR4、MyD88、NF-κB p65、α-SMA蛋白表达水平显著增多(P均<0.05)。与I/R组相比，I/R＋SCFAs组小鼠肾纤维化程度减轻，肾组织的CD68、TNF-α、ICAM-1表达降低，而且TLR4、MyD88、NF-κB p65、α-SMA蛋白表达水平亦降低(P均<0.05)。与I/R＋SCFAs组相比，I/R＋SCFAs＋anti-CD25组病理损伤加重，Foxp3表达减少，而TNF-α、ICAM-1、RORγt表达升高(P均<0.05)，TLR4、MyD88、NF-κB p65、α-SMA蛋白表达水平有所升高。结论:SCFAs可能通过TLR4/MyD88/NF-κB通路抑制炎症因子产生，从而减轻肾脏炎症反应和肾纤维化。

目的 探究Toll样受体4(TLR4)信号与溃疡性结肠炎(UC)发生、发展的关系.方法 收集UC患者结直肠活检组织样本(n=63),根据Matts组织病理学分级标准分为 1～5 级,利用免疫组织化学染色检测TLR4表达情况.利用FreeStyle 293表达系统制备TLR4-Ig融合蛋白.体外培养健康者来源的外周血单个核细胞(PBMC),在培养基中添加 100 μg/mL脂多糖诱导炎症模型,并加入 100 μg/mL TLR4-Ig阻断TLR4,检测粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、干扰素γ、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α的分泌水平.以葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠急性结肠炎模型,分别采用 20 mg/kg TLR4-Ig、40 mg/kg TLR4-Ig、抗生素+40 mg/kg TLR4-Ig进行干预,取小鼠结肠组织测量结肠长度并进行组织病理学评估.结果 UC患者结肠组织Matts分级越高TLR4 高表达的样本比例越高(P＜0.001).TLR4-Ig融合蛋白能够以高亲和力结合TLR4 配体,阻断TLR4 信号介导的PBMC活化和炎症因子分泌.TLR4-Ig融合蛋白对TLR4 信号的阻断加重了DSS诱导的小鼠急性结肠炎,而抗生素处理则对TLR4 信号阻断造成的小鼠急性结肠炎加重有缓解作用.结论 TLR4信号与肠道菌群的信号交流是UC发生早期的重要保护机制,TLR4信号的缺失不利于缓解急性炎症和修复肠黏膜.

目的 探究微小核RNA(miR)-93对Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB的调控作用及对动脉粥样硬化(AS)大鼠血管内皮炎症反应的影响.方法 大鼠经高脂饲料喂养+腹腔注射维生素D3复制AS模型,随机分为正常对照组、模型组、miR-93 模拟物(miR-93 agomir)组、agomir-NC 组、RS09(TLR4 激活剂)组、miR-93 agomir+RS09 组,每组 15 只,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血脂[三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]和炎症因子[白细胞介素(IL)-6、C反应蛋白(CRP)]水平;流式细胞术检测循环内皮细胞比例以评价血管内皮损伤状况;Movat染色观察动脉血管泡沫细胞聚集状况;油红O染色检测斑块面积;免疫组化法检测M1型巨噬细胞标记抗体(CD11)阳性表达水平;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测miR-93表达;Western印迹法检测TLR4/核因子(NF)-κB通路蛋白、脂质沉积相关蛋白如三磷酸腺苷(ATP)结合盒转运体(ABC)A1、载脂蛋白(Apo)A1、巨噬细胞清道夫受体(ScR)-A、凝集素型氧化低密度脂蛋白受体(Lox)-1、M1型巨噬细胞极化相关蛋白[IL-1β、诱导型一氧化氮(iNOS)]、M2巨噬细胞极化相关蛋白[IL-10,几丁质酶-3样蛋白3(YM1)]表达.结果 与正常对照组相比,模型组动脉血管内膜增厚、泡沫细胞聚集及脂质沉积严重,斑块面积比例、IL-6、CRP、循环内皮细胞比例、TG、TC、LDL-C水平、TLR4/NF-κB通路活化介导的M1型巨噬细胞极化、炎症应答活性均明显升高,HDL-C、miR-93表达明显降低(P＜0.05).外源性上调miR-93,可明显促进脂质转运相关蛋白ABCA1及ApoA1表达,明显抑制TLR4/NF-κB通路活化介导的M1型巨噬细胞极化和炎症应答,缓解大鼠动脉血管内膜增厚、泡沫细胞聚集及脂质沉积,明显降低斑块面积及循环内皮细胞比例(P＜0.05).RS09可明显促进TLR4/NF-κB通路活化介导的M1型巨噬细胞极化和炎症应答,并可拮抗miR-93 agomir发挥的上述作用(P＜0.05).结论 外源性上调miR-93表达可能通过靶向抑制TLR4/NF-κB通路活化,发挥抗炎、抗M1型巨噬细胞极化、抗泡沫细胞聚集及抗脂质沉积作用,改善AS大鼠血管内皮损伤.

目的:检测系统性红斑狼疮(SLE)病人外周血中髓样树突状细胞(mDC)表面Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)的表达情况及血清白细胞介素(IL)-10、IL-17A表达水平,探讨其在SLE发病机制中的作用及临床意义.方法:纳入SLE病人54例作为研究对象,根据SLEDAI-2000将SLE病人分为稳定组和活动组,同时选取本院30例健康志愿者作为对照组,应用流式细胞术检测SLE病人及健康志愿者外周血中mDC表面TLR2、TLR4的表达情况,并用ELISA法检测SLE病人及健康志愿者血清中IL-10、IL-17A的表达水平.结果:活动组SLE病人mDC-TLR2表达率高于稳定组、对照组(P<0.01),mDC-TLR4表达率高于对照组(P<0.01).SLE病人血清中IL-10、IL-17A表达水平均高于对照组(P<0.01).mDC-TLR2表达与抗Sm抗体呈正相关(P<0.05),与血清IgG、24 h尿蛋白定量呈负相关(P<0.05);mDC-TLR4表达与血小板计数呈正相关(P<0.05).结论:SLE活动组病人mDC-TLR2、TLR4表达率增高,二者可能在SLE的发病或病情进展中起到一定作用.

目的:观察温针灸对寒湿痹阻型类风湿关节炎(RA)患者血清CXC趋化因子配体16(CXCR16)、趋化因子配体19(CCL19)和Toll样受体4/核转录因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路的影响.方法:选择2020年6月～2022年6月期间佛山健翔骨伤医院收治的80例RA患者.按照随机数字表法将患者分为对照组(接受常规西医治疗,40例)和研究组(对照组的基础上结合温针灸治疗,40例).对比两组评分[中医证候积分、28个关节疾病活动性评分(DAS28)]、实验室指标[RF、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、抗环瓜氨酸抗体(抗CCP抗体)]、血清CXCR16、CCL19和TLR4/NF-κB信号通路相关指标的变化情况.结果:治疗后,两组中医证候积分、DAS28评分均下降,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后,两组类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、抗环瓜氨酸抗体(抗CCP抗体)下降,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后,两组CXCR16、CCL19下降,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后,两组TLR4信使核糖核酸(mRNA)、NF-κB mRNA下降,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:温针灸能够显著改善寒湿痹阻型RA患者的临床症状,调节血清CXCR16、CCL19水平,同时还可抑制TLR4/NF-κB信号通路激活.

目的 探讨外周血CD4+CD25+Treg细胞、TLR4、人巨细胞病毒(hCMV)-IgM与动脉粥样硬化型急性脑梗死(As-ACI)患者颈动脉粥样硬化的关系.方法 选取89例As-ACI患者(脑梗死组),另选取健康体检者43例(对照组).根据颈内动脉超声结果将As-ACI患者分为内膜正常组、内膜增厚组、斑块组、狭窄组.比较各组外周血CD4+CD25+Treg细胞水平、单个核细胞TLR4表达水平、hCMV-IgM抗体阳性率和内膜中膜厚度(IMT).分析As-ACI患者颈动脉狭窄的危险因素,分析CD4+CD25+Treg细胞、TLR4与IMT的相关性及其对颈动脉狭窄的预测价值.结果 脑梗死组CD4+CD25+Treg细胞、HDLC水平低于对照组,TLR4表达、hCMV-IgM抗体阳性率、TC、TG、LDLC、hs-CRP水平、IMT高于对照组(P＜0.05).内膜正常组、内膜增厚组、斑块组、狭窄组CD4+CD25+Treg细胞水平依次降低,TLR4表达、hCMV-IgM抗体阳性率、IMT依次增高(P＜0.05).CD4+CD25+Treg细胞水平与IMT呈负相关,TLR4表达与IMT呈正相关(P＜0.05).高血压、CD4+CD25+Treg表达、TLR4表达、hCMV-IgM抗体阳性是As-ACI患者颈动脉狭窄的危险因素(P＜0.05).CD4+CD25+Treg细胞、TLR4表达水平联合检测的预测价值高于单独检测(P＜0.05).结论 外周血CD4+CD25+Treg细胞、TLR4、hCMV-IgM抗体阳性率与As-ACI患者颈动脉粥样硬化进展有关,外周血CD4+CD25+Treg细胞、TLR4联合可以较好预测病变过程.

目的:研究疏肝解毒法治疗桥本甲状腺炎甲状腺功能减退期患者临床疗效及对 Toll 样受体 2(TLR2)及Toll样受体 4(TLR4)的影响.方法:选取桥本甲状腺炎甲状腺功能减退期患者 80 例,随机将患者分为研究组、对照组,每组各 40 例.对照组给予常规治疗,研究组在对照组的基础上给予疏肝解毒法治疗,治疗 3 个月.比较两组治疗后的中医症候评分,临床症状评分、血清学指标、甲状腺B超以及安全性指标.结果:治疗后,两组中医症候积分、临床症状积分较治疗前显著降低,且研究组低于对照组(均P<0.05).治疗后两组血清促甲状腺素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)显著下降,游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)及游离甲状腺素(FT4)显著上升(均P<0.05).治疗后,研究组 TSH、TPOAb 及 TGAb 水平显著低于对照组,研究组 FT3、FT4水平显著高于对照组(均P<0.05).两组治疗前血清TLR2、TLR4 水平比较差异无统计学意义(均P>0.05).治疗后两组血清TLR2、TLR4 水平显著下降,且研究组血清 TLR2、TLR4 水平低于治疗组(均P<0.05).与治疗前比较,两组治疗后甲状腺左、右叶及峡部厚度比较差异无统计学意义(均P>0.05);治疗后两组甲状腺左、右叶及峡部厚度比较差异无统计学意义(均 P>0.05).治疗后研究组总有效率为 86.49%,高于对照组的 64.86%(P<0.05).两组未出现严重不良反应.结论:疏肝解毒法治疗桥本甲状腺炎甲状腺功能减退期患者具有显著疗效,可显著降低患者中医症候评分及临床症状评分,并且改善甲状腺功能,降低甲状腺抗体水平,降低TLR2 及TLR4 水平.

目的 探讨山茱萸总苷对MRL/lpr狼疮性肾炎小鼠肾炎症反应的改善作用及可能的作用机制.方法 将40 只MRL/lpr狼疮性肾炎小鼠按随机数字表法分为模型组、山茱萸总苷低、中、高剂量组(27.5、55、110 mg/kg),每组 10 只,另取10 只C57BL/6 小鼠作为对照组.灌胃给药,1 次/天,连续4 周.于药物干预前及干预后第 2、4 周,收集 24h尿液,测定尿蛋白含量.药物干预结束后,取小鼠血清及肾脏组织,采用试剂盒检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和抗双链DNA(dsDNA)抗体水平;ELISA法检测血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6 和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平;流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群变化;HE染色观察肾组织病理学变化;Western blot 检测肾组织中 Toll 样受体 4(TLR4)、髓样分化因子-88(MyD88)、核转录因子(NF-κB)p65 和p-NF-κB p65 蛋白表达.结果 与对照组比较,模型组小鼠肾组织损伤严重,24 h尿蛋白、Scr、BUN和抗dsDNA抗体以及IL-1β、IL-6 和TNF-α水平均升高(P<0.01),外周血CD4+ T/CD8+ T淋巴细胞值降低(P<0.01),肾脏组织中TLR4、MyD88 和 p-NF-κB p65 蛋白表达水平均上调(P<0.01);与模型组比较,山茱萸总苷各剂量组小鼠肾组织损伤改善明显,24 h尿蛋白、Scr、BUN和抗 dsDNA抗体及 IL-6、TNF-α和IL-1β 水平均降低(P<0.01),外周血 CD4+ T/CD8+ T淋巴细胞值增加(P<0.01),肾组织中TLR4、MyD88和p-NF-κB p65 蛋白表达均下调(P<0.01),其中高剂量组小鼠各指标变化最为显著;而各组NF-κB p65 蛋白表达无显著性差异.结论 山茱萸总苷对MRL/lpr狼疮性肾炎小鼠肾炎症反应具有一定改善作用,其机制可能与抑制 TLR4/NF-κB信号通路有关.